用于傷口處理的制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含含有纖維蛋白原和/或凝血酶的混合物的干粉纖維蛋白密封劑的新型制劑，其用于處理傷口或損傷，特別是用作外用止血組合物或用于外科手術(shù)干預(yù)。
【專利說(shuō)明】用于傷口處理的制劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及包含完全生物可降解的干粉纖維蛋白密封劑或外用止血?jiǎng)┑男滦椭苿?，其用于處理傷口或損傷，特別是用作適合于處理嚴(yán)重傷口和損傷的改進(jìn)的外用止血組合物。
[0002]發(fā)明背景
[0003]正在開(kāi)發(fā)用于出血和/或溢血控制，尤其用于嚴(yán)重出血的新技術(shù)、裝置和藥物。即使有目前可用的所有技術(shù)，但出血和溢血控制仍然是緊急醫(yī)療護(hù)理中的主要未解決的問(wèn)題。在住院治療的頭48小時(shí)內(nèi)所有死亡的幾乎50%與不能充分控制出血有關(guān)。在頭24小時(shí)內(nèi)止血失敗幾乎總是致命的，尤其是當(dāng)涉及多個(gè)創(chuàng)傷部位時(shí)。普遍認(rèn)為，在戰(zhàn)區(qū)用于前線護(hù)理的止血產(chǎn)品必須迅速控制出血、易于使用、施加簡(jiǎn)單、在周圍溫度下具有接近兩年的儲(chǔ)存壽命并且理想地防止細(xì)菌生長(zhǎng)或病毒傳播/再激活。為了符合軍事和民用要求，產(chǎn)品的止血作用的時(shí)間是關(guān)鍵的。
[0004]現(xiàn)今作為外部的傷口處理方法研究或使用的裝置的范圍從含有凝血?jiǎng)┑奈諌|、壓力繃帶、紗布、用于四肢的止血帶，到用于身體傷口的創(chuàng)傷藥盒。
[0005]設(shè)計(jì)用于停止外部出血的試劑在組成和組分上不同，但常被設(shè)計(jì)為幫助施加位置處快速形成血凝塊。凝血產(chǎn)品一般含有變化但通常高的濃度的材料諸如人纖維蛋白原、凝血酶、鈣、因子X(jué)III和/或抗溶纖維蛋白藥。除了纖維蛋白之外，微孔多糖大珠、礦物和合成沸石，及殼聚糖(聚 -N-乙?；咸前?也可用來(lái)作為止血?jiǎng)?。有許多新止血產(chǎn)品可用于處理傷口創(chuàng)傷，例如使用殼聚糖(脫乙?；?N-乙?；咸前坊w，HemCon Inc.，Tigard, USA)的繃帶產(chǎn)品，其是據(jù)稱設(shè)計(jì)用于優(yōu)化殼聚糖在傷口部位處的粘膜粘附表面密度和結(jié)構(gòu)完整性的冷凍干燥的殼聚糖敷料。HemCon?殼聚糖繃帶顯然是主要通過(guò)附著于傷口來(lái)發(fā)揮其止血效果，盡管有證據(jù)提示它還可以增強(qiáng)血小板功能以及將紅細(xì)胞并入到在傷口上形成的血凝塊中。這種繃帶在幾種動(dòng)脈溢血?jiǎng)游锬Ｐ椭斜憩F(xiàn)出改善的止血和較少的失血，但是在不同繃帶之間觀察到顯著的變化性，包括一些由于在傷口上的不充分附著而引起的失敗。(參見(jiàn) McManus 等人，Business Briefing !Emergency Medical Review2005,79) o然而，它只有18個(gè)月的儲(chǔ)存壽命。另一種基于殼聚糖的產(chǎn)品是Rapid DeploymentHemostat?(RDH), (Marine Polymer Technologies, Danvers, USA),其似乎通過(guò)紅細(xì)胞聚集、血小板激活、凝血級(jí)聯(lián)激活和局部血管收縮來(lái)發(fā)揮它的止血效果。Rapid DeploymentHemostat?是源于藻類的敷料，其由聚_N_乙?；?葡糖胺組成。盡管原始的敷料設(shè)計(jì)有效減少了輕微出血，但是為了在主動(dòng)脈和肝臟損傷的豬模型中減少血液損失需要添加紗布襯墊。(參見(jiàn) McManus 等人，Business Briefing !Emergency Medical Review2005,第 78頁(yè))。
[0006]Z-Medica Corporation,, Connecticut,USA銷售一種供美國(guó)軍隊(duì)使用的壓力繃帶產(chǎn)品(QuikClot?:)。這種產(chǎn)品使用粒狀合成礦物沸石通過(guò)吸收液體和促進(jìn)凝血來(lái)停止出血。然而，QuikClot?產(chǎn)生熱量，如果繃帶不能正確施加，該熱量則可能造成燃燒，而且礦物材料不能生物降解，因此必須手術(shù)除去。
[0007]另一種常用止血產(chǎn)品為Combat Gauze,其是一種高嶺土涂覆的手術(shù)紗布,現(xiàn)用作美國(guó)軍隊(duì)的標(biāo)準(zhǔn)敷料。
[0008]Nycomed Pharma, Austria 銷售商品名為 Tachocomb?.和 Tachosil? 的涂覆
有人纖維蛋白原和凝血酶的馬膠原蛋白基質(zhì)，其在許多歐洲國(guó)家用于手術(shù)室使用(參見(jiàn)，U.Schiele等人，Clin.Materials9:169-177 (1992))。雖然這些纖維蛋白原-凝血酶敷料不需要液體纖維蛋白密封劑所需的預(yù)先混合，但是它們用于戰(zhàn)場(chǎng)應(yīng)用的實(shí)用性受到這樣的限制，即常需要用鹽水預(yù)潤(rùn)濕產(chǎn)品以便使得它具有適合于施加至出血部位的柔韌性。事實(shí)上，迄今為止還沒(méi)有觀察到它們的戰(zhàn)場(chǎng)實(shí)用性，并且已知這些敷料對(duì)于高壓、大量出血也無(wú)效。(參見(jiàn)Sondeen等人Trauma54:280-285 (2003))。另一種用于處理受傷組織的干燥纖維蛋白原/凝血酶敷料公開(kāi)于American Red Cross (ARC)的美國(guó)專利第6，762，336號(hào)中。這種特定敷料由襯墊材料和多個(gè)層組成，所述多個(gè)層的最外側(cè)兩個(gè)層含有纖維蛋白原(但是不含凝血酶)，而內(nèi)層含有凝血酶和氯化鈣(但是不含纖維蛋白原)。雖然這種敷料已經(jīng)在幾種動(dòng)物溢血模型中顯示出成功，但是該繃帶脆弱、無(wú)柔韌性，并且在處理時(shí)有分裂的傾向(參見(jiàn) McManus 等人，Business Briefing !Emergency Medical Review2005,第 78 頁(yè)；Kheirabadi等人Trauma59:25-35 (2005))。發(fā)現(xiàn)纖維蛋白原與凝血酶的混合對(duì)于冷凍干燥/制造程序非常關(guān)鍵，表明纖維蛋白原與凝血酶活性組分的完全混合是產(chǎn)品發(fā)揮完全功效所必需的。這種產(chǎn)品還沒(méi)有在US或EU批準(zhǔn)上市。
[0009]還提出了其他基于纖維蛋白原/凝血酶的敷料。例如，美國(guó)專利第4，683，142號(hào)公開(kāi)了用于使傷口閉合和愈合的再吸收性片材，其由含有凝血蛋白(諸如纖維蛋白原和凝血酶)的糖蛋白基質(zhì)(諸如膠原蛋白)組成。美國(guó)專利第7，189，410號(hào)公開(kāi)了由襯墊材料組成的繃帶，在所述襯墊材料上具有:(i)纖維蛋白原顆粒；(ii)凝血酶顆粒；和(iii)氯化鈣。US2008/003272和W000/38752公開(kāi)了涂覆在支撐材料上的混合細(xì)粒或細(xì)?；旌衔镄问降睦w維蛋白膠。EP0059265公開(kāi)了涂覆有纖維蛋白原和凝血酶顆粒的膠原蛋白載體。W097/44015公開(kāi)了凝血酶/纖維蛋白原白蛋白微顆粒混合物。W02010/002435公開(kāi)了芯體中包含纖維蛋白原或凝血酶微粒及玻璃微粒的生物可吸收止血袋。
[0010]目前對(duì)于過(guò)多或嚴(yán)重出血的處理，尤其對(duì)于來(lái)自動(dòng)脈或靜脈出血的壓力出血的控制沒(méi)有完美的解決方案。關(guān)于一類試劑的熱發(fā)生是主要問(wèn)題。當(dāng)施加至深傷口或不規(guī)則形狀的傷口上時(shí)，某些敷料有效附著的能力產(chǎn)生另一個(gè)主要限制。
[0011]外科手術(shù)和創(chuàng)傷傷口是在傷口護(hù)理領(lǐng)域中解決的最常見(jiàn)的傷口類型。開(kāi)發(fā)用于此領(lǐng)域的產(chǎn)品時(shí)要克服的進(jìn)一步障礙是此類外科手術(shù)患者的血液中存在的抗凝血?jiǎng)┑挠泻τ绊憽，F(xiàn)有繃帶由紗布制成并且經(jīng)常與彈性繃帶結(jié)合使用。它們?cè)试S傷口呼吸但是對(duì)后續(xù)污染的阻隔能力差。這些繃帶不能停止嚴(yán)重出血并且在動(dòng)脈出血、彌漫性出血或靜脈出血的情形下需要施加壓力。許多常規(guī)傷口密封劑未能提供以下幾者的最佳化組合:凝血速度、高壓出血狀況下的有效性及響應(yīng)于創(chuàng)傷部位的需求隨著時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的血凝塊。通常，傷口密封劑通常與單獨(dú)的傷口敷料結(jié)合使用。顯然，由尖銳物體造成的外科手術(shù)創(chuàng)傷發(fā)生在干凈環(huán)境中，經(jīng)常是外科手術(shù)程序本身的副產(chǎn)物。然而，不是在受控制的環(huán)境中造成的創(chuàng)傷傷口經(jīng)常為在道路交通事故中或者在戰(zhàn)場(chǎng)上發(fā)現(xiàn)的中等尺寸、分布廣并且具有顯著組織損傷的臟傷口。[0012]擦傷一般由皮膚外層的刮擦造成；裂口(laceration)是有缺口的不規(guī)則的皮膚切割口(cut)或撕裂(tear);穿孔由刺穿皮膚層從而產(chǎn)生小孔的物體造成；刀口(incision)是通常由小刀或其他尖銳物體造成的切口 ；而燃燒造成深度、尺寸和嚴(yán)重性可能差別很大的損害?；鹌魉碌膫诳赡苌畈⑶揖哂酗@著的組織破壞。創(chuàng)傷所致的肢體斷離(dismemberment)需要立即干預(yù)來(lái)停止來(lái)自斷肢的血液損失。
[0013]W097/44015僅描述了一種基于纖維蛋白原和凝血酶微粒的干粉纖維蛋白密封劑。這些微粒組合物的進(jìn)一步優(yōu)化制劑描述于共同未決的非臨時(shí)申請(qǐng)US12/636，718中。
[0014]因此，本領(lǐng)域仍然需要可用于在戰(zhàn)場(chǎng)上或在外科手術(shù)和/或類似嚴(yán)重出血情形中處理受傷組織，尤其創(chuàng)傷性損傷所引起的受傷組織的固體即用(即，不用重構(gòu)、混合等)敷料。另外，本領(lǐng)域中仍然需要可用于處理難以進(jìn)入或需要空間填充特性的傷口的固體和/或柔韌性或液體(或粘性液體)即用(即，不用重構(gòu)、混合等)止血密封劑。本發(fā)明的其他優(yōu)點(diǎn)包括改進(jìn)了使用中的處理和施加，減少了采用其他止血產(chǎn)品的需要，以及較少地需要施加根據(jù)本發(fā)明的組合物中存在的額外外源微粒。
發(fā)明概要
[0015]因此，本發(fā)明的目的在于提供可處理受傷組織的組合物，所述受傷組織包括由創(chuàng)傷性損傷或其他嚴(yán)重和/或不受控制的出血狀況，諸如外科手術(shù)引起的受傷組織。本發(fā)明的進(jìn)一步目的在于提供處 理受傷的哺乳動(dòng)物組織，尤其人組織的方法。本發(fā)明的其他目的、特征和優(yōu)點(diǎn)將闡述在隨后的優(yōu)選實(shí)施方案詳細(xì)描述中，并且部分在該描述中顯而易見(jiàn)和/或可以通過(guò)實(shí)踐本發(fā)明得知。這些目的和優(yōu)點(diǎn)將通過(guò)本說(shuō)明書中描述的組合物和方法來(lái)實(shí)現(xiàn)和獲得，并且在隨后的權(quán)利要求書中具體地指出。
[0016]根據(jù)這些和其他目的，本發(fā)明的第一方面涉及藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微粒或包含含量為約0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體。
[0017]在本發(fā)明的第二方面，提供了包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體的藥物組合物，其中包含纖維蛋白原的微粒與包含凝血酶的微粒的混合物分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上，其中所述第一微粒包含含量為約
0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原，并且所述第二微粒包含含量為約0.01至500IU/cm2的凝血酶，其中第一和第二微粒都進(jìn)一步包含玻璃狀載體。
[0018]在本發(fā)明的第三方面，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方方法，所述方法包括向傷口或溢血部位施用藥物組合物，所述藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微粒和/或包含含量為約0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體。
[0019]在本發(fā)明的第四方面，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，所述方法包括向傷口或溢血部位施用藥物組合物，所述藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微粒和/或包含含量為約0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中當(dāng)施用至顯示出大于約30克/分鐘的出血速率的傷口上時(shí),所述處理導(dǎo)致止血時(shí)間少于約10分鐘。
[0020]在本發(fā)明的第五方面，提供了基本上由選自纖維素、聚氨酯、明膠或膠原蛋白(諸如膠原蛋白-海綿)，或殼聚糖的生物相容的生物可降解聚合物組成的可吸收載體，及足夠量的無(wú)定形纖維蛋白原或足夠量的無(wú)定形凝血酶在制備用于組織密封或止血的產(chǎn)品中的用途。
[0021]在本發(fā)明的第六方面，提供了制備藥物組合物的方法，其包括:(i)將包含纖維蛋白原的微?；虬傅奈⒘腋≡谒鼈?cè)谄渲胁豢扇芙獾拿浇槲镏?，所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體；(ii)將所得懸浮液施加到可吸收載體上；以及(iii)任選地除去媒介物。
[0022]在本發(fā)明的第七方面，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，所述方法包括向傷口或溢血部位施用藥物組合物，所述藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微?；虬繛榧s0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體。
[0023]在本發(fā)明的第八方面，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，所述方法包括向傷口或溢血部位施用藥物組合物，所述藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微?；虬繛榧s0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，優(yōu)選二者的混合物，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，并且其中當(dāng)施用至顯示出大于約30克/分鐘的出血速率的傷口上時(shí)，所述處理導(dǎo)致止血時(shí)間少于約10分鐘。
[0024]在本發(fā)明的第九方面，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀`載體。
[0025]在本發(fā)明的進(jìn)一步方面是藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的微?；虬傅奈⒘?，任選地其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體。
[0026]在本發(fā)明的另一方面是藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都為W097/44105中所描述的一般類型，及如描述于共同未決的申請(qǐng)US12/636, 718中的這些微粒組合物的進(jìn)一步優(yōu)化制劑，這兩篇專利都以引用的方式并入本文。因而，第一和第二微粒通過(guò)將帶有海藻糖的纖維蛋白原和帶有海藻糖的凝血酶作為單獨(dú)產(chǎn)品進(jìn)行噴霧干燥來(lái)適當(dāng)?shù)刂苽?。每種產(chǎn)品的主要粒度為直徑高達(dá)50 μ m。噴霧干燥的纖維蛋白原和凝血酶微粒粉末在干燥狀態(tài)是非反應(yīng)性的，從而使得它們能夠摻混在一起和直接施加；無(wú)須通過(guò)在施用之前或期間分層或混合來(lái)對(duì)凝血酶和纖維蛋白原組分進(jìn)行物理分離。纖維蛋白密封劑，這些組分的摻混物，已被證明是一種易于使用、穩(wěn)定并且有效的外用止血?jiǎng)Ｔ摦a(chǎn)品可立即使用而無(wú)需重構(gòu)。一經(jīng)與諸如血液的水性流體接觸，暴露和/或溶解的活性凝血酶就將暴露和/或溶解的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成不溶性纖維蛋白聚合物。[0027]這些微粒摻混物可以任選地另外包含如以引用的方式并入本文的W02010/136588中所描述的生物相容、吸水、水可溶脹的添加劑材料，或水溶性添加劑材料或者生物相容的吸水二氧化硅添加劑材料。添加劑材料可以充當(dāng)載體或稀釋劑，可以增強(qiáng)粉末流動(dòng)和潤(rùn)濕能力，并且還可以具有增強(qiáng)對(duì)出血傷口的流體的吸收的作用，由此減少局部組織流體并且因此增加傷口中凝血因子的相對(duì)濃度。由此，增加了纖維蛋白密封劑的有效性。
[0028]在本發(fā)明的進(jìn)一步方面是用于處理患者中的受傷組織的任選地為固體敷料形式的藥物組合物，其包含纖維蛋白原和凝血酶，其中纖維蛋白原以約0.l-15mg/cm2，優(yōu)選約
0.5至5mg/cm2的量存在，而凝血酶以約0.01至500IU/cm2，優(yōu)選約0.1至50IU/cm2的量存在。
[0029]在本發(fā)明的又一進(jìn)一步方面是用于處理患者中的受傷組織的任選地為固體敷料形式的藥物組合物，其包含纖維蛋白原和凝血酶，其中就面向敷料側(cè)的傷口的表面積而言，纖維蛋白原以約0.l-15mg/cm2,優(yōu)選約0.5至5mg/cm2的量存在，而凝血酶以約0.01至500IU/cm2，優(yōu)選約0.1至50IU/cm2的量存在。
[0030]應(yīng)理解，前述一般描述和優(yōu)選實(shí)施方案的以下詳細(xì)描述僅是示例性和說(shuō)明性的，旨在提供對(duì)如本文要求保護(hù)的本發(fā)明的進(jìn)一步解釋，而非限制。
[0031]詳述
[0032]除非另外定義，本文中所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)都具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員通常理解的相同的含義。本文中提及的所有專利和出版物都以引用的方式并入本文。
[0033]如本文中使用的，諸如“一”、“一個(gè)”、和“該(所述)”的單數(shù)冠詞的使用并不意欲排除該冠詞的客體的復(fù)數(shù)形式，除非上下文清楚而明確地規(guī)定不是如此。
[0034]如本文中使用的“患者”是指需要醫(yī)療護(hù)理和/或治療的人或動(dòng)物個(gè)體。
[0035]如本文中使用的“傷口 ”是指對(duì)患者的任何組織的任何損害，其導(dǎo)致血液從循環(huán)系統(tǒng)的損失和/或任何其他流體從患者身體的損失。所述損害可由任何原因(agent)或起因(source)導(dǎo)致，包括創(chuàng)傷性損傷、感染或外科手術(shù)干預(yù)。傷口可以在諸如器官的軟組織中，或者在諸如骨的硬組織中。所述組織可以為內(nèi)部組織諸如器官或血管，或者是外部組織諸如皮膚。血液的損失可以是內(nèi)部的，諸如來(lái)自破裂的器官，或者是外部的，諸如來(lái)自裂口(laceration)。
[0036]如本文中使用的“可再吸收材料”、“可吸收載體”和“生物相容的生物可降解聚合物”是指這樣的材料，其自然和/或由身體分解成在不引起任何顯著代謝紊亂的情況下以不顯著干擾傷口愈合和/或組織再生的方式被降解或清除的組分。
[0037]如本文中使用的“適合的”旨在意指不會(huì)不利地影響本發(fā)明組合物或其任何組分的穩(wěn)定性的材料。
[0038]如本文中使用的“脫膜劑(release agent) ”是指使本發(fā)明組合物容易從制造模具中取出的化合物或化合物的混合物。
[0039]如本文中使用的“粘結(jié)試劑”或“粘結(jié)劑”是指改進(jìn)微粒組分與本發(fā)明組合物的載體或基質(zhì)材料的粘附和/或粘著的化合物或化合物的混合物。
[0040]如本文中使用的“填料”是指為本發(fā)明組合物提供容積(bulk)和/或多孔性的化合物或化合物的混合物。
[0041]如本文中使用的“固體”旨在意指當(dāng)置于剛性表面上并然后在25°C靜置24小時(shí)時(shí)本發(fā)明組合物的形狀或形式不會(huì)顯著改變，和/或在25°C下不為液體。
[0042]根據(jù) Kheirabadi 等人(J.trauma, Injury, Infection and Critical Care ；71:Nol, July Supplement2011),用于作戰(zhàn)應(yīng)用的理想止血敷料展現(xiàn)出以下特征中的至少一種或優(yōu)選全部:(a)，被FDA批準(zhǔn)；(b)，在少于或等于兩分鐘內(nèi)停止嚴(yán)重動(dòng)脈和/或靜脈出血；(C)，無(wú)毒性或副作用；(d)，不會(huì)引起疼痛或熱損傷，(e)，不會(huì)給醫(yī)護(hù)人員帶來(lái)危險(xiǎn)；(f)是即用型的，需要很少或不需要培訓(xùn)；(g)，輕便耐用；(h)，具有足以與復(fù)雜傷口配合的柔韌性并且容易除去，不留殘留物；(i)，在極端的溫度(-10°C至+40°C)下穩(wěn)定并且具備功能至少兩周；(j)，在嚴(yán)峻條件(低能見(jiàn)度、雨、風(fēng)等)下使用是實(shí)際而容易實(shí)現(xiàn)的；(k)，具有很長(zhǎng)的儲(chǔ)藏壽命，優(yōu)選大于2年；(I),對(duì)不用止血帶不順從的交界傷口(junctional wound)有效；(m)，廉價(jià)并且具有成本效益，以及；(η)，是生物可降解和生物可吸收的。本 申請(qǐng)人:認(rèn)為本發(fā)明實(shí)施方案滿足如果不是所有的以上標(biāo)準(zhǔn)，也是大多數(shù)。
[0043]在本發(fā)明的第一實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體。
[0044]在本發(fā)明的第二實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中第一微粒和/或第二微粒的玻璃狀載體包含海藻糖。
[0045]在本發(fā)明的第三實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的 第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，并且其中所述微粒分散和/或固定成穿過(guò)所述可吸收載體、分散和/或固定在所述可吸收載體中或上。
[0046]在本發(fā)明的第四實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，并且其中所述微?；旧暇鶆虻胤稚⒑?或固定成穿過(guò)所述可吸收載體、分散和/或固定在所述可吸收載體中或上。
[0047]在本發(fā)明的第五實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中纖維蛋白原以約
0.l-15mg/cm2,優(yōu)選約0.5至5mg/cm2的量存在，并且凝血酶以約0.01至500IU/cm2,優(yōu)選約
0.1至50IU/cm2的量存在。替代地，對(duì)于具有三維的形式的組合物(諸如墊、泡沫等，其中含量可用體積表示)，纖維蛋白原以約0.l-15mg/cm3,優(yōu)選約0.5至5mg/cm3的量存在,并且凝血酶以約0.01至500IU/cm3，優(yōu)選約0.1至50IU/cm3的量存在。
[0048]在本發(fā)明的第六實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述載體是柔韌性和/或多孔的，并且進(jìn)一步包含增塑劑和/或增粘劑。
[0049]在本發(fā)明的第七實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，并且其中第一和/或第二微粒的混合物在可吸收載體的一個(gè)或多個(gè)表面上構(gòu)成層。
[0050]在本發(fā)明的第八實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，并且其中第一和/或第二微粒的混合物在可吸收載體的一個(gè)或多個(gè)表面上構(gòu)成止血層，并且任選地其中所述藥物組合物進(jìn)一步包含一個(gè)或多個(gè)支撐層(例如，背襯材料或內(nèi)部支撐材料)和/或防粘層。
[0051]在本發(fā)明的第九實(shí)施方案中，提供了處理患者中的受傷組織的方法，其包括將根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物施加至受傷組織，以及向組合物施加足夠的壓力持續(xù)足夠的時(shí)間以便形成足夠的纖維蛋白從而減少來(lái)自傷口的血液和/或其他流體損失。例如，壓力施加持續(xù)時(shí)間可以為約30秒至約10分鐘。
[0052]在本發(fā)明的第十實(shí)施方案中，提供了形成被成形或鑄造為單件(single piece)的本發(fā)明藥物組合物的方法，優(yōu)選地其中微?；旌衔锘旧现潦贾两K是均勻的，任選地其中所述組合物進(jìn)一步含有粘 結(jié)劑從而促進(jìn)或改善微粒之間和/或微粒與任何一個(gè)(多個(gè))支撐層和/或可吸收載體或基質(zhì)和/或組織之間的粘附。合適粘結(jié)劑的示例性實(shí)例包括但不限于，蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、明膠、透明質(zhì)酸酶及其衍生物(諸如透明質(zhì)酸)、麥芽糖、聚維酮、淀粉、殼聚糖及其衍生物，及纖維素衍生物(諸如羧甲基纖維素、羥丙基纖維素)，以及它們中的兩種或更多種的混合物。包含纖維蛋白原和凝血酶的第一和第二微?；旌衔镆部扇芜x地含有一種或多種合適的填料，諸如蔗糖、乳糖、麥芽糖、絲制品、纖維蛋白、膠原蛋白、白蛋白、透明質(zhì)酸鹽及其衍生物(諸如透明質(zhì)酸)、聚山梨酯(Tween?)、甲殼素、殼聚糖及其衍生物(諸如NOCC-殼聚糖)、藻酸及其鹽、纖維素及其衍生物、蛋白聚糖、乙醇酸聚合物、乳酸聚合物、乙醇酸/乳酸共聚物，以及它們中的兩種和更多種的混合物。包含纖維蛋白原和凝血酶的第一和第二微?；旌衔镆部扇芜x地含有一種或多種合適的增溶劑，諸如蔗糖、右旋糖、甘露糖、海藻糖、甘露糖醇、山梨糖醇、白蛋白、透明質(zhì)酸酶及其衍生物(諸如透明質(zhì)酸)、聚山梨酯(Tween?)、山梨聚糖(SPAN?)，以及它們中的兩種或更多種的混合物。
[0053]在本發(fā)明的第十一實(shí)施方案中，提供了形成被成形或鑄造為單件的本發(fā)明藥物組合物的方法，優(yōu)選地其中微?；旌衔锘旧现潦贾两K是均勻的，任選地其中所述組合物進(jìn)一步含有合適的鈣離子來(lái)源諸如氯化鈣，和/或纖維蛋白交聯(lián)劑，諸如轉(zhuǎn)氨酶(例如因子X(jué)lll/XIIIa)或戊二醛。
[0054]在本發(fā)明的第十二實(shí)施方案中，藥物組合物可任選地進(jìn)一步包含一個(gè)或多個(gè)支撐層。如本文中使用的，“支撐層”是指維持或增強(qiáng)組合物和/或當(dāng)將此種組合物施加至傷口時(shí)形成的纖維蛋白血凝塊的結(jié)構(gòu)完整性的材料。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，支撐層在與被施加至受傷組織的側(cè)面相對(duì)的藥物組合物側(cè)上包括襯墊材料。此種襯墊材料可以用生理學(xué)上可接受的粘合劑固定或者可以自粘合。襯墊材料可包含一種或多種可再吸收材料或者一種或多種不可再吸收材料或它們的混合物。優(yōu)選地，襯墊材料是單一可再吸收材料?？梢詫⒈绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知和可獲得的任何適合的可再吸收材料用于本發(fā)明。例如，可再吸收材料可以是蛋白質(zhì)物質(zhì)，例如絲制品、纖維蛋白、角蛋白、膠原蛋白和/或明膠。替代地，可再吸收材料可以是碳水化合物物質(zhì)，諸如藻酸鹽、透明質(zhì)烷(hyaluronan)及其衍生物(諸如透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸鈉)、甲殼素、纖維素、蛋白聚糖(例如聚N-乙?；咸前?、乳酸聚合物、乙醇酸聚合物，或乙醇酸/乳酸共聚物?？稍傥詹牧线€可以包含蛋白質(zhì)物質(zhì)的混合物或碳水化合物物質(zhì)的混合物或蛋白質(zhì)物質(zhì)與碳水化合物物質(zhì)的混合物。特別優(yōu)選的可再吸收材料的合適實(shí)例包括但不限于，以商品名DEX0N?(—種乙醇酸聚合物)和VICRYL?( —種乙醇酸/乳酸共聚物)銷售的材料?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知和可獲得的任何合適的不可再吸收材料作為襯墊材料，其實(shí)例包括但不限于紙和紙制品、乳膠、塑料、棉花、硅酮聚合物、紗布等。
[0055]在本發(fā)明的第十三實(shí)施方案中，提供了形成使用模具成形或鑄造為單件的本發(fā)明藥物組合物的方法，其中所述組合物還可任選地進(jìn)一步包含防粘層。如本文中使用的“防粘層”是指含有一種或多種試劑(“脫膜劑”)的層，所述試劑(“脫膜劑”)促進(jìn)或允許藥物組合物從它在其中被制造的模具中取出。優(yōu)選的此種試劑為蔗糖，但是其他合適的脫膜劑包括明膠、甘露糖醇、山梨糖醇、透明質(zhì)酸酶及其衍生物(諸如透明質(zhì)酸)，和葡萄糖。替代地，此類的一種或多種脫膜劑如果存在于此種構(gòu)造中，則可包含在微粒的止血層中。本發(fā)明組合物的各個(gè)層可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知和可獲得的任何合適的方式固定至彼此。例如，可以將生理學(xué)上可接受的粘合劑施加至襯墊材料(當(dāng)存在時(shí))，并隨后將藥物組合物固定于其上。
[0056]在本發(fā)明的第十四實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的微粒或包含凝血酶的微粒，任選地其中所述微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體。優(yōu)選地，纖維蛋白原以約0.l-15mg/cm2或約0.5至5mg/cm2的量存在，并且凝血酶以約0.01至500IU/cm2，或約0.1至50IU/cm2的量存在。更優(yōu)選地，所述微粒作為包含纖維蛋白原的微粒和包含凝血酶的微粒的混合物存在。
[0057]在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，生理學(xué)上可接受的粘合劑的剪切強(qiáng)度和/或結(jié)構(gòu)使得在將根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物施加至受傷組織后可從由所述組合物形成或在所述組合物內(nèi)形成的纖維蛋白血凝塊上分離出襯墊材料。在其他實(shí)施方案中，生理學(xué)上可接受的粘合劑的剪切強(qiáng)度和/或結(jié)構(gòu)使得在所述施加之后不能從所述組合物上分離出襯墊材料。
[0058]在根據(jù)本發(fā)明的組合物的使用期間，優(yōu)選纖維蛋白原和凝血酶在施加至受傷組織時(shí)被患者的從溢血傷口流出的內(nèi)源流體激活。
[0059]在本發(fā)明的第十五實(shí)施方案中，藥物組合物還可以含有一種或多種生物活性物，諸如生長(zhǎng)因子、多克隆和單克隆抗體、藥物和其他化合物，所述其他化合物包括但不限于以下:纖維蛋白溶解抑制劑，諸如抑肽酶(apiOtonin)、氨甲環(huán)酸和ε-氨基己酸；抗生素，諸如四環(huán)素和甲硝唑(metronidazole)、環(huán)丙沙星(ciprofloxacin)和阿莫西林(amoxicillin);抗凝血?jiǎng)?諸如激活的蛋白C、前列腺素(特別是(PGl2)、白細(xì)胞三烯、肝素、ADP酶、前列環(huán)素、抗凝血酶III和血纖維蛋白溶解酶原激活劑；留體類，諸如地塞米松(dexamethasone)和用于抑制炎癥的前列環(huán)素、前列腺素、白細(xì)胞三烯和/或細(xì)胞分裂素的抑制劑；心血管藥物，諸如鈣通道阻斷劑、血管擴(kuò)張劑和血管收縮劑；局部麻醉劑，諸如布比卡因(bupivacaine);及抗增殖藥/抗瘤藥諸如5_氟尿B密唳(5_FU)、泰素和/或秦索帝(taxotere);抗病毒藥，諸如丙氧鳥苷(gancyclovir)、齊多夫定(zidovudine)、金剛燒胺(amantidine)、三氟尿苷(trifIuridine)、無(wú)環(huán)鳥苷(acyclovir)、阿糖腺苷(vidarabine)、利巴韋林(ribaravin)、二脫氧尿苷及病毒組分的抗體；哺乳動(dòng)物基因產(chǎn)物、細(xì)胞因子，諸如α-或β-腫瘤壞死因子、α-或β-或Y-干擾素,和白細(xì)胞介素；集落刺激因子；紅細(xì)胞生成素；抗真菌劑，諸如大扶康(diflucan)、酮康唑(ketaconazole)和制霉菌素(nystatin);抗寄生蟲藥,諸如噴他脒(pentamidine);抗炎劑,諸如α-l-抗-胰蛋白酶和ct-1-抗凝乳蛋白酶；麻醉劑，諸如布比卡因(bupivacaine);鎮(zhèn)痛藥；防腐劑；激素；維生素和其他營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑；糖蛋白；纖連蛋白；肽和蛋白質(zhì)；碳水化合物(簡(jiǎn)單的和/或復(fù)雜的碳水化合物)；蛋白聚糖；抗血管生成素；抗原；脂質(zhì)或脂質(zhì)體；寡核苷酸(有義和/或反義DNA和/或RNA);及基因治療劑。在本發(fā)明的其他實(shí)施方案中，如果存在襯墊層，其可含有一種或多種生物活性物。
[0060]在本發(fā)明的第十六實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微粒或包含含量為約0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述可吸收載體包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯并且其中所述可吸收載體優(yōu)選為多孔基質(zhì)形式。
[0061]關(guān)于術(shù)語(yǔ)“部分地穿過(guò)”，意圖微粒以至少單一表面摻入到可吸收載體中，或者更優(yōu)選呈現(xiàn)為相對(duì)于所述可吸收載體的其中一個(gè)表面呈遞濃度梯度的分布，或者更優(yōu)選呈現(xiàn)為在整個(gè)所述可吸收載體中均勻分布。在優(yōu)選的構(gòu)造中，根據(jù)本發(fā)明的組合物不包括含有纖維蛋白原的微粒和/或含有凝血酶的微粒和/或載體微粒的簡(jiǎn)單的非聚集的二元或三元摻混物，諸如W02010/136588中所描述的那些`。
[0062]在本發(fā)明的第十七實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2或約0.5至5mg/cm2的纖維蛋白原的微?；虬繛榧s0.01至500IU/cm2和約0.1至50IU/cm2的凝血酶的微粒，并且其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述可吸收載體包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯并且其中所述可吸收載體優(yōu)選為多孔基質(zhì)形式。
[0063]在本發(fā)明的第十八實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散和/或固定成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散和/或固定在所述可吸收載體上的以下微粒的均勻混合物:包含含量為約0.l-15mg/cm2或約0.5至5mg/cm2的纖維蛋白原的微粒和包含含量為約0.01至500IU/cm2或約0.1至50IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述可吸收載體包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯并且其中所述可吸收載體優(yōu)選為多孔基質(zhì)形式。
[0064]在本發(fā)明的第十九實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散和/或固定成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散和/或固定在所述可吸收載體上的以下微粒的均勻混合物:包含含量為約0.l-15mg/cm2或約0.5至5mg/cm2的纖維蛋白原的微粒和包含含量為約0.01至500IU/cm2或約0.1至50IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述可吸收載體優(yōu)選包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯，并且其中所述可吸收載體優(yōu)選為多孔基質(zhì)形式，借此所述組合物具有介于I %與99.9%之間，或約介于5%與99%之間，或約介于10%與98%之間，或約介于15%與95%之間的孔隙率或空隙分?jǐn)?shù)，其中所述孔隙率或空隙分?jǐn)?shù)為表示為百分率的空隙體積相對(duì)于總體積的分?jǐn)?shù)。替代地，當(dāng)孔隙存在于組合物中時(shí)，該孔隙可具有約0.5微米至約5mm,或約I微米至約Imm,或甚至約10微米至約500微米的直徑。
[0065]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散和/或固定成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散和/或固定在所述可吸收載體上的以下微粒的均勻混合物:包含纖維蛋白原的微粒和包含凝血酶的微粒，所述微粒的量相對(duì)于形成混合物的組合微粒的總質(zhì)量為約5mg/cm2至約lOOmg/cm2，或約10mg/cm2至約90mg/cm2,或約20mg/cm2至約50mg/cm2,其中所述微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述可吸收載體優(yōu)選包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯。
[0066]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微?；虬繛榧s0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述可吸收載體包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯，并且其中所述可吸收載體優(yōu)選為多孔和柔韌性基質(zhì)的形式，其具有以下物理特性中的至少一種:在從約5N/cm至約100N/cm，諸如從約ION/cm至50N/cm范圍 內(nèi)的彈性模量,及約0.lmg/cm3至50mg/cm3,諸如約lmg/cm3至10mg/cm3的密度。
[0067]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了用于止血、組織密封和組織膠合的組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微?；虬繛榧s0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述可吸收載體包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯，并且其中所述可吸收載體優(yōu)選為多孔和/或柔韌性基質(zhì)的形式，其中所述可吸收載體具有以下物理特性中的至少一種:在約5N/cm至約100N/cm,諸如約10N/cm至50N/cm范圍內(nèi)的彈性模量，及約0.lmg/cm3至50mg/cm3,諸如約lmg/cm3至10mg/cm3的密度。
[0068]在本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2或約0.5至5mg/cm2的纖維蛋白原的微粒與包含含量為約0.01至500IU/cm2或約0.1至50IU/cm2的凝血酶的微粒的混合物，并且其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述可吸收載體包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯，并且其中所述可吸收載體優(yōu)選為多孔基質(zhì)形式，并且其中所述組合物為具有三維結(jié)構(gòu)的單一的離散固體單元形式。
[0069]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微粒或包含含量為約0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述組合物以以下形式提供:干粘合劑涂料(dry adhesive coating)、氣溶膠、干氣溶膠、泵壓噴劑、醫(yī)用敷布；膜；涂覆的石膏；加有藥品的海綿或外科手術(shù)貼劑、止血毛絨(fleece);止血墊；紗布；藥膏、半凝膠、凝膠、泡沫、糊劑、混懸劑、膏劑、乳狀液、可模塑形式、鼻栓、外科手術(shù)敷料、傷口包扎物、繃帶、藥簽、導(dǎo)管、光學(xué)纖維、注射器、子宮托、栓劑，或者在液體或非水性液體中的混懸劑。
[0070]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微?；虬繛榧s0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述組合物以具有三維結(jié)構(gòu)的單一離散固體單元的形式提供，所述具有三維結(jié)構(gòu)的單一離散固體單元選自醫(yī)用敷布；膜；涂覆的石膏；加有藥品的海綿、外科手術(shù)貼劑、止血毛絨；止血墊；紗布；可模塑形式、鼻栓、外科手術(shù)敷料、傷口包扎物、繃帶、藥簽、導(dǎo)管、光學(xué)纖維、注射器、子宮托，或栓劑。
[0071]本發(fā)明組合物中采用的纖維蛋白原可為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知和可獲得的任何合適的纖維蛋白原。用于特定應(yīng)用的具體纖維蛋白原可由本領(lǐng)域技術(shù)人員憑經(jīng)驗(yàn)選擇。優(yōu)選地，纖維蛋白原為適合于引入到患者中的純化纖維蛋白原。[0072]本發(fā)明組合物中采用的凝血酶可為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知和可獲得的任何合適的凝血酶。用于特定應(yīng)用的具體凝血酶來(lái)源可由本領(lǐng)域技術(shù)人員憑經(jīng)驗(yàn)選擇。優(yōu)選地，凝血酶為適合于引入到患者中的純化凝血酶。纖維蛋白原和凝血酶可從人或動(dòng)物供體(諸如牛凝血酶)的血液中分離，其中纖維蛋白原和/或凝血酶已經(jīng)受諸如沉淀、濃縮、滲濾和親和層析(優(yōu)選免疫親和層析)的多個(gè)純化步驟，從而除去在藥物組合物的制造、儲(chǔ)存和/或使用期間導(dǎo)致纖維蛋白原和/或凝血酶片段化、激活和/或降解的物質(zhì)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，纖維蛋白原和/或凝血酶中的任一者或兩者都可通過(guò)重組DNA技術(shù)在培養(yǎng)的細(xì)胞中或經(jīng)由轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或植物制備。
[0073]纖維蛋白原或凝血酶可為全長(zhǎng)的野生型(對(duì)于含有具有625或611或610個(gè)氨基酸的Aa鏈的纖維蛋白原)或其任何活性片段。片段是已知的；參見(jiàn)Coller等人，J.Clin.1nvest.89:546-555 (1992)。還可使用變體形式。纖維蛋白原的合適變體形式包括作為選擇性剪接的結(jié)果的變體，諸如所謂的? ' (Y '變體)和a-ext Fib或Fib420變體，如W02010/004004中所公開(kāi)并以引用的方式并入本文的。纖維蛋白原原材料可為冷凍溶液，但是可使用在噴霧干燥之前需要重構(gòu)的凍干粉末。
[0074]包含玻璃狀載體的微粒中的纖維蛋白原含量可為約0.05% w/w至99.9% w/w，或約 0.1 % w/w 至 80% w/w,或約 0.5% w/w 至 60% w/w,以及約 5% w/w 至 50% w/w,或約 10%w/w至25% w/w,或約6.5% w/w。包含玻璃狀載體的微粒中的凝血酶含量可為約10IU/g至20，000IU/g,或約 25IU/g 至 1000IU/g,或約 100IU/g 至 500IU/g,或約 270IU/g。[0075]含有纖維蛋白原和/或凝血酶的微粒和/或添加劑材料，當(dāng)存在時(shí)，可為固體或中空的，諸如在微膠囊的情況下。包含纖維蛋白原或凝血酶的微?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域中已知的方法制備，所述方法例如如均以引用的方式并入本文的W092/18164、W096/09814、W096/18388或W097/44015中所描述的方法。這些噴霧干燥和相關(guān)的顆粒操控工藝使得能夠制得具有規(guī)定的尺寸分布，例如直徑至多50微米的可溶蛋白質(zhì)微膠囊。例如，如那些文獻(xiàn)中所描述的，可以重復(fù)制備例如90%或更多(以體積計(jì))尺寸至多30 μ m，例如10-20 μ m的微粒。正如將被本領(lǐng)域技術(shù)人員理解的，通過(guò)將噴霧干燥機(jī)中的空氣流動(dòng)模式調(diào)節(jié)成逆流(counter-current)，或者將多個(gè)霧化器排列成“強(qiáng)制初級(jí)聚集”的設(shè)置，可以原位制得這些顆粒的容易流動(dòng)的聚集體。此類聚集體的直徑可以為50至1000微米或100至500微米，或者125至250微米。如W003/037303中所描述的，可以將含纖維蛋白原和含凝血酶的可溶微粒分開(kāi)配制并通過(guò)使用多噴嘴霧化器在噴霧干燥設(shè)備中將它們摻混在一起。
[0076]盡管制備微粒組分的優(yōu)選方法包括噴霧干燥，但其他干燥技術(shù)也可用來(lái)制備所述微粒。合適的方法是本領(lǐng)域已知的并且包括流化床干燥和冷凍干燥并隨后進(jìn)行微粉化，或者經(jīng)由噴霧-冷凍干燥。如果必要或需要，可以使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)將微粒滅菌。
[0077]用于形成根據(jù)本發(fā)明的組合物的微粒優(yōu)選通過(guò)噴霧干燥制備。通常，使用2-流體噴嘴，其在霧化工藝期間利用壓縮空氣；這導(dǎo)致產(chǎn)生中空微粒?？稍贜iro Mobile Minor噴霧干燥機(jī)上使用這種霧化系統(tǒng)制造的微粒的最大粒度(體積中值直徑，X50，通過(guò)Sympatec測(cè)量)為~30μπι。本發(fā)明微粒的優(yōu)選Χ50值介于約I與50微米之間，最優(yōu)選介于約10與30微米，或約介于15 與25微米之間。
[0078]然后首先將實(shí)心或中空的含纖維蛋白原的微粒與實(shí)心或中空的含凝血酶的微粒摻混，并且任選地然后與如本文所描述的添加劑材料摻混，反之亦然，或者以產(chǎn)生均勻摻混物的任何順序摻混。此種摻混可以使用低剪切或高剪切摻混，或者本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其他技術(shù)進(jìn)行。
[0079]本發(fā)明的微粒可以通過(guò)單獨(dú)地噴霧干燥活性組分的溶液與糖而制備，所述糖諸如單糖和二糖，包括乳糖、甘露糖醇和海藻糖，或者多糖諸如右旋糖苷。一種替代程序包括共噴霧干燥，其中配制纖維蛋白原或凝血酶和另一種壁形成材料并且噴霧干燥，從而得到活性組分已摻入到其中的微粒。合適的其他蛋白質(zhì)可以是天然存在的或者通過(guò)重組DNA技術(shù)在培養(yǎng)的細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或植物中制備。它們可以充當(dāng)“壁形成材料”，如W092/18164中所描述的，其中給出了多個(gè)實(shí)例。優(yōu)選的材料是HSA(人血清白蛋白)。例如，單獨(dú)地或在變化量的賦形劑諸如HSA(例如纖維蛋白原:HSA的比率為1: 1、1: 3、3: I)和海藻糖的存在下噴霧干燥纖維蛋白原。HSA的其他合適替代物包括表面活性劑，諸如TWeen20、Tween80> Poloxamer407或Poloxamerl88?？蓪丐離子例如以氯化|丐形式摻入到凝血酶原料中。替代地，可以在加工后將氣化鈣加入到微粒中。
[0080]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，也可以存在添加劑材料。本發(fā)明中使用的添加劑材料通常具有IOnm至Imm或約10微米至1000 μ m的粒度。在選擇添加劑充當(dāng)載體的情況下，粒度可介于10 μ m至1000 μ m之間，或介于100 μ m至500 μ m之間，或介于125 μ m至250 μ m之間，或者可能例如介于ΙΟμπι至40μηι之間。它們可包含一種材料或混合物。[0081 ] 添加劑材料可構(gòu)成組合物的微粒摻混物的約I重量％、約2重量％、約3重量％、約4重量％、約5重量％、約6重量％、約7重量％、約8重量％、約9重量％、約10重量％、約11重量％、約12重量％、約13重量％、約14重量％、約15重量％、約16重量％、約17重量％、約18重量％、約19重量％、約20重量％、約21重量％、約22重量％、約23重量％、約24重量％、約25重量％、約26重量％、約27重量％、約28重量％、約29重量％、約30重量％、約31重量％、約32重量％、約33重量％、約34重量％、約35重量％、約36重量％、約37重量％、約38重量％、約39重量％、約40重量％、約41重量％、約42重量％、約43重量％、約44重量％、約45重量％、約46重量％、約47重量％、約48重量％、約49重量％、約50重量％、約51重量％、約52重量％、約53重量％、約54重量％、約55重量％、約56重量％、約57重量％、約58重量％、約59重量％、約60重量％、約61重量％、約62重量％、約63重量％、約64重量％、約65重量％、約66重量％、約67重量％、約68重量％、約69重量％、約70重量％、約71重量％、約72重量％、約73重量％、約74重量％、約75重量％、約76重量％、約77重量％、約78重量％、約79重量％、約80重量％、約81重量％、約82重量％、約83重量％、約84重量％、約85重量％、約86重量％、約87重量％、約88重量％、約89重量％、約90重量％、約91重量％、約92重量％、約93重量％、約94重量％、約95重量％、約96重量％、約97重量％、約98重量％、約99重量或之間的任何范圍。
[0082]多種材料適合用作用于增強(qiáng)流動(dòng)和潤(rùn)濕能力等的生物相容、吸水、可水溶脹的添加劑材料。優(yōu)選地，所述材料不溶或者非常緩慢溶解。此類材料可以包括右旋糖苷聚合物如例如可以不同粒度獲得的Sephadex,淀粉,普魯蘭多糖(pullulan)衍生物,透明質(zhì)酸酯，纖維素產(chǎn)品諸如微晶纖維素(Avicel系列)，甲基纖維素，羧甲基纖維素，微細(xì)纖維素或羥基丙基纖維素，羥基丙基甲基纖維素，羥基丙基纖維素，低取代的羥基丙基纖維素，羥基乙基纖維素及其他材料，諸如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，它們可以單獨(dú)或者以混合物形式使用。此外，充當(dāng)載體的合適添加劑材料包括優(yōu)選具有約1000分子量的聚乙二醇)(PEG);優(yōu)選具有約50，000平均分子量的聚乙烯吡咯烷酮(PVP);聚(丙烯酸)、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇(PVA)、聚(甲基乙烯基醚-共-馬來(lái)酸酐)、聚(環(huán)氧乙烷)及通常具有約40，000平均分子量的右旋糖苷。如果必要或需要，可以對(duì)摻入到本發(fā)明藥物組合物中的微粒或組合物本身進(jìn)行滅菌。無(wú)菌加工、電子束照射、Y-照射和環(huán)氧乙烷是合適技術(shù)的實(shí)例。
[0083]本發(fā)明中使用的額外顆粒(本文描述`為“載體顆?！?通常具有ΙΟμπι至ΙΟΟΟμπι，例如10 μ m至40 μ m的粒度。它們可以包含一種材料或混合物。多種材料適合用于纖維蛋白密封劑用的大載體材料中，用于增強(qiáng)流動(dòng)和潤(rùn)濕能力等。它們包括糖諸如單糖和二糖，包括乳糖、甘露糖醇和海藻糖，或者右旋糖苷和右旋糖苷聚合物，如例如可以不同粒度獲得的Sephadex0
[0084]諸如微晶纖維素(Avicel系列)、甲基纖維素、羧甲基纖維素、微細(xì)纖維素或羥基丙基纖維素的纖維素產(chǎn)品，及諸如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的其他材料可以單獨(dú)或者以混合物形式用作載體顆粒。此外，合適的載體顆?？砂瑑?yōu)選具有約1000分子量的聚乙二醇(PEG);優(yōu)選具有約50，000平均分子量的聚乙烯吡咯烷酮(PVP);聚(丙烯酸)、PVA、聚(甲基乙烯基醚-共-馬來(lái)酸酐)、聚(環(huán)氧乙烷)及通常具有約40，000平均分子量的右旋糖苷。
[0085]片劑崩解劑是可包括在摻入到根據(jù)本發(fā)明的組合物中的微粒摻混物內(nèi)的額外材料的實(shí)例。這些材料將從傷口吸收水分，迅速膨脹并且由此增強(qiáng)粉末摻混物的止血組分的潤(rùn)濕能力:[0086]-淀粉乙醇酸鈉(Explotab?.或Primojel?)-具有35-55 μ m范圍的平均粒度。約25%的葡萄糖單元羧甲基化。
[0087]-交聯(lián)的聚乙烯吡咯燒酮(polyplasdone?:)
[0088]-藻酸鹽和藻酸
[0089]-交聯(lián)的羧甲基纖維素鈉(Ac-D1-Sol?)
[0090]可以使用的樹膠和膠凝劑包括，例如，黃芪膠、刺梧桐樹膠、可溶淀粉、明膠、果膠、瓜爾膠和結(jié)冷膠(Gellan gum)。特別優(yōu)選的添加劑為Emdex?,即右旋糖酐鹽(dextrate)的水合形式(含有少量淀粉寡糖的噴霧結(jié)晶右旋糖)。它是高度精煉的產(chǎn)品，由具有190-220 μ m中值粒度的白色自由流動(dòng)的噴霧結(jié)晶大孔球體組成。另一種優(yōu)選的添加劑為N0N-PAREIL SEEDS?: (Sugar Spheres) 0這些在多個(gè)藥品單元中使用以獲得改進(jìn)的含量均勻性、一致性及受控制的藥物釋放和高度的藥物穩(wěn)定性，尺寸在200mm至2000mm的范圍內(nèi)。另一種合適的載體添加劑是如以名稱PARTECK SI?知PARTECK M? (Merck KGaA,Darmstadt, Germany)出售的高度多孔且高度可溶的交織細(xì)絲狀晶體形式的山梨糖醇或甘露糖醇。這些等級(jí)具有高吸附容量，并且因此適合于與本發(fā)明組合物中存在的干粉纖維蛋白密封劑粉末摻混，從而產(chǎn)生用于摻入的新型粉末，所述新型粉末通過(guò)使得血液能夠浸入組合物并因此避免單獨(dú)在界面處凝結(jié)而減少起塵(dusting)，增強(qiáng)干粉纖維蛋白密封劑和/或本發(fā)明組合物的潤(rùn)濕能力、溶解性和性能。
[0091]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，摻入到根據(jù)本發(fā)明的組合物中的微?；蚱鋼交煳锟梢赃M(jìn)一步包含泡騰劑對(duì)。泡騰反應(yīng)后產(chǎn)生的氣體可以使纖維蛋白密封劑膨脹成‘泡沫’和/或增加包含纖維蛋白密封劑的粉末的潤(rùn)濕能力。當(dāng)所述粉末被施加至傷口上時(shí)，泡騰組分溶解、反應(yīng)并且釋放出，即二氧化碳，由此增加止血組分的潤(rùn)濕能力并且因此改善血凝塊形成時(shí)間。一旦完全反應(yīng)并且血凝塊已經(jīng)形成，纖維蛋白密封劑便呈現(xiàn)為穩(wěn)定的泡沫。泡騰劑對(duì)通常包含檸檬酸或檸檬酸氫鈉和碳酸氫鈉，但可以使用其他生理學(xué)上可接受的酸/堿金屬或堿土金屬碳酸鹽混合物，例如酒石酸、己二酸、富馬酸或蘋果酸，及碳酸(氫)鈉、鉀或鈣或者甘氨酸碳酸鈉鹽。一般而言，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)基于化學(xué)分子當(dāng)量的泡騰劑對(duì)組分的相對(duì)比例在4: 3至1: 3的范圍內(nèi)，更優(yōu)選約2: 3 (表示為酸性組分與堿性組分的摩爾當(dāng)量比)時(shí)，表現(xiàn)出優(yōu)選的口味特征。就檸檬酸和碳酸氫鈉的優(yōu)選組合而言，這些值以重量為基準(zhǔn)，在1:1至0.3: I的范圍內(nèi)，優(yōu)選0.5: I (表示為酸性組分與堿性組分的比率)。
[0092]另一種優(yōu)選的添加劑材料是二氧化硅，優(yōu)選親水的那些。此類二氧化硅可以為膠體二氧化硅、鍛制二氧化硅、研磨二氧化硅、沉淀二氧化硅，或它們的混合物。合適的鍛制二氧化硅的實(shí)例包括但不限于，Aerosil? 90、130、150、200、300、380、R202、R805、R812、R972、R974 (Degussa Corporation, Ridgefield Park, N.J.)和CAB-O-SIL? TS-720 和M-5 (Cabot Corporation, Tuscola, III.)。一般而言，優(yōu)選 Aerosil.?.200、Aerosil?..R974、CAB-0-SIL.?.TS-720及得自其他鍛制二氧化硅制造商的任何其他一般等價(jià)的產(chǎn)品。已知親水性AEROSIL?J交體二氧化硅增加了片劑崩解和活性成分釋放的速率。膠體二氧化硅充當(dāng)“芯”，從而將水-例如從消化液中-抽入到片劑的內(nèi)部中。而且，“涂覆”有親水性AEROSIL? 200膠體二氧化硅的片劑成分更容易潤(rùn)濕并且更快溶脹(崩解劑)或者更快溶解(活性成分)。此類特性增強(qiáng)了摻入到本發(fā)明組合物中的干粉纖維蛋白密封劑和/或微粒的潤(rùn)濕能力和溶解。此外，此類二氧化硅已知充當(dāng)助流劑，并且因此將在本發(fā)明組合物的制造期間增強(qiáng)此類粘合的微粒的流動(dòng)能力、填充和遞送。而且，此類膠體二氧化硅是用于血液凝結(jié)的已知激活劑，并且因此與纖維蛋白原和凝血酶組分協(xié)同起作用(參見(jiàn)Margolis, " The Effect of Colloidal Silica on Blood Coagulation" ,Aust.J.Exp.Biol.,39, pp.249-258(1961))。本發(fā)明組合物可以包含介于 0.0001% w/w 至 5% w/w，或約0.001%至2%或約0.01% w/w至0.5% w/w的二氧化硅。二氧化硅可以簡(jiǎn)單地與含有纖維蛋白原的組分摻混，然后將含凝血酶的組分加入其中并且進(jìn)一步摻混，或者反之亦然。最優(yōu)選地，在摻入如本文所描述的可吸收載體之前，作為最后步驟將二氧化硅與預(yù)先摻混的粉末狀組分摻混。合適的摻混設(shè)備將是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，二氧化硅可以與如本文定義的載體添加劑顆粒組合存在。
[0093]添加劑材料可以作為單一組分或者以組合形式存在于摻入到根據(jù)本發(fā)明的組合物中的微粒摻混物中，并且可以存在于原料中或者在摻混在一起前加入到噴霧干燥的凝血酶或纖維蛋白原組分中，或者加入到最終摻混物中并且經(jīng)受進(jìn)一步摻混。此種摻混可以使用低剪切或高剪切摻混、機(jī)械-化學(xué)鍵合、雜化或者本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其他技術(shù)進(jìn)行。
[0094]盡管微粒組分優(yōu)選為水溶的，并且微粒優(yōu)選通過(guò)噴霧干燥合適的溶液獲得，但可獲得的微?？梢允亲杂闪鲃?dòng)、離散并且基本上干燥或無(wú)水的，殘余水分含量?jī)?yōu)選不大于約8% w/w,最優(yōu)選不大于5% w/w或3% w/w。這意味著根據(jù)本發(fā)明使用的微粒組分一直未被激活，直到它們例如通過(guò)與傷口部位處的液體接觸而潤(rùn)濕才被激活。含有活性物的纖維蛋白原和/或凝血酶微粒優(yōu)選在室溫(例如25攝氏度)下為無(wú)定形的或者玻璃的形式，或者包含玻璃狀載體，使得夾帶的蛋白質(zhì)穩(wěn)定以及使得活性物以此種快速溶解的狀態(tài)存在。優(yōu)選地，如通過(guò)差示掃描量熱法或者調(diào)制的差示掃描量熱法測(cè)量的，含有纖維蛋白原和/或凝血酶的微粒中的任一者或兩者都表現(xiàn)出高于約25攝氏度，或約30攝氏度，或約40攝氏度，或約50攝氏度，或更合適地約60攝氏度，或約70攝氏度，或約80攝氏度，或更高的玻璃轉(zhuǎn)變溫度。如通過(guò)差示掃 描量熱法或者調(diào)制的差示掃描量熱法測(cè)量的，存在于含有纖維蛋白原和/或凝血酶的微粒中的任一者或兩者中的載體、稀釋劑或賦形劑，或其組合表現(xiàn)出高于約25攝氏度，或約30攝氏度，或約40攝氏度，或約50攝氏度，或更合適地約60攝氏度，或約70攝氏度，或約80攝氏度，或更高的玻璃轉(zhuǎn)變溫度。在此種物理狀態(tài)下，載體、稀釋劑或賦形劑因此為玻璃狀的。優(yōu)選地，玻璃狀載體具有如通過(guò)FTIR測(cè)量的以組合物中的微粒群的重量計(jì)最高約10%，更優(yōu)選最高約8%，甚至更優(yōu)選最高約6%的結(jié)晶度。
[0095]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，玻璃狀載體包含選自由以下組成的組的玻璃形成物:碳水化合物、碳水化合物衍生物、碳水化合物聚合物、有機(jī)羧酸鹽、合成的有機(jī)聚合物、蛋白質(zhì)、肽、氨基酸，以及它們的混合物。優(yōu)選地，玻璃狀載體包含選自由以下組成的組的玻璃形成物:碳水化合物、肽和氨基酸。最優(yōu)選地，玻璃狀載體包含選自由以下組成的組的玻璃形成物:檸檬酸鈉、棉子糖、乳糖、海藻糖、麥芽三糖、麥芽糊精、麥芽糖、吡喃葡糖基-山梨糖醇、吡喃葡糖基-甘露糖醇、聚右旋糖、蔗糖、環(huán)糊精、酪蛋白、人血清白蛋白、羥乙基淀粉、水蘇糖、葡萄糖酸鎂、纖維二糖，以及它們的混合物。在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，玻璃狀載體包含海藻糖。[0096]在另一個(gè)實(shí)施方案中，采用基本上由無(wú)定形纖維蛋白原和/或無(wú)定形凝血酶組成的微粒。如通過(guò)差示掃描量熱法或者調(diào)制的差示掃描量熱法測(cè)量的，無(wú)定形纖維蛋白原和/或無(wú)定形凝血酶表現(xiàn)出高于約25攝氏度，或約30攝氏度，或約40攝氏度，或約50攝氏度，或更合適地約60攝氏度，或約70攝氏度，或約80攝氏度，或更高的玻璃轉(zhuǎn)變溫度。在此種物理狀態(tài)下，載體、稀釋劑或賦形劑因此為玻璃狀的。優(yōu)選地，無(wú)定形纖維蛋白原和/或無(wú)定形凝血酶微粒表現(xiàn)出如通過(guò)FTIR測(cè)量的以組合物中的微粒群的重量計(jì)最高約10%，更優(yōu)選最高約8%，甚至更優(yōu)選最高約6%的結(jié)晶度。
[0097]所述無(wú)定形纖維蛋白原或凝血酶顆粒的優(yōu)選生產(chǎn)工藝是經(jīng)由如US6926908中所描述的噴霧干燥進(jìn)行。所述噴霧干燥的微粒在可吸收載體中或上的摻入優(yōu)選借助于冷卻的無(wú)水溶劑，諸如乙醇在_30°C下進(jìn)行。
[0098]添加劑材料也可以在室溫(例如25攝氏度)下為無(wú)定形或玻璃的形式以便處于快速溶解的狀態(tài)。優(yōu)選地，如通過(guò)差示掃描量熱法或者調(diào)制的差示掃描量熱法測(cè)量的，組合物中的含有纖維蛋白原和/或凝血酶的微粒表現(xiàn)出高于約25攝氏度，或約30攝氏度，或約40攝氏度，或約50攝氏度，或更合適地約60攝氏度，或約70攝氏度，或約80攝氏度，或更高的玻璃轉(zhuǎn)變溫度。此類玻璃狀組合物使得組合物能夠儲(chǔ)存在周圍溫度或室溫例如25攝氏度下一段延長(zhǎng)的時(shí)間，例如大于3個(gè)月或大于6個(gè)月，而不發(fā)生活性的顯著損失。顯著損失被定義為高于纖維蛋白原和/或凝血酶中任一者或兩者的原始效能的約5%或10%或20%或更高的活性損失。
[0099]添加劑材料也可以處于結(jié)晶或無(wú)定形狀態(tài)，但也可以是自由流動(dòng)、離散并且基本上無(wú)水的，殘余水分含量?jī)?yōu)選不大于約5% w/w,最優(yōu)選不大于約3% w/w。
[0100]在本發(fā)明的又一個(gè)實(shí)施方案中，組合物適于形成保護(hù)性或預(yù)防性覆蓋物或繃帶用于輕微擦傷、切口、刮傷、劃傷、燒傷、曬傷、潰瘍和其他皮膚損傷和刺激，諸如外科手術(shù)期間和之后的出血，及來(lái)自重度創(chuàng)傷和/或戰(zhàn)場(chǎng)傷口的不受控制的內(nèi)和外溢血。
`[0101]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，藥物組合物可用作外用止血?jiǎng)┮酝Ｖ钩鲅Ｔ诒景l(fā)明的上下文中，停止出血所需的時(shí)間`被稱為止血時(shí)間(TTH)。如果使用加壓片，TTH的測(cè)量通常在將加壓片施加至出血部位并隨后施加壓力時(shí)開(kāi)始，直到通過(guò)觀察敷料判斷出血停止和/或未觀察到穿過(guò)敷料或者敷料周圍的出血跡象為止。
[0102]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，提供了處理傷口的方法或根據(jù)本發(fā)明的組合物作為止血?jiǎng)┑挠猛?，其中藥物組合物在傷口處的施加導(dǎo)致約10分鐘或更少，約5分鐘或更少，或約3分鐘或更少的TTH。
[0103]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，或根據(jù)本發(fā)明的組合物作為止血?jiǎng)┑挠猛?，其中藥物組合物在傷口處的施加導(dǎo)致處理后血液損失少于約100ml/kg，或少于約80ml/kg，或少于約60ml/kg，或少于約40ml/kg，任選地其中處理前血液損失為至少約5ml/kg,或至少約10ml/kg,或至少約15ml/kg,或至少約50ml/kg,或至少約100ml/kg或更高。
[0104]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，或根據(jù)本發(fā)明的組合物作為止血?jiǎng)┑挠猛荆渲兴幬锝M合物在傷口處的施加導(dǎo)致?lián)p傷后60分鐘平均動(dòng)脈壓(MAP)相對(duì)于損傷前減少小于約40mmHg,或小于約30mmHg,或小于約2OmmHg,或小于約IOmmHg,或小于約5mmHg，或小于約3mmHg，或者M(jìn)AP相對(duì)于損傷前MAP甚至沒(méi)有變化。因此，期望將MAP維持成盡可能接近損傷前MAP，持續(xù)盡可能長(zhǎng)的時(shí)間，以便增強(qiáng)受試者的存活機(jī)會(huì)并減少輸注和/或輸血的需要。
[0105]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，或根據(jù)本發(fā)明的組合物作為止血?jiǎng)┑挠猛?，其中藥物組合物在傷口處的施加導(dǎo)致至少約60分鐘，或至少約90分鐘，或至少約120分鐘，或至少約180分鐘或更長(zhǎng)的存活時(shí)間。
[0106]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，或根據(jù)本發(fā)明的組合物作為止血?jiǎng)┑挠猛荆渲兴幬锝M合物在傷口處的施加導(dǎo)致至少約10 %，或至少約20 %，或至少約30 %，或至少約40 %，或至少約50 %，或至少約75 %，或至少約90 %，或至少約95 %或更高的存活百分率。
[0107]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，或根據(jù)本發(fā)明的組合物在止血、組織密封和組織膠合中的用途，其中藥物組合物的施加或使用進(jìn)一步包括施加適度的手動(dòng)壓力，持續(xù)不少于約30秒，或不少于約60秒，或不少于約2分鐘，或不少于約3分鐘，或不少于約5分鐘，或不少于約7分鐘，或不少于約10分鐘，或更長(zhǎng)時(shí)間。
[0108]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，提供了處理傷口或減少溢血部位出血的方法，或根據(jù)本發(fā)明的組合物在止血、組織密封和組織膠合中的用途，其中藥物組合物的施加或使用進(jìn)一步包括施加適度的手動(dòng)壓力，持續(xù)不少于約30秒，或不少于約60秒，或不少于約2分鐘，或不少于約3分鐘，或不少于約5分鐘，或不少于約7分鐘，或不少于約10分鐘，或更長(zhǎng)時(shí)間，并且其中當(dāng)施用至表現(xiàn)出大于約30克/分鐘或更高的出血速率的傷口上時(shí)，所述處理導(dǎo)致止血時(shí)間(TTH)少于約10分鐘，或少于約8分鐘，或少于約5分鐘，或少于約4分鐘，或少于約3分鐘，或少于約2分鐘。
[0109]本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是如本文所描述的藥物組合物在處理輕度至中度出血中的用途。輕度出血是通常呈現(xiàn)出小于約5g/分鐘的血流量的那些，而中度出血通常為約IOg/分鐘或更少，或約20g/分鐘或更少，任選地TTH少于10分鐘，或約5分鐘或更少。
[0110]在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了如本文所描述的藥物組合物在處理嚴(yán)重出血中的用途。嚴(yán)重出血是通常呈現(xiàn)出超過(guò)約30g/分鐘，或超過(guò)約40g/分鐘，或超過(guò)約50g/分鐘，或超過(guò)約60g/分鐘,或超過(guò)約100g/分鐘,或甚至超過(guò)約150g/分鐘或更高的血流量或血液損失的那些。因此，提供了用于處理有需要的受試者中的嚴(yán)重或不受控制的出血的組合物，其中所述受試者中的血流量或血液損失超過(guò)約30g/分鐘,或超過(guò)約40g/分鐘,或超過(guò)約50g/分鐘,或超過(guò)約60g/分鐘,或超過(guò)約100g/分鐘，或甚至超過(guò)約150g/分鐘或更高，并且任選地其中所述處理導(dǎo)致TTH少于約10分鐘，或少于約5分鐘或更少。在存在這樣高的出血速率的情形下，同時(shí)需要輸血液制品和/或輸注擴(kuò)充劑等是很常見(jiàn)的。
[0111]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了用于處理有需要的受試者中的嚴(yán)重或不受控制的出血和/或減少有需要的受試者中的溢血部位出血的組合物，其中所述受試者中的血流量或血液損失超過(guò)約30g/分鐘,或超過(guò)約40g/分鐘,或超過(guò)約50g/分鐘,或超過(guò)約60g/分鐘,或超過(guò)約100g/分鐘,或甚至超過(guò)約150g/分鐘或更高,并且任選地其中所述處理導(dǎo)致TTH少于約10分鐘，或少于約5分鐘或更少，并且其中在處理之前嚴(yán)重或不受控制的出血的持續(xù)時(shí)間為至少約2分鐘，或至少約5分鐘，或至少約10分鐘，或更長(zhǎng)時(shí)間。
[0112]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了處理有需要的受試者中的嚴(yán)重或不受控制的出血和/或減少有需要的受試者中的溢血部位出血的方法，其中所述受試者中的血流量或血液損失超過(guò)約30g/分鐘,或超過(guò)約40g/分鐘,或超過(guò)約50g/分鐘,或超過(guò)約60g/分鐘，或超過(guò)約100g/分鐘，或甚至超過(guò)約150g/分鐘或更高，并且任選地其中所述處理導(dǎo)致TTH少于約10分鐘，或少于約5分鐘或更少，并且其中在處理之前嚴(yán)重或不受控制的出血的持續(xù)時(shí)間為至少約2分鐘，或至少約5分鐘，或至少約10分鐘，或更長(zhǎng)時(shí)間。
[0113]本發(fā)明的另一目的在于提供適于在非淺表組織上形成密封或者使超出輕微擦傷、切口、刮傷、劃傷、燒傷、曬傷、潰瘍和其他皮膚損傷和刺激的敞開(kāi)組織閉合的藥物組合物?？商幚淼膫诎?局部傷口 ；較深的傷口 ；外科手術(shù)刀口 ；嚴(yán)重的傷口 ；戰(zhàn)場(chǎng)傷口和創(chuàng)傷；及急救室過(guò)量出血等。因此，傷口密封劑的各種應(yīng)用包括用于外科手術(shù)和醫(yī)療程序的急救和傷員鑒別(triage)應(yīng)用。本發(fā)明藥物組合物可以直接施加至可能出現(xiàn)出血的傷口、縫合處、刀口和其他開(kāi)口上。傷口包括對(duì)活生物體中任何組織的損害。生物組織包括結(jié)締組織、內(nèi)皮組織、神經(jīng)組織、肌肉組織和器官。優(yōu)選的生物組織選自由以下組成的組:骨、皮膚、軟骨、脾、肌肉、淋巴、腎臟、肝、血管、肺、硬腦膜、腸和消化組織。該組織可以是內(nèi)部(例如器官)或外部組織(例如眼、皮膚等)，并且可以是硬組織(例如骨)或軟組織(例如肝、脾等)。傷口可能由任何原因造成，包括感染、外科手術(shù)干預(yù)、燒傷或創(chuàng)傷。創(chuàng)傷被定義為由物理力造成的損傷；實(shí)例包括機(jī)動(dòng)車事故、槍擊和灼傷的結(jié)果。
[0114]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物在外科手術(shù)期間或之后施用。本發(fā)明組合物可施用至受試者的一個(gè)或多個(gè)傷口上，包括人、哺乳動(dòng)物和其他牲畜應(yīng)用。
[0115]本發(fā)明進(jìn)一步包括通過(guò)施加或施用如本文所描述的組合物來(lái)處理傷口或減少溢血部位出血的方法。
[0116]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，藥物組合物被配制并包裝成用于單次遞送施加的非無(wú)菌或無(wú)菌制劑，或多次使用性(mult1-use)制劑。
[0117]本發(fā)明藥物組合物 外用施加至傷口部位。替代地或另外地，在例如較深的裂口、動(dòng)脈傷口的情況下或者在外科手術(shù)程序期間可將組合物從內(nèi)部引入到傷口部位中。
[0118]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，提供了液體組合物，其包含含有纖維蛋白原的第一微粒和/或含有凝血酶的第二微粒的混合物在非水性媒介物中的懸浮液，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，并且任選地其中液體組合物進(jìn)一步包含添加劑，或者如本文所描述，用于外用遞送在輕微擦傷、切口、刮傷、劃傷、燒傷、曬傷、潰瘍、內(nèi)靜脈出血、外靜脈出血、限制進(jìn)入的傷口(limited access wounds)、空間填充應(yīng)用(space-filling application)和外科手術(shù)創(chuàng)傷上。該組合物可以容易地以可變的數(shù)量施加至傷口部位并且將迅速停止出血。
[0119]本發(fā)明還包括制備水溶性纖維蛋白密封劑糊劑、藥膏(salve)、膏劑(ointment)或懸浮液組合物的工藝，其包括以下步驟:將本發(fā)明組合物的微粒組分和/或其摻混物，與液態(tài)生物相容的生物可降解聚合物媒介物，諸如具有約200至6000的分子量范圍的聚乙二醇混合。優(yōu)選地，使用各種分子量的PEG的摻混物。優(yōu)選地，PEG為具有500至1，000范圍內(nèi)的平均分子量的摻混物，如PEG300MW和PEG1500MW的1: 1，或1: 2或1: 3或1: 5或1: 9摻混物。使用較低等級(jí)的PEG將制得顏色較淺的粘度較低的懸浮液，所述懸浮液可以包裝并且通過(guò)泵壓噴霧遞送。此類懸浮液可以任選包括表面活性劑或其他合適的助懸劑以防止絮凝。此類形式的制劑和劑型是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。所述糊劑、藥膏、膏劑或懸浮液組合物也可與例如明膠海綿、紗布或者膠原蛋白材料通過(guò)以下方式結(jié)合使用:在此種作為襯底的材料上涂覆組合物并且將它施加至溢血部位，或者首先將組合物施加至溢血部位并且將凝膠海綿、紗布或膠原蛋白放在組合物頂部上并且向其上施加壓力。本發(fā)明的膏劑、藥膏或糊劑的粘度和效能足夠高，使得它的止血有效應(yīng)用能夠通過(guò)外科醫(yī)生將戴手套的手指浸入糊劑并且將糊劑放在出血部位上來(lái)實(shí)現(xiàn)。在這個(gè)方面使用的聚乙二醇具有約500至1000或者更優(yōu)選約900的平均分子量范圍。聚乙二醇等級(jí)可以彼此組合以產(chǎn)生獨(dú)特特性。例如，可以將在室溫下為固體而在室溫下不溶于液體PEG300中的PEG1500組合在一起，并且將其加熱到較高熔點(diǎn)的二醇(即PEG1500)的熔點(diǎn)以上從而形成溶液。例如，將作為液體的PEG300與相等重量的在43攝氏度下熔融的固體PEG1500混合，并且將兩者一起在PEG1500的熔點(diǎn)下進(jìn)行加熱或加熱到高于PEG1500的熔點(diǎn)，使得它們液化成均勻溶液，并且當(dāng)該溶液冷卻至室溫時(shí)它形成光滑的軟糊劑。這種糊劑是水溶的，并且足夠柔軟(yielding)從而容易地散布在組織或皮膚上。其他合適的非水性媒介物將是技術(shù)人員已知的。
[0120]本發(fā)明進(jìn)一步包括通過(guò)將糊劑組合物施加至患者的溢血部位來(lái)處理傷口或減少溢血部位出血的方法，所述糊劑組合物在含有諸如聚乙二醇的液態(tài)生物相容的生物可降解聚合物媒介物的基體中包含止血有效量的含有纖維蛋白原的第一微粒與含有凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體。所述糊劑可與纖維紗布材料組合或者單獨(dú)以糊劑形式施加至溢血部位。
[0121]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，將根據(jù)本發(fā)明的組合物的微粒組分和/或其摻混物，與推進(jìn)劑， 任選地與諸如PVP的聚合物混合并包裝在氣溶膠容器中(參見(jiàn)US4, 752，466)。因此這提供了將干粉狀凝血酶直接遞送到傷口上，或者直接遞送到如本文所描述的止血或支撐材料上的便利方式。每一種中使用的纖維蛋白密封劑粉末組合物的量可以根據(jù)期望的效能而不同，但通常可以為約0.5至約1.0克或更高的數(shù)量級(jí)。然后從罐中通過(guò)閥門將液化形式的推進(jìn)劑填充到氣溶膠容器中，推進(jìn)劑在罐中以液化形式存在。使用的推進(jìn)劑的量通?？梢詾榧s10克的數(shù)量級(jí)。填充氣溶膠容器的其他方法是熟知的并且如果需要可以使用。在氣溶膠容器內(nèi)，生物相容的生物可降解聚合物例如PVP可完全溶解于推進(jìn)劑中。纖維蛋白密封劑粉末組合物不溶解，但以非常細(xì)碎的狀態(tài)存在，即它懸浮于推進(jìn)劑中，其中它作為細(xì)碎的乳狀懸浮液存在。當(dāng)壓下閥門以從氣溶膠容器噴射材料時(shí)，纖維蛋白密封劑粉末組合物、推進(jìn)劑和生物相容的生物可降解聚合物的混合物射出。推進(jìn)劑迅速蒸發(fā)并且消失。設(shè)計(jì)用于分配粉末噴劑的氣溶膠容器及其組件可商購(gòu)獲得，并且可用于本發(fā)明 ° 在 Paul Sanders 的“Handbook ofAerosol Technology，，(Van Nostrand, ReinholdCompany, N.Y.1979,第 2 版，21 章，題為“Aerosol Suspensions”)(Powders)中給出了背景信息。優(yōu)選的推進(jìn)劑包括HFA系列的那些。
[0122]本發(fā)明的氣溶膠包裝應(yīng)當(dāng)以使得它的內(nèi)容物在被噴射時(shí)以無(wú)菌的方式制備和處理。細(xì)菌過(guò)濾器和無(wú)菌加工技術(shù)的使用得到無(wú)菌產(chǎn)品。本發(fā)明的氣溶膠被設(shè)計(jì)為在室溫下儲(chǔ)存。在這種形式中，由于組合物的微粒組分的玻璃狀性質(zhì)，它相對(duì)穩(wěn)定至少6個(gè)月時(shí)間。
[0123]在本發(fā)明的最優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，所述藥物組合物用于諸如在胃腸系統(tǒng)，例如食管、胃、小腸、大腸、腸、直腸上，在實(shí)質(zhì)性器官諸如肝、胰腺、脾、肺、腎、腎上腺、淋巴腺和甲狀腺上的外科手術(shù)干預(yù)；在耳、鼻和喉區(qū)域(ENT)中的外科手術(shù)干預(yù)，包括牙齒外科手術(shù)、鼻出血、心臟血管外科手術(shù)，諸如頸動(dòng)脈脈內(nèi)膜切除術(shù)、股胭旁路或冠狀動(dòng)脈旁路接枝(CABG);美容外科手術(shù)、脊柱外科手術(shù)、神經(jīng)外科手術(shù)，諸如后路腰椎椎體間融合術(shù)、微椎間盤切除術(shù)或開(kāi)顱術(shù)；淋巴、膽汁和腦脊液(CSF)瘺，胸肺外科手術(shù)期間的漏氣，胸腔外科手術(shù)，包括氣管、支氣管和肺的外科手術(shù)；矯形外科手術(shù)，諸如膝關(guān)節(jié)或髖關(guān)節(jié)置換；婦科外科手術(shù)程序諸如剖腹產(chǎn)手術(shù)、子宮切除術(shù)、纖維瘤外科手術(shù)；血管外科手術(shù)，諸如分流術(shù)；泌尿道、骨(例如松質(zhì)切除術(shù))，及急救外科手術(shù)。特別優(yōu)選的外科手術(shù)干預(yù)包括矯形外科手術(shù)、肝切除術(shù)、軟組織損傷/外科手術(shù)和血管外科手術(shù)?？梢允┘咏M合物，使微?；旌衔飳?如果存在)與傷口表面相鄰，或者該層在施加至傷口表面的層的相對(duì)側(cè)。
[0124]在本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，并且其中所述組合物以以下形式提供和/或包裝:干粘合劑涂料、氣溶膠、干氣溶膠、泵壓噴劑、醫(yī)用敷布；月旲；涂覆的石骨；加有藥品的海綿或外科手術(shù)貼劑、止血毛續(xù)(fleece);止血塾；紗布；藥膏、半凝膠、凝膠、泡沫、糊劑、混懸劑、膏劑、乳狀液、可模塑形式、鼻栓、外科手術(shù)敷料、傷口包扎物(wound packing)、繃帶、藥簽、導(dǎo)管、光學(xué)纖維、注射器、子宮托、栓劑,或者在液體或非水性液體中的懸浮液。
[0125]在本發(fā)明的最優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其中可吸收載體包含選自由以下組成的組的生物相容的生物可降解聚合物:多糖、白蛋白、纖維素、甲基纖維素、烷基羥烷基纖維素、羥烷基纖維素、硫酸纖維素、羧甲基纖維素鹽、羧甲基纖維素、羧乙基纖維素、氧化纖維素；明膠或膠原蛋白(如膠原蛋白-海綿)、甲殼素、羧甲基甲殼素、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸的鹽、藻酸鹽、藻酸、藻酸丙二醇酯、糖原、右旋糖酐、硫酸右旋糖酐、凝膠多糖、果膠、普魯蘭多糖、黃原膠、軟骨素、硫酸軟骨素、羧甲基葡聚糖、羧甲基殼聚糖、殼聚糖、肝素、硫酸肝素、乙酰肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸皮膚素、硫酸角質(zhì)素、角叉菜膠、淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉、聚-N-葡糖胺、聚-N-乙酰葡糖胺、聚甘露糖醛酸、聚葡糖醛酸、聚古羅糖醛酸、殼聚糖、羧甲基殼聚糖、殼聚糖鹽；聚氨酯；氧化多糖，以及以上任何物質(zhì)的衍生物或組合。
[0126]用于本發(fā)明這個(gè)實(shí)施方案中的其他優(yōu)選的生物相容的生物可降解聚合物包括聚氨酯及由聚氨酯形成的可吸收載體，諸如以引用方式并入本文的W02004/062704和W02010/137981 (Polyganics B.V)中所公開(kāi)的那些。
[0127]用于本發(fā)明這個(gè)實(shí)施方案中的更進(jìn)一步優(yōu)選的生物相容的生物可降解聚合物包括甲殼素、甲殼素-葡聚糖、殼聚糖、殼聚糖-葡聚糖，其衍生物，及其任何組合，以及由此類聚合物和組合形成的可吸收載體,諸如以引用方式并入本文的W02010/142507和W02007/122187 (Kitozyme S.A)中所公開(kāi)的那些。
[0128]在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中可吸收載體包含殼聚糖或其衍生物或共聚物或鹽，任選地其不來(lái)源于真菌。
[0129]在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中可吸收載體包含支撐材料，諸如紗布、海綿、墊、繃帶等。
[0130]本文提出將根據(jù)本發(fā)明的組合物的微粒組分和/或其摻混物以預(yù)定的強(qiáng)度例如:20%、40%、60%或80%或者任何其他優(yōu)選強(qiáng)度，噴射、滴注、浸入、浸潰或以其他方式包埋或施加于支撐上并且標(biāo)明施加于其上的纖維蛋白密封劑粉末的強(qiáng)度。將微粒組分和/或其摻混物，或者如本文所描述的微粒組分與其他材料的組合施加到支撐材料中、施加到支撐材料上，或施加成穿過(guò)支撐材料的方法是本領(lǐng)域那些技術(shù)人員熟知的。
[0131]在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中可吸收載體包含支撐材料，諸如紗布、海綿、墊、繃帶等，并且其中將第一和第二微粒分散和/或固定成穿過(guò)所述可吸收載體、分散和 /或固定在所述可吸收載體中或上。
[0132]在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中可吸收載體包含支撐材料，諸如紗布、海綿、墊、繃帶等，并且其中第一和/或第二微?；旧暇鶆虻胤稚⒑?或固定成穿過(guò)所述可吸收載體、分散和/或固定在所述可吸收載體中或上。
[0133]合適的媒介物包括但不限于，載體、溶劑、全氟化碳等。最優(yōu)選的媒介物為在ICHGuidelines下被歸類為2類或3類的溶劑。2類中合適的此類溶劑包括乙腈、環(huán)己烷、二氯甲烷、1，4_ 二噁烷、乙二醇、己烷、甲醇、甲苯、二甲苯等。3類中合適的此類溶劑包括丙酮、茴香醚、1- 丁醇、2- 丁醇、乙酸丁酯、庚烷、乙酸異丙酯、甲基乙基酮、2-甲基-1-丙醇、二甲亞砜、乙醇、乙酸乙酯、乙醚、甲酸乙酯、戊烷、1-戊醇、2-丙醇等。在最優(yōu)選的方法中，使用乙醇或I，4-二噁烷。
[0134]在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了制備藥物組合物的方法，所述藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中可吸收載體包含支撐材料，諸如紗布、海綿、墊、繃帶等，并且所述方法包括以下步驟；(i)，在不溶解所述微?；旌衔锏拿浇槲锘蜉d體流體中形成所述微粒混合物的分散體或懸浮液，所述媒介物或載體流體任選地包含粘結(jié)劑或增粘劑，(?)在大氣壓力、降低的壓力或升高的壓力下將所述分散體或懸浮液施加至可吸收載體的一個(gè)或多個(gè)表面，以及任選地(iii)，除去所述媒介物。
[0135]施加所述分散體或懸浮液從而浸潰所述載體的合適工藝包括滲濾、噴射、浸入、浸泡、滴注、浸潰、包埋、真空壓力浸潰、高壓浸潰等。替代地，可通過(guò)如下方式形成三明治型形式(sandwich presentation):將包含粘結(jié)劑的分散體或懸浮液施加至一個(gè)或多個(gè)單獨(dú)載體/基質(zhì)的一個(gè)或多個(gè)表面并使它們鄰接在一起，然后任選地除去媒介物或載體流體。
[0136]步驟(iii)中除去所述媒介物的合適方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，但是包括但不限于，空氣干燥、冷凍干燥、真空干燥(任選地在升高的濕度下)、微波真空干燥、超臨界處理(諸如RES、SEDS等)、強(qiáng)制空氣干燥等。
[0137]合適的粘結(jié)和/或增粘劑是本領(lǐng)域中已知的，但是最優(yōu)選的此種材料包括兩親聚合物，諸如羥丙基纖維素，或PVP等。以這種方式，懸浮液將展現(xiàn)出增強(qiáng)或足夠的分散穩(wěn)定性并且因此確保上述步驟(ii)中的配料(dosing) —致性和施加均勻性，并維持了組合物內(nèi)的含量均勻度。
[0138]在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了制備藥物組合物的方法，所述藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中可吸收載體包含支撐材料，諸如紗布、海綿、墊、繃帶等，并且所述方法包括以下步驟；(i)，在不溶解所述微?；旌衔锘蚱鋼交煳锏拿浇槲锘蜉d體流體中形成所述微?；旌衔锘蚱鋼交煳锏姆稚Ⅲw或均勻懸浮液，所述媒介物或載體流體與合適量的生物相容的生物可降解聚合物溶液或懸浮液在一起，任選地進(jìn)一步包含粘結(jié)劑或增粘劑，以及(ii)，除去所述媒介物。以這種方式，形成包含所述微?；旌衔锏目晌蛰d體的復(fù)合材料，其中所述微粒與所述可吸收載體包埋在一起、包埋在所述可吸收載體上或包埋在整個(gè)所述可吸收載體中。所述媒介物或載體液體的除去方法極大地影響所獲得的最終組合物的性質(zhì)。例如，冷凍干燥可產(chǎn)生生物相容的生物可降解聚合物和/或根據(jù)本發(fā)明的組合物的多孔基質(zhì)，而簡(jiǎn)單的空氣干燥可產(chǎn)生所述生物相容的生物可降解聚合物和/或根據(jù)本發(fā)明的組合物的膜。
[0139]在此種冷凍干燥工藝中，生`物相容的生物可降解聚合物溶液的合適的濃度范圍可包括約 0.1 % w/v 至 70% w/v,或約 0.5% w/v 至 50% w/v,或約 0.75% w/v 至 10% w/v,或約1% w/v至5% w/v。用于制造根據(jù)本發(fā)明的組合物的方法中的粘結(jié)劑或增粘劑溶液的合適的濃度范圍包括約0.001 % w/v至50% w/v,或約0.01 % w/v至10% w/v,或約0.1 % w/
V至 5% w/v,或約 I % w/v 至 3% w/v。
[0140]步驟(ii)中除去所述媒介物的合適方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，但是包括但不限于，包括空氣干燥、冷凍干燥、任選地在升高濕度下的真空干燥、微波真空干燥、超臨界處理(諸如RES、SEDS等)、強(qiáng)制空氣干燥等。優(yōu)選地，將媒介物、水分含量、載體流體、溶劑等的殘余量減少至可接受的或合適的水平。
[0141]上面描述的制造方法可以在無(wú)菌或滅菌條件下操作，以便避免需要使用Y照射、電子束滅菌，或用環(huán)氧乙烷處理，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他此類技術(shù)對(duì)組合物進(jìn)行最終滅菌。替代地，當(dāng)該制造方法不在滅菌或無(wú)菌條件下操作時(shí)，可使用此類工藝和/或此類工藝可能是必要的。
[0142]如本文中使用的“水分含量”或“殘余溶劑”是指根據(jù)本發(fā)明的組合物中的可自由獲得的水或溶劑等的量?！翱勺杂色@得的”意指殘余物沒(méi)有與根據(jù)本發(fā)明的一種或多種非液體組分結(jié)合或絡(luò)合。本文提及的水分含量是指通過(guò)諸如改良的Karl Fischer方法的程序或者通過(guò)近紅外光譜法測(cè)定的水平。根據(jù)本發(fā)明的特定組合物的一種(多種)合適的水分含量或殘余溶劑水平可由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)它們的一種(多種)預(yù)期應(yīng)用憑經(jīng)驗(yàn)確定。例如，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，較高的水分或溶劑含量與根據(jù)本發(fā)明的具有較強(qiáng)柔韌性的組合物相關(guān)聯(lián)。因而，在某些應(yīng)用中，可以優(yōu)選具有至少約3重量％至約6重量％或甚至在約6重量％至44重量％范圍內(nèi)的水分含量。在本發(fā)明的其他實(shí)施方案中，較低的水分含量與具有較強(qiáng)剛性的組合物相關(guān)聯(lián)。因而，在腹部或胸部傷口的應(yīng)用中，例如，可優(yōu)選具有低于根據(jù)本發(fā)明的組合物的約6重量％或甚至在根據(jù)本發(fā)明的組合物的約I重量％至約6重量％的范圍內(nèi)的水分含量。
[0143]因而，根據(jù)本發(fā)明的組合物的水分或殘余溶劑含量的合適范圍包括但不限于以下(每個(gè)值均為±0.9% ):低于53%、低于44%、低于28%、低于24%、低于16%、低于12%、低于6%、低于5%、低于4%、低于3%、低于2.5%、低于2%、低于1.4%、介于O與12%之間(不含端值)、介于O與6%之間、介于O與4%之間、介于O與3%之間、介于O與20Z0之間、介于O與1%之間、介于1%與16%之間、介于1%與11%之間、介于1%與8%之間、介于1%與6%之間、介于1%與4%之間、介于1%與3%之間、介于1%與2%之間；以及介于2%與4%之間，以組合物的重量計(jì)。
[0144]在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，摻入到本發(fā)明組合物中的微粒混合物可以以以下的每單位面積載體的濃度分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上:約Img所述混合物或其均勻摻混物/平方厘米至約5000mg/平方厘米,或約IOmg/平方厘米至約2000m g/平方厘米,更合適地約25mg/平方厘米至約500mg/平方厘米。甚至更優(yōu)選地，將微?；旌衔锞鶆虻胤峙浜?或固定成穿過(guò)所述可吸收載體、分配和/或固定在所述吸收載體中或上，優(yōu)選固定在所述可吸收載體上。關(guān)于術(shù)語(yǔ)“固定”，它意指微粒附接、膠合、融合、包埋、干燥在載體中、上或穿過(guò)載體，或結(jié)合或以任何其他方式和/或連接至載體，使得它們?cè)谶\(yùn)輸和/或使用期間不容易脫離。對(duì)于此種固定的合適測(cè)試是測(cè)定在本發(fā)明組合物暴露于搖動(dòng)或振動(dòng)之后除去的微粒的量的測(cè)試。例如，相關(guān)程序?yàn)橹T如在US7052713中發(fā)現(xiàn)的程序，其中對(duì)微粒在載體上的固定強(qiáng)度的評(píng)估是這樣的:當(dāng)將所述組合物樣品在Vibrofix搖床中以約1000rpm的頻率搖動(dòng)2分鐘時(shí),所述組合物的磨耗低于
1.0mg/cm2。因此，當(dāng)經(jīng)受相同的測(cè)試程序時(shí)，根據(jù)本發(fā)明的組合物表現(xiàn)出低于約50mg/cm2，或低于約40mg/cm2，或低于約30mg/cm2，或低于約20mg/cm2，或低于約10mg/cm2，或甚至低于約2mg/cm2的磨耗。
[0145]在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了制備藥物組合物的方法，所述藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中在摻入所述微?；旌衔镏昂?或之后，可吸收載體具有介于I %與99.9%之間，或約介于5 %與99 %之間，或約介于10 %與98 %之間，或約介于15 %與95 %之間的孔隙率或空隙分?jǐn)?shù)，其中孔隙率或空隙分?jǐn)?shù)為表示為百分率的空隙體積相對(duì)于總體積的分?jǐn)?shù)。替代地，當(dāng)孔隙存在于組合物中時(shí)，該孔隙可具有約0.5微米至約5_，或約I微米至約Imm,或甚至約10微米至約500微米的直徑。
[0146]在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了制備藥物組合物的方法，所述藥物組合物包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體、分散在所述可吸收載體中或上的包含纖維蛋白原的第一微粒和/或包含凝血酶的第二微粒的混合物，任選地其中第一和/或第二微粒中的任一者或兩者都進(jìn)一步包含玻璃狀載體，其中所述組合物展現(xiàn)出吸收超過(guò)其自身重量的約10，或約20，或約30，或約40或約50或甚至約100倍或更高的血液或其他體液的吸收容量。此類浸潰的支撐和海綿等允許在凝血發(fā)生之前或同時(shí)血液滲入該結(jié)構(gòu)中。
[0147]經(jīng)處理的支撐的標(biāo)記可以采取在經(jīng)處理的支撐(在一側(cè)或兩側(cè))的表面，或者僅在其一層下面印刷強(qiáng)度百分比，例如20140%和60%的形式。需要時(shí),百分比標(biāo)記可以為任何其他優(yōu)選的數(shù)字，諸如25%、50%和75%，或甚至1、2、3、4、5。在完成標(biāo)記后，需要時(shí)對(duì)經(jīng)處理的支撐進(jìn)行滅菌。
[0148]藥物組合物的尺寸可為特定應(yīng)用或出血速率所需的任何此種尺寸、面積和體積，并且將是本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的。這些可包括lXlcm、2X2cm、3X3cm等。墊的厚度可經(jīng)改造用于特定應(yīng)用或出血速率，并且將是本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的，但是對(duì)于單一或三明治型組合物，可包括介于約0.1cm與IOcm之間，或約0.5cm至5cm之間的厚度。
[0149]通過(guò)促進(jìn)傷口與組合物的干粉微粒組分和/或其摻混物已包埋和/或涂覆在其中的界面處形成血凝塊，本發(fā)明藥物組合物的此類新型形式與單獨(dú)微粒組分或微粒組分摻混物相比較表現(xiàn)出協(xié)同和/或較高的功效。[0150]本發(fā)明的其他優(yōu)選方法可用于密封外科手術(shù)程序期間在生物組織中的刀口、穿孔和/或流體或氣體泄露，并且包括使組織與根據(jù)本發(fā)明的組合物接觸，由此密封刀口、穿孔或者流體或氣體泄露。
實(shí)施例
[0151]實(shí)施例1
[0152]如共同未決的申請(qǐng)US12/636，718中所描述的那樣制備干粉纖維蛋白密封劑。簡(jiǎn)言之，如該申請(qǐng)中所描述的那樣制備纖維蛋白原(ZLB, Marburg, Germany)和基于海藻糖(Pfanstiehl, Waukegan, IL, USA)的中空球形顆粒。顆粒中纖維蛋白原的濃度為12% (w/W)。將凝血酶(SNBTS, Glasgow, Scotland)和海藻糖噴霧干燥從而獲得中空顆粒。凝血酶以1000IU/克顆粒的濃度存在。將該顆粒以1:1比率摻混；所得粉末具有6% w/w濃度的纖維蛋白原和500IU/克的粉末。這種摻混物在后文稱為Fibrocap?。
[0153]將Fibrocaps?:粉末置于敞開(kāi)氣溶膠罐或瓶中，將閥桿和頂蓋放在上面并且卷合到位(crimped into place)。添加的粉末的量為約I至1.5克。然后從罐中通過(guò)閥門將液化形式的推進(jìn)劑填充到氣溶膠容器中，推進(jìn)劑在罐中以液化形式存在。然后通過(guò)制動(dòng)閥門使氣溶膠罐內(nèi)容物釋放來(lái)將氣溶膠施加至傷口上，從而導(dǎo)致快速止血。
[0154]實(shí)施例2
[0155]將實(shí)施例1的Fibrocaps?:粉末以1:1比率與PEG200和0.5% Tween80混合從而產(chǎn)生淺色液體懸浮液并包裝在瓶中，然后將其施加至傷口上，從而快速止血。
[0156]實(shí)施例3[0157]將實(shí)施例1的Fibrocaps?:粉末以1:1比率與PEG800混合從而產(chǎn)生糊劑并包裝在管中，然后將其施加至傷口上，從而導(dǎo)致快速止血。
[0158]實(shí)施例4
[0159]本實(shí)施例描述了可以如何制備這樣的產(chǎn)品，其中由不起反應(yīng)的噴霧干燥形式(直至與水性環(huán)境接觸)的凝血酶和纖維蛋白原組成的Fibrocaps?粉末的主動(dòng)和被動(dòng)止血特性都可保留在應(yīng)用于中度或重度出血適應(yīng)癥的“即用”海綿中。將Fibrocaps?澆鑄到被動(dòng)止血海綿上作為活性止血?jiǎng)┟芊鈩踊虬裨谡麄€(gè)被動(dòng)止血海綿中。在本實(shí)施例中，使用Spongostan/Surgifoam(吸收性明膠海綿USP)，因?yàn)樗暮穸葟腇ibrocaps?澆鑄和吸收特性這兩個(gè)角度來(lái)看可提供一些益處。它還可能具有較低的成本，而且在單獨(dú)使用及與供比較用的凝血酶溶液結(jié)合使用方面具有較悠久的歷史。
[0160]首先將實(shí)施例1的Fibrocaps?:粉末分散在基于乙醇的澆鑄溶液中，將該溶液逐滴施加以覆蓋Spongostan吸收性明膠海綿的表面，并進(jìn)行干燥。評(píng)價(jià)含有實(shí)施例1的Fibrocaps?:粉末的基于乙醇的澆鑄溶液對(duì)止血海綿處理性能(即，柔韌性、脆性、硬性(stiffness)等)以及功能特性(即，流體吸收、對(duì)浸透的紗布的粘合性)的影響，所述Fibrocaps?輪末包含數(shù)種添加劑，包括增塑劑(即，丙二醇；PG、甘油；G)和羥丙基纖維素(即，HCP-LF、HPC-GF、HCP-HF)的組合。使用各種澆鑄溶液組合物以180mg、350mg或700mgFC/3mL/3.5X2.5 X Icm Spongostan的分散體，初始制備并評(píng)價(jià)包埋有FC的海綿。添加羥丙基纖維素(HPC)，因?yàn)樗绊慒ibrocaps?.在海綿表面內(nèi)或上的保留，以及潛在地為該產(chǎn)品添加生物粘附性能。重要地，HPC可溶于乙醇和水二者中。它可以不同的粘度等級(jí)獲得。較低的粘度等級(jí)(LF)可能對(duì)于Fibrocaps?;懸浮液的施加和隨后滲透更合適，但是HF和GF等級(jí)可用作增粘劑以增強(qiáng)Fibrocaps?懸浮液的均勻性。
[0161]添加丙二醇和甘 油作為共溶劑從而在海綿表面上提供增塑劑性能(即，使脆性/硬性減至最低)并從而提高吸收性能。它們還通過(guò)使海綿暴露于有機(jī)溶劑而防止海綿以不期望的方式被修飾。對(duì)于測(cè)試，簡(jiǎn)言之，將一塊IOX IOcm紗布折疊兩次以上，放在60cm佩特里氏培養(yǎng)皿(Petri dish)中，并加入20mL TBS使紗布浸透。代表每種澆鑄溶液的一塊海綿放在TBS浸透的紗布上，并施加輕微的壓力30秒。注意代表每種澆鑄溶液的每塊海綿的相對(duì)吸收率；應(yīng)認(rèn)識(shí)到，Spongostan吸收性明膠海綿不容易吸收水溶液,除非通過(guò)揉捏(kneading)進(jìn)行預(yù)先浸透。使代表每種澆鑄溶液組合物的每塊海綿與TBS浸透的紗布接觸5分鐘，然后通過(guò)試圖從紗布上提起/分離出海綿來(lái)評(píng)估粘合性。
[0162]綜合易制備性、干海綿處理/吸收性能，及纖維蛋白對(duì)TBS浸透的紗布的粘合性來(lái)看，由94%乙醇、5% PG和1% HPC-LF構(gòu)成的澆鑄溶液產(chǎn)生良好的結(jié)果。雖然所獲得的結(jié)果是Spongostan吸收性明膠海綿所特有的,但是它們一般可應(yīng)用于其他止血海綿諸如基于膠原蛋白、殼聚糖、合成聚合物和透明質(zhì)酸等的那些。在180mg至700mg/3.5X2.5X IcmSpongostan海綿范圍內(nèi)增加FC負(fù)載量時(shí)，對(duì)TBS浸透的紗布的粘合性得到明顯改善。這表明在嚴(yán)重出血適應(yīng)癥中的止血功效可通過(guò)增加FC負(fù)載量來(lái)改善。
[0163]觀察到，不含增塑劑的明膠海綿也產(chǎn)生良好的結(jié)果。在數(shù)種出血模型中測(cè)試了此類海綿。
[0164]實(shí)施例5[0165]本實(shí)施例評(píng)估了在不添加增塑劑的情況下制備的Fibrocaps?負(fù)載的明膠海綿的止血容量。Spongostan FC-FTP墊基本上如下那樣制備:
[0166].稱取98.8克絕對(duì)乙醇置于玻璃Scotch瓶中。
[0167]?加入 1.04 克 HPC-LF。
[0168].用磁力攪拌器將溶液在37°C下攪拌2hr。
[0169]?將6ml這種溶液的等分試樣加入到1,4克經(jīng)照射的FC的等分試樣中，并在15ml離心管(falcon tube)中勻化。
[0170].將2800mg分散在12ml含I % (w/w) HPC-LF的EtOH中的FC均勻地分配在5X7X Icm Spongostan墊的表面上,將整個(gè)體積的懸浮液滴注在該墊的一側(cè)上。
[0171].將FC/HPC-LF涂覆的墊在通風(fēng)柜中空氣干燥過(guò)夜。
[0172]未添加Fibrocaps?的海綿充當(dāng)對(duì)照。
[0173]給50kg或更重的家豬(Sus scrofa domestica)服用鎮(zhèn)靜劑并將其置于氣體麻醉中。制作從胸骨尖端向后方延伸的小中線剖腹刀口。使脾暴露出來(lái)并轉(zhuǎn)動(dòng)脾，使得脾動(dòng)脈和靜脈背對(duì)著。為了制造嚴(yán)重出血傷口，使用手術(shù)刀在脾中劃開(kāi)橫切脾組織表面下方的外置脾靜脈和脾動(dòng)脈的30-40mm切口。由此產(chǎn)生的傷口高度搏動(dòng)，流出鮮紅色血，指示動(dòng)脈和組織損害。出血速率為對(duì)于稍微較小的傷口的30g/min至60g/min至對(duì)于更接近脾前部的一個(gè)或多個(gè)較大傷口的超過(guò)120g/min?？梢灶A(yù)見(jiàn)，如果不將縫線或穩(wěn)健的止血干預(yù)置于傷口上以控制出血，那 么接著將會(huì)發(fā)生血壓和心率的下降。
[0174]結(jié)果表明使用2800mg Fibrocaps?/HPC Spongostan海綿在三個(gè)試驗(yàn)中的兩個(gè)中實(shí)現(xiàn)止血。對(duì)照海綿沒(méi)有導(dǎo)致止血并且需要搶救治療。
[0175]實(shí)施例6- Fibrocaps?負(fù)載的殼聚糖墊的制備
[0176]本實(shí)施例描述了將Fibrocaps?:粉末負(fù)載到自營(yíng)銷售的殼聚糖墊(CoreLeaderBio，Taiwan)上，從而產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的止血組合物。如下那樣在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中重復(fù)制備實(shí)施例I中制備的微粒；噴霧干燥的含纖維蛋白原微粒的粒度(X50，幾何直徑)為18.4μπι，其纖維蛋白原含量為152mg/g。水分含量(Karl-Fischer)為2%。噴霧干燥的含凝血酶粉末的粒度(X50，幾何直徑)為12.5μm，其凝血酶含量為 977IU/g。水分含量(Karl-Fischer)為3%。使用圓筒混合機(jī)將這兩種噴霧干燥的粉末以1: 1% w/w比率在18rpm下?lián)交?5分鐘。所得摻混物的粒度為15.5 μ m，其纖維蛋白原含量為69.lmg/g。然后將摻混物以1.5g填充質(zhì)量填充到玻璃瓶中，然后進(jìn)行照射從而使它們無(wú)菌。
[0177]將180mg質(zhì)量的經(jīng)照射的Fibrocaps?懸浮在3ml乙醇中或懸浮在3ml含有30mg HPC-LF的乙醇中，從而產(chǎn)生具有24mg/cm2 Fibrocaps?負(fù)載量的墊。通過(guò)用Pasteur吸移管重復(fù)抽取和排出對(duì)FC粉末分散體進(jìn)行充分混合。將該分散體逐滴施加至Hemo-Pad (CoreLeader Bio)的3X2.5cm切片的表面上；盡最大努力將施加物均勻地分配在該表面上。這一式兩份地執(zhí)行，從而產(chǎn)生兩個(gè)負(fù)載墊。將這兩個(gè)墊以涂覆層向下放在53微米30cm Endecott篩上,在4(TC下真空干燥2小時(shí)(該方案陳述了 4小時(shí),但是注意到該墊在2小時(shí)后已干燥，因此提早將它們從烘箱中取出)。
[0178]按照相同的方案，將350mg經(jīng)照射的Fibrocaps?;懸浮在3ml乙醇中或懸浮在3ml含有30mg HPC-LF的乙醇中，從而產(chǎn)生具有47mg/cm2Fibrocaps負(fù)載量的墊。[0179]實(shí)施例7-負(fù)載的殼聚糖墊的表征
[0180]評(píng)價(jià)實(shí)施例6中制備的負(fù)載墊的柔韌性和附著性。
[0181]視覺(jué)評(píng)估表明單獨(dú)乙醇的負(fù)載與其中還存在HPC-LF的負(fù)載相比較產(chǎn)生較差的結(jié)果。這在兩種負(fù)載濃度下均觀察到。當(dāng)使用單獨(dú)的乙醇時(shí)，這導(dǎo)致墊表面上有一層厚厚的Fibrocaps?。這個(gè)餅狀物在數(shù)個(gè)地方出現(xiàn)開(kāi)裂。就乙醇/HPC-LF混合物而言，墊的頂部存在一層薄薄的Fibrocaps?。這表明可使用乙醇/HPC-LF混合物將Fibrocaps?:負(fù)載在墊上。與單獨(dú)的乙醇?jí)|相比，利用乙醇/HPC-LF混合物制備的墊還容易處理并且仍然具有柔韌性，且不存在粉末開(kāi)裂或剝落。
[0182]使用以下方法測(cè)試使用乙醇/HPC-LF制備并且分別負(fù)載有24mg/cm2和47mg/cm2 Fibrocaps?的塾的附著性:將一塊 IOX IOcm 紗布(Boots Pharmaceuticals,UK)折疊兩次以上，放在60cm佩特里氏培養(yǎng)皿中并加入20mL TBS(50mM, pH7.4)以浸透紗布。將負(fù)載墊放在TBS浸透的紗布上，并施加輕微的壓力30秒。記錄利用每種澆鑄溶液觀察到的每塊海綿的相對(duì)吸收率。使每個(gè)墊與TBS浸透的紗布接觸5分鐘。然后通過(guò)試圖從紗布上提起/分離出海綿來(lái)評(píng)估粘合性。在30秒后，對(duì)這兩種類型的墊觀察到對(duì)紗布的附著性。在這兩種情況下，墊都變得非常柔韌并且墊頂部開(kāi)始顯示出吸收。在5分鐘后，在這兩種情況下，墊都非常柔韌，具有凝膠樣外觀并且仍然存在對(duì)紗布的附著性。負(fù)載有47mg/cm2 Fibrocaps?的墊的附著性比針對(duì)具有24mg/cm2負(fù)載量的墊觀察到的附著性強(qiáng)。這些數(shù)據(jù)表明使用乙醇/HPC-LF制備的負(fù)載墊能夠粘附并且保留了它們的柔韌性?，F(xiàn)測(cè)試這些墊在嚴(yán)重出血狀況下的止血。
[0183]實(shí)施例8
[0184]在嚴(yán)重出血豬損傷模型中評(píng)估了實(shí)施例6中制得的殼聚糖負(fù)載的墊的功效。不包含F(xiàn)ibrocaps?的殼聚糖墊用作對(duì)照，這里表示安慰劑。
[0185]在兩只豬中，通過(guò)制作穿過(guò)脾上較小背動(dòng)脈并進(jìn)入底層靜脈和較大動(dòng)脈的裂口來(lái)制造出血傷口。這些傷口通過(guò)使用手術(shù)刀跨越血管和相鄰組織切開(kāi)大約2cm傷口來(lái)制作。這個(gè)傷口沒(méi)有完全橫切器官，但是足夠深，導(dǎo)致需要壓力和止血?jiǎng)┑拇罅縿?dòng)脈出血。立即將紗布?jí)|施加至切口上來(lái)吸收血液大約30秒以測(cè)定出血速率。通過(guò)如下方式確定所收集血液的重量:稱量血液浸濕的紗布?jí)|的重量并減去這些墊的干重從而得出所吸收血液的以克表示的重量并且從而確定出血速率。處理由向傷口施加單層止血墊組成，以Fibrocaps?,層(活性處理物)向下朝向傷口。安慰劑墊上沒(méi)有涂覆Fibrocaps?，因此沒(méi)有特定取向。
[0186]用干凈紗布?jí)|將這兩種類型的處理墊固定就位，并啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。在3分鐘后，小心地將紗布?jí)|從處理墊上提起以觀察止血情況。如果在這個(gè)3分鐘點(diǎn)沒(méi)有止血，則再施加該處理和直接壓力3分鐘，然后再進(jìn)行觀察。如果在總共6分鐘的時(shí)間后沒(méi)有實(shí)現(xiàn)止血(失敗)，則使用Ultrafoam、FibrocapS?:粉末和壓力，或這些要素的組合來(lái)開(kāi)始搶救。
[0187]結(jié)果在表1中給出并且表明根據(jù)本發(fā)明的殼聚糖墊非常有效地實(shí)現(xiàn)止血。具有24mg/cm2Fibrocaps?劑量的殼聚糖墊能夠在184g/min的極端出血情況下實(shí)現(xiàn)止血。對(duì)具有47mg/cm2負(fù)載量的殼聚糖墊也觀察到止血。它們表現(xiàn)出對(duì)傷口的最強(qiáng)有力的粘附，促進(jìn)止血并且具有良好的處理性能。
[0188]表1
【權(quán)利要求】
1.一種藥物組合物，其包含生物相容的生物可降解聚合物的可吸收載體，及分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上的包含含量為約0.l-15mg/cm2的纖維蛋白原的微?；虬繛榧s0.01至500IU/cm2的凝血酶的微粒，其中所述微粒進(jìn)一步包含玻璃狀載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中包含纖維蛋白原的微粒與包含凝血酶的微粒的混合物分散成至少部分地穿過(guò)所述可吸收載體或者分散在所述可吸收載體上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其中所述微粒的所述玻璃狀載體包含海藻糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述微粒固定在所述可吸收載體上或者固定成穿過(guò)所述可吸收載體。
5.根據(jù)任何前述權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中所述可吸收載體是柔韌性或多孔的，并且所述組合物任選地進(jìn)一步包含增塑劑、粘結(jié)劑或增粘劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物載體，其中所述可吸收載體為柔韌性且多孔的。
7.根據(jù)任何前述權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中所述可吸收載體包含選自由以下組成的組的生物相容的聚合物:多糖、白蛋白、纖維素、甲基纖維素、烷基羥烷基纖維素、羥烷基纖維素、硫酸纖維素、羧甲基纖維素鹽、羧甲基纖維素、羧乙基纖維素、氧化纖維素；明膠或膠原蛋白(諸如膠原蛋白-海綿)、甲殼素、羧甲基甲殼素、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸的鹽、藻酸鹽、藻酸、藻酸丙二醇酯、糖原、右旋糖酐、硫酸右旋糖酐、凝膠多糖、果膠、普魯蘭多糖、黃原膠、軟骨素、硫酸軟骨素、羧甲基右旋糖酐、肝素、硫酸肝素、乙酰肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸皮膚素、硫酸角質(zhì)素、角叉菜膠、淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉、聚-N-葡糖胺、聚-N-乙酰葡糖胺、聚甘露糖醛酸、聚葡糖醛酸、聚古羅糖醛酸；殼聚糖、甲殼素、甲殼素-葡聚糖、殼聚糖-葡聚糖、羧甲基殼聚糖、殼聚糖鹽，其殼聚糖衍生物，以及其任何組合；聚氨酯、氧化多糖，以及以上任何物質(zhì)的衍生物或組合。
8.根據(jù)任何前述權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中所述組合物以以下形式提供:干粘合劑涂料、氣溶膠、干氣溶膠、泵壓噴劑、醫(yī)用敷布；膜；涂覆的石膏；加有藥品的海綿或外科手術(shù)貼劑、止血毛絨；止血墊；紗布；藥膏、半凝膠、凝膠、泡沫、糊劑、混懸劑、膏劑、乳狀液、可模塑形式、鼻栓、外科手術(shù)敷料、傷口包扎物、繃帶、藥簽、導(dǎo)管、光學(xué)纖維、注射器、子宮托、栓劑，或者在液體或非水性液體中的混懸劑。
9.根據(jù)任何前述權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中所述可吸收載體包含殼聚糖，或其衍生物或鹽或共聚合物；明膠、膠原蛋白或聚氨酯。
10.根據(jù)任何前述權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中所述纖維蛋白原或凝血酶是從天然來(lái)源純化的人重組體，或轉(zhuǎn)基因，任選地其中所述重組纖維蛋白原是HMW纖維蛋白原或α-延伸的纖維蛋白原。
11.根據(jù)任何前述權(quán)利要求所述的藥物組合物，其用于止血、組織密封或組織膠合。
12.一種處理傷口或減少溢血部位出血的方法，其包括向所述傷口或溢血部位施用如任何前述權(quán)利要求所述的藥物組合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中當(dāng)施用至顯示出大于約30克/分鐘的出血速率的傷口上時(shí),所述處理導(dǎo)致止血時(shí)間少于約10分鐘。
14.基本上由選自纖維素、聚氨酯、明膠或膠原蛋白諸如膠原蛋白-海綿，或殼聚糖的生物相容的生物可降解聚合物組成的可吸收載體，及無(wú)定形纖維蛋白原或無(wú)定形凝血酶在制備用于組織密封、組織膠合或止血的產(chǎn)品中的用途。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，其中所述無(wú)定形纖維蛋白原或無(wú)定形凝血酶表現(xiàn)出以所述載體中的微粒群的重量計(jì)最高約10%的結(jié)晶度。
16.根據(jù)權(quán)利要求14或15所述的用于外用處理傷口的用途，其中所述傷口選自輕微擦傷、切口、刮傷、劃傷、燒傷、曬傷、潰瘍、內(nèi)靜脈出血、外靜脈出血，及選自涉及胃腸系統(tǒng)、在實(shí)質(zhì)性器官上的外科手術(shù)干預(yù)的外科手術(shù)干預(yù)；在耳、鼻和喉區(qū)域(ENT)中的外科手術(shù)干預(yù)、心臟血管外科手術(shù)、美容外科手術(shù)、脊柱外科手術(shù)、神經(jīng)外科手術(shù)；淋巴、膽汁和腦脊液(CSF)瘺，胸肺外科手術(shù)期間的漏氣，胸腔外科手術(shù)，矯形外科手術(shù)；婦科外科手術(shù)程序；血管外科手術(shù)和急救外科手術(shù)、肝切除術(shù)、軟組織損傷或外科手術(shù)。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的用途，其中所述用途的特征是在戰(zhàn)場(chǎng)創(chuàng)傷中或在外科手術(shù)期間或之后外用施加至 創(chuàng)傷性損傷。
18.—種制備藥物組合物的方法，其包括: (i)將包含纖維蛋白原的微?；虬傅奈⒘腋≡谒鼈儾蝗芙庥谄渲械拿浇槲镏校鑫⒘＿M(jìn)一步包含玻璃狀載體； (?)將所得懸浮液施加至可吸收載體上；以及 (iii)任選地除去所述媒介物。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中所述組合物進(jìn)一步包含增塑劑、粘結(jié)劑或增粘劑。
【文檔編號(hào)】A61K38/48GK103717208SQ201280033664
【公開(kāi)日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2012年7月6日 優(yōu)先權(quán)日:2011年7月6日
【發(fā)明者】艾莉安·舒特, 琳達(dá)·查克曼, 理查德·森德羅夫, 格倫·馬丁 申請(qǐng)人:普羅菲布瑞克斯公司