專利名稱：含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化工及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是涉及一種含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿，以及制備方法。適合作為各種外傷敷料。
背景技術(shù)：
殼聚糖是天然多糖甲殼素的脫乙?；a(chǎn)物，是一種含有游離氨基的堿性多糖，具有多種生物功能。近年來，國內(nèi)外學(xué)者的研究表明，殼聚糖在醫(yī)藥方面的應(yīng)用已經(jīng)越來越顯示出其獨(dú)特的優(yōu)勢。殼聚糖及其衍生物具有良好的生物相容性、可降解性、對人體無毒副作用及一定的抑菌作用等特性，是一種安全可靠的醫(yī)用高分子材料。殼聚糖的葡萄糖單元中含有氨基、羥基等活性基團(tuán)，具有很強(qiáng)的配位、螯合作用，可與大部分金屬離子形成配合物 [李巖，謝云濤，何玉鳳，王榮民，丁蘭.低聚殼聚糖金屬卟啉絡(luò)合物的制備及抗腫瘤細(xì)胞活性研究[J].西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，43 (2): 50.]。
研究表明稀土元素及其化合物具有消炎、殺菌、抑制微生物生長的抗菌作用，一些稀土化合物及稀土有機(jī)配合體配合物可用于治療燒傷、皮膚病、濕疹、關(guān)節(jié)炎等病癥。近年來，隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌的抗藥性也越來越強(qiáng)，科學(xué)家在探索一種新型的療效好、 毒副作用小的新藥。研究表明，適宜濃度的稀土元素對微生物的增長有輕微刺激作用，提高稀土元素的濃度對微生物的生長產(chǎn)生抑制作用，而且稀土元素在一定的劑量下屬于低毒物質(zhì)。吳士筠[吳士筠.La(III)的抑菌作用研究[J].中南民族大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，24(3):23-26.]等進(jìn)行La(III)抑菌實(shí)驗(yàn)的研究，證明La離子對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌有不同程度的抑制作用。含殼聚糖和/或殼聚糖衍生物稀土復(fù)合物的粉劑和敷料，可以充分發(fā)揮稀土良好的抑菌效果，人們開始關(guān)注以殼聚糖及其衍生物作為載體、 分散劑和保護(hù)劑的含殼聚糖和/或殼聚糖衍生物稀土復(fù)合物的粉劑和敷料制備方法及應(yīng)用。張愛迪[張愛迪，丁德潤，陳燕青.La(III)，Sm(III)與低分子量殼聚糖配合物的合成及性質(zhì)[J].中國稀土學(xué)報(bào)，2009，27(5):592-596.]等以低分子殼聚糖與稀土離子 LadII) ,SmdII)制備低分子量殼聚糖稀土金屬離子配合物，并對其表征和抑菌研究，得出稀土離子和殼聚糖之間以氨基和羥基進(jìn)行配位，殼聚糖及其配合物對革蘭氏陽性球菌和革蘭氏陰性桿菌的最低抑菌濃度分別為4和5g ·廠1。
殼聚糖作為一種高分子海洋活性多糖，具有優(yōu)良的吸附性、溶脹性和成膜性，可以將殼聚糖及其衍生物制成各種各樣的醫(yī)用敷料，如殼聚糖膜、殼聚糖海綿、殼聚糖凝膠等。 羅勇華，趙麗等[羅勇華，趙麗，孫竹華.納米銀/羧甲基殼聚糖生物敷料的研制表征及抑菌試驗(yàn)研究[J].交通醫(yī)學(xué)，2009，23 O) :141-144.]用羧甲基殼聚糖與納米銀制備得到納米銀/羧甲基殼聚糖敷料，對樣品進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征，并利用制備的納米銀/羧甲基殼聚糖敷料對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等致病菌的抑菌效果進(jìn)行檢測，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，合成的可降解殼聚糖敷料結(jié)合了兩種成分的優(yōu)點(diǎn)，顯出較強(qiáng)的抑菌效果。利用殼聚糖作為稀土元素的載體，制備一種完全新型的醫(yī)用材料，使其同時(shí)具有殼聚糖及稀土制劑的優(yōu)勢，并且可以促進(jìn)藥物的滲透吸收，適當(dāng)?shù)谋砻嫘揎椷€可使之對特定病灶具有靶向作用。如何制備用于皮膚潰瘍、燒傷等具有抗菌譜廣、高效、無毒、抗菌持久、止血止痛、促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)、潰瘍愈合的新型醫(yī)用敷料，是目前需要解決的問題。發(fā)明內(nèi)容
在已有研究的基礎(chǔ)上，針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明人以固相合成的殼聚糖和/ 或其衍生物稀土復(fù)合物為原料，加入適量魚膠、甘油，采用冷凍干燥的方法制得稀土離子分布均勻，具有良好的吸濕、保濕、吸水、透氣性，并具有良好抑菌作用、止血鎮(zhèn)痛促進(jìn)創(chuàng)面愈合的生物海綿敷料。殼聚糖稀土元素一鑭、鈰、釤海綿樣品對以大腸桿菌(federichia coli, E. coli)為代表的革蘭氏陰性菌，對以金黃色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)為代表的革蘭氏染色陽性菌，對以白色念珠菌(Monilia albican或canidia Albicans)為代表的真菌，均具有較好的接觸抑菌作用。
本發(fā)明的目的之一是提供上述含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿， 以及制備方法。本發(fā)明的目的之二是提供上述生物海綿在治療創(chuàng)傷、皮膚潰瘍、褥瘡、燒傷等中的應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案是含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿，組分中含有殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物、甘油、膠原類物質(zhì)和冰醋酸，吸濕性100 221%，保濕性80 96%，吸水性433 785%，吸透性33% 47%。
所述的膠原類物質(zhì)為明膠或魚膠。所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基甲殼素、羧甲基殼聚糖、羧甲基甲殼素、琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種。
本發(fā)明還提供了所述的生物海綿的制備方法，步驟如下(1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物研磨為細(xì)粉；(2)按照殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與稀土化合物的重量比例1000. 5 10 (優(yōu)選 100 :2 8，更優(yōu)選100 :5)，將步驟(1)所得細(xì)粉與稀土化合物細(xì)粉混勻，充分快速研磨1 3小時(shí)(優(yōu)選1. 5 2. 5小時(shí)，更優(yōu)選2小時(shí))，即得殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物；(3)將步驟(2)所得細(xì)粉用0.5-1. 2%的冰醋酸溶液配制成質(zhì)量濃度為1-4%的殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物溶液；(4)將步驟(3)所得溶液、魚膠溶液與甘油按一定的體積比混勻，抽真空脫氣；(5 )將(4 )所得混合液置模具內(nèi)，-20 V -80 V (優(yōu)選-25 °C -60 V，更優(yōu)選-50 V ) 冷凍15 M小時(shí)(優(yōu)選18 22小時(shí)，更優(yōu)選20小時(shí))后，置冷凍干燥機(jī)中-50°C _80°C (優(yōu)選_55°C _70°C，更優(yōu)選_60°C )冷凍真空干燥M 48小時(shí)(優(yōu)選30 40小時(shí)，更優(yōu)選35小時(shí))，即得含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿。
所述的制備方法，優(yōu)選的方案在于，所述稀土化合物為氯化鑭、硫酸鈰銨、氧化釤中的一種或幾種。
所述的制備方法，優(yōu)選的方案在于，冰醋酸溶液的質(zhì)量濃度為0.8-1.0%，優(yōu)選 1. 0%。
所述的制備方法，優(yōu)選的方案在于，步驟(3)所得殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物溶液的質(zhì)量濃度為2-3. 5%，優(yōu)選為3. 0%。
本發(fā)明還提供了所述的生物海綿在醫(yī)用敷料中的應(yīng)用。尤其在治療褥瘡、皮膚潰瘍、燒傷、燙傷、創(chuàng)傷、陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛上的應(yīng)用。
本發(fā)明以固相法合成殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物，并以此為主要原料之一，制備的含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿敷料，具有促進(jìn)創(chuàng)面愈合、抑菌、止血、止痛作用；可直接作用于創(chuàng)面，并具有良好的吸濕、保濕、吸水和透氣性；抗菌譜廣、作用持久；可提高愈合質(zhì)量，降低毒副作用，減少抗生素的使用，防止細(xì)菌對抗生素繼發(fā)耐藥的產(chǎn)生。并且制備工藝簡單，具有開發(fā)應(yīng)用前景。
除此之外，本發(fā)明的優(yōu)良效果還表現(xiàn)在1.同時(shí)具有稀土元素一鑭、鈰、釤制劑及殼聚糖或其衍生物的功能及優(yōu)勢，殼聚糖或其衍生物與鑭、鈰、釤離子具有協(xié)同抑菌作用。
2.在制備過程中以殼聚糖或其衍生物作為稀土元素一鑭、鈰、釤的載體，生成配合物或鹽，使其分散均勻。
3.殼聚糖稀土元素一鑭、鈰、釤海綿樣品對以大腸桿菌(fecAericAia coli, E. coli)為代表的革蘭氏陰性短桿菌，對以金黃色葡萄球菌(Sia/^j^occocm aureus 辦從/？如^力)為代表的革蘭氏染色陽性菌，對以白色念珠菌(Mwi/ia albican或canidia Albicans)為代表的真菌，均具有較好的接觸抑菌作用。
4.所得生物海綿輔料具有良好抑菌、預(yù)防創(chuàng)面感染以及吸濕、保濕、吸水及吸透功能，集多功能于一體。


圖1是樣品1生物海綿敷料照片。
圖2是樣品6生物海綿敷料照片。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但保護(hù)范圍不限于此。
實(shí)施例1-20所得含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿，組分中含有殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物、甘油、膠原類物質(zhì)和冰醋酸，吸濕性100 221%，保濕性 80 96%，吸水性433 785%，吸透性33% 47%。
實(shí)施例1 一種殼聚糖鈰復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.05g硫酸鈰銨細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與硫酸鈰銨細(xì)粉混勻，充分快速研磨2小時(shí)，即得殼聚糖鈰復(fù)合物粉末；(原料1)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入0.5%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7. ^il,加入魚膠 70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，-20°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鈰復(fù)合物的海綿生物敷料。該海綿敷料質(zhì)地柔軟，疏松多孔，孔徑均勻，呈淡黃色。(樣品1)實(shí)施例2 —種殼聚糖鈰復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.Ig硫酸鈰銨細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與硫酸鈰銨細(xì)粉混勻，充分快速研磨1.5小時(shí)，即得殼聚糖鈰復(fù)合物粉末；(原料2)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_50°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中_60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鈰復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品2)實(shí)施例3 —種殼聚糖鈰復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.2g硫酸鈰銨細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與硫酸鈰銨細(xì)粉混勻，充分快速研磨2.5小時(shí)，即得殼聚糖鈰復(fù)合物粉末；(原料3)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1.洲醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il,加入魚膠 70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中_60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鈰復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品3)實(shí)施例4 一種殼聚糖鈰復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.5g硫酸鈰銨細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與硫酸鈰銨細(xì)粉混勻，充分快速研磨2小時(shí)，即得殼聚糖鈰復(fù)合物粉末；(原料4)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入0.5%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7. ^il,加入魚膠 70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，-50°C凍22小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鈰復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品4)實(shí)施例5 —種殼聚糖鑭復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.05g氯化鑭細(xì)粉;(3)將殼聚糖細(xì)粉與氯化鑭細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖鑭復(fù)合物粉末；(原料5)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_60°C凍20小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中_60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鑭復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品5)實(shí)施例6 —種殼聚糖鑭復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.Ig氯化鑭細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與氯化鑭細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖鑭復(fù)合物；(原料6)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il,加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍24小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鑭復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品6)實(shí)施例7 —種殼聚糖鑭復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.8g氯化鑭細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與氯化鑭細(xì)粉混勻，充分研磨3小時(shí)，即得殼聚糖鑭復(fù)合物粉末；(原料7)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鑭復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品7)實(shí)施例8 —種殼聚糖鑭復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；稱取0. 5g氯化鑭細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與氯化鑭細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖鑭復(fù)合物粉末；(原料8)(3)將步驟(2)所得細(xì)粉用0.8%的冰醋酸溶液配制成質(zhì)量濃度為3%的殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物溶液；(4)將步驟(3)所得溶液、魚膠溶液與甘油按一定的體積比混勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鑭復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品8)實(shí)施例9 一種殼聚糖釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.05g氧化釤細(xì)粉;(3)將殼聚糖細(xì)粉與氧化釤細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖釤復(fù)合物粉末；(原料9)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il,加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_25°C凍18小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖釤復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品9)實(shí)施例10 —種殼聚糖釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.Ig氧化釤細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與氧化釤細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖釤復(fù)合物粉末；(原料10)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥30 小時(shí)，既得殼聚糖釤復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品10)實(shí)施例11 一種殼聚糖釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.25g氧化釤細(xì)粉;(3)將殼聚糖細(xì)粉與氧化釤細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖釤復(fù)合物粉末；(原料11)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖釤復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品11)實(shí)施例12 —種殼聚糖釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.8g氧化釤細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與氧化釤細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖釤復(fù)合物粉末；(原料12)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖釤復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品12)實(shí)施例13 —種殼聚糖海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(原料13)(2)將(1)所得細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(3)將(2)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖海綿生物敷料。(樣品13)實(shí)施例14 一種殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.15g硫酸鈰銨、0. 15g氯化鑭、0. 2g氧化釤細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與以上稀土細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物粉末；(原料14)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il,加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品14)實(shí)施例15 —種殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.25g硫酸鈰銨、0. 25g氯化鑭、0. 25g氧化釤細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與以上稀土細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物粉末；(原料15)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍24小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-80°C冷凍干燥M 小時(shí)，既得殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品15)實(shí)施例16 —種殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.25g硫酸鈰銨、0. 25g氯化鑭、0. 5g氧化釤細(xì)粉；(3)將殼聚糖細(xì)粉與以上稀土細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物粉末；(原料16)(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物的海綿生物敷料。(樣品16)實(shí)施例17 —種羧甲基殼聚糖釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg羧甲基殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取Ig氧化釤細(xì)粉；(3)將羧甲基殼聚糖細(xì)粉與氧化釤細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得羧甲基殼聚糖釤復(fù)合物粉末；(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入蒸餾水33:3ml，加入甘油7.^iil，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得羧甲基殼聚糖釤復(fù)合物的海綿生物敷料。
實(shí)施例18 —種羧甲基殼聚糖鑭復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg羧甲基殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.5g氯化鑭細(xì)粉；(3)將羧甲基殼聚糖細(xì)粉與氯化鑭細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得羧甲基殼聚糖鑭復(fù)合物粉末；(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入蒸餾水33:3ml，加入甘油7.^iil，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得羧甲基殼聚糖鑭復(fù)合物的海綿生物敷料。
實(shí)施例19 一種羧甲基殼聚糖鈰復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg羧甲基殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.5g硫酸鈰銨細(xì)粉；(3)將羧甲基殼聚糖細(xì)粉與硫酸鈰銨細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得羧甲基殼聚糖鈰復(fù)合物粉末；(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入蒸餾水33:3ml，加入甘油7.^iil，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-60°C冷凍干燥20 小時(shí)，既得羧甲基殼聚糖鈰復(fù)合物的海綿生物敷料。
實(shí)施例20 —種羧甲基殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg羧甲基殼聚糖研磨為細(xì)粉；(2)稱取0.25g硫酸鈰銨、0. 25g氯化鑭、0. 5g氧化釤細(xì)粉；(3)將羧甲基殼聚糖細(xì)粉與以上稀土細(xì)粉混勻，充分研磨2小時(shí)，即得羧甲基殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物粉末；(4)將(3)所得混合物細(xì)粉加入蒸餾水33:3ml，加入甘油7.^iil，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時(shí)，置冷凍干燥機(jī)中-50°C冷凍干燥48 小時(shí)，既得羧甲基殼聚糖鈰鑭釤復(fù)合物的海綿生物敷料。
試驗(yàn)例一 1.材料與方法1.1藥品與材料殼聚糖(Mr :10-20萬)、羧甲基殼聚糖(Mr :5000)(均購至浙江金殼生物化學(xué)有限公司); 魚膠、殼聚糖和羧甲基殼聚糖鈰、殼聚糖和羧甲基殼聚糖鑭、殼聚糖及羧甲基殼聚糖釤、殼聚糖和羧甲基殼聚糖鈰鑭釤均由實(shí)驗(yàn)室自制；MH培養(yǎng)基；沙氏培養(yǎng)基；其余均為國產(chǎn)分析純。
菌種細(xì)菌革蘭氏染色陽性菌(G +菌)金黃色葡萄球菌(份aMhcocc^s aureaus) ATCC25 923 革蘭氏染色陰性菌(G_菌)大腸桿菌(fecAeiicAia co7i)ATCC25 922、 綠膿桿 OPseudomorms aeruginosa) klCC21 853、產(chǎn)酸克雷伯 iU(lebsiella oxytoca)、陰溝腸桿鬼(Mnterobacter cloacae)> 腸炎夕少門氏 lif {Salmonella enteritidis)，真菌白色念珠菌、Candida a^ica/ ·^)、光滑念珠菌(TbrWoAsis Wa力raia)、熱帶念珠菌 (Candida tropicalis)、近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)、克柔念珠菌(Candida krusei)。
1. 2 儀器MNL-030-A型真空冷凍干燥機(jī)(Stone ridge, New York USA) ;TH2_C型恒溫振蕩器(江蘇太倉市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠)；303-1電熱培養(yǎng)箱(江蘇省東臺市電器廠)；DJ-CJ-IN醫(yī)用型潔凈工作臺(北東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司)。
1. 3試驗(yàn)方法原料粉末的接觸抑菌在無菌條件下，在90mm的培養(yǎng)皿中加等量的固體MH培養(yǎng)基，凝固后加100 μ L菌液，涂布均勻。取一定量的藥品粉末放置在固體培養(yǎng)基上成直徑0. 5cm的圓形，細(xì)菌37°C下培養(yǎng)20h，真菌37°C下培養(yǎng)40h，測量抑菌圈大小。
樣品海綿的接觸抑菌在無菌條件下，在90mm的培養(yǎng)皿中加等量的固體MH培養(yǎng)基，凝固后加IOOyL菌液，涂布均勻。將直徑為0.6cm的圓形海綿小餅，放置在培養(yǎng)基上， 細(xì)菌37°C下培養(yǎng)20h，真菌37°C下培養(yǎng)40h，測量抑菌圈的大小。
結(jié)果與分析2.1原料粉末的接觸抑菌原料粉末的接觸抑菌作用較小，但是樣品與培養(yǎng)基的接觸面均無菌生長。各原料粉末對六種細(xì)菌的接觸抑菌抑菌圈直徑見表1。各原料粉末對五種真菌的接觸抑菌抑菌圈直徑見表2。
表1 各原料粉末對六種細(xì)菌的接觸抑菌抑菌圈直徑(單位cm ；原料直徑0. 5cm)樣品大腸桿菌金黃色葡萄球菌綠膿桿菌產(chǎn)酸克雷伯菌陰溝腸桿菌腸炎沙門氏菌10. 5960. 6300. 5960. 6360. 6130. 59320. 6390. 6860. 6400. 6720. 6420. 64130. 6990. 7010. 6810. 7200. 6800. 68840. 7310. 7550. 7090. 7720. 7430. 73450. 5760. 5910. 5920. 6120. 5860. 58960. 6090. 6340. 6350. 6690. 6130. 61770. 6540. 6910. 6860. 7100. 6550. 66480. 6960. 7550. 7240. 7330. 7350. 69790. 6010. 6330. 6120. 6320. 5990. 595100. 6360. 6610. 6600. 6600. 6390. 648110. 6560. 6950. 6930. 7350. 6870. 689120. 7430. 7390. 7250. 8350. 7260. 753130. 5610. 5790. 5680. 6060. 5720. 567140. 7230. 7390. 7090. 7340. 7120. 723150. 7530. 7900. 7490. 7440. 7450. 753160. 7730. 8470. 7870. 8420. 8450. 808由上表可知，各原料粉末對六種細(xì)菌的接觸抑菌，抑菌圈直徑最大為0. 847cm (樣品16 對金黃色葡萄球菌的接觸抑菌圈)，最小為0. 561cm (樣品13對大腸桿菌的接觸抑菌圈);殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末的抑菌效果優(yōu)于殼聚糖原料粉末；含有不同稀土元素，但殼聚糖與稀土元素比例相同的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末，其抑菌效果差異不大；含有相同稀土元素的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末，隨著其稀土元素所占比例的增大，抑菌效果呈現(xiàn)上升趨勢；鈰、鑭、釤三種稀土復(fù)合的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末的抑菌效果優(yōu)于單一稀土的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末。
表2 各原料粉末對五種真菌的接觸抑菌抑菌圈直徑(單位cm ；原料直徑0. 5cm)樣品白色念珠菌光滑念珠菌熱帶念珠菌近平滑念珠菌克柔念珠菌10. 5980. 6130. 5330. 5740. 55620. 6320. 6120. 5470. 6390. 59430. 6690. 6340. 6200. 6410. 64540. 7970. 7340. 7350. 7420. 76350. 6180. 6070. 5360. 5570. 62560. 6730. 6870. 5540. 5620. 67270. 7910. 7730. 6180. 8280. 75580. 9410. 8790. 8030. 9380. 93890. 5750. 6030. 5520. 5660. 573100. 5660. 5880. 5390. 5670. 579110. 6070. 5960. 5470. 5750. 592120. 6170. 6410. 5580. 5650. 670130. 6040. 6060. 5380. 5670. 564140. 8710. 8910. 8850. 7560. 837151. 0671. 1531. 1230. 871. 027161. 0721. 1851. 2320. 9411. 096由上表可知，各原料粉末對五種真菌的接觸抑菌抑菌圈直徑最大為1.232cm (樣品16對熱帶念珠菌的接觸抑菌圈)，最小為0. 533cm (樣品1對熱帶念珠菌的接觸抑菌圈)；部分殼聚糖與稀土元素比例較高的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末，即殼聚糖鈰粉末(樣品3、樣品 4)、殼聚糖鑭粉末(樣品7、樣品8)、殼聚糖鈰鑭釤粉末(樣品14、樣品15、樣品16)的抑菌效果優(yōu)于殼聚糖粉末；含有不同稀土元素，殼聚糖與稀土元素比例為100:5時(shí)的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末，其抑菌效果殼聚糖鑭>殼聚糖鈰>殼聚糖釤；含有相同稀土元素的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末，其中殼聚糖鈰復(fù)合物原料粉末與殼聚糖鑭復(fù)合物原料粉末隨著其稀土元素所占比例的增大，抑菌效果呈現(xiàn)上升趨勢；鈰、鑭、釤三種稀土復(fù)合的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末的抑菌效果顯著優(yōu)于單一稀土的殼聚糖稀土復(fù)合物原料粉末。
樣品海綿的接觸抑菌所有樣品海綿均有較好的接觸抑菌作用，樣品與培養(yǎng)基的接觸面均無菌生長。各樣品海綿對六種細(xì)菌的接觸抑菌抑菌圈直徑見表3。各樣品海綿對五種真菌的接觸抑菌抑菌圈直徑見表4。
表3 各樣品海綿對六種細(xì)菌的接觸抑菌抑菌圈直徑(單位cm ；樣品直徑0. 6cm)
權(quán)利要求
1.含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿，其特征在于，組分中含有殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物、甘油、膠原類物質(zhì)和冰醋酸，吸濕性100 221%，保濕性80 96%,吸水性433 785%,吸透性33% 47%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物海綿，其特征在于，所述的膠原類物質(zhì)為明膠或魚膠。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物海綿，其特征在于，所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、 羥丙基甲殼素、羧甲基殼聚糖、羧甲基甲殼素、琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的生物海綿的制備方法，其特征在于，步驟如下(1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物研磨為細(xì)粉；(2)按照殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與稀土化合物的重量比例1000. 5 10，將步驟 (1)所得細(xì)粉與稀土化合物細(xì)粉混勻，充分快速研磨1 3小時(shí)，即得殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物；(3)將步驟(2)所得細(xì)粉用0.5-1. 2%的冰醋酸溶液配制成質(zhì)量濃度為1-4%的殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物溶液；(4)將步驟(3)所得溶液、魚膠溶液與甘油按一定的體積比混勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得混合液置模具內(nèi)，-20°C _80°C冷凍15 M小時(shí)后，置冷凍干燥機(jī)中-50°C -80°C冷凍真空干燥M 48小時(shí)，即得含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述稀土化合物為氯化鑭、硫酸鈰銨、氧化釤中的一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，冰醋酸溶液的質(zhì)量濃度為0.8-1. 0%， 優(yōu)選1. 0%。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)所得殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物溶液的質(zhì)量濃度為2-3. 5%，優(yōu)選為3. 0%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的生物海綿在醫(yī)用敷料中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含殼聚糖和/或其衍生物稀土復(fù)合物的生物海綿，其稀土元素分布均勻，具有良好的吸濕、保濕、吸水、透氣性，并具有較好的接觸抑菌作用，抗菌譜廣。具有預(yù)防創(chuàng)面感染、促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)、潰瘍愈合等功能。
文檔編號A61L15/42GK102492183SQ20111040209
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月7日
發(fā)明者桑青, 肖慶振, 陳曉霞 申請人:聊城大學(xué)