專利名稱：4,5,6,7-四氫普伐他汀及其鹽在心血管上的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及4，5，6，7_四氫普伐他汀及其可藥用鹽，其用于制備藥品的用途，具體地說是制備降血脂藥物的用途。
背景技術(shù)：
動脈粥樣硬化引起的心腦血管疾病是嚴(yán)重危害人類健康的常見病、多發(fā)病之一。動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，至今尚未完全闡明。一般認(rèn)為，在物理、化學(xué)或生物因素的刺激下，動脈內(nèi)皮細(xì)胞受損，繼而引發(fā)脂質(zhì)在動脈內(nèi)膜下沉積、單核/巨噬細(xì)胞浸潤、平滑肌細(xì)胞增殖及泡沫細(xì)胞形成等多種復(fù)雜的病理過程，逐步發(fā)展形成動脈粥樣斑塊。而脂質(zhì)代謝異常所致的高脂血癥是與動脈粥樣硬化發(fā)病密切相關(guān)的危險(xiǎn)因素之一。
高脂血癥是指血漿中總膽固醇和/或甘油三酯水平超出正常范圍，包括原發(fā)性和繼發(fā)性兩種。目前高脂血癥的治療以降血脂藥物為主，主要包括以下幾類I、煙酸類降脂藥物包括煙酸及其衍生物煙酸肌醇酯等，為一類廣譜調(diào)血脂藥，對多種高脂血癥有效，尤其適用于降低甘油三酯的同時(shí)升高高密度脂蛋白，且可促使低密度脂蛋白轉(zhuǎn)化為無致動脈粥樣硬化的A表型。2、貝特類藥物貝特類降脂藥物是一類人工合成的過氧化酶增殖體激活受體a (PPARa)的配體，能有效地延緩動脈粥樣硬化的發(fā)展進(jìn)程。但目前的研究認(rèn)為PPAR a與肝組織肥大有關(guān)。3、樹脂類膽酸螯合劑該類藥物臨床應(yīng)用較多的為陰離子堿性樹脂，如考來烯胺、考來替泊和地維稀胺，通過阻止膽酸或膽固醇從腸道吸收、促進(jìn)膽酸或膽固醇隨糞便排出，促進(jìn)膽固醇的降解來降低血脂。由于此類藥物的胃腸道不良反應(yīng)及使用不便，故臨床應(yīng)用較少。4、膽固醇吸收抑制劑默克/先靈葆雅公司開發(fā)的單環(huán)β -內(nèi)酰胺類膽固醇吸收抑制劑依澤替米貝是第一個(gè)選擇性膽固醇吸收抑制劑，可同時(shí)干擾食物來源的膽固醇及腸肝循環(huán)中由肝臟合成的膽固醇的吸收，而對其他營養(yǎng)成分的吸收并不產(chǎn)生影響，已于2002年年底在德國和美國上市。默克/先靈葆雅公司開發(fā)的由依澤替米貝與辛伐他汀組成的復(fù)方制劑——Vytorin，已于2004年7月23日經(jīng)美國食品和藥物管理局(FDA)正式批準(zhǔn)上市，用于單純他汀治療不能控制達(dá)標(biāo)和/或已開始接受他汀和依澤替米貝治療的高脂血癥患者。目前，該藥已在超過40個(gè)國家廣泛應(yīng)用，有四種劑型，即每片含有IOmg依澤替米貝和不同劑量的辛伐他汀(分別為10mg、20mg、40mg和80mg)。臨床試驗(yàn)顯示，采用高劑量Vytorin將使低密度脂蛋白水平最多降低60%。中等劑量的Vytorin與最大劑量的阿托伐它汀和羅伐他汀同樣有效。5、羥甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMG-CoA還原酶)抑制劑HMG_CoA還原酶是膽固醇合成的限速酶，他汀類藥物是HMG-CoA還原酶抑制劑的代表藥物，由于降血脂效果顯著，已成為治療高脂血癥的首選藥物。目前臨床常用的HMG-CoA還原酶抑制劑有洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、氟伐他汀及阿托伐他汀等。2003年分別在加拿大和日本上市的羅伐他汀和匹伐他汀均具有強(qiáng)大的降LDL作用，而且兩者的分解代謝均不受細(xì)胞色素P450-3A4介導(dǎo)，避免了藥物間相互作用。他汀類藥物雖然是治療高脂血癥的首選藥物，但是對于血脂紊亂嚴(yán)重的病人，他汀類藥物的療效并不理想。他汀類藥物的副反應(yīng)較少，常見的副反應(yīng)有胃腸道反應(yīng)，轉(zhuǎn)氨酶升高等。德國拜耳公司的西立伐他汀(Cerivastatin)在與吉非羅齊合用時(shí)，出現(xiàn)了橫紋肌溶解的副作用，并造成了多例臨床死亡病例，已于2001年8月宣布從市場撤出。鑒于西立伐他汀造成橫紋肌溶解的嚴(yán)重副作用，新的他汀類藥物的長期安全性將影響患者和醫(yī)師對其的信任，也必然面臨來自患者及藥物管理機(jī)構(gòu)更加苛刻的評價(jià)。此外，ACAT抑制劑、CETP抑制劑、微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白抑制劑均有多種結(jié)構(gòu)類型的候選藥物處于臨床研究階段，其安全性和有效性還有待更長時(shí)間的檢驗(yàn)。總之，尋找降血脂活性強(qiáng)，副作用低的藥物成為該研究方向最關(guān)鍵的技術(shù)難點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新的他汀類衍生物4，5，6，7_四氫普伐他汀及其鈉鹽 的用途，具體說是降血脂的用途，其作用靶點(diǎn)明確，在高血脂動物模型中，顯示出了較好的降血脂活性，且橫紋肌毒性作用小，安全性更高。本課題組在普伐他汀的相關(guān)物質(zhì)質(zhì)量控制研究中，發(fā)現(xiàn)了 4，5，6，7_四氫普伐他汀及其鈉鹽。在以后的研究中，發(fā)現(xiàn)該化合物易于合成，質(zhì)量可控，且具有很好的HMG-CoA還原酶抑制活性，而無橫紋肌溶解等副作用。詳細(xì)發(fā)明內(nèi)容如下本發(fā)明合成了化合物(I)與其藥學(xué)上可接受的鹽
OV0
H3C^^^VS H Γ
CH3/^1/V>CH3
H0、'、、.kA^
I根據(jù)本發(fā)明，藥學(xué)上可接受的鹽包括與下列無機(jī)堿形成的鹽與金屬、特別是堿金屬、堿土金屬和過渡金屬(例如鉀、鈉、鎂、招、韓等)形成的鹽，如化合物(II)
HO、
N^^coo-
O VohH (M)nCH3^\
M = Na, K, Li, NH4, HN(CH2CH3), n = I Ca, n = 1/2
II特別的，為化合物(I)的鈉鹽(III)，其結(jié)構(gòu)如下

化合物⑴與化合物(II)的制備方法可參考中國專利一種制備4，5，6，7-四氫普伐他汀及其鈉鹽的方法和固體結(jié)晶形式(CN200810198328. 3)，其制備方法如下以普伐他汀為起始原料，經(jīng)一步催化氫化還原反應(yīng)直接制得4，5，6，7-四氫普伐他汀(I)，以化合物
(I)為起始原料，經(jīng)堿性水解制備4，5，6，7-四氫普伐他汀相對于的堿鹽(II)。以下是本發(fā)明化合物的藥理學(xué)試驗(yàn)數(shù)據(jù)I、體外HMG-CoA還原酶抑制活性試驗(yàn)(I)化合物⑴和(III)對HMG-CoA還原酶抑制活性的初篩200-250g的大鼠喂養(yǎng)添加2% Cholestyramine的飼料四天,制備肝微粒體、酶的溶解及提純，得到HMG-CoA還原酶上清液,分裝，-80°C保存。Coomassie brilliant blue法測定酶濃度。酶溶液37°C水浴活化lOmin。配制工作液，NADPH終濃度為O. 2Mm，酶蛋白終濃度為100-150 μ g，混勻，140 μ I分裝于96孔板中，加入終濃度為6. 6Χ 10_5Μ待測化合物，37°C溫孵30min。340nm測定光吸收，得到Λ Al/ Δ tl，即為無HMG-CoA存在下的氧化速度。加入終濃度為O. Im MDL-HMG-CoA，340nm測定光吸收，得到Λ A2/Λ t2，即兩個(gè)底物均存在情況下的氧化速度。本實(shí)驗(yàn)瑞舒伐他汀，阿托伐他汀，匹伐他汀，普伐他汀及普伐他汀鈉鹽為陽性對照，以“ + 表示有或沒有抑制作用。化合物⑴與化合物(III)對HMG-CoA還原酶活性的抑制結(jié)果見表1，這兩個(gè)化合物在濃度為6. 6X 10_5M時(shí)均表現(xiàn)出對HMG-CoA還原酶的抑制活性，可以進(jìn)行下一步的復(fù)篩。表I.不同的他汀類物質(zhì)對HMG-CoA還原酶的抑制作用
終濃度(M)AA/AT(xlO-J)±SD(n=3)活性
空白對照0.53±0.32
陰性對照5.10±2.50
瑞舒伐他汀6·6χ10_51.86±0.20+阿托伐他汀6.6Χ10·53.69±2.50+
匹伐他汀6·6χ10-51.26±0.20+
普伐他汀鈉鹽 6·6χ10·52.63±1.30+
化合物(I)6.6χ10·51.05±0.80+
化合物(III)6.6χ10·52.19±1.30+
(2)化合物⑴與(III)對HMG-CoA還原酶抑制活性的IC5tl的測定方法同(1)，以瑞舒伐他汀為陽性對照，不加任何抑制劑為陰性對照，同時(shí)以無HMG-CoA和無抑制劑的為空白對照。對化合物⑴和(II)進(jìn)行復(fù)篩。選取5. 00X10_4M、I. 00Χ10_4Μ、5· 00Χ10_5Μ、1· 00Χ10_5Μ、5· 00Χ10_6Μ、1· 00Χ10_6Μ、5· 00Χ10_7Μ、1· OOXlO-7M八個(gè)濃度進(jìn)行測量，作量效曲線，由此計(jì)算出IC5(I。結(jié)果見表2。表2.不同的他汀類物質(zhì)對HMG-CoA還原酶的抑制IC5tl
權(quán)利要求
1.一種4，5，6，7-四氫普伐他汀化合物及其可藥用的鹽，具有式(I)所示結(jié)構(gòu)
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的式(I)化合物，其特征在于其可藥用的鹽的結(jié)構(gòu)為式(II)所示結(jié)構(gòu)
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一所述的化合物，其特征為化合物(I)的鈉鹽，結(jié)構(gòu)為式(III)所示結(jié)構(gòu)
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的化合物及其可藥用鹽在制備防治高血脂疾病藥物中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的化合物及其可藥用鹽在制備防治高血脂疾病藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物中含有治療有效量的作為活性成分的是所述化合物和其可藥用鹽的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物由所述化合物及其藥用鹽與制劑允許的藥物賦形劑或載體制備成藥物組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物由所述混合物與制劑允許的藥物賦形劑或載體制備成藥物組合物。
全文摘要
4，5，6，7-四氫普伐他汀及其鹽在心血管上的用途。本發(fā)明涉及4，5，6，7-四氫普伐他汀及其可藥用鹽在用于制備藥品中的用途，具體地說是用于制備治療高血脂藥品的用途，其作用靶點(diǎn)明確，降血脂活性高，且無其他他汀類藥物的橫紋肌溶解副作用。
文檔編號A61K31/22GK102875504SQ20111019477
公開日2013年1月16日 申請日期2011年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月13日
發(fā)明者張雷, 李晶, 李環(huán) 申請人:華南理工大學(xué)