專利名稱：治療咳喘病的中藥組合物的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療咳喘病的中藥組和物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，尤其涉及一種治療肺腎氣虛、痰熱郁肺之咳喘，以及急慢性支氣管炎、支氣管哮喘的中藥組和物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
咳喘病包括哮喘、氣管炎等疾病，是一組世界范圍內(nèi)的常見病、疑難病。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道“哮喘對(duì)人類健康造成的危害和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)超過了結(jié)核病和艾滋病的總和?！币蛏鷳B(tài)環(huán)境污染程度不斷加重，哮喘的發(fā)病率和死亡率呈逐年增高趨勢(shì)。目前全世界有哮喘病人1. 5億 2億人，而且這個(gè)數(shù)字還在繼續(xù)增加，每年死于哮喘病的人達(dá)18萬之多。其中我國(guó)哮喘發(fā)病率為 5%，約有3000萬哮喘病人。近幾年來，隨著工業(yè)化程度的不斷提高、大氣污染的加重和化工工業(yè)的發(fā)展，哮喘的發(fā)病率有逐漸增加趨勢(shì)。頑疾發(fā)作時(shí)臨床表現(xiàn)為咳喘、氣喘、痰多、胸悶、喉癢、干咳、呼吸困難、心悸多汗、嚴(yán)重?zé)┰?、喘鳴有聲、心跳紊亂、血壓下降、甚至窒息死亡。在治療咳喘病的藥物中，化學(xué)藥品只對(duì)癥治療無法根治，而多數(shù)中藥療程長(zhǎng)，服用量大，療效不穩(wěn)定。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種治療咳喘病的中藥組合物；本發(fā)明目的還在于提供一種治療咳喘病的中藥組合物的制備方法；本發(fā)明目的還在于提供一種治療咳喘病的中藥組合物的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物是由如下重量比的原料藥制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份
黃芪30-50重量份麻黃(炙)10-20重量份地龍10_20重量份本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物可以是由如下重量比的原料藥制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黃芪30-50重量份麻黃(炙)10-20重量份地龍10_20重量份淮山藥20-40重量份葶藶子25-40重量份本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物可以是由如下重量比的原料藥制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黃芪30-50重量份麻黃(炙)10-20重量份地龍10_20重量份淮山藥20-40重量份知母10-30重量份
本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物可以是由如下重量比的原料藥制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黃芪30-50重量份麻黃(炙)10-20重量份地龍10_20重量份淮山藥20-40重量份山楂(生)60-80重量份本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物可以是由如下重量比的原料藥制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黃芪30-50重量份麻黃(炙)10-20重量份地龍10_20重量份山楂(生)60-80重量份葶藶子25-40重量份本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物可以是由如下重量比的原料藥制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黃芪30-50重量份麻黃(炙)10-20重量份地龍10_20重量份山楂(生)60-80重量份蛤蚧5-15重量份本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物可以是在上述原料藥中加入魚腥草 80-120重量份。本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物可以是由如下重量比的原料藥制成的
射干30重量份桔梗15重量份淫羊藿50重量份
山楂(生)75重量份葶藶子30重量份魚腥草100重量份
黃芪45重量份麻黃(炙)15重量份地龍15重量份
淮山藥30重量份知母15重量份蛤蚧10重量份本發(fā)明組方科學(xué)，黃芪，益氣固表，地龍，清熱平肝，通絡(luò)平喘，利尿，二藥相合扶正祛邪，標(biāo)本兼固，為君主之藥。淫羊霍、蛤蚧，補(bǔ)腎益肺，助肺納氣；魚腥草、射干，清熱解毒， 祛濕散結(jié)，知母清瀉肺火，滋陰潤(rùn)肺，助主藥清熱化痰；炙麻黃質(zhì)潤(rùn)鎮(zhèn)咳平喘；六藥均為臣藥，共助主藥專力主攻主癥。佐以葶藶子，瀉肺利水，助君臣之藥化痰平喘；山楂，消食化積， 活血化淤，淮山藥，補(bǔ)脾胃，益肺腎，助脾胃運(yùn)化，而達(dá)到培土生金，寬胸消痞之效；桔梗，宣肺祛痰，行氣活血，專入肺經(jīng)，引諸藥直達(dá)病所，為方中使藥。全方使虛有所補(bǔ)，實(shí)有所祛，扶正祛邪，標(biāo)本兼顧，使肺氣得復(fù)，痰熱得除，咳喘自平。本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物制備方法為選取所述原料藥藥材，加水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 15 1. 20 (500C )的浸膏，加入輔料，制成本領(lǐng)域各種常規(guī)制劑，如顆粒劑、膠囊劑、片劑、軟膠囊、丸劑，即得。本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合物制備方法為選取所述原料藥材，加水煎煮二次，第一次加10倍量的水煎煮2小時(shí)，第二次加8 倍量的水煎煮2小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 15 1. 20 (500C )的浸膏， 加淀粉，制粒，干燥，加入0. 5%的硬脂酸鎂混合均勻，壓片，用95%乙醇做溶劑配制8%的胃溶型包衣溶液，進(jìn)風(fēng)溫度為40°C，噴液速度為25kg/h，包衣鍋轉(zhuǎn)速開始時(shí)選用4轉(zhuǎn)/分的速度，隨著薄膜衣層在素片表面的不斷形成，再逐步增加轉(zhuǎn)速，直到7轉(zhuǎn)/分；噴液結(jié)束后， 用熱風(fēng)干燥20分鐘，即得。本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合的質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別A.取相當(dāng)于原料藥10_50g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加甲醇40_80ml， 超聲處理10-60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0-60ml使溶解，加正丁醇振搖提取三次， 每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)覷ml甲醇使溶解，作為供試品溶液。另取射干對(duì)照藥材0. 5-2g，加甲醇10-20ml，超聲處理20-60分鐘，濾過，濾液濃縮至Iml作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液 3-10 μ 1，對(duì)照藥材溶液1-5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水 (6-10 1-5 0.5-2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈OMnm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。B.取相當(dāng)于原料藥40_70g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加三氯甲烷 10-40ml，超聲處理10-60分鐘，濾過，濾液濃縮至0. 5_&ι1，作為供試品溶液。另取地龍對(duì)照藥材0. 5-2g，加三氯甲烷10-40ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005 年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述對(duì)照藥材溶液3-10μ 1，供試品溶液5-20μ 1分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(8-12 0.5-2) 為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。C.取相當(dāng)于原料藥40_70g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加1-3%氫氧化鉀甲醇溶液40-60ml，稱定重量，加熱回流，保持微沸0. 5-2. 0小時(shí)，濾過，濾液加三氯甲烷-正丁醇(1-3 0.5-2)混合溶液提取1-3次，每次50ml，合并提取液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌1-3次，每次30-50ml，棄去氨試液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?0. 5-2. Oml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含0. 1-1. Omg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μ 1、對(duì)照品溶液1_5μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(10-20 5-10 1-5) 10°C以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中， 在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。D.取相當(dāng)于原料藥5_20g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加30-70%乙醇 30ml，加熱回流10-50分鐘，取出，放冷，濾過，濾液蒸至近干，加水l_5ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱徑10 15mm)上，用水IOOml洗脫，棄去洗脫液，再用乙醇IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖?. 5-2. Oml使溶解，作為供試品溶液。另取淫羊藿苷對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含0.5-2. Omg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥黃2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2 μ 1，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以無水乙醇-水 (55 44)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)。E.取相當(dāng)于原料藥20_40g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加濃氨試液 2-8ml使?jié)駶?rùn)，加氯仿20-60ml，加熱回流0. 5-2. 0小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)勇确翴ml 使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加氯仿制成每Iml含0. 5-2. Omg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取
8上述兩種溶液各3-10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇-正丁醇-濃氨試液 (10-20 1-3 1-5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)。F.取相當(dāng)于原料藥20_50g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，加7%硫酸乙醇-水 (0.5-2.0 1-5)混合溶液40ml，加熱回流1-5小時(shí)，放冷，加氯仿振搖提取1-3次，每次 10-30ml，合并氯仿液，加水20-40ml洗滌，棄去水液，氯仿液用無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糽_3ml使溶解，加活性碳適量處理，濾過，濾液作為供試品溶液。另取桔梗對(duì)照藥材0. 5-2. Og,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2-10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醚 (0.5-2.0 0.5-2.0)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。含量測(cè)定淫羊藿的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水 (40-60 60-40)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為200-300nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000。對(duì)照品溶液的制備取淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含 0. 05-0. 5mg的溶液，即得。供試品溶液的制備取相當(dāng)于原料藥30_50g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，取約0. 5-2. Og,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇10-20ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率50kHz) 0. 5-2. 0小時(shí)，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量， 搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2-10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每日服用劑量含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4tlO15)計(jì)，不得少于1. 0-5. Omgo本發(fā)明所述的治療咳喘病的中藥組合的質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別Α.取相當(dāng)于原料藥37. 5g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加正丁醇振搖提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)?ml甲醇使溶解，作為供試品溶液。另取射干對(duì)照藥材lg，加甲醇 15ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至Iml作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μ 1，對(duì)照藥材溶液2μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(8 2.5 1)的下層溶液為展開劑， 展開，取出，晾干，置紫外光燈OMnm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。B.取相當(dāng)于原料藥56g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加三氯甲烷30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取地龍對(duì)照藥材lg，加三氯甲烷 30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述對(duì)照藥材溶液5μ 1，供試品溶液10μ 1分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(9 1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。C.取相當(dāng)于原料藥56g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加2%氫氧化鉀甲醇溶液50ml，稱定重量，加熱回流，保持微沸1小時(shí)，濾過，濾液加三氯甲烷-正丁醇O 1) 混合溶液提取2次，每次50ml，合并提取液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌2次，每次40ml，棄去氨試液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μ 1、對(duì)照品溶液2μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(15 7 2) IO0C 以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。D.取相當(dāng)于原料藥Ilg本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加50%乙醇30ml， 加熱回流30分鐘，取出，放冷，濾過，濾液蒸至近干，加水3ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱徑10 15mm)上，用水IOOml洗脫，棄去洗脫液，再用乙醇IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸干， 殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取淫羊藿苷對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥黃2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2 μ 1，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以無水乙醇-水(55 44)為展開劑， 展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)。E.取相當(dāng)于原料藥37. 5g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加濃氨試液細(xì)1使?jié)駶?rùn)，加氯仿40ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)勇确翴ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加氯仿制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇-正丁醇-濃氨試液(15 2 2.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)。F.取相當(dāng)于原料藥37. 5g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，加7%硫酸乙醇-水 (1 幻混合溶液40ml，加熱回流3小時(shí)，放冷，加氯仿振搖提取2次，每次20ml，合并氯仿液，加水30ml洗滌，棄去水液，氯仿液用無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml 使溶解，加活性碳適量處理，濾過，濾液作為供試品溶液。另取桔梗對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各6μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醚(1 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。含量測(cè)定淫羊藿的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水 (53 47)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0. Img 的溶液，即得。供試品溶液的制備取相當(dāng)于原料藥37. 5g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，取約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20ml，稱定重量，超聲處理(功率 250W,頻率50kHz) 1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每日服用劑量含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4tlO15)計(jì)，不得少于2. 25mg。本發(fā)明組方科學(xué)，黃芪，益氣固表，地龍，清熱平肝，通絡(luò)平喘，利尿，二藥相合扶正祛邪，標(biāo)本兼固，為君主之藥。淫羊霍，補(bǔ)腎益精，助肺納氣，魚腥草、射干，清熱解毒，祛濕散結(jié)，助主藥清熱化痰，炙麻黃質(zhì)潤(rùn)鎮(zhèn)咳平喘。四藥均為臣藥，共助主藥專力主攻主癥，佐以葶藶子，瀉肺利水，助君臣之藥化痰平喘。山楂，消食化積，活血化淤，助脾胃運(yùn)化，而達(dá)到培土生金，寬胸消痞之效，桔梗，宣肺祛痰，行氣活血。專入肺經(jīng)，引諸藥直達(dá)病所，為方中使藥全方使虛有所補(bǔ)實(shí)有所祛，扶正祛邪，標(biāo)本兼顧，使肺氣得復(fù)，痰熱得除，咳喘自平。本發(fā)明組合物療效確切，具有益氣補(bǔ)腎，清肺化痰，止咳平喘的作用，對(duì)肺腎氣虛、 痰熱郁肺之咳喘，以及急慢性支氣管炎、支氣管哮喘見上述證候者有很好的療效。通過與現(xiàn)有制劑的對(duì)比實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明藥物組合物具有突出的藥效。本發(fā)明所提供的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，是通過大量具體創(chuàng)造性試驗(yàn)篩選后得到，鑒別方法中通過對(duì)樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且方法經(jīng)濟(jì)適用、結(jié)果快速，并且對(duì)不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測(cè)定方法中通過對(duì)樣品、供試品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得含量測(cè)定方法可以很有效的對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制，并且用該方法測(cè)定的產(chǎn)品要相比其他方法測(cè)定的產(chǎn)品在藥理效果上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例進(jìn)一步說明但不下限于本發(fā)明實(shí)驗(yàn)例1.本發(fā)明中藥組和物制備工藝的優(yōu)選實(shí)驗(yàn)1、提取工藝研究1. 1水提加水量研究在原提取工藝中，沒有規(guī)定加入的溶劑體積，但在實(shí)際生產(chǎn)過程中，加入的提取溶劑體積是重要參數(shù)，對(duì)提取的浸膏的質(zhì)量有很大影響，故在研究過程中，對(duì)原提取工藝進(jìn)行完善，以保證提取工藝的科學(xué)性和可控性。按施例3處方比例配置3份藥材，每份187. 5g，分四組進(jìn)行試驗(yàn)，第一組加水量6 倍量、4倍量，第二組加水量8倍量、6倍量，第三組加水量10倍量、8倍量，第四組加水量12 倍量、10倍量，合并煎液，濾過，分別濃縮成相對(duì)密度為1. 25 1. 30的清膏(75°C )，真空干燥，以干膏得率為指標(biāo)，確定加水量。結(jié)果見表1:表1 水提加水量
權(quán)利要求
1. 一種治療咳喘病的中藥組合物制劑的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下步驟 選取如下原料藥射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30-60重量份黃芪30-50重量份麻黃(炙)10-20重量份地龍10-20重量份淮山藥20-40重量份山楂(生)60-80重量份； 該檢測(cè)方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或幾種 鑒別A.取相當(dāng)于原料藥10-50g該組合物制劑，研細(xì)，加甲醇40-80ml，超聲處理10-60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0-60ml使溶解，加正丁醇振搖提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)觢_3ml甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取射干對(duì)照藥材0. 5-2g，加甲醇10-20ml，超聲處理20-60分鐘，濾過，濾液濃縮至Iml作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法 (中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液3-10 μ 1，對(duì)照藥材溶液 1-5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(6-10 1-5 0.5-2) 的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈OMnm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B.取相當(dāng)于原料藥40-70g該組合物制劑，研細(xì)，加三氯甲烷10-40ml，超聲處理10-60 分鐘，濾過，濾液濃縮至0. 5-aiil，作為供試品溶液；另取地龍對(duì)照藥材0. 5-2g，加三氯甲烷 10-40ml,同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述對(duì)照藥材溶液3-10 μ 1，供試品溶液5-20 μ 1分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(8-12 0.5-2)為展開劑，展開，取出， 晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C.取相當(dāng)于原料藥40-70g該組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加1-3%氫氧化鉀甲醇溶液 40-60ml，稱定重量，加熱回流，保持微沸0. 5-2. 0小時(shí)，濾過，濾液加三氯甲烷-正丁醇 (1-3 0.5- 混合溶液提取1-3次，每次50ml，合并提取液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌 1-3次，每次30-50ml，棄去氨試液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?. 5-2. Oml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含0. 1-1. Omg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液 10μ 1、對(duì)照品溶液1_5μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上， 以三氯甲烷-甲醇-水(10-20 5-10 1-5) 10°C以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；D.取相當(dāng)于原料藥5-20g該組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加30-70%乙醇30ml，加熱回流 10-50分鐘，取出，放冷，濾過，濾液蒸至近干，加水l_5ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱徑 10 15mm)上，用水IOOml洗脫，棄去洗脫液，再用乙醇IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖?. 5-2. Oml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊藿苷對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含 0. 5-2. Omg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥黃2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2 μ 1，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以無水乙醇-水(55 44)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；E.取相當(dāng)于原料藥20-40g該組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加濃氨試液2-8ml使?jié)駶?rùn)，加氯仿20-60ml，加熱回流0. 5-2. 0小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)勇确翴ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加氯仿制成每Iml含0. 5-2. Omg的溶液，作為對(duì)照品溶液； 照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3-10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇-正丁醇-濃氨試液(10-20 1-3 1-5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)；F.取相當(dāng)于原料藥20-50g該組合物制劑內(nèi)容物，加7%硫酸乙醇-水(0.5-2.0 1-5) 混合溶液40ml，加熱回流1-5小時(shí)，放冷，加氯仿振搖提取1-3次，每次10_30ml，合并氯仿液，加水20-40ml洗滌，棄去水液，氯仿液用無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糽_3ml使溶解，加活性碳適量處理，濾過，濾液作為供試品溶液；另取桔梗對(duì)照藥材0. 5-2. Og,同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2-10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醚 (0.5-2.0 0.5-2.0)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)；含量測(cè)定淫羊藿的含量測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水00-60 60-40)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為200-300nm;理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；對(duì)照品溶液的制備取淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0. 05-0. 5mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取相當(dāng)于原料藥30_50g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，取約0. 5-2. 0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇 10-20ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率50kHz) 0. 5-2. 0小時(shí)，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2-10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每日服用劑量含淫羊藿以淫羊藿苷計(jì)，不得少于1. 0-5. Omg。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物制劑的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別方法Α.取相當(dāng)于原料藥37. 5g該組合物制劑，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過， 濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加正丁醇振搖提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干， 殘?jiān)?ml甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取射干對(duì)照藥材lg，加甲醇15ml，超聲處理30 分鐘，濾過，濾液濃縮至Iml作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5μ 1，對(duì)照藥材溶液2μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(8 2.5 1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈OMnm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B.取相當(dāng)于原料藥56g該組合物制劑，研細(xì)，加三氯甲烷30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取地龍對(duì)照藥材lg，加三氯甲烷30ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述對(duì)照藥材溶液5μ 1，供試品溶液10μ 1分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上， 以環(huán)己烷-乙酸乙酯(9 1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C.取相當(dāng)于原料藥56g該組合物制劑，研細(xì)，加2%氫氧化鉀甲醇溶液50ml，稱定重量， 加熱回流，保持微沸1小時(shí)，濾過，濾液加三氯甲烷-正丁醇O 1)混合溶液提取2次， 每次50ml，合并提取液，用正丁醇飽和的氨試液洗滌2次，每次40ml，棄去氨試液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μ 1、對(duì)照品溶液2μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(15 7 2)10°C以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；D.取相當(dāng)于原料藥Ilg該組合物制劑，研細(xì)，加50%乙醇30ml，加熱回流30分鐘，取出，放冷，濾過，濾液蒸至近干，加水3ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱徑10 15mm)上，用水IOOml洗脫，棄去洗脫液，再用乙醇IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊藿苷對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥黃2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2 μ 1， 分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以無水乙醇-水(55 44)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑占.E.取相當(dāng)于原料藥37.5g該組合物制劑，研細(xì)，加濃氨試液使?jié)駶?rùn)，加氯仿40ml， 加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)勇确翴ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加氯仿制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典 2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上， 以異丙醇-正丁醇-濃氨試液(15 2 2.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)；F.取相當(dāng)于原料藥37.5g該組合物制劑，加7%硫酸乙醇-水(1幻混合溶液40ml， 加熱回流3小時(shí)，放冷，加氯仿振搖提取2次，每次20ml，合并氯仿液，加水30ml洗滌，棄去水液，氯仿液用無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加活性碳適量處理，濾過，濾液作為供試品溶液；另取桔梗對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各6 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醚(1 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)；含量測(cè)定方法為淫羊藿的含量測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(53 47)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm;理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；對(duì)照品溶液的制備取淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供試品溶液的制備取相當(dāng)于原料藥37. 5g本發(fā)明藥物組合物制劑內(nèi)容物，研細(xì)，取約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20ml， 稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率50kHz) 1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各 5μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每日服用劑量含淫羊藿以淫羊藿苷計(jì)，不得少于 2. 25mg。
3.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物的檢測(cè)方法，其特征在于該藥物組合物制劑的制備方法為淮山藥、黃芪、地龍、山楂粉碎成100目細(xì)粉，其余藥味加水煎煮二次，每次2小時(shí)， 合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05 1. 10(50°C)的濃縮液，用上述藥粉泛丸，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療咳喘病的中藥組合物的檢測(cè)方法。本發(fā)明中藥組合物由射干、桔梗、淫羊藿、山楂(生)、等原料藥組成，本發(fā)明組合物質(zhì)量控制方法中采用高效液相色譜法對(duì)淫羊藿苷進(jìn)行含量測(cè)定，對(duì)射干、桔梗、淫羊藿、黃芪、麻黃(炙)、地龍進(jìn)行定性薄層鑒別。
文檔編號(hào)A61P11/14GK102258665SQ201110149988
公開日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2007年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月26日
發(fā)明者付建家, 付立家 申請(qǐng)人:北京亞東生物制藥有限公司