專利名稱：一種硫酸軟骨素的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā) 明方法涉及豬軟骨深加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種硫酸軟骨素的提取方法， 是一種以豬鼻軟骨為原料，通過生物酶解技術(shù)，從而提取硫酸軟骨素的方法。
背景技術(shù)：
硫酸軟骨素是從動物組織中提取制備的酸性粘多糖，是糖胺聚糖的一種，由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β-1，4-糖苷鍵連接而成的重復(fù)二糖單位組成的多糖，并在 N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羥基上發(fā)生硫酸酯化。硫酸軟骨素對角膜膠原纖維具有保護(hù)作用，能促進(jìn)基質(zhì)中纖維的增長，增強(qiáng)通透性，改善血液循環(huán)，加速新陳代謝，促進(jìn)滲透液的吸收及炎癥的消除；其聚陰離子具有強(qiáng)的保水性，能改善眼角膜組織的水分代謝，對角膜有較強(qiáng)的親和力，能在角膜表面形成一層透氣保水膜，促進(jìn)角膜創(chuàng)傷的愈合及改善眼部干燥癥狀。此外，它為關(guān)節(jié)疼痛患者帶來福音，主要表現(xiàn)在一方面提供墊襯作用，緩和行動時的沖擊和摩擦，另一方面把重要的氧供和營養(yǎng)素輸送至關(guān)節(jié)，幫助清除關(guān)節(jié)內(nèi)的廢物。目前，國內(nèi)外提取硫酸軟骨素普遍采用稀堿或濃堿與酶解相結(jié)合的方法。稀堿酶解工藝中，稀堿溶液用量大，使在酒精沉淀時，用量更大；濃堿酶解工藝中，堿用量大，為后面的提純帶來困難。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供了一種硫酸軟骨素的提取方法，是一種以提高產(chǎn)品純度、節(jié)能和提高產(chǎn)品安全性為目的的提取方法，該方法有利于工業(yè)化的生產(chǎn)。為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明的一種硫酸軟骨素的提取方法的步驟如下1、稱取市售豬鼻軟骨作為原料，剪去結(jié)締組織，洗凈后加水煮沸，除去油脂，然后將除去油脂后的豬鼻軟骨從水中撈出，用絞肉機(jī)絞碎，加入原料豬鼻軟骨3倍重量的水，調(diào) pH值至8. 5-9. 0，升溫至45-50°C，加入占原料豬軟骨重量2 %的牛胰蛋白酶(酶活力為3. 3 萬U/g)，在45-50°C下攪拌酶解4-5h，酶解過程中保持反應(yīng)體系的pH值穩(wěn)定在8. 5-9. 0 ；2、將酶解液調(diào)pH值至6. 8-7.0，依次加入原料豬鼻軟骨重量的白陶土、的活性炭粉末，45°C攪拌吸附lh，然后過濾除去白陶土和活性炭，得濾液；3、將濾液的pH值調(diào)至6. 0，然后加入其三倍體積的95wt %乙醇，充分?jǐn)嚢韬箪o置， 去上清液，得沉淀，即為硫酸軟骨素粗品；4、加入9倍粗品重量的純水將粗品溶解，再依次加入粗品重量1 %的氯化鈉，1 % 的牛胰蛋白酶(酶活力為3. 3萬U/g)，45-50°C下攪拌酶解3-4h，酶解過程中控制反應(yīng)體系的PH值穩(wěn)定在8. 5-9. 0，然后升溫至90-95°C，保持10-15min以滅酶，然后過濾得過濾液；5、調(diào)節(jié)過濾液的PH值至2. 0-3. 0，然后用濾膜孔徑為5nm的過濾機(jī)過濾，以除去無機(jī)鹽和小分子雜質(zhì)；6、調(diào)節(jié)所得濾液的PH值至6. 5，記下此時的溶液體積，然后加入此體積2倍的90wt%乙醇進(jìn)行沉淀，分離出沉淀后，加入與沉淀等體積的無水乙醇脫水，最后真空干燥得硫酸軟骨素精品。本發(fā)明方法中用于調(diào)節(jié)PH值的酸和堿分別是35 37wt%的鹽酸和固體氫氧化鈉。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法的優(yōu)點(diǎn)和有益效果如下1、采用白陶土和活性炭脫色，既避免了有害物質(zhì)在產(chǎn)品中的殘留，又能保證產(chǎn)品的天然潔白度，所得產(chǎn)品為白色均勻粉末；2、采用本發(fā)明的納濾技術(shù)，對液態(tài)物料進(jìn)行分離、濃縮和純化，均在常溫下操作、 無相態(tài)變化、高效節(jié)能，并且生產(chǎn)過程中不產(chǎn)生污染；3、本法所得產(chǎn)品的純度高，不產(chǎn)生任何有毒有害物質(zhì)，安全，無毒副作用，可廣泛用于藥品、保健品等領(lǐng)域。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體的實(shí)施例對本發(fā)明方法做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。以下實(shí)施例中用于調(diào)節(jié)PH值的酸和堿分別是35 37wt%的鹽酸和固體氫氧化鈉。實(shí)施例1 一種硫酸軟骨素的提取方法，其步驟如下1、稱取市售豬鼻軟骨lkg，剪去結(jié)締組織，洗凈后加水煮沸，除去油脂，然后將除去油脂后的豬鼻軟骨從水中撈出，用絞肉機(jī)絞碎，加入3kg純水，調(diào)pH值至8. 5，升溫至45°C， 加入20g牛胰蛋白酶(酶活力為3. 3萬U/g)，在45°C下攪拌酶解4h，酶解過程中保持反應(yīng)體系的PH值穩(wěn)定在8.5 ；2、將酶解液調(diào)pH值至6. 8，依次加入IOg白陶土、IOg活性炭粉末，45°C攪拌吸附 lh，然后過濾除去白陶土和活性炭，得濾液；3、將濾液的pH值調(diào)至6. 0，然后加入其三倍體積的95wt %乙醇，充分?jǐn)嚢韬箪o置， 去上清液，得沉淀400g，即為硫酸軟骨素粗品；4、加入3. 6kg的純水將粗品溶解，再依次加入4g氯化鈉，4g牛胰蛋白酶(酶活力為3. 3萬U/g)，45°C下攪拌酶解4h，酶解過程中控制反應(yīng)體系的pH值穩(wěn)定在8. 5，然后升溫至90°C，保持15min以滅酶，然后過濾得過濾液；5、調(diào)節(jié)過濾液的pH值至2.0，然后用濾膜孔徑為5nm的過濾機(jī)過濾，以除去無機(jī)鹽和小分子雜質(zhì)；6、調(diào)節(jié)所得濾液的pH值至6. 5，記下此時的溶液體積，然后加入此體積2倍的 90wt%乙醇進(jìn)行沉淀，分離出沉淀后，加入與沉淀等體積的無水乙醇脫水，最后真空干燥得硫酸軟骨素精品250g。表1實(shí)施例1所得產(chǎn)品的檢測報告
檢測項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定檢測結(jié)果
產(chǎn)品純度^ 76%98. 5%
權(quán)利要求
1. 一種硫酸軟骨素的提取方法，步驟如下1)、稱取豬鼻軟骨作為原料，剪去結(jié)締組織，洗凈后加水煮沸，除去油脂，然后將除去油脂后的豬鼻軟骨從水中撈出，用絞肉機(jī)絞碎，加入原料豬鼻軟骨3倍重量的水，調(diào)PH值至8. 5-9. 0，升溫至45-50°C，加入占原料豬軟骨重量21的3. 3萬U/g的牛胰蛋白酶，在 45-50°C下攪拌酶解4-5h，酶解過程中保持反應(yīng)體系的pH值穩(wěn)定在8. 5-9. 0 ；2)、酶解完成后，將酶解液調(diào)pH值至6.8-7. 0，依次加入原料豬鼻軟骨重量1%的白陶土、1%的活性炭粉末，45°C攪拌吸附lh，然后過濾除去白陶土和活性炭，得濾液；3)、將濾液的pH值調(diào)至6.0，然后加入其三倍體積的95wt%乙醇，攪拌后靜置，然后去上清液，得硫酸軟骨素粗品；4)、加入9倍粗品重量的純水將粗品溶解，再依次加入粗品重量1%的氯化鈉，1%的3.3 萬U/g的牛胰蛋白酶，45-50°C下攪拌酶解3-4h，酶解過程中控制反應(yīng)體系的pH值穩(wěn)定在 8. 5-9. 0，然后升溫至90-95°C，保持10-15min以滅酶，然后過濾得過濾液；5)、調(diào)節(jié)過濾液的pH值至2.0-3. 0，然后用濾膜孔徑為5nm的過濾機(jī)過濾，以除去無機(jī)鹽和小分子雜質(zhì)；6)、調(diào)節(jié)步驟5)所得濾液的pH值至6.5，記下此時的溶液體積，然后加入此體積2倍的90wt%乙醇進(jìn)行沉淀，分離出沉淀后，加入與沉淀等體積的無水乙醇脫水，最后真空干燥得硫酸軟骨素精品。 全文摘要
本發(fā)明公開了一種硫酸軟骨素的提取方法，該方法采用豬鼻軟骨為主要原料，經(jīng)過蒸煮除雜、配水、酶解、脫色、沉淀、再酶解、納濾、沉淀、干燥即獲硫酸軟骨素精品。本發(fā)明方法生產(chǎn)出的產(chǎn)品純度高，不產(chǎn)生任何有毒有害物質(zhì)，而且所得產(chǎn)品安全性高，可廣泛用于藥品、保健品等領(lǐng)域。
文檔編號A61P27/02GK102153672SQ20101060985
公開日2011年8月17日 申請日期2010年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月28日
發(fā)明者葉傳發(fā), 葉思, 張小東 申請人:湖北遠(yuǎn)成藥業(yè)有限公司