專利名稱：一種具有抗腸道病毒活性和/或流感病毒甲型劑活性的黃芩組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有抗腸道病毒和流感病毒甲型劑活性的黃芩組合 物，屬于醫(yī)藥衛(wèi)生技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
腸道病毒包括脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒(Coxsackie virus)、致腸 細(xì)胞病變?nèi)斯聝翰《?enterocytopathic human orphan virus ECHO簡稱?？?病毒)及新型腸道病毒共71個(gè)血清型，本屬病毒感染分布廣泛，臨床表現(xiàn) 復(fù)雜多樣。全球性傳染病手足口病(Hand-foot-mouth disease, HFMD)即 是由多種腸道病毒引起的常見傳染病，以嬰幼兒發(fā)病為主。引起手足口病 的腸道病毒主要為小RNA病毒科、腸道病毒屬的柯薩奇病毒A組16、 4、 5、 7、 9、 10型，B組2、 5、 13型；埃可病毒的某些血清型和腸道病毒71 型(EV71),其中以CoxA16型及EV71型最為常見。腸道病毒EV71型 主要是通過唾液、皰疹液、糞便污染的手、毛巾、手絹、牙杯、玩具、食 具、奶具及床上用品、內(nèi)衣等密切接觸傳播，常引起兒童手足口病、病毒 性咽峽炎，重癥患兒可出現(xiàn)肺水腫、腦炎等，統(tǒng)稱為腸道病毒EV71感染 疾病。該病多發(fā)生于兒童，尤其3歲以下嬰幼兒多發(fā)，少數(shù)病情較重，嚴(yán) 重的會(huì)引起死亡。
流感病毒分為甲、乙、丙三種類型，致病株主要是甲、乙型，丙型基 本不致病。其中甲型流感病毒是幾次世界性流感流行的主要病原體，而且 目前世界上流行的也多為甲型。目前為止，甲型流感病毒共有15種不同的 血凝素和神經(jīng)氨酸酶被分離鑒定，可分為多種亞型，如H1N1，H1N2，H2N2， H3N2等，在人類中引發(fā)流行的最為常見的是H1N1、 H3N2亞型。自發(fā) 現(xiàn)流感病毒，20世紀(jì)中有5次世界性大流行的記載，分別發(fā)生于1900、1918、 1957、 1968和1977年，其中以1918年的一次流行最為嚴(yán)重，死亡人數(shù)達(dá) 2000萬以上。我國從1953年至1976年已有12次中等或中等以上的流感流行，每次流行均由甲型流感病毒所引起，2003年爆發(fā)的禽流感也是一種 由甲型流感病毒亞型引起的呼吸道傳染病。甲型H1N1流感是一種由病毒 A (H1N1)引起的呼吸系統(tǒng)疾病。人感染甲型H1N1流感后的癥狀與普通 人流感相似，包括發(fā)熱、咳嗽、喉嚨痛、身體疼痛、頭痛、發(fā)冷和疲勞等， 有些還會(huì)出現(xiàn)腹瀉和嘔吐，重者會(huì)繼發(fā)肺炎和呼吸衰竭，甚至死亡。
目前，國內(nèi)外西醫(yī)對(duì)腸道病毒、流感病毒的防治方法就是根據(jù)抗原抗 體學(xué)說運(yùn)用疫苗來預(yù)防病毒的發(fā)生，但由于病毒的抗原不斷發(fā)生著變異， 疫苗往往也就失去效力。而用于抗病毒的藥物，基于病毒的變異性及藥物 的耐藥等問題，使病毒的防治問題仍很嚴(yán)峻。至今，尚無找到針對(duì)手足口 病、甲型H1N1流感的疫苗和特效治療藥物。因此，尋找一種療效明確的治 療及預(yù)防手足口病、甲型H1N1流感藥物成為醫(yī)療界關(guān)注的焦點(diǎn)。
祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為，手足口病、甲型H1N1流感均是由外感疫毒之邪氣所致， 此病傳播迅速，是多種疾病的起因，常入里化熱。病因?yàn)闇責(zé)岫拘?，病機(jī) 為外感溫?zé)嵋叨局?，侵襲肺衛(wèi)，后迅速進(jìn)入氣分，伏于氣分，致陽氣郁 熱，肺衛(wèi)郁閉，臨床上表現(xiàn)為高熱、惡寒、咳嗽及肌肉酸痛等衛(wèi)氣同病的 癥狀。
中藥不僅具有耐藥性低、副作用和不良反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)，而且還有抑制病 毒復(fù)制、調(diào)節(jié)免疫功能、改善血液循環(huán)、解熱鎮(zhèn)痛及抗菌消炎等綜合功效， 其在防治病毒感染方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和廣闊的發(fā)展前景。研究表明，清 熱解毒類中藥大多具有直接抗病毒的作用，如連翹、金銀花、野菊花、黃 連、黃芩、大青葉、魚腥草、柴胡、牛蒡子等。
黃芩是有名的清熱解毒中藥，為唇形科(labiatae)植物黃苓(Scutdlar ia baicalensis Georgi)的干燥根，又名子芩、條芩、獨(dú)尾芩、鼠尾芩、黃芩條等， 黃芩苦、寒，清熱燥濕、瀉火解毒，善清肺火及上焦之實(shí)熱；從研究內(nèi)容 看，人們重視黃芩的作用，而對(duì)黃芩的認(rèn)識(shí)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠?，F(xiàn)有研究沒有關(guān)于 黃芩抗腸道病毒的報(bào)道，也沒有深入研究到黃芩對(duì)流感病毒亞型的作用
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明通過體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)黃芩對(duì)引起手足口病的腸道病毒、流
感病毒甲型H1N1、 H3N2亞型有明顯的抑制作用，從而將其應(yīng)用到治療和預(yù) 防手足口病及甲型新型H1N1流感、甲型H1N1流感及甲型H3N2流感中。本 研究針對(duì)上述病因病機(jī)，基于黃芩的藥理特點(diǎn)，將其應(yīng)用到腸道病毒、流 感病毒甲型的研究領(lǐng)域中。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，克服現(xiàn)有技術(shù) 的不足，提供一種能夠有效治療或預(yù)防手足口病、甲型新型H1N1流感、甲 型H1N1流感及甲型H3N2流感的藥物及衛(wèi)生用品。
本發(fā)明的目的是為了提供一種具有抗腸道病毒活性和抗甲型流感病毒 活性的黃芩組合物。本發(fā)明的黃芩組合物中含黃苳黃酮的重量百分含量在 5% 90%范圍內(nèi)。本發(fā)明的黃芩組合物可用于治療或預(yù)防因腸道病毒 EV71和/或柯薩奇病毒A16引起的感染，以及因流感病毒甲型新型H1N1 亞型、H1N1亞型和/或H3N2亞型引起的感染。
本發(fā)明的黃苓組合物的是通過用適量的水和/或醇提取粉碎的黃芩或 黃芩飲片，然后濃縮制得的提取液而得的。.
上述的"用水和/或醇提取"一般采用水、醇或其混合物對(duì)黃苳藥材進(jìn)行 浸泡或加熱提取，這些方法都可以適于本發(fā)明。
具體地，本發(fā)明的黃芩組合物是將黃芩粉碎或制成飲片后，用適量的 水，醇，或含水醇，在靜態(tài)或動(dòng)態(tài)條件下，室溫或加熱(或回流)提取， 提取可連續(xù)或間歇進(jìn)行，然后濾去藥渣，濾液在常壓或減壓、動(dòng)態(tài)狀態(tài)下 濃縮至一定濃度后(通常是指lg/ml生藥或lkg/L生藥)，保溫離心除去不 溶物，收集濾液，濾液可進(jìn)一步濃縮成膏狀進(jìn)行制劑成型。浸膏可經(jīng)冷凍 干燥或真空干燥成干粉，也可把濃縮液體直接噴霧干燥成干粉進(jìn)行制劑成 型。
以上提取濾液又可采取如下步驟進(jìn)行后處理
將收集得到的濾液回收醇，濃縮或加水稀釋至相對(duì)密度1.02~1.15, 加稀鹽酸調(diào)節(jié)pHl-2， 50 8(TC保溫，靜置過夜，過濾，取沉淀物，依次 用適量水和不同濃度的乙醇洗至pH至7.0先用水洗漆，揮盡乙醇，真空干 燥成干粉，用于制劑成型。以上提取濾液還可采取如下步驟進(jìn)行后處理
將收集得到的濾液回收醇，濃縮或加水稀釋至相對(duì)密度1.02 1.15，加 稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至1.0 2.0， 50 8(TC保溫1小時(shí)，靜置過夜，過濾，沉淀物用 適量水?dāng)噭?，?0 60X氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，加等量乙醇，攪拌使 溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1.0 2.0， 40 60。C保溫l小時(shí)，靜置過夜， 過濾，沉淀依次用適量水和不同濃度的乙醇洗至pH至7.0先用水洗滌，揮盡 乙醇，真空干燥成干粉，用于制劑成型。
以上提取濾液還可直接上交換，如大孔樹脂、離子換權(quán)樹脂、凝膠， 和膜技術(shù)進(jìn)行精制濃縮后，再制成浸膏或干粉。
本發(fā)明的制備方法中，所述的醇為甲醇、乙醇、異丙醇和丁醇中的一 種或它們的混合物，優(yōu)選地為乙醇、異丙醇和丁醇，更優(yōu)選地為乙醇。
本發(fā)明的制備方法中，所述的含水醇是醇的重量百分比為20% 95%， 優(yōu)選地為30% 80%，更優(yōu)選地為的50% 70%。
本發(fā)明的制備方法中，"適量的溶劑"中的適量是指本領(lǐng)域技術(shù)人員按 照常規(guī)技術(shù)可確定用于提取黃芩組合物的溶劑用量，具體地說，為原藥材 重量的2 14倍，優(yōu)選地為4 12倍，更優(yōu)選地為4 8倍。
本發(fā)明的制備方法中，室溫是指25°C±5°C，加熱的溫度可控制在 30曙80。C，例如35。C、 45。C、 55。C或70。C。
本發(fā)明的制備方法中，間歇提取時(shí)，每次提取時(shí)間為1 4小時(shí)，重復(fù) 1 4次；優(yōu)選地，每次提取時(shí)間為1 3小時(shí)，重復(fù)1 3次；更優(yōu)選地， 每次提取時(shí)間為1 2小時(shí)，重復(fù)2 3次。
本發(fā)明所述的黃芩組合物，黃芩黃酮含量在5% 90%范圍內(nèi)。本發(fā)明 所述的中藥組合物，加入相關(guān)劑型的輔料，可以制成藥物學(xué)上可接受的制 劑形式，包括膠囊、口服液、糖漿、片劑、口崩片、滴丸、含嗽液、顆粒 劑、洗劑、溶液劑、酊劑、混懸劑、膏劑、噴霧劑等。
本發(fā)明所述的黃芩組合物，加入相關(guān)的賦形劑，可制成各種衛(wèi)生用品 可接受的形式，包括消毒水、爽身粉、牙膏、香皂、肥皂、浴液、洗發(fā)香 波、漱口水、護(hù)膚膏、防曬油、香水等。本發(fā)明所述的黃芩組合物及其各種制劑形式、衛(wèi)生用品形式，用于治
療或預(yù)防腸道病毒引起的手足口病及流感病毒甲型新型H1N1流感、流感 病毒甲型H1N1和流感病毒甲型H3N2流感的感染。
具體實(shí)施例方式
下面將參照實(shí)施例和試驗(yàn)例進(jìn)一步詳細(xì)闡述本發(fā)明 實(shí)施方式l:黃芩組合物的制備
取粉碎的黃芩800g,，加入藥材8倍量的水，煎煮1小時(shí)，連續(xù)3次， 合并煎煮液，濾去藥渣，濾液在減壓狀態(tài)下濃縮至相對(duì)密度為1.02 1.10， 離心除去不溶物，收集濾液，收集濾液。將濾液分成4份，分別按如下方
法制備
a. 濃縮制成浸膏；
b. 濃縮成浸膏后,再經(jīng)真空干燥，制成干粉； C. 經(jīng)冷凍干燥制成千粉；
d.直接噴霧干燥，制成干粉。
實(shí)施方式2:黃芩組合物的制備
取粉碎的黃芩800g,，加入藥材12倍量的乙醇，滲漉提取，滲漉液回 收乙醇，加與藥材重量等量的水，攪拌均勻，離心除去不溶物，收集濾液。 將濾液分成4份，分別按如下方法制備
a. 濃縮制成浸膏；
b. 濃縮成浸膏后,再經(jīng)真空干燥，制成干粉； C.經(jīng)冷凍干燥制成干粉； d.直接噴霧干燥，制成干粉。
實(shí)施方式3:黃芩組合物的制備
取粉碎的黃芩800g，加入藥材10倍量的40% 80%的乙醇，加熱至 6(TC，回流1小時(shí)，連續(xù)3次，使并回流液，濾去藥渣，濾液在減壓狀態(tài)下濃縮回收乙醇，繼續(xù)濃縮或加水，使相對(duì)密度為1.02 1.10，離心除去 不溶物，收集濾液。將濾液分成4份，分別按如下方法制備 a.濃縮制成浸膏；
b.濃縮成浸膏后,再經(jīng)真空干燥，制成干粉；
C.經(jīng)冷凍千燥制成干粉；
d.直接噴霧干燥,制成干粉。
實(shí)施例4:黃芩組合物的制備
取粉碎的黃芩800g，加入藥材8倍量的70%乙醇浸泡，靜置過夜，濾 過，收集乙醇溶液；濾渣加入藥材8倍量的水，煎煮1小時(shí)，連續(xù)2次。 合并乙醇溶液和水煎煮液，濾去藥渣，濾液在減壓狀態(tài)下濃縮至相對(duì)密度 為1.02 L10，離心除去不溶物，收集濾液，收集濾液。將濾液分成4份， 分別按如下方法制備 a.濃縮制成浸膏； b.濃縮成浸膏后,再經(jīng)真空干燥，制成干粉； C.經(jīng)冷凍干燥制成干粉；
d.直接噴霧干燥，制成干粉。
實(shí)施例5:黃芩組合物的制備
取粉碎的黃芩800g，加入藥材10倍量的50%的乙醇，加熱至60°C， 回流1小時(shí)，連續(xù)3次，使并回流液，濾去藥渣，濾液在減壓狀態(tài)下濃縮 回收乙醇，并繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.02 1.10，上大孔樹指交換柱，先 適量水洗，再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液約1600ml，減壓濃縮回收乙醇， 再經(jīng)真空干燥，制成干粉。
實(shí)施例6:黃芩組合物的制備
取粉碎的黃芩800g，加入藥材8倍量的水，煎煮1小時(shí)，連續(xù)3次， 合并煎煮液，濾去藥渣，濾液在減壓狀態(tài)下濃縮至相對(duì)密度為1.02 1.10，離心除去不溶物，收集濾液。濾液濃縮至相對(duì)密度1.02 1.15，加稀鹽酸調(diào) 節(jié)pH1.0~2.0， 8(TC保溫lh，靜置過夜，過濾，取沉淀物，依次用適量水 和不同濃度的乙醇洗至pH至7.0，揮盡乙醇，真空干燥制成干粉。
實(shí)施例7:黃芩組合物的制備
取粉碎的黃芩800g，加入藥材8倍量的水，煎煮1小時(shí)，連續(xù)3次， 合并煎煮液，濾去藥渣，濾液在減壓狀態(tài)下濃縮至相對(duì)密度為1.02 1.10， 離心除去不溶物，收集濾液。濾液濃縮至相對(duì)密度1.02 1.15，加稀鹽酸調(diào) 節(jié)pH1.0~2.0， 80。C保溫1小時(shí)，靜置過夜，過濾，取沉淀物用適量水?dāng)?勻，用10 60X氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解， 濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1.0 2.0， 40 60。C保溫l小時(shí)，靜置過夜， 過濾，沉淀依次用適量水和不同濃度的乙醇洗至pH至7.0，揮盡乙醇，真 空干燥制成干粉。
試驗(yàn)例
試驗(yàn)例l:黃芩體外實(shí)驗(yàn)抗腸道病毒的療效
(1) 實(shí)驗(yàn)原理以Vero (非洲綠猴腎)細(xì)胞為病毒宿主，測(cè)定黃芩樣 品抑制腸道病毒71型(EV71)、柯薩奇病毒A16 (COX A16)引起Vero
細(xì)胞病變程度。
(2) 測(cè)試材料和方法取實(shí)施例1-7制得的干粉，加水溶解并稀釋，以 500ng/ml，起始濃度，用培養(yǎng)液逐級(jí)稀釋。陽性對(duì)照藥利巴韋林(RBV)湖 北潛江藥廠生產(chǎn)的。測(cè)試方法Vero細(xì)胞種96孔培養(yǎng)板，24小時(shí)后分別 感染腸道病毒71型(EV71) (100TCID5o感染量)、柯薩奇病毒A16 (COX A16) (100TCID5。感染量)，吸附1小時(shí)，棄病毒液，按以上稀釋度加入樣 品，同時(shí)設(shè)細(xì)胞對(duì)照孔和病毒對(duì)照孔，感染后51小時(shí)觀察細(xì)胞病變程度
(CPE)，用Reed-Muench法分別計(jì)算樣品抗腸道病毒71型(EV71)、柯 薩奇病毒A16 (COXA16)的半數(shù)抑制濃度(IC50)。
(3)測(cè)試結(jié)果實(shí)施例l-7的干粉樣品，抗腸道病毒EV71的TDso在36.14pg/ml~ 256.6|ig/ml, ICso在7.1pg/ml 42.6嗎/ml，選擇指數(shù)SI大于5.0; 抗柯薩奇病毒A16的TDso在96.68pg/ml~ 326.8ng/ml, ICso在19.09ug/ml~ 56.36pg/ml，選擇指數(shù)SI大于5.0。 試驗(yàn)例2:黃芩體外實(shí)驗(yàn)抗流感病毒甲型的療效
(1) 實(shí)驗(yàn)原理以MDCK(狗腎細(xì)胞)細(xì)胞為病毒宿主，測(cè)定黃芩樣品 抑制流感病毒甲型H1N1 (A/京防/262/95， l(T3感染，病毒感染相當(dāng)于100 個(gè)TCID50)、 H3N2 (A/粵防/243/72， 1/5 l(T4感染，病毒感染相當(dāng)于100個(gè) TCID5。)弓I起MDCK細(xì)胞的病變程度。
(2) 測(cè)試材料和方法取實(shí)施例1-7制得的干粉，加水溶解，再用培 養(yǎng)液稀釋成1000pg/ml作為起始濃度，用培養(yǎng)液逐級(jí)稀釋。陽性對(duì)照藥 利巴韋林(RBV)湖北潛江藥廠生產(chǎn)的。測(cè)試方法MDCK細(xì)胞種96孔培 養(yǎng)板，24小時(shí)后感染病毒，吸附2小時(shí)，棄病毒液，按以上稀釋度加入樣 品，同時(shí)設(shè)細(xì)胞對(duì)照孔和病毒對(duì)照孔，24小時(shí)觀察細(xì)胞病變程度(CPE)， 用Reed-Muench法分別計(jì)算樣品的半數(shù)有毒濃度(TD5o)和半數(shù)有效濃度 (IC5Q)，并計(jì)算藥物選擇指數(shù)(SI)。
(3) 測(cè)試結(jié)果實(shí)施例1-7的干粉樣品，抗流感病毒甲型H1N1的TDso 在125ug/ml~ 256pg/ml范圍內(nèi)，ICso在25.1ug/ml~ 78.6pg/ml，選擇指數(shù) SI大于5.0;抗流感病毒甲型H3N2在125ug/ml 256^ig/ml范圍內(nèi)，IC50= 12.1ug/iril~ 56.8pg/ml，選擇指數(shù)SI大于10.0。
試驗(yàn)例3:黃芩治療手足口病的臨床療效 1.1資料和方法 l丄l診斷標(biāo)準(zhǔn)
觀察對(duì)象均符合手足口病(HFMD)的診斷標(biāo)準(zhǔn)(1)流行病學(xué)資料。 (2)發(fā)熱，多表現(xiàn)為中等程度發(fā)熱，偶有高熱，體溫39-C以上。(3)皮疹， 以手足掌部皰疹為特征，皰疹基底部繞有紅暈，部分病例皰疹發(fā)生在臀部。 (4) 口腔皰疹一般與手足皰疹同時(shí)或先于手足部皰疹。 1.1.2臨床資料
本組病例均來自2008年5月-2009年6月確診的HFMD的診斷標(biāo)準(zhǔn)患兒。年齡:8個(gè)月 4歲。隨機(jī)分為治療組(黃芩制劑)30例，男16例，女14例， 平均年齡2.3士0.5歲；對(duì)照組(病毒唑)28例，男14例，女14例，平均年齡 2.4±0.5歲；其中治療組再分為治療組A (腸道病毒EV71) 18例和治療組B
(柯薩奇病毒A16) 12例。各組在性別、年齡、病程和病情分布上無統(tǒng)計(jì)學(xué) 意義(PX).05)。
1.2治療方法
治療組A給予實(shí)施例3的黃芩組合物干粉，口服，每日兩次，每次用量 相當(dāng)于生藥材10g;治療組B用實(shí)施例3的浸膏，外涂局部皮疹，每次用量相 當(dāng)于生藥材3g;對(duì)照組用病毒唑10 15mg/kg靜滴，1次/d。分別觀察治療 效果。 1.3療效標(biāo)準(zhǔn)
1.3.1全身情況顯效:48h內(nèi)體溫正常， 一般狀態(tài)好轉(zhuǎn)，72 h內(nèi)不流涎， 能進(jìn)食，正常玩耍；有效:72h體溫正常， 一般狀態(tài)好轉(zhuǎn),5 d不流涎，能 進(jìn)食，正常玩耍；無效治療4d仍發(fā)熱，流涎，進(jìn)食受限，口腔黏膜充血， 潰爛明顯，合并細(xì)菌感染。
1.3.2退疹1 3d為明顯好轉(zhuǎn)，4 6d為好轉(zhuǎn)，6d以上為無效。
1.4結(jié)果
運(yùn)用本發(fā)明黃苓治療手足口病，結(jié)果表明治療組總有效率為83.33%， 對(duì)照組為60%。比較三組的發(fā)熱、皮疹、口腔潰瘍改善情況，治療組優(yōu)于 對(duì)照組。在臨床治療觀察中未發(fā)現(xiàn)毒副作用。臨床結(jié)果提示本發(fā)明中藥 組合物治療手足口病療效滿意。
試驗(yàn)例4:黃芩治療甲型新型H1N1流感、甲型H1N1流感、甲型H3N2 流感的臨床療效
1.1資料和方法
1.1.1臨床資料
本組病例均為2009年確診的甲型新型H1N1流感、甲型H1N1流感、甲型 H3N2流感患者，年齡23.5±4.0歲，隨機(jī)分為治療組(黃苓)30例，對(duì)照組 (達(dá)菲)IO例，其中治療組再分為治療組A (甲型新型H1N1流感)IO例、治療組B (甲型H1N1流感)和治療組C (甲型H3N2流感)IO例，各組在性 別、年齡、病程和病情分布上無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PX).05)。 l丄2診斷標(biāo)準(zhǔn)
(1)與新型H1N1、 H1N1或H3N2患者有密切接觸史。(2) —周內(nèi)出現(xiàn)流 感臨床表現(xiàn)者。(3)從鼻咽拭子中分離到特定病毒，RT-PC旨標(biāo)本檢測(cè)， 有新型H1N1、 H1N1或H3N2病毒RNA存在，經(jīng)過測(cè)序證實(shí)結(jié)果兩次為陽性者。
1.2治療方法
治療組給予實(shí)施例3的黃芩組合物干粉，口服，每日兩次，每次用量相 當(dāng)于生藥材10g;對(duì)照組用達(dá)菲75mg口服，每日兩次，兒童酌減。療程為5 天。
1.3療效標(biāo)準(zhǔn)
顯效:24h內(nèi)體溫正常，咳嗽、咳痰等臨床癥狀明顯緩解，從鼻咽拭子 中分離的病毒經(jīng)RT-PCR檢觀!J，新型H1N1、 H1N1、 H3N2病毒RNA—次結(jié)果
為陰性者。
有效:72h內(nèi)體溫正常，咳嗽、咳痰等臨床癥狀有所緩解，從鼻咽拭子中 分離的病毒經(jīng)RT-PCR檢測(cè)，新型H1N1、 H1N1、 H3N2病毒RNA—次結(jié)果為
陰性者。
無效治療5d仍發(fā)熱，咳嗽、咳痰等臨床癥狀未緩解，從鼻咽拭子中分 離的病毒經(jīng)RT-PCR檢測(cè)，新型H1N1、 H1N1、 H3N2病毒RNA結(jié)果仍為陽性。 1.4結(jié)果
運(yùn)用本發(fā)明黃芩治療流感病毒甲型新型H1N1流感、甲型H1N1流感 及甲型H3N2流感，結(jié)果表明比較四組的發(fā)熱、咽痛、咳嗽、咳痰改善 情況、血象改善情況，治療組總有效率為71.5%，對(duì)照組達(dá)菲組為79.67%。 與達(dá)菲組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PX).05)。在臨床治療觀察中未發(fā)現(xiàn)毒副作用。 臨床結(jié)果提示本發(fā)明黃芩制劑治療流感病毒甲型新型H1N1流感、甲型 H1N1流感、甲型H3N2流感療效滿意。
以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明。對(duì)于本發(fā)明所屬技術(shù) 領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若 干簡單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種具有抗腸道病毒活性和/或抗甲型流感病毒活性的黃芩組合物，其特征在于，通過適量的水和/或醇提取粉碎的黃芩或黃芩飲片，然后濃縮制得提取液。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃芩組合物，其特征在于，醇為甲醇、乙醇、 異丙醇、丁醇中的一種或它們的混合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃芩組合物，其特征在于，黃芩黃酮含量在 5% 90%范圍內(nèi)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1 3任一項(xiàng)所述的黃芩組合物，其特征在于，可制 成藥物學(xué)上可接受的載體。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1 3任一項(xiàng)所述的黃芩組合物，其特征在于，可制 成藥物學(xué)上可接受的制劑形式，包括膠囊、口服液、糖漿、片劑、口崩片、 滴丸、含嗽液、顆粒劑、洗劑、溶液劑、酊劑、混懸劑、膏劑、噴霧劑。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1 3任一項(xiàng)所述的黃芩組合物，其特征在于，可制 成各種衛(wèi)生用品可接受的形式，包括消毒水、爽身粉、牙膏、香皂、肥皂、 浴液、洗發(fā)香波、漱口水、護(hù)膚膏、防曬油、香水。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1 3任一項(xiàng)所述的黃芩組合物，用于治療或預(yù)防腸 道病毒EV71和/或柯薩奇病毒A16引起的手足口病及甲型新型H1N1，和 /或甲型H1N1，和/或甲型H3N2流感病毒的感染。
8. —種制備具有抗腸道病毒活性和/或抗甲型流感病毒活性的黃芩組 合物的工藝，包括如下步驟1) 將黃芩粉碎或制成飲片后，用適量的水，醇，或含水醇，在靜態(tài) 或動(dòng)態(tài)條件下，室溫或加熱或回流提取，提取可連續(xù)或間歇進(jìn)行，然后濾 去藥渣；2) 將濾液在常壓或減壓、動(dòng)態(tài)狀態(tài)下濃縮后，保溫離心除去不溶物， 收集濃縮濾液；3) 將收集得到的濾液回收醇，濃縮或加水稀釋至相對(duì)密度1.02 1.15， 加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH1.0 2.0， 50 8(TC保溫1小時(shí)，靜置過夜，過濾，取沉 淀物，依次用適量水和不同濃度的乙醇洗至pH至7.0先用水洗滌，揮盡乙醇，真空干燥成干粉，用于制劑成型。
9. 一種制備具有抗腸道病毒活性和/或抗甲型流感病毒活性的黃芩組合物的工藝，包括如下步驟1) 將黃芩粉碎或制成飲片后，用適量的水，醇，或含水醇，在靜態(tài) 或動(dòng)態(tài)條件下，室溫或加熱或回流提取，提取可連續(xù)或間歇進(jìn)行，然后濾 去藥渣；2) 將濾液在常壓或減壓、動(dòng)態(tài)狀態(tài)下濃縮后，保溫離心除去不溶物, 收集濃縮濾液；3)將收集得到的濾液回收醇，濃縮或加水稀釋至相對(duì)密度1.02 1.15， 加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至1.0~2.0， 50 80'C保溫1小時(shí)，靜置過夜，過濾，沉 淀物用適量水?dāng)噭?，?0 60%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，加等量乙醇， 攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1.0 2.0， 40 60'C保溫1小時(shí)， 靜置過夜，過濾，沉淀依次用適量水和不同濃度的乙醇洗至pH至7.0先用 水洗滌，揮盡乙醇，真空干燥成干粉，用于制劑成型。
10.如權(quán)利要求8或者9所述的制備具有抗腸道病毒活性和/或抗甲型 流感病毒活性的黃芩組合物的工藝，其特征是步驟1)中所述的間歇提取，每次提取時(shí)間為1 4小時(shí)，重復(fù)1 4次。全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有抗病毒活性的黃芩組合物，屬于醫(yī)藥衛(wèi)生技術(shù)領(lǐng)域，其特征在于，取中藥黃芩，粉碎或制成飲片，用適量的水、醇或含水醇為溶劑，在室溫、加熱或回流條件下進(jìn)行提取，然后濃縮制得提取液。提取液可進(jìn)一步濃縮成膏狀進(jìn)行制劑成型，浸膏可經(jīng)冷凍干燥或真空干燥制成干粉，也可把提取液體直接噴霧干燥成干粉。本發(fā)明的中藥組合物，可用于制備抗腸道病毒EV71、抗柯薩奇病毒A16、抗流感病毒甲型新型H1N1、甲型H1N1和H3N2亞型的藥物和衛(wèi)生用品。
文檔編號(hào)A61K36/185GK101612197SQ20091010869
公開日2009年12月30日 申請(qǐng)日期2009年7月15日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月15日
發(fā)明者劉家琛, 劉玉玲, 曲敬來, 曾曉蓮, 雪 高 申請(qǐng)人:曲敬來