專利名稱：：二乙酰化黃芩素在制備解熱劑中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及化合物醫(yī)藥用途，具體地說是二乙?；S芩素在制藥領(lǐng)域中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：二乙?；S芩素為黃芩苷的衍生物。黃芩苷(Baicalin)是從黃芩根中提取分離出來的一種黃酮類化合物，具有抑菌、利尿、抗炎、抗變態(tài)及解痙作用。臨床上也有采用黃芩素用于治療上呼吸道感染的，但臨床醫(yī)師反映其解熱鎮(zhèn)痛效果不夠理想。由于黃芩類藥物具有安全、可靠的特點(diǎn)，因此，人們一直希望獲得更多更好的黃芩類治療藥物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的就是要提供一種比黃芩素效果更好的同類藥物，以期為臨床用藥提供更多的選擇。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，二乙酰化黃芩素具有更好的解熱效果。故首次提出將二乙?；S芩素在制備解熱劑中進(jìn)行應(yīng)用。本發(fā)明使二乙?；S芩素可以制備成解熱劑，因此本發(fā)明提供了一種比黃芩素解熱效果更好的藥物，同時(shí)為臨床治療發(fā)燒、發(fā)熱，尤其是上呼吸道感染所致發(fā)熱提供了一種新的用藥選擇。本發(fā)明所述的二乙?；S芩素，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下OHO其制備方法包括有以下步驟a、以黃芩苷為原料，加葡萄糖醛酸水解酶，在10-8(TC條件下，保溫l-4天；過濾，沉淀物用水洗滌、干燥，得黃芩素；其中葡萄醛酸水解酶的用量最好為原料量的0.1-10倍。b、以黃芩素為原料，加醋酐乙酰化，沉淀物用水洗滌、干燥，得二乙?；S芩素。本發(fā)明所述二乙?；S芩素可用于治療上呼吸道感染以及各種類型的發(fā)燒、發(fā)熱。本發(fā)明所述二乙?；S芩素在用于治療上呼吸道感染以及各種類型的發(fā)燒、發(fā)熱時(shí)，可經(jīng)口服或不經(jīng)口服給藥。給藥量也因劑型不同而各有不同。對(duì)成年人來說，口服用藥3每天200-900mg比較適宜。肌注或靜脈注射用藥每天50-100mg比較適宜。本發(fā)明的有益效果通過以下實(shí)驗(yàn)得到了驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)材料及受試動(dòng)物二乙?；S芩素的制備(1)將100克黃芩素加入1000毫升醋酐中，在攝氏50度下攪拌3小時(shí)，過濾，收集沉淀，水洗，得白色粉末產(chǎn)品112克。(2)將1.5千克黃芩素溶解在5升吡啶中，再加入5升醋酐，室溫下攪拌10小時(shí)，反應(yīng)液濃縮后加入10升冰水中，過濾，收集沉淀，水洗，得白色粉末產(chǎn)品1.8千克。白色粉末產(chǎn)品的化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)質(zhì)譜EI-MS:m/z354[M]+，312，270。核磁共振氫譜1H-NMR(CDC13):12.90(1H，s，5-0H)，7.88(2H，d，J=6.OHz，H_2，，6，)，7.52(3H，m，H_3，，4，，5，)，6.95(1H，s，H_3)，6.72(1H，s，H_8)，2.35(3H，s，-CH3)，2.33(3H，s，-CH3)。核磁共振碳譜13C-NMR(CDC13):182.9(C_4)，167.7(_C=0)，167.5(_C=0)，165.1(C_7)，153.4(C_2)，153.3(C_5)，148.3(C_9)，132.3(C_6)，130.8(C-l')，129.2(C_3，，4，，5，)，126.4(C_2，，6，，)，109.5(C_10)，105.7(C_3)，101.6(C_8)，20.7(-CH3)，20.2(-CH3)。經(jīng)上述波譜學(xué)方法鑒定，白色粉末產(chǎn)品為二乙?；S芩素，純度高于98%。且該數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的二乙?；S芩素一致。藥理實(shí)驗(yàn)材料及受試動(dòng)物動(dòng)物1、大耳白家兔，一級(jí)，雌雄各半，2.0±0.lkg購自中國獸藥監(jiān)察所，京動(dòng)許字(1999)第004號(hào)，監(jiān)動(dòng)質(zhì)字(2000)第292號(hào)。2、SD大鼠，二級(jí)，購自北京市維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，合格證號(hào)SCXK11-00-0008。主要試劑1、二乙?；S吝素用時(shí)以0.5%羧甲基纖維素鈉(0.5%CMC-Na)配成混懸液。2、黃吝素(外購)用時(shí)以0.5%羧甲基纖維素鈉(0.5%CMC-Na)配成混懸液。3、阿司匹林原料藥，白色粉末，山東新華制藥股份有限公司，批號(hào)9907653，用時(shí)以0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC_Na)配成混懸液。4、大腸桿菌內(nèi)毒素:0111B4，lml/支，批號(hào)960301.購自中國藥品生物制品檢定所。用注射用生理鹽水溶解稀釋，本實(shí)驗(yàn)用250ng/kg.，lml/kg新鮮配制。5、干酵母外購，酵母懸液制備稱取干酵母10克，置于乳缽中，逐漸加入蒸餾水磨為均勻的懸漿，最后定容為50ml(20%)，此液體需于臨用前配制。儀器1、精密電子分析天平EB-280M-22型日本KYOTO公司。2、0MR0N電子數(shù)字式體溫計(jì)MC_3，歐姆龍大連有限公司制造。方法與結(jié)果二乙?；S芩素的解熱作用—、二乙?；S芩素對(duì)內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱的解熱作用(1)、家兔的選擇選擇健康大耳白家兔數(shù)十只，每日早晚用電子體溫計(jì)測體溫1次，連續(xù)2日，使家兔適應(yīng)測體溫操作，選擇體溫范圍38.6-39.5°C，且體溫波動(dòng)在0.3°C以內(nèi)者，備用。(2)、正式實(shí)驗(yàn)取體溫合格家兔48只，按基礎(chǔ)體溫隨機(jī)分為6組，藥前測兩次基礎(chǔ)體溫(每30分鐘一次)。第1組空白對(duì)照組口服給予等容量0.5%CMC-Na;第2組陽性藥組阿司匹林100mg/kg;第3組黃吝素100mg/kg組；第4組二乙?；S吝素160mg/kg組；第5組二乙?；S芩素lOOmg/kg組；第6組二乙?；S芩素40mg/kg組；以上各組均于注射內(nèi)毒素后立即灌胃給藥。每只家兔均耳緣靜脈注射大腸桿菌內(nèi)毒素250ng/kg(lml/kg)，隨即灌胃給藥，并于內(nèi)毒素攻擊后1、2、3、4、5、6小時(shí)各測體溫1次，結(jié)果見表1。并將各組之間在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行t檢驗(yàn)。結(jié)果如表l:家兔口服給予二乙?；S吝素40mg/kg、100mg/kg、160mg/kg，對(duì)內(nèi)毒素引起的發(fā)熱模型具有明顯的解熱作用，與空白對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05-0.001);二乙?；S芩素160mg/kg組與陽性藥比較解熱作用無顯著性差異。二乙?；S芩素與黃芩素同劑量組相比，解熱作用明顯且持久。表1二乙?；S芩素對(duì)內(nèi)毒素致熱家兔體溫的影響G±s，n=8)5<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注與模型組相比*p<0.05**p<0.01***p<0.001二、二乙?；S吝素對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的解熱作用1.大鼠準(zhǔn)備取200-250克雄性大鼠數(shù)十只，于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境適應(yīng)3_4日，用電子體溫計(jì)從肛內(nèi)測體溫2次，連續(xù)2天，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日每小時(shí)測體溫1次，連續(xù)2次，選取體溫變化不超過o.3t:的動(dòng)物供實(shí)驗(yàn)用。2.正式實(shí)驗(yàn)取200-250克雄性合格大鼠60只，隨機(jī)均分6組，第1組空白對(duì)照組，給等容量.0.5%CMC-Na;第2組陽性藥阿司匹林150mg/kg;第3組黃芩素組100mg/kg;第4組二乙?；S芩素高劑量組200mg/kg;第5組二乙酰基黃芩素中劑量組lOOmg/kg;第6組二乙?；S芩素低劑量組50mg/kg。各鼠于背部皮下注入10%酵母懸液10ml/kg，于給酵母后第5小時(shí)開始給藥.并于給藥后的1、2、3、4、5小時(shí)各測大鼠體溫一次。結(jié)果如表2:大鼠口服給藥二乙?；S吝素200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg，對(duì)干酵母誘發(fā)的大鼠發(fā)熱模型具有明顯的解熱作用，與空白對(duì)照組比較，有顯著性差異(P<0.05-0.001);二乙?；S芩素組與黃芩素組相比，解熱作用明顯且持久。表2.二乙酰黃芩素對(duì)酵母菌致熱大鼠體溫的影響(n二10，；±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與同時(shí)間點(diǎn)模型組比較:*p<0.05，**p<0.01，微p<0.001綜上所述，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示二乙?；S芩素口服給藥對(duì)內(nèi)毒素誘發(fā)家兔的發(fā)熱模型和對(duì)干酵母誘發(fā)大鼠的發(fā)熱模型，具有明顯的解熱作用。其無論是大劑量組還是小劑量組其解熱效果均優(yōu)于黃芩素組，且解熱作用持續(xù)時(shí)間也均優(yōu)于黃芩素組。以上各項(xiàng)試驗(yàn)顯示出明顯的量效關(guān)系。由此可見，二乙?；S吝素具有良好的解熱作用，可在制備解熱劑藥物中得到應(yīng)用。本發(fā)明所述二乙?；S芩素與常規(guī)的藥用輔劑如賦形劑、崩解劑、黏合劑、潤滑劑、抗氧化劑、包衣劑、著色劑、芳香劑、表面活性劑等混合，可將其制成顆粒劑、膠囊劑、片劑的等口服制劑。也可按照采用常規(guī)制劑技術(shù)制備成注射液、輸液劑等制劑。具體實(shí)施例方式下面的制劑實(shí)施例可更詳細(xì)地說明二乙酰化黃芩素在制備解熱劑藥物中的應(yīng)用，但不以任何形式限制本發(fā)明。實(shí)施例1:二乙酰化黃芩素的制備(a).黃芩素的制備黃芩苷一公斤，溶于升30升水中，加入葡萄糖醛酸水解酶0.3公斤，在5(TC保溫?cái)嚢?天，過濾，沉淀用水洗滌后干燥，得黃芩素(0.6公斤)。黃吝素的鑒定質(zhì)譜EI-MS:m/z270[M]+;紫外光譜max(MeOH)nm:277，315;mp.273-275.核磁共振氫譜1H-NMR(dmso-d6):12.64(1H，s，5-0H)，10.55(1H，7-0Hs)，8.80(1H，s，6-0H)，8.04(2H，d，J=6.OHz，H—2，，6')，7.56(3H，m，H-3，，4，，5')，6.92(1H，s，H-3)，6.61(lH，s，H-8).核磁共振碳譜13C-NMR(dmso-d6):182.1(C—4)，162.8(C—2)，153.6(C—7)，149.8(C-9)，147.0(C-5)，131.7(C_4，)，131.O(C-l')，129.3(C-6)，129.0(C-2，，6')，126.2(C—3，，5，)，104.4(C—3)，104.2(C—10)，94.0(C—8)。這些數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(滇黃芩化學(xué)成分的分離與鑒定；沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，Vol.20，No.3，pp.181-183,2003)報(bào)道的黃吝素?cái)?shù)據(jù)一致，證明在實(shí)施例1(a)中得到的化合物為黃芩素。(b).二乙?；S芩素的制備黃芩素10g，加入100ml乙酸酐中，攪拌，反應(yīng)溫度50°C，3小時(shí)后終止反應(yīng)。水洗，抽濾，沉淀干燥后得二乙?；S芩素產(chǎn)品12g。二乙?；S吝素的鑒定質(zhì)譜EI-MS:EI-MSm/z(rel.int.%):270(100)，312(23)，241(8)，168(16)，139(10)，69(28)，43(45);紫外光i普max(MeOH)nm:269，丄HNMR(300MHz)and13CNMR(75MHz)data(CDC13)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>這些數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)(J.Med.Chem.，2004,47:5555-5566)報(bào)道的二乙?；S吝素?cái)?shù)據(jù)一致，證明在實(shí)施例1(b).中得到的化合物為二乙?；S芩素。實(shí)施例2:二乙?；S芩素口服液將5000mg二乙?；S吝素，溶于1000ml水中，制成0.5%濃度的水溶液，調(diào)節(jié)pH至66.5，加熱溶解，混合均勻，裝入20ml藥瓶中，封口、消毒。服用方法口服，每日服用二乙?；S芩素100-300mg。實(shí)施例3:二乙?；S芩素注射液取二乙酰化黃芩素2000mg，溶于1000ml水中，制成水溶液，調(diào)節(jié)pH至66.5，加熱溶解，混合均勻，分裝成20mg/10ml/支的注射液，蒸汽流通滅菌30分鐘。用法用量肌注或靜脈注射，每日50-100mg。實(shí)施例4:二乙?；S芩素片劑取二乙?；S芩素2000g，按公知片劑制備方法，加入淀粉，糊精、硬酯酸鎂等，混合制成濕粒，機(jī)器沖壓成片，每片含二乙?；S芩素lOOmg。用法用量口服，每日2-3次，每次100mg-300mg。本發(fā)明在制藥領(lǐng)域中的應(yīng)用，完全不局限于此，例如二乙?；S芩素還可引入藥學(xué)上可以接受的鹽類，如二乙?；S芩素磷酸鹽，二乙?；S芩素鹽酸鹽，二乙?；S芩素硫酸鹽等等。本發(fā)明的藥物劑型也完全不限于此，它可以制備成更多的劑型，如滴丸、膠囊劑、軟膠囊劑、緩控釋制劑等等。權(quán)利要求二乙酰化黃芩素在制備解熱劑藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種比黃芩素效果更好的同類藥物，同時(shí)為臨床治療上呼吸道感染引起的發(fā)熱以及各種發(fā)燒、發(fā)熱提供了更多的用藥選擇。本發(fā)明使二乙?；S芩素在制備解熱劑藥物中的應(yīng)用得以實(shí)現(xiàn)。文檔編號(hào)A61P29/00GK101744804SQ20081008005公開日2010年6月23日申請(qǐng)日期2008年12月11日優(yōu)先權(quán)日2008年12月11日發(fā)明者車慶明申請(qǐng)人:車慶明