專利名稱：抑制nadph氧化酶活性的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
0001本發(fā)明涉及用于預(yù)防或治療與NADPH氧化酶活性相關(guān) 或有關(guān)的醫(yī)學狀況的組合物和方法。更具體地，本發(fā)明涉及這樣的組 合物和方法，其應(yīng)用藻膽素作為前體藥物并且在其施用給哺乳動物對 象以抑制NADPH氧化酶活性時轉(zhuǎn)化為藻玉紅素(phycorubin)。
背景技術(shù)：
0002NADPH氧化酶將電子從NADPH傳遞給氧，導(dǎo)致產(chǎn)生活 性氧種類(ROSs)，包括02—和^02。 NADPH氧化酶在嗜中性粒細 胞中表達，其中利用活性氧種類裂解來殺死病原體。NADPH氧化酶表 達和活性也可在哺乳動物身體的其它細胞和組織中觀察到，其中 NADPH氧化酶起著細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)劑作用。
0003遺憾的是，在高比例的非感染性病理中，NADPH氧化酶 在受到侵襲的組織中過量表達和/或過度活化，并且導(dǎo)致的氧化劑產(chǎn)生 經(jīng)常介導(dǎo)或加劇病狀。實際上，在大多數(shù)病理性病癥中，活化的NADPH 氧化酶表現(xiàn)為過度氧化應(yīng)激(oxidant stress)的主要來源。NADPH氧化酶 的過度活性可以刺激促炎機制，促進組織纖維化和骨吸收，并且，在 血管系統(tǒng)中拮抗一氧化氮的重要保護活性。由NADPH氧化酶產(chǎn)生的 氧化劑也可能誘導(dǎo)包括DNA的關(guān)鍵細胞靶標的結(jié)構(gòu)損害，并且可能增 強癌癥的生長因子活性(Meyer JW等人，F(xiàn)EBS Lett 2000: 472: 1-4; ZalbaG等人，Hypertension 2001; 38: 1395-9; InoguchiT等人，J Am Soc Nephrology 2003; 14: S227-32; LiJM等人，Hypertension 2002; 40: 477-84; BatellerR等人，J Clin Invest 2003: 112: 1383-94; Darden AG等人，J Bone Mineral Res 1996; 11: 671-5; OhshimaH等人，ArchBiochem Biophys 2003 ;417:3-11; Mander P等人，J Neuroinflammation
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0004實際上，現(xiàn)在認為某些常用藥物一一包括他汀類和ACE抑制劑——的有益效果在某些組織中部分地是由間接抑制NADPH氧化酶活性進行介導(dǎo)的。然而，到目前為止，現(xiàn)在沒有藥物或植物營養(yǎng)素(phytonutrient)可用于能夠在大多數(shù)或所有組織中直接抑制NADPH氧化酶活性的臨床或飲食用途。
0005因此，所需要的是NADPH氧化酶抑制劑，其能夠被容易地大量生產(chǎn)，能夠用于抑制NADPH氧化酶活性并且可以用于防止或治療與NADPH氧化酶活性有關(guān)的狀況。
發(fā)明簡述
0006本發(fā)明的一個方面涉及用于施用給哺乳動物對象的藻化學(phycochemical)組合物。所述藻化學組合物具有抑制NADPH氧化酶活性的前體藥物活性。該藻化學組合物包括溶解或懸浮在藥學上可接受載體中的分離的藻膽素和具有用于容納所述分離的藻膽素的凝膠包裝的膠囊。所述分離的藻膽素在被施用到所述哺乳動物對象以用于抑制NADPH氧化酶活性時轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。在優(yōu)選的實施方式中，所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素(phytochromobilin)，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其.l:的藻藍蛋白肽片段。在進一步優(yōu)選的實施方式中，藥學.匕可接受的載體是干的，并且膠囊任選地是硬凝膠。在進一步優(yōu)選的實施方式中，所述藥學上可接受的載體是液體，并且所述膠囊任選地是軟的。在其它優(yōu)選的實
施方式中，所述藻化學組合物進-一步包括選自下述的--種或多種成分
葉酸、L-精氨酸、普利醇(policosanol)、大豆異黃酮、綠茶提取物、?；撬?、輔酶Q10、鉀鹽、鎂、魚油、維生素C、硒、葉黃素、玉米黃質(zhì)(zeathanthin)、鋅、苯磷硫胺(benfotiamine)和吡哆胺。本發(fā)明的該方面，即，含有溶解或懸浮在藥學上可接受載體中的分離的藻膽素的膠囊可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)本文提供的說明、通過改良本領(lǐng)域內(nèi)己知的傳統(tǒng)方法容易地制造。
0007本發(fā)明的另一方面涉及用于施用給哺乳動物對象的另一
藻化學組合物。同樣，所述藻化學組合物具有抑制NADPH氧化酶活性的前體藥物活性。然而，在本發(fā)明的此方面，藻化學組合物包括與藥學上可接受載體物質(zhì)或食品級填料混合并被壓成片劑的分離的藻膽素。所述分離的藻膽素在施用給哺乳動物對象以用于抑制NADPH氧化酶活性時轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。在優(yōu)選的實施方式中，所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白肽片段。在其它優(yōu)選的實施方式中，所述藻
化學組合物進一步包括選自下述的一種或多種成分葉酸、L-精氨酸、
普利醇、大豆異黃酮、綠茶提取物、?；撬?、輔酶QIO、鉀鹽、鎂、魚油、維生素c、硒、葉黃素、玉米黃質(zhì)、鋅、苯磷硫胺和吡哆胺。
本發(fā)明的該方面，g卩，通過壓制與藥學上可接受的載體物質(zhì)或食品級填料混合的藻膽素制成的片劑，可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)本文提供的說明、通過改良本領(lǐng)域內(nèi)己知的傳統(tǒng)方法容易地制造。
0008本發(fā)明的另一方面涉及用于腸胃外施用給哺乳動物對象的進一步的藻化學組合物。同樣，所述藻化學組合物具有抑制NADPH氧化酶活性的前體藥物活性。然而，在本發(fā)明的此方面，藻化學組合物包括溶解或懸浮在適合注射的生理學上可接受的無菌溶劑中的分離的藻膽素。所述分離的藻膽素在施用給哺乳動物對象以用于抑制NADPH氧化酶活性時轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。在優(yōu)選的實施方式中，所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白肽片段。適合注射的生理學上可接受的無菌溶劑通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的傳統(tǒng)方法和本文所描述的方法來制造。本發(fā)明的該方面，即，溶解或懸浮在適合注射的生理學上可接受的無菌溶劑中的分離的藻膽素可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)本文提供的說明、通過改良本領(lǐng)域內(nèi)己知的傳統(tǒng)方法容易地制造。
0009本發(fā)明的另一方面涉及用于局部施用給哺乳動物對象的
8藻化學組合物。同樣，在本發(fā)明的此方面，所述藻化學組合物具有抑
制NADPH氧化酶活性的前體藥物活性。然而，所述藻化學組合物包 括溶解或懸浮在皮膚病學上可接受的潤膚載體中的分離的藻膽素。所 述分離的藻膽素在局部施用給哺乳動物對象以用于抑制NADPH氧化 酶活性時轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。在優(yōu)選的實施方式中，所述分離的藻膽素 選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每 j巾藻膽素任選地包括 結(jié)合到其.匕的藻藍蛋白肽片段。在另一優(yōu)選的實施方式中，所述藻化 學組合物作為防曬劑起作用。本發(fā)明的該方面，即，從溶解或懸浮在 皮膚病學上可接受的潤膚載體中的分離的藻膽素制成的局部組合物可 以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)本文提供的說明、通過改良本領(lǐng)域內(nèi)已 知的傳統(tǒng)方法容易地制造。
0010本發(fā)明的另一方面涉及營養(yǎng)食品(nutraceutical)組合物。 所述營養(yǎng)食品組合物包括與分離的藻膽素混合的營養(yǎng)物質(zhì)。在優(yōu)選的 實施方式中，所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色 膽素，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其-.,.h的藻藍蛋白肽片段。本發(fā) 明的該方面，即，具有與分離的藻膽素混合的營養(yǎng)物質(zhì)的營養(yǎng)食品組 合物可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)本文提供的說明、通過改良本領(lǐng) 域內(nèi)己知的傳統(tǒng)方法容易地制造。
0011本發(fā)明的另一方面涉及藥用化妝品(cosmeceutical)組合
物。所述藥用化妝品組合物包括與分離的藻膽素混合的化妝品物質(zhì)。 在優(yōu)選的實施方式中，所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、 植物生色膽素，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白的肽 片段。本發(fā)明的該方面，即，藥用化妝品組合物包含與分離的藻膽素 混合的化妝品物質(zhì)，可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)本文提供的說明、 通過改良本領(lǐng)域內(nèi)己知的傳統(tǒng)方法容易地制造。
0012本發(fā)明的另一方面涉及預(yù)防或治療對象的與NADPH氧 化酶活性相關(guān)或有關(guān)的醫(yī)學狀況的方法。所述方法包括步驟以預(yù)防 或治療有效量給對象施用一種或多種分離的藻膽素，用于預(yù)防或治療 與NADPH氧化酶活性相關(guān)或有關(guān)的醫(yī)學狀況。所述醫(yī)學狀況可以選 自缺血性心臟病、心肌梗死、中風、外周動脈粥樣硬化、腦血管硬化、左心室肥厚、充血性心力衰竭、高動脈壓、肺動脈高壓、勃起機能障礙、代謝綜合癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病變、腎小球硬化癥、肺氣腫、哮喘、變態(tài)反應(yīng)、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、胃潰瘍、敗血癥性休克、纖維化、肺纖維化、肝纖維化、帕金森氏病、阿爾茨海默病性癡呆、對皮膚的紫外損害、癌癥、類風濕性關(guān)節(jié)炎、潰瘍性結(jié)腸炎、硬皮病、病理性血管發(fā)生、移植排斥和慢性疼痛綜合癥/痛覺增敏。在本發(fā)明的此方面的優(yōu)選方式中，藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白肽片段。所述藻膽素可以口服、腸胃外或局部施用。
附圖簡述
0013

圖1A和1B說明了藻膽素提取物對人動脈內(nèi)皮細胞中的NADPH氧化酶的抑制。源自動脈內(nèi)皮的人細胞培養(yǎng)物與NADPH溫育，以通過細胞NADPH氧化酶誘導(dǎo)過氧化物產(chǎn)生。通過光澤精化學發(fā)光(lucigeninchemiluminescence)量化過氧化物的產(chǎn)生。光澤精是過氧化物的特異檢測劑。二亞苯基碘鏞(Diphenyleneiodonium)——一種已知的NADPH氧化酶抑制劑——顯示完全抑制由加入的NADPH誘導(dǎo)的過量過氧化物產(chǎn)生。以300 nM至20 范圍的濃度將藻藍膽素(PCB,圖1A)或膽綠素(BVD，圖1B)加入到NADPH處理的細胞培養(yǎng)物中。膽綠素是另一已知的NADPH氧化酶抑制劑。藻藍膽素和膽綠素都顯示出對NADPH氧化酶過氧化物產(chǎn)生的劑量依賴性抑制。20 pM藻藍膽素對人動脈內(nèi)皮細胞中的NADPH氧化酶活性的抑制效果與DPI的抑制效果相當。
0014圖2A和圖2B說明了藻膽素提取物對人動脈平滑肌細胞中NADPH氧化酶的抑制。源自動脈平滑肌的人細胞培養(yǎng)物與NADPH溫育，以通過細胞NADPH氧化酶誘導(dǎo)過氧化物的產(chǎn)生。通過光澤精化學發(fā)光量化過氧化物的產(chǎn)生。光澤精是過氧化物的一種特異檢測劑。二亞苯基碘絲、——- -種已知的NADPH氧化酶抑制劑——顯示完全抑制由加入的NADPH誘導(dǎo)的過量過氧化物的產(chǎn)生。以300 nM至20 (iM
10范圍的濃度將藻藍膽素(PCB，圖2A)或膽綠素(BVD,圖2B)加入到NADPH處理的細胞培養(yǎng)物中。膽綠素是另一已知的NADPH氧化酶抑制劑。藻藍膽素和膽綠素都顯示出對NADPH氧化酶過氧化物產(chǎn)生的劑量依賴性抑制。20 |iM藻藍膽素對人動脈平滑肌細胞中的NADPH氧化酶活性的抑制效果與DPI的抑制效果相當。
0015圖3A和圖3B說明了藻膽素提取物對人腎系膜細胞中NADPH氧化酶的抑制。源自腎系膜組織的人細胞培養(yǎng)物與NADPH溫育，以通過細胞NADPH氧化酶誘導(dǎo)過氧化物的產(chǎn)生。通過光澤精化學發(fā)光量化過氧化物產(chǎn)物。光澤精是過氧化物的一種特異檢測劑。二亞苯基碘絲、—一種已知的NADPH氧化酶抑制劑——顯示完全抑制由加入的NADPH誘導(dǎo)的過量過氧化物的產(chǎn)生。以300 nM至20 |aM濃度的范圍將藻藍膽素(PCB,圖3A)或膽綠素(BVD,圖3B)加入到NADPH處理的細胞培養(yǎng)物中。膽綠素也起抑制NADPH氧化酶的作用，因為其在細胞內(nèi)被轉(zhuǎn)化為膽紅素。藻藍膽素和膽綠素都顯示出對NADPH氧化酶過氧化物的產(chǎn)生的劑量依賴性抑制。20 )aM藻藍膽素對人腎系膜細胞中的NADPH氧化酶活性的抑制效果小于DPI的抑制效果，但具有統(tǒng)計學意義。
0016圖4A和圖4B說明了由膽綠素還原酶介導(dǎo)的膽綠素和藻膽素到膽紅素和藻玉紅素的轉(zhuǎn)化。圖4A描述了膽綠素和主要的藻膽素藻藍膽素、植物生色膽素和藻紅膽素的同源化學結(jié)構(gòu)。圖4B描述了膽紅素和藻玉紅素藻藍玉紅素(phycocyanombin)、植物生色玉紅素(phytochromombin)和藻紅玉紅素(phycoerythrorubin)的同源化學結(jié)構(gòu)。箭頭代表存在于哺乳動物細胞中的膽綠素還原酶的催化活性。
發(fā)明詳述
0017本文公開了藻玉紅素直接并有效地抑制NADPH氧化酶，以及當藻膽素被施用給哺乳動物對象或以另外的方式被放置與膽綠素還原酶接觸時被轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。因此，藻膽素起前體藥物或藻玉紅素的前體的作用并且可以用于預(yù)防或治療與NDPH氧化酶活性相關(guān)或有關(guān)的醫(yī)學狀況。
0018藻膽素是在植物、藻類和藍細菌中發(fā)現(xiàn)的發(fā)色團化合物 家族。在此應(yīng)用的優(yōu)選的藻膽素包括藻藍膽素、藻紅膽素和植物生色 膽素。實際上，藻膽素共價結(jié)合到脫輔基蛋白質(zhì)_匕；得到的全蛋白質(zhì)， 稱為藻青蛋白，其具有獲取光能的作用。
1.定義
0019NADPH氧化酶是指將還原形式的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 磷酸(NADP)氧化，同時使分子氧還原為過氧化物的酶復(fù)合物。
0020如本文所定義的，術(shù)語"分離的"表示目標化合物(一種 或多種)已經(jīng)基本上從其實際存在的周圍環(huán)境中純化出來。例如，實 際..匕，藻膽素結(jié)合到脫輔基蛋白質(zhì)上，其中所述脫輔基蛋白結(jié)合形式 是指藻青蛋白，因此，在本文的一個實施方式中，分離的表示將藻膽 素連接到藻青蛋白脫輔基蛋白的硫醚鍵已經(jīng)斷裂，并且得到的游離藻 膽素被提取和濃縮，以使得到的濃縮物基本上不含藻青蛋白全蛋白或 脫輔基蛋白。
0021如本文所定義的，術(shù)語"藻化學組合物"表示源自植物或 果實的組合物。
0022如本文所定義的，術(shù)語"營養(yǎng)食品組合物"表示要求對人 的健康具有醫(yī)學作用的已加工食品，或可選地，具有傳統(tǒng)食品中存在 的化學成分的組合物。
0023如本文所定義的，術(shù)語"營養(yǎng)物質(zhì)"表示存在亍傳統(tǒng)食品 并且具有營養(yǎng)價值的化學成分。
0024如木文所定義的，術(shù)語"藥用化妝品組合物"表示要求對 人的健康具有醫(yī)學作用或藥物樣益處的化妝品。
0025如本文所定義的，術(shù)語"化妝品物質(zhì)"表示存在于傳統(tǒng)化 妝品的任何功能性化學成分，其賦予了化妝特性。
0026如本文所定義的，術(shù)語"局部施用"表示其中生物活性物 質(zhì)被應(yīng)用于皮膚的任何輸送方式。
0027如本文所定義的，術(shù)語"潤膚載體"表示能夠運送物質(zhì)并且外部應(yīng)用于皮膚從而軟化或緩和皮膚的任何載體或軟膏。通常，"潤 膚載體"通過防止或降低水分損失來軟化或緩和皮膚。大多數(shù)天然油執(zhí) 行該功能。對于制造能用于本發(fā)明的潤膚載體的傳統(tǒng)技術(shù)的評述，參
見Nair B. "Cosmetic Ingredients Review Expert Panel. Final report ..." /她m加'owa/ 7oi^"<3/Jbx/co/ogy. 22 Suppl 2: 11-35， 2003 。
0028如本文所定義的，術(shù)語"防曬劑"表示可通過反射、吸收 和/或散射紫外線A和B輻射來幫助保護皮膚免于陽光的有害射線的任 何物質(zhì)。
0029如本文所定義的，術(shù)語"膠囊"表示這樣的任何結(jié)構(gòu)，所 述結(jié)構(gòu)在藥品的制造中使用，用于將生物活性物質(zhì)封裝進相對穩(wěn)定的 殼中，使它們例如口服或用作栓劑。兩種主要類型的膠囊是硬殼膠囊， 其通常用于干的、粉末狀成分，和軟殼膠囊，其主要用于油或用于溶 解或懸浮在油中的活性成分。這兩種膠囊都具有凝膠包裝，其或從明 膠或從基于植物的凝膠化物質(zhì)制備，如角叉藻聚糖和/或改性形式的淀 粉、纖維素和功能相當?shù)奈镔|(zhì)。對于能用于實踐本文公開的本發(fā)明的 傳統(tǒng)包封技術(shù)的評述，參見Bill Bennett和Graham Cole (2003). 尸/zarm〃ceM"c"http://Vo^/mC/o"， Ewg/ween'wg Gw/cfe. IChemE， 126-129。
0030如本文所定義的，術(shù)語"片劑"表示通過傳統(tǒng)手段以粉末 被擠壓或壓緊成固體的活性物質(zhì)和賦形劑的任何混合物。賦形劑包括 確保有效制片的粘結(jié)劑、助流劑(流動輔助劑)和潤滑劑；保證片劑 在消化道中分解的崩解劑；掩蓋具有不良味道的活性成分的味道的甜 味劑或香料；以及使未包衣的片劑具有視覺吸引力的顏料?？梢詰?yīng)用 包衣以隱藏片劑成分的味道，使所述片劑更光滑并且更容易吞咽，并 且使其更耐環(huán)境，延長其儲存期限。
0031如本文所定義的，術(shù)語"適合注射的生理學上可接受的無 菌溶液"表示任何這樣的溶液，所述溶液在被注射到人類對象時是無害 的并且能夠攜帶并遞送感興趣的生物活性物質(zhì)。
0032在--種實施方式中，藻青蛋白被消化或部分消化(例如， 用胰蛋白酶或其它蛋白酶)，形成游離肽和結(jié)合到藻膽素上的肽，其 中基本純化的結(jié)合藻膽素的肽用于本發(fā)明的實施方式。在本實施方式中，分離的意味著分離的藻膽素組合物不包括結(jié)合到脫輔基蛋白—— 發(fā)現(xiàn)藻膽素天然地結(jié)合到其上——的完整多肽的藻膽素(除了在--種 實施方式中以痕量存在以外)。在關(guān)于肽藻膽素結(jié)合物的一種實施方 式中，所述肽的長度為100個氨基酸或更短。在關(guān)于肽藻膽素結(jié)合物 的 種實施方式中，所述肽的長度為75個氨基酸或更短。在關(guān)于肽藻
膽素結(jié)合物的一種實施方式中，所述肽的長度為50個氨基酸或更短。 在關(guān)于肽藻膽素結(jié)合物的一種實施方式中，所述肽的長度為25個氨基 酸或更短。在關(guān)于肽膽氮素結(jié)合物的一種實施方式中，所述肽的長度 為0個氨基酸或更短。
0033基本純化表示目標化合物(-- 種或多種)占含有所述目 標化合物(一種或多種)的組合物的千重的至少15%或以上。在一種 實施方式中，基本純化表示目標化合物(一種或多種)占含有所述目 標化合物(一種或多種)的組合物干重的至少25%或以上。在-一種實 施方式中，分離的表示目標化合物(一種或多種)占含有所述目標化 合物(一種或多種)的組合物干重的50%或以.匕在一種實施方式中， 分離的表示目標化合物(一種或多種)占含有所述目標化合物(一種 或多種)的組合物千重的75%或以上。在--種實施方式中，分離的表 示目標化合物(一種或多種)占含有所述目標化合物(-一種或多種) 的組合物千重的90%或以上。在一種實施方式中，分離的表示目標化 合物(-一種或多種)占含有所述目標化合物(一種或多種)的組合物 干重的95%或以上。在一種實施方式中，分離的表示目標化合物(一 種或多種)是基本上純的。
0034在一種實施方式中，治療有效量是抑制5%或以.h的 NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中，治療有效量是抑制10% 或以上的NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中，治療有效量 是抑制15%或以上的NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中， 治療有效量是抑制20%或以上的NADPH氧化酶活性的量。在一種實 施方式中，治療有效量是抑制25%或以—t:的NADPH氧化酶活性的量。 在一種實施方式中，治療有效量是抑制30%或以上的NADPH氧化酶 活性的量。在 -種實施方式中，治療有效量是抑制40%或以上的NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中，治療有效量是抑制50% 或以一 匕的NADPH氧化酶活性的量。
0035在一種實施方式中，治療有效量是每天施用1 mg至 5000mg的一種或多種藻膽素或-一種或多種肽-藻膽素結(jié)合物。在一種實 施方式中，治療有效量是每天施用1 mg至2000mg的 種或多種藻膽 素或一種或多種肽-藻膽素結(jié)合物。在一種實施方式中，治療有效量是 每天施用1 mg至lOOOmg的一種或多種藻膽素或一種或多種肽-藻膽素 結(jié)合物。在一種實施方式中，治療有效量是每天施用100mg至5000mg 的一種或多種藻膽素或一種或多種肽-藻膽素結(jié)合物。在一種實施方式 中，治療有效量是每天施用100 mg至2000mg的一種或多種藻膽素或 一種或多種肽-藻膽素結(jié)合物。
0036在一種實施方式中，預(yù)防量是抑制5%或以上的NADPH 氧化酶活性的量。在一種實施方式中，預(yù)防量是抑制10%或以—匕的 NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中，預(yù)防量是抑制15%或以 匕的NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中，預(yù)防量是抑制20% 或以.匕的NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中，預(yù)防量是抑 制25%或以上的NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中，預(yù)防 量是抑制30%或以上的NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方式中， 預(yù)防量是抑制40%或以—匕的NADPH氧化酶活性的量。在一種實施方 式中，預(yù)防量是抑制50%或以上的NADPH氧化酶活性的量。
0037在一種實施方式中，預(yù)防量是每天施用1 mg至5000mg 的- 種或多種藻膽素或--種或多種肽-藻膽素結(jié)合物。在-- 種實施方式 中，預(yù)防量是每天施用1 mg至2000mg的一種或多種藻膽素或一種或 多種肽-藻膽素結(jié)合物。在一種實施方式中，預(yù)防量是每天施用1 mg 至1000mg的一種或多種藻膽素或一種或多種肽-藻膽素結(jié)合物。在一 種實施方式中，預(yù)防量是每天施用100 mg至5000mg的-"種或多種藻 膽素或--種或多種肽-藻膽素結(jié)合物。在一種實施方式l:l::l，預(yù)防量是每 天施用100 mg至2000mg的---種或多種藻膽素或一種或多種肽-藻膽素 結(jié)合物。
0038狀況是任何醫(yī)學疾病、病癥、綜合癥等。
152.膽紅素是NADPH氧化酶活性的抑制劑并且在與NADPH氧化 酶活性產(chǎn)生的氧化應(yīng)激有關(guān)的狀況的治療和/或預(yù)防中有用
0039NADPH氧化酶的生理抑制劑是膽紅素(Lanone S等人， FASEB J 2005; 19: 1890-2; Mats翻to H等人，Mol Cell Biochem 2006; Apr20epub; Jiang F等人，Hypertension 2006; 48: 1-8)，其在體內(nèi) 通過膽綠素還原酶由膽綠素還原產(chǎn)生。膽綠素又通過血紅素加氧酶的 活性產(chǎn)生，所述血紅素加氧酶將血紅素轉(zhuǎn)變?yōu)槟懢G素、 一氧化碳和游 內(nèi)tf、J I- ij^、 r勾丁 o
0040膽紅素對NADPH氧化酶的有效抑制活性——以納摩爾 細胞內(nèi)濃度觀測——在眾多的流行病研究中得到反映，所述流行病研 究將增加的血清游離膽紅素水平與降低的動脈粥樣硬化疾病和癌癥的 風險聯(lián)系起來(Schwertner HA等人，Clin Chem 1994; 40: 18-23; NovotnyL等人，Exp Biol Med 2003; 228: 568-71; Temme EH等人， Cancer Causes Control 2001; 12: 887-94; Zucker SD等人，H印atology 2004; 40: 827-35; ChingS等人，JNutr2002; 132: 303-6)。例如， 在稱為吉耳伯綜合癥(Gilbert syndrome)的人遺傳性變型中，1A1型 肝UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(膽紅素結(jié)合的主要介質(zhì))的表達降低導(dǎo)致 血清游離膽紅素數(shù)倍增力卩，這與冠狀動脈風險的顯著降低相關(guān)(VitekL 等人，Atherosclerosis 2002; 160: 449-56; VitekL等人，Cerebrovascular Dis2006; 21: 408-14)。而且，血紅素加氧酶-1基因(HO-l，血紅素 加氧酶的可誘導(dǎo)形式)的高表達多態(tài)現(xiàn)象與其中氧化劑起關(guān)鍵發(fā)病作 用的病癥的風險降低相聯(lián)系，這反映了在包括血管疾病、癌癥和炎癥 相關(guān)病理的病癥中升高的膽紅素組織水平提供的保護(Shibahara S, Tohoku J ExpMed2003; 200: 167-86; ExnerM等人，F(xiàn)ree Radical Biol Med 2004; 37: 1097-1104; Kikuchi A等人，Hum Genet 2005; 116: 354-60)。引入注意的是，己經(jīng)將HO-l的高表達多態(tài)現(xiàn)象與日本人口 的總體壽命增加相聯(lián)系(Yamaya M等人，J Med Genet 2003; 40.-146-80)。這些觀測結(jié)果表明NADPH氧化酶活性的部分抑制在治療和 /或預(yù)防與由NADPH氧化酶活性產(chǎn)生的氧化應(yīng)激有關(guān)的狀況中是有用 的。
10041膽綠素比膽紅素更可溶，并且在體內(nèi)可以被到處表達的
膽綠素還原酶有效地轉(zhuǎn)變?yōu)槟懠t素(Baranano DE等人，Proc Natl Acad Sci2002; 99: 16093; SedlakTW等人,Pediatrics 2004; 113: 1776-82)。 由于其溶解性，在口服施用后，膽綠素比膽紅素具有更大的生物利用 率，并且實際上，在可能由NADPH氧化酶的抑制介導(dǎo)的嚙齒動物研 究中，口服膽綠素已經(jīng)顯示出強有力的生理作用(Nakao A等人， Circulation 2005; 112: 587-91; Sarady-Andrews JK等人，Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2005; 289: LI 131-7; RodellaL等人，F(xiàn)ree Radic Biol Med 2006; 40: 2198-205; YamashitaK等人，F(xiàn)ASEBJ2004; 18: 765- 7; NakaoA等人，Gastroenterology 2004; 127: 595-606; Fondevila C等人，Hepatology 2004; 40: 1333-41; Nakao A等人，Am J Transplant 2005; 5: 282-91; Berbemt PO等人，Inflamm Bowel Dis 2005; 11: 350-9; OllingerR等人，Circulation 2005; 112: 1030-9)。
0042膽紅素的每日內(nèi)源產(chǎn)量為大約300-400 mg (Meyer UA, Schweiz Med Wochenschr 1975; 105: 1165-8)。除在內(nèi)源膽紅素和/或 膽綠素觀測到的抑制之外，施用外源膽紅素和/或膽綠素可以用于進一 步抑制NADPH氧化酶活性，并且因此能夠用于治療或防止與NADPH 氧化酶活性有關(guān)的狀況。然而，膽紅素和膽綠素的商業(yè)供應(yīng)是有限的， 因為膽紅素通常來源于牛膽汁，而膽綠素由復(fù)雜又昂貴的有機合成產(chǎn) 生。也就是說，膽綠素或者通過從頭合成或者通過氧化在先存在的膽 紅素來生產(chǎn)。后一策略對膽綠素在商業(yè)上可行不起作用，因為其依賴 于稀有的膽紅素。
0043本發(fā)明人己經(jīng)注意到，藻膽素是膽綠素的近似結(jié)構(gòu)類似 物，反映了這樣的事實藻膽素在生物合成上衍生自膽綠素或通過膽 紅素的氧化產(chǎn)生(見圖4)。進一步，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了這樣的證據(jù)藻膽 素是膽綠素還原酶的良好底物，所述膽綠素還原酶將它們轉(zhuǎn)變?yōu)榉Q為 藻玉紅素的化合物，所述藻玉紅素是膽紅素的近似類似物(TerryMJ等 人，JBiolChem 1993; 268: 26099-106)。
0044本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，部分地，以它們的藻膽素前體被施用給 哺乳動物細胞(其含有膽綠素還原酶)的藻玉紅素抑制細胞的NADPH氧化酶活性。這種發(fā)現(xiàn)由圖l、 2和3中的細胞培養(yǎng)研究所提供的數(shù)據(jù) 證明。
045因此，藻膽素在本發(fā)明的 一個實施方式l:::'用于抑制哺乳動 物細胞和組織中的活性氧種類的產(chǎn)生，并且在本發(fā)明的某些實施方式 中用于防止和/或治療與NADPH氧化酶活性有關(guān)的任何狀況。
0046而且，由于藻膽素占某些藍細菌如螺旋藻干重可達1% (PatelA等，Protein Express Purification 2005; 40: 248-55)，因此大
量生產(chǎn)它們是可行的。
0047如同膽紅素、膽綠素和數(shù)百種其它的藻化學物質(zhì)，已經(jīng) 報道藻膽素在無細胞體系中起通用氧化劑清道夫的作用(Hirata T等 人，J ApplPhycology2000; 12: 435-9)。然而，以前沒有藻膽素能夠 抑制NADPH氧化酶的報道或暗示。實際上，就發(fā)明人所知，沒有這 樣的在先研究，其中分離的藻膽素被施用給人類、動物或哺乳動物細 胞培養(yǎng)物。同樣，也沒有分離的藻膽素能被用在膳食補充劑、功能食 品或化妝品|::::戶的在先暗示。
0048植物沒有膽綠素還原酶。哺乳動物細胞和組織廣泛表達 膽綠素還原酶。
3.藻膽素組合物
0049藻膽素組合物可以本領(lǐng)域內(nèi)已知的任何方式(包括，例 如通過傳統(tǒng)的混合、溶解、?；?、糖衣制造、乳化、膠囊化、封裝、 凍千或懸浮方法)制造。優(yōu)選的是，制造是根據(jù)Good Manufecturing Practice進行的，其程序和規(guī)則在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的。在一種實施方式 中，藻膽素是食品級。在--- 種實施方式中，藻膽素是人類食品級。
0050在某些實施方式中，藻膽素組合物被制造為進一步包括 藥學上可接受的載體、賦形劑、助劑、防腐劑或其它成分(本文總稱 為"藥學上可接受的載體")。術(shù)語"載體"于此是指"藥學上可接受的載 體"，并且包括食品級填充劑。優(yōu)選地，藥學上可接受的載體適合施 用給人或非人哺乳動物。用于配制和施用藥物組合物的技術(shù)的進 步 詳細資料可'以在Remington's Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co., Easton, PA)的最新版本中發(fā)現(xiàn)。
180051流體載體可以包括水溶液，優(yōu)選地為在生理相容的緩沖 液(例如，漢克斯液、林格溶液或生理緩沖鹽水)中。流體載體也包 括非水的和油性懸浮液。合適的親脂性溶劑或載體可以包括脂肪油(例 如，芝麻油、合成的脂肪酸酯、油酸乙酯、甘油三酯或脂質(zhì)體)。有 用的脂質(zhì)體包括陽離子脂質(zhì)體、陰離子脂質(zhì)體和帶有中性電荷密度的 脂質(zhì)體。粘度增強劑可以被包括(例如，羧甲基纖維素鈉、山梨醇或 葡聚糖)。穩(wěn)定劑、粘合劑或增加溶解度的劑也可以被包括。另外的 惰性成分可以包括阿拉伯樹膠、糖漿、羊毛脂或淀粉的任一種或全部。
可以使用的另一種賦形劑是聚乙二醇(PEG) 。 PEG可以與所述制劑 混合或連接到藻膽素分子本身。PEG可以用作例如脫水劑或濃縮劑。 從而，載體可以是水性的、非水性的(疏水的)或兩性的。緩釋和/或 持續(xù)釋放載體和其藥物制劑在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的并且可以按照本公開 內(nèi)容用于本文的實施方式。
0052藻膽素組合物可以作為鹽提供，并且可以用酸(例如， 鹽酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、琥珀酸和類似物)形成。 在另一實施方式中，藻膽素組合物可以是凍千的粉末，其在使用前優(yōu) 選地與緩沖液結(jié)合。
0053藻膽素可以摻入洗液基質(zhì)、面膜基質(zhì)、洗發(fā)精基質(zhì)、調(diào) 理劑(conditioner)基質(zhì)、潤膚齊U (skintoner)基質(zhì)或其它的化妝品基 質(zhì)中，以形成包含藻膽素(或分離的藻膽素)的化妝品。含有藻膽素的 化妝品用于例如減輕頭發(fā)、皮膚和類似物的氧化損傷。
4. 施用藻膽素組合物
0054可以通過任何期望的途徑施用藻膽素組合物，所述期望 的途徑包括但不限于，口服、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、鼻的、氣管內(nèi)、關(guān)節(jié) 內(nèi)、動脈內(nèi)、髓內(nèi)、鞘內(nèi)、心室內(nèi)、經(jīng)皮、皮下、腹膜內(nèi)、鼻內(nèi)、瘤 內(nèi)、腸內(nèi)、局部、舌下、陰道或直腸施用途徑。根據(jù)本發(fā)明，本領(lǐng)域 普通技術(shù)人員能夠選擇適合的將藻膽素組合物施用給對象的途徑。
5. 藻膽素組合物的劑量
0055根據(jù)本發(fā)明和本領(lǐng)域知識，藻膽素組合物的有效劑量的 確定完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力之內(nèi)。0056治療有效劑量或范圍最初可以在細胞培養(yǎng)分析或在動物 模型中進行估計；通常在小鼠、大鼠、兔、狗、豬或非人靈長類中進 行估計。動物模型也可以用亍確定優(yōu)選的濃度范圍和施用途徑。然后 這種信息可以用于對人類選擇優(yōu)選的劑量和施用途徑。
0057治療功效和毒性可以通過在細胞培養(yǎng)、實驗動物或其它 移植模型系統(tǒng)中的標準藥物程序來測定。例如，可以在模型系統(tǒng)中測 定ED50 (在50%的群體中治療有效的劑量)和LD50 (對50%的群體 致死的劑量)。毒性和治療效果之間的劑量比是治療指數(shù)，其可以被 表示為比率L:D50/ED50。具有大治療指數(shù)的藻膽素組合物是優(yōu)選的。 得自模型系統(tǒng)(一個或多個)的數(shù)據(jù)被用于獲得用于人使用的劑量范 圍。包含在這種組合物中的劑量優(yōu)選地在循環(huán)濃度范圍之內(nèi)，該循環(huán) 濃度包括具有低毒性或更優(yōu)選地基本上沒有毒性的ED50。因此，在對 象中使用的藻膽素組合物的劑量優(yōu)選地由專業(yè)人員根據(jù)與需要治療的 對象有關(guān)的因素來確定。
0058對劑量和給藥進行調(diào)節(jié)，以提供足夠量的活性部分(例 如循環(huán)濃度和/或局部濃度)或維持期望的效果?？梢钥紤]的因素包括 疾病狀態(tài)的嚴重性、對象的總體健康狀態(tài)、年齡、體重、性別、飲食、 給藥的時間和頻率、藥物聯(lián)合(一種或多種)、反應(yīng)靈敏度、治療耐 受性以及治療反應(yīng)。
0059下列實施例意在進一步解釋本發(fā)明的實施方式，而不是 限制本發(fā)明。
劑量考慮因素與螺旋藻和藻藍膽素比較
0060藻藍蛋白占螺旋藻總干重的大約14%;藻藍膽素(PCB) 提供了大約4,7。/。的藻藍蛋白質(zhì)量(Padyana AK等人，Crystal structure of a light-harvesting protein C-phycocyanin from Spirulina platensis. Biochem Biophys Res Commun 2001 April 13; 282(4): 893-8)?？衫斫?螺旋藻干重的大約0.66%為PCB。也就是說，15 g螺旋藻——接近- 大湯匙——含有大約100mgPCB。
0061假定在嚙齒動物和人類中螺旋藻-結(jié)合的PCB的吸收和代 謝相似，那么，臨床上有用的螺旋藻(和也許是PCB)的劑量用法可
20以通過顯示嚙齒動物中抗氧化功效的用法進行推斷來估計。這種劑量 推斷可以直接基于mg/kg進行。然而，在臨床實踐中，劑量通常通過 相對的身體表面積來調(diào)節(jié)，其與體重比的2/3次冪對應(yīng)。該后一標準顯 然產(chǎn)生低得多的校正因子。 一般使用的在這兩個標準之間的折中方法 是按照體重比的3/4次冪調(diào)節(jié)劑量；已經(jīng)發(fā)現(xiàn)當推斷哺乳動物種之間的
各種可定量代謝參數(shù)時，這提供了"最佳匹配"(Travis CC. Interspecies extrapolation in risk analysis.爿朋Sw/ er 6""w/to 1991; 27(4): 581-93; Darveau CA,等人，Allometric cascade as a unifying principle of body mass effects on metabolism.淑臟2002 May 9; 417(6885): 166-70; i)ndstedt L 等人，Use of allometry in predicting anatomical and physiological parameters of mammals.丄a6 Jm>w 2002 January; 36(1): 1-19)。如果將200 g大鼠與70 kg人比較，所述3/4次冪標準產(chǎn)生大 約80的校正因子；或如果將20g小鼠與70kg人比較，產(chǎn)生450的因 子。(也就是說，如果大鼠接受x mg某劑，對應(yīng)的人劑量將是80x mg。) 在大量的研究中，Romay和同事已經(jīng)報道，在50-300 mg/kg/天的劑量 范圍內(nèi)，口服施用給小鼠和大鼠的口服藻藍蛋白產(chǎn)生了許多劑量-依賴 性抗炎作用(Romay C等人，Antioxidant and anti-inflammatory properties of C-phycocyanin from blue-green algae， /"/7函w / es 1998 January; 47(1): 36-41; Romay C等人，Effects of phycocyanin extract on tu鵬.r necrosis factor-alpha and nitrite levels in serum of mice treated with endotoxin.」r2w< /w//te^bryc/2i/"g 2001 September; 51 (9): 733-6; Romay C等人，C-phycocyanin: a biliprotein with antioxidant, anti-inflammatory and neuroprotective effects. Cw/r iVo e/w尸e/^ Sc/ 2003 June; 4(3): 207-16; Rimbau V等人，Protective effects of C-phycocyanin against kainic acid-induced neuronal damage in rat hippocampus. ./Vewasa'丄e〃 1999 December 3; 276(2): 75-8)。這等于2.35-14.1 mg/kg的PCB攝入量。 如果基于mg/kg進行推斷，這對應(yīng)于70 kg的人每日攝入165-9卯mg。 根據(jù)3/4次冪標準的推斷給出了 21.2-127mg (采用小鼠)和37.6-226 mg (采用大鼠)的人每日攝入量。
0062近來的研究——其中完整螺旋藻被口服施用給嚙齒動物 ——也顯示出在150-1,000mg/kg/天的劑量范圍內(nèi)具有抗炎作用(Remirez D禽夸人，Inhibitory effects of Spirulina in zymosan-induced arthritis in mice. vVfed/ato^s /w/7"ww 2002 April; 11(2): 75-9; Rasool M 等人，Antiinflammatory effect of Spirulina fusiformis on adjuvant-induced arthritis in mice.腸/泡r附5w〃 2006 December; 29(12): 2483-7; Chamorro G等人，Spirulina maxima pretreatment partially protects against 1-methyl-4-phenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridine neurotoxicity. A^/r iVew7,oscz' 2006 October; 9(5-6): 207-12; Khan M等人，Protective effect of Spirulina against doxorubicin-induced cardiotoxicity./V^to/Zzer /Jes 2005 December; 19(12): 1030-7; Mohan IK等人，Protection against cisplatin-induced nephrotoxicity by Spirulina in rats. Cawcer CTzemo/Zzer i^/zarmaco/ 2006 December ; 58(6) : 802-8 ; Khan M, 等人，Spirulina attenuates cyclosporine-induced nephrotoxicity in rats. / J/ p/ 7b;c/co/ 2006 September; 26(5): 444-51)。這等于1-6.6 mg/kg/天的PCB攝入量。 基于相對體重進行推斷，這對應(yīng)于70 kg的人攝入70-462 mgPCB?；?于3/4次冪標準進行推斷，其對應(yīng)于9-59mg(小鼠研究)禾n 16-106 mg (大鼠研究)的攝入量。螺旋藻在其中顯示出保護功效的綜合癥包括佐劑 性關(guān)節(jié)炎(a4juvantarthritis)、 MPTP-誘導(dǎo)的帕金森病、阿霉素誘導(dǎo)的心 肌病以及由順鉑和環(huán)孢霉素介導(dǎo)的腎?。籒ADPH氧化酶的活化被顯示 是每一種這些綜合癥的重要調(diào)制劑不可能是巧合(BartBA等人，The newly developed neutrophil oxidative burst antagonist apocynin inhibits joint-swelling in rat collagen arthritis. Jgewte ^c"cws SMpp/ 1991; 32: 179-84; van Lent PL 等人，NADPH-oxidase-driven oxygen radical production determines chondrocyte death and partly regulates metalloproteinase-mediated cartilage matrix degradation during interferon-gamma畫stimulated immune complex arthritis. 77ze/-2005; 7(4): R885-R895; Miesel R等人，Antiinflammatory effects of NADPH oxidase inhibitors, /"y/awmaf/ow 1995 June; 19(3): 347-62; Hougee t亭人，Oral administration of the NADPH-oxidase inhibitor apocynin partially restores diminished cartilage proteoglycan synthesis and reduces inflammation in mice.五wr J PAarmaco/ 2006 February 15; 531(1-3): 264-9)。
0063如注意到的， 一大湯匙的螺旋藻包含大約100mgPCB。因而，每天兩大湯匙的用法——可論證地，這是對良好動機患者可行
的長期最高攝入量——將提供每日大約200mgPCB。該攝入量因而在
——并在一些情況下稍微超過——上述推斷的劑量范圍之內(nèi)。應(yīng)該理
解一一假定人類如嚙齒動物一樣消化和代謝螺旋藻結(jié)合的PCB——對 于人，每日2大湯匙螺旋藻的日攝入量應(yīng)該在臨床上具有有益的抗氧 化活性。盡管可能證明使用完整螺旋藻作為抑制NADPH氧化酶的策 略在臨床.匕是可行的，但是由于需要的高劑量螺旋藻的大體積以及惡 臭的氣味和味道，這帶來了實際困難。因此，需要提供分離的藻膽素 的補充劑。
實施例
1.藻膽素組合物的制備
0064如以前所述，采用熱甲醇萃取，從20g千的螺旋藻海藻 中制備藻藍膽素(OCarraP等人，Phytochemistry 1966; 5: 993-7)。
在室溫，用甲醇萃取海藻三次以除去葉綠素和類胡蘿卜素。過濾后， 固體——其仍然保留了蛋白結(jié)合的藻藍膽素一一被轉(zhuǎn)移到250ml的燒 瓶屮，懸浮在含有抗壞血酸(1.6g)的甲醇(160ml)中，并且在60t: 攪拌。在這些條件下，甲醇分解作用逐步使連接藻藍膽素與藻藍蛋白 脫輔基蛋白的硫醚鍵裂解。在8小時后，過濾的萃取物在40'C在減壓 條件下蒸發(fā)。殘余物溶解在小量的甲醇中并且加入到醋酸乙酯/己烷
(1/1)中；用O.lNHCl萃取有機相三次。用醋酸乙酯/己烷(1/1)洗 滌組合的酸萃取物并且用固體乙酸鈉中和；藍色顏料被萃取三次，進 入到醋酸乙酯/己烷中，并且用1%乙酸鈉洗滌組合的萃取物。然后從有 機相中再萃取藍色顏料，進入到o.l N HC1中并且最后萃取到氯仿
(50mlx2)中。所述氯仿萃取物在無水硫酸鈉上千燥并且在40。C在減 壓下蒸發(fā)。油性殘余物溶解在小量的醋酸乙酯中，轉(zhuǎn)移到小瓶(4ml) 中，并且用過量的己垸處理。將沉淀的顏料離心并將沉淀物重新溶解 在小量的醋酸乙酯中，并且再次用過量的己烷沉淀。在離心后，在高 寫空下干燥沉淀物。獲得12mg基本上純的藻藍膽素。
0065用Waters 600E HPLC系統(tǒng)，對獲得的藻藍膽素樣品進行
23分析C8柱(Varian),乙腈/磷酸銨(0.1 M， pH 2.5)為流動相，并 且在375nm進行檢測。該分析顯示出一種主要產(chǎn)物，藻藍膽素。
2. 藻膽素提取物抑制人動脈內(nèi)皮細胞中的NADPH氧化酶
0066源自動脈內(nèi)皮的人細胞培養(yǎng)物與NADPH —起溫育，以 通過細胞NADPH氧化酶誘導(dǎo)過氧化物的產(chǎn)生。通過光澤精化學發(fā)光 量化過氧化物的產(chǎn)生。光澤精是過氧化物的一種特定檢測劑。二亞苯 基碘錯——- 種已知的NADPH氧化酶抑制劑——顯示完全抑制由加 入的NADPH誘導(dǎo)的過量過氧化物的產(chǎn)生。按300 nM至20 范圍的 濃度將藻藍膽素(PCB，圖1A)或膽綠素(BVD，圖1B)加入到NADPH 處理的細胞培養(yǎng)物中。膽綠素是另一已知的NADPH氧化酶抑制劑。 藻藍膽素和膽綠素都顯示出對NADPH氧化酶過氧化物產(chǎn)生的劑量依 賴性抑制。20 (iM藻藍膽素對人動脈內(nèi)皮細胞中的NADPH氧化酶活性 的抑制效果與DPI的抑制效果相當。
0067實驗人動脈內(nèi)皮細胞購自Clonetics (East Rutherford, NJ)。 在補充有hFGF-B、 VEGF、 IGF-1、抗壞血酸hEGF、氫化可的松和2% 胎牛血清的內(nèi)皮細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(Clonetics)中培養(yǎng)內(nèi)皮細胞。在實驗 屮使用來自第二代至第五代的細胞。通過光澤精方法，測定過氧化物 陰離子的細胞產(chǎn)物。為了實驗，用胰蛋白酶/EDTA分離細胞，并且將 細胞重懸在含有140 mM NaCl、 5 mM KC1、 0.8 mM MgCl2、 1.8 mM CaCl2、 1 mM Na2HP04、 25 mM HEPES和1°/。葡萄糖的改良HEPES 緩沖液(pH7.2)中，并且與或不與各種濃度的藻藍膽素(PCB)或膽綠素 (BVD)溫育1小時，所述濃度為300 nM至20 ^M。在記錄前才將 NADPH (100 (iM)和適應(yīng)暗光的光澤精(5 (iM)加入到細胞懸浮液中。每 分鐘記錄光發(fā)射，記錄20分鐘并且將光發(fā)射表示為平均任意光單位/ 分鐘。實驗重復(fù)三次。在具有NAD(P)H氧化酶抑制的實驗中，在 NADPH加入前IO分鐘加入氯化二苯碘錯(DPI, 10-5 M)——NAD(P)H 氧化酶的抑制劑，并且記錄化學發(fā)光。這是第-^個采用人動脈內(nèi)皮細 胞觀察純化的藻藍膽素對NADPH氧化酶活性作用的實驗。
3. 藻膽素提取物抑制人動脈平滑肌細胞中的NADPH氧化酶0068源自動脈平滑肌的人細胞培養(yǎng)物與NADPH溫育，以通過細胞NADPH氧化酶誘導(dǎo)過氧化物的產(chǎn)生。通過光澤精化學發(fā)光量 化過氧化物的產(chǎn)生。光澤精是過氧化物的一種特異檢測劑。二亞苯基
碘錯——一種已知的NADPH氧化酶抑制劑——顯示完全抑制由加入 的NADPH誘導(dǎo)的過量過氧化物的產(chǎn)生。以300 nM至20 范圍的濃 度將藻藍膽素(PCB，圖2A)或膽綠素(BVD,圖2B)加入到NADPH 處理的細胞培養(yǎng)物中。膽綠素是另一己知的NADPH氧化酶抑制劑。 藻藍膽素和膽綠素都顯示出對NADPH氧化酶過氧化物產(chǎn)生的劑量依 賴性抑制。20 jaM藻藍膽素對人動脈平滑肌細胞中的NADPH氧化酶活 性的抑制效果與DPI的抑制效果相當。
0069實驗人動脈平滑肌細胞購自Clonetics (East Rutherford,
NJ)。在含有5%胎牛血清的平滑肌細胞生長培養(yǎng)基(Clonetics)中培養(yǎng) 平滑肌細胞。在實驗中使用來自第二代至第五代的細胞。通過光澤精 方法測定過氧化物陰離子的細胞產(chǎn)物。為了實驗，用胰蛋白酶/EDTA 分離細胞并且將細胞重懸在含有140 mM NaCl、 5 mM KCl、 0.8 mM MgCl2、 1.8mMCaCl2、 lmMNa2HP04、 25 mM HEPES禾ll 1%葡萄糖 的改良HEPES緩沖液(pH7.2)中，并且與或不與各種濃度的藻藍膽素 (PCB)或膽綠素(BVD)溫育1小時，所述濃度為300nM至20 MM。在 記錄前才將NADPH (100 pM)和適應(yīng)暗光的光澤精(5 [iM)加入到細胞 懸浮液中。每分鐘記錄光發(fā)射，記錄20分鐘并且將光發(fā)射表示為平均 任意光單位/分鐘。實驗重復(fù)三次。在具有NAD(P)H氧化酶抑制的實 驗中，在NADPH加入前10分鐘加入氯化二苯碘鎩、((DPI, lCT5 M) — 一NAD(P)H氧化酶的抑制劑，并且記錄化學發(fā)光。這是第一個采用人 動脈平滑肌細胞觀察純化的藻藍膽素對NADPH氧化酶活性作用的實
4.藻膽素提取物抑制人腎系膜細胞中的NADPH氧化酶
0070源自腎系膜組織的人細胞培養(yǎng)物與NADPH溫育，以通 過細胞NADPH氧化酶誘導(dǎo)過氧化物的產(chǎn)生。通過光澤精化學發(fā)光量 化過氧化物產(chǎn)物。光澤精是過氧化物的一種特異檢測劑。二亞苯基碘 镎——一種己知的NADPH氧化酶抑制劑一一顯示完全抑制由加入的 NADPH誘導(dǎo)的過量過氧化物的產(chǎn)生。以300 nM至20 |iM濃度的范圍將藻藍膽素(PCB,圖3A)或膽綠素(BVD，圖3B)加入到NADPH 處理的細胞培養(yǎng)物中。膽綠素是另一已知的NADPH氧化酶抑制劑。 藻藍膽素和膽綠素都顯示出對NADPH氧化酶過氧化物的產(chǎn)生的劑量 依賴性抑制。20 pM藻藍膽素對人腎系膜細胞中的NADPH氧化酶活性 的抑制效果小于DPI的抑制效果，但具有統(tǒng)計學意義。
0071實驗人系膜細胞購自Clonetics (East Rutherford, NJ)。 在含有5%胎牛血清的系膜細胞生長培養(yǎng)基(Clonetics)中培養(yǎng)系膜細 胞。在實驗中使用來自第二代至第五代的細胞。通過光澤精方法測定 過氧化物陰離子的細胞產(chǎn)物。為了實驗，用胰蛋白酶/EDTA分離細胞 并且將細胞重懸在含有140mMNaCl、 5mMKCi、 0.8mMMgCl2、 1.8 mM CaCl2、 1 mM Na2HP04、25 mM HEPES和1%葡萄糖的改良HEPES 緩沖液(pH7.2)中，并且與或不與各種濃度的藻藍膽素(PCB)或膽綠素 (BVD)溫育1小時，所述濃度為300 nM至20 |iM。在記錄前才將 NADPH (100 nM)和適應(yīng)暗光的光澤精(5 (iM)加入到細胞懸浮液中。每 分鐘記錄光發(fā)射，記錄20分鐘，并且將光發(fā)射表示為平均任意光單位 /分鐘。實驗重復(fù)三次。在具有NAD(P)H氧化酶抑制的實驗中，在 NADPH加入前10分鐘加入氯化二苯碘錯((DPI, 10—5 M)——NAD(P)H 氧化酶的抑制劑，并且記錄化學發(fā)光。這是第一個采用人腎系膜細胞 觀察純化的藻藍膽素對NADPH氧化酶活性作用的實驗。
與NADPH氧化酶活性有關(guān)或相關(guān)的醫(yī)學狀況
0072缺血性心臟病與NADPH氧化酶活性有關(guān)或相關(guān)。內(nèi)皮細胞、 血管平滑肌細胞和內(nèi)膜巨噬細胞|:=l，的NADPH氧化酶活性在作為這種 綜合癥的基礎(chǔ)的冠狀動脈粥樣硬化的誘導(dǎo)中發(fā)揮了主要作用。已知許 多缺血性心臟病的危險因素——包括LDL膽固醇、C-反應(yīng)蛋白和同型 半胱氨酸的血清水平升高以及高動脈壓——可激活血管內(nèi)皮細胞|::1:'的 NADPH氧化酶。引起的氧化應(yīng)激增加促進了內(nèi)膜發(fā)炎，部分地通過增 加內(nèi)皮細胞中的NF-kB活化，并且也通過拮抗---氧化氮的保護性抗炎、 抗肥大和抗血栓形成活性來進行。血管氧化應(yīng)激也促進LDL的氧化。 與藻膽素潛在的抗動脈粥樣硬化活性相一致，已經(jīng)報道，給膽固醇喂 養(yǎng)的倉鼠喂養(yǎng)藻藍蛋白相當顯著地抑制動脈脂肪條紋的產(chǎn)生。而且，
26在患有吉耳伯綜合癥(特征為升高的游離膽紅素血漿水平的遺傳變型) 的人中冠狀動脈疾病顯得相對少。對冠狀動脈疾病，科學家專家之間 的普遍一致意見是NADPH氧化酶的藥理學抑制對于預(yù)防和治療這種
綜合癥具有相當大的潛能。(SoccioM等人，Eur J Clin Invest 2005; 35: 305-14; Cai H等人，7>ewA尸/2"rwac0/2003; 24: 471-8; Rueckschloss U等人，^ "oxWofojcS一a/2003; 5: 171-80; GriendlingKK等人， Oci &y2000; 86: 494-501; MeyerJW等人，F(xiàn)E5S丄e" 2000; 472: l陽4; RissJ等人，J」gn'cfboJO^m2007; 55: 7962-7; VitekL等人， Jj^era'sc/eras^ 2002; 160: 449-56; VitekL等人，Cere6rawwc i)^ 2006; 21: 408-14)。
0073心肌梗死與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。雖然 NADPH的活化通過促進這種綜合癥的先決條件的冠狀動脈粥樣硬化， 明顯地加大心肌梗塞的風險，但是其也可以通過促進斑塊的不穩(wěn)定性
(部分地反映了由氧化劑引起的巨噬細胞-來源的蛋白水解酶的活化) 和血小板聚集來更劇烈地促成梗塞。血小板屮NADPH氧化酶的活化 有助于聚集過程，并且來自內(nèi)皮的NADPH氧化酶源的過氧化物也較 少直接地通過拮抗一氧化氮的血小板穩(wěn)定活性來促進血小板聚集。而 且，已知內(nèi)皮和浸潤炎癥細胞中的NADPH氧化酶的活化是缺血-苒灌 注損傷的介質(zhì)，所述缺血-再灌注促進了梗塞區(qū)域中的心肌細胞的死亡。
(Chan讓KM, Arterioscler Th麵b Vase Biol 2002; 22: 1751-2; Rupin A等人，Cardiovascular Res 2004; 63: 323-30; Chlopicki S等人，Antiox Redox Signal 2004; 6: 691-8; Herkert O等人，Antiox Redox Signal 2004; 6: 765-76)。
0074中風與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。盡管腦血管 動脈中NADPH氧化酶的活化大大地促成了這些動脈的結(jié)構(gòu)重塑，所 述結(jié)構(gòu)重塑促成缺血和可能的出血性中風的發(fā)生，但是在梗塞的腦組 織以及浸潤白細胞內(nèi)的NADPH氧化酶的活化也促進了腦神經(jīng)元的損 失和其導(dǎo)致的功能不全。因而，在具有NADPH氧化酶活性遺傳缺陷， 或用NADPH氧化酶抑制藥物如夾竹桃麻素或他汀類(statin)預(yù)先處 理的嚙齒動物中，在短暫的缺血誘導(dǎo)之后觀察到的腦組織損傷不是特別嚴重。也有可能血小板中的NADPH氧化酶活化促成引發(fā)缺血性中
風的血栓的形成。(WalderCE等人，Stroke 1997; 28: 2252-8; Wang Q等人，Brain Res 2006; 1090: 182-9; Miller AA等人，Brain Res 2006; 1111: 111-6; HongH等人，Am J Physiol Heart Circ Physiol 2006; Jun
9電子版)。
0075外周和腦動脈硬化與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。 雖然NADPH氧化酶活化明顯地是冠狀動脈粥樣化形成的重要介質(zhì)， 但是也有可能是外周動脈——如在糖尿病患者和吸煙者中通常遇到的 ——和腦動脈中動脈粥樣化形成的關(guān)鍵介質(zhì)。(Meyer JW等人，F(xiàn)EBS Lett 2000; 472: 1-4)。
0076左心室肥厚(left ventricular hypertrophy)與NADPH氧
化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。在左心室肥厚(LVH)的過程中，心肌細胞 以及血管內(nèi)皮細胞中的NADPH氧化酶變得活化。有力的證據(jù)是所產(chǎn) 生的氧化應(yīng)激在細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的活化中發(fā)揮了至關(guān)重要的作 用，所述信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑促進心肌細胞肥大、間質(zhì)纖維化以及產(chǎn)生的心 室重塑。(LiJM等人，Hypertension 2002; 40: 477-84; Byrne JA等 人，Circ Res 2003; 93: 802-5; Murdoch CE等人，Cardiovasc Res 2006; 71: 208-15)。
0077充血性心力衰竭與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。 氧化應(yīng)激，其在很大程度上起源于NADPH氧化酶，也是心功能不全 ——收縮和舒張效率降低——的介質(zhì)，其特征是LVH患者的心力衰竭 的失代償相。(Murdoch CE等人，Curr Opin Pharmacol 2006; 6: 148-53; MacCarthyPA， Circulation 2001; 104: 2967-74; Takayama T等人，Circ J 2004; 68: 1067-75; Heymes C等人，J Am Coll Cardiol 2003; 41: 2164-710)。
0078高動脈壓與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。通常在 高動脈壓中觀察到內(nèi)皮細胞和血管平滑肌細胞中NAPDH氧化酶的活 化增加，并且所述NAPDH氧化酶的活化增加通過拮抗一氧化氮的血 管舒張作用來促使血壓升高。這種氧化應(yīng)激也是血管緊張素II信號轉(zhuǎn) 導(dǎo)的介質(zhì)，并且促進經(jīng)常加重長時間高血壓的內(nèi)側(cè)肥厚。在腦中，調(diào)
28節(jié)交感神經(jīng)活性的中樞中NADPH氧化酶的活化促進了交感神經(jīng)活性 ——與肥胖有關(guān)的高血壓的關(guān)鍵介質(zhì)——的升高。在患有吉耳伯綜合
癥的對象中高血壓顯得非常稀少(Touyz RM等人，Histochem Cell Biol 2004; 122: 339-52; Touyz RM等人，Clin Exp Pharmacol Physiol 2003; 24: 471-8; MorawietzH等人，Biochem Biophys Res Comm 2001; 285: 1130-5; JungO等人，Circulation 2004; 109: 1795-801; ZalbaG等人， Hypertension 2001， 38: 1395-9; WangHD等人，Circ Res 2001; 88: 947-53; VitekL等人，Atherosclerosis 2002; 160: 449-56)。
0079肺動脈高壓與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。當慢 性組織缺氧誘導(dǎo)肺動脈高壓時，肺部內(nèi)動脈中的NADPH氧化酶的活 性和表達升高。這種氧化應(yīng)激促成肺血壓以及相關(guān)的肺動脈和右心室 肥大性重塑增加；因而，當具有NADPH氧化酶遺傳缺陷的小鼠被暴 露于慢性組織缺氧時，這些現(xiàn)象基本上減少。用歧化過氧化物的藥劑 處理在這方面也是保護性的。(Liu JQ等人，Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2006; 290: L2-10; BrennanLA等人，Circ Res 2003; 92: 683-91 )。
0080勃起機能障礙與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。血 管源的勃起機能障礙(ED)——最普通的形式——反映了一氧化氮介 導(dǎo)的血管舒張的相對失效。用于治療ED的藥物典型地通過抑制cGMP (- 氧化氮的血管舒張活性的關(guān)鍵介質(zhì))的分解代謝來補償這種缺陷。 目前的證據(jù)是血管源的ED與陰莖脈管系統(tǒng)中增加的氧化應(yīng)激有關(guān)，并 且NADPH氧化酶可能是這種應(yīng)激的主要來源。而且，這種氧化應(yīng)激 在很大程度上是脈管性ED中的一氧化氮的生物活性相對失效的原因。 該模型理論上解釋了與血管風險因素如高脂血癥、高血壓和糖尿病相 關(guān)的ED風險大增。(Koupparis A等人，BJU Int 2004; 94: 257-8; Jeremy JY等人，J Urol 2006; 175-1175-6; Jeremy JY等人，Int J Impot Res 2006; Octl9電子出版)。
0081代謝綜合癥與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。NADPH 氧化酶的過度活化在代謝綜合癥的發(fā)生和病理并發(fā)癥中起了關(guān)鍵的作 用。最近的證據(jù)是在肥大的脂肪細胞中發(fā)展的胰島素抵抗——并且其 通過促進游離脂肪酸過度暴露和脂肪細胞因子的失調(diào)誘導(dǎo)系統(tǒng)性胰島素抵抗 -一一依賴于由活化的NADPH氧化酶介導(dǎo)的脂肪細胞氧化應(yīng)激 的增加。因此，夾竹桃麻素處理改善了在超重的脂肪喂養(yǎng)小鼠中的胰 島素抵抗綜合癥。而且，作為胰島素抵抗綜合癥特征的游離脂肪酸過
度暴露激活血管內(nèi)皮中的NAPDH氧化酶，因而促進了與胰島素抵抗 綜合癥有關(guān)的血管風險的顯著增加。胰島素抵抗對象中胰腺P細胞內(nèi) 的NAPDH氧化酶的過度活化可能促成了可導(dǎo)致II型糖尿病的P細胞 功能障礙的發(fā)病。(Talior 1等人，Am J Physiol Endocrinol Metab 2005; 288: E405-ll; FumkawaS等人，J Clin Invest 2004; 114: 1752-61; InoguchiT等人，Curr Drug Targets 2005; 6: 495-501; DelboscS等人， Atherosclerosis 2005; 179: 43-9; Roberts CK等人，Metabolism 2006; 55: 928-34)。
0082糖尿病并發(fā)癥——視網(wǎng)膜病、神經(jīng)病、腎病與NADPH
氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。葡萄糖和游離脂肪酸的同時升高——如在 糖尿病中特征性見到的——通過增加蛋白激酶C的各種亞型的活性， 促進葡萄糖可滲透細胞(包括血管內(nèi)皮、視網(wǎng)膜周皮細胞和腎間充質(zhì) 細胞)中的NAPDH氧化酶的慢性活化。所產(chǎn)生的氧化應(yīng)激是糖尿病 的一些最重要長期并發(fā)癥——包括視網(wǎng)膜病、神經(jīng)病、腎病和致動脈 粥樣硬化的血管疾病的關(guān)鍵介質(zhì)。因而，已經(jīng)顯示，抑制NADPH氧 化酶的藥劑——包括夾竹桃麻素——在糖尿病嚙齒動物中可防止系膜 增生并且改善神經(jīng)功能障礙。最近的流行病學研究顯示，與沒有患吉 耳伯綜合癥(與緩慢升高的游離膽紅素水平有關(guān))的糖尿病患者相比， 視網(wǎng)膜病、腎功能不全和冠狀動脈疾病在患有該綜合癥的糖尿病患者 中少幾乎80%。由于游離的膽紅素在生理—...匕起抑制NADPH氧化酶的 作用，這構(gòu)成了強有力的間接證據(jù)，即NADPH氧化酶活化是人類中 糖尿病并發(fā)癥的主要介質(zhì)。(InoguchiT等人，Curr Dmg Targets 2005; 6: 495-501; InoguchiT等人，J Am Soc Nephrol 2003; 14: S227-32; Manea A等人，Biol Cell 2005; 97: 123-34; Ushio-Fukai M等人， Mol Cell Biochem 2004; 264: 85-97; Cotter MA等人，Life Sci 2003; 73: 1813-24; CoppeyLJ等人，F(xiàn)ree Radical Res 2003; 37: 33-400; LiJM等人，J Am Soc Nephrol 2003; 14: S221-6; XiaL等人，Am J Physiol Renal Physiol 2005; 290: F345-56; Lee HB等人，J Am SocNephrol 2003; 14: S241-5; InoguchiT等人，JAMA 2007; 298: 1398-400)。
0083腎小球硬化癥與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。間 充質(zhì)細胞中NADPH氧化酶的活化在與慢性高血壓或自身免疫性疾病 有關(guān)的腎小球硬化癥中起致病作用。這種肥大性反應(yīng)主要由增加的轉(zhuǎn) 化生長因子-|3活性介導(dǎo)；由NADPH氧化酶產(chǎn)生的氧化應(yīng)激在TGF-卩 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起關(guān)鍵作用，并且也對增加這種激素的表達產(chǎn)生作用。而 且， 一氧化氮的抗肥大活性被氧化應(yīng)激所拮抗。(ModlingerPS等人， Semin Nephrol 2004; 24: 354-65; Kondo S等人，J Am Soc Nephrol 2006; 17: 783-94; YangZZ等人，Kidney Int 2003; 63: 1012-20; McCarty MF, Med Hypoth 2006; 67: 1277-96)。
0084肺氣腫與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。NADPH氧 化酶來源的氧化劑也在與長期吸煙有關(guān)的肺氣腫中起致病作用。因而， 夾竹桃麻素阻止了香煙煙霧在人氣道上皮tl暴露而誘導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白 酶-12的能力；已知這種蛋白酶是肺氣腫嚙齒動物模型中蛋白水解損傷 的關(guān)鍵介質(zhì)。同樣，在肺氣腫倉鼠模型中——其通過氣管內(nèi)輸入脂多 糖誘導(dǎo)，夾竹桃麻素處理可幫助保持分泌性白細胞蛋白酶抑制劑的活 性，其起控制肺蛋白水解活性的作用；這種現(xiàn)象反映了這樣的事實 氧化劑能夠使這種關(guān)鍵的蛋白酶抑制劑失活。(Stolk J等人，Am J RespirCrit Care Med 1994; 150: 1628-31; LavigneMC等人，Biochem Biophys Res Comm 2005; 330: 194-203)。
0085哮喘與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。NADPH氧化 酶活化在哮喘炎癥的許多階段中起介導(dǎo)作用肥大細胞的活化(使組 胺能夠分泌并且使白三烯能夠產(chǎn)生)，VCAM-介導(dǎo)的嗜曙紅細胞到肺 組織中的遷移，嗜曙紅細胞和嗜中性粒細胞的促炎活性以及在慢性哮 喘中促進肺重塑的氣道平滑肌細胞的高增殖。臭氧暴露以刺激哮喘患 者中支氣管收縮反應(yīng)的能力主要地通過吸入夾竹桃麻素來改善。在患 有嚴重慢性哮喘的患者中，當血清膽紅素水平由于急性乙型肝炎而增 加時，癥狀中的臨時實質(zhì)改善是顯著的；當膽紅素水平回到正常時， 肺功能再次惡化。(Hoidal JR等人，Antiox Redox Signal 2003; 5: 751-8;
31Brar SS等人，Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2002; 282: L782-95; Peters EA等人，F(xiàn)ree Radic Biol Med 2001; 31: 1442-7; TailleC等人， JBiolChem2003; 278: 27160-8; CaramoriG等人，Thorax 2004; 59: 170-3; OhmiT等人，Tohoku J Exp Med 2003; 199: 193-6)。
0086變態(tài)反應(yīng)與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)?？乖?起的組胺和白三烯從肥大細胞中釋放——變態(tài)反應(yīng)綜合癥的主要特征 ——在其中NADPH氧化酶活化起專門作用，從而使細胞內(nèi)的游離鈣 急劇增加的信號傳導(dǎo)途徑中是可能發(fā)生的。因而，NADPH氧化酶抑制 劑DPI阻止由暴露于抗原的肥大細胞釋放組胺和白三烯。(Suzuki Y 等人，Chem Immunol Allergy 2005; 87: 32-42; Yoshimaru T等人， Clin Exp Allergy 2002; 32: 612-8; Suzuki Y等人，J Immunol 2003; 171: 6119-27)。
0087骨質(zhì)疏松癥與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。破骨 細胞，介導(dǎo)骨吸收的骨細胞，是具有高的通過NADPH氧化酶產(chǎn)生氧 化劑能力的改良巨噬細胞。已經(jīng)顯示NADPH氧化酶在體外在骨移植 體屮抑制骨吸收，顯然是因為過氧化氫是骨吸收必需的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的介 質(zhì)。在切除卵巢的小鼠中，已經(jīng)顯示輸入PEG化的過氧化氫酶(其具 有延長的半衰期)消除了骨吸收作用，表明過氧化氫在介導(dǎo)絕經(jīng)后骨 損失中的關(guān)鍵作用。NADPH-來源的氧化劑似乎也在破骨細胞分化中發(fā) 揮作用。(Darden AG等人，J Bone Miner Res 1996; 11: 671 -5; Yang S等人，J Cell Biochem 2004; 92: 238-48; Steinbeck MJ等人，J Cell Physiol 1998; 176: 574-87; BaxBE等人，Biochem Biophys Res Comm 1992; 183: 1153-8; LeanJM等人，Endocrinology 2005; 146: 728-35)。
0088骨關(guān)節(jié)炎與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。骨關(guān)節(jié) 炎是低級的炎癥狀況，其中某些細胞因子——最顯著的是白介素-l—— 千擾軟骨細胞功能，阻止基質(zhì)蛋白聚糖的合成，同時促進基質(zhì)的蛋白 水解降解。對培養(yǎng)的軟骨細胞的研究顯示，NADPH-來源的氧化劑是白 介素-1對軟骨細胞的這些作用的關(guān)鍵介質(zhì)。過硝酸鹽，由過氧化物和 一氧化氮自發(fā)反應(yīng)形成，抑制蛋白聚糖合成同時促進白介素-1處理的 軟骨細胞凋亡；氧化應(yīng)激直接促進過硝酸鹽產(chǎn)生并且也通過輔助可誘導(dǎo)的-'氧化氮合成酶的亞型的誘導(dǎo)來促進。(Biemond P等人，Ann Rhe薩Dis 1986; 45: 249-55; LoYY等人，J Cell Biochem 1998; 69: 19-29; MendesAF等人，J Cell Biochem 2003; 88: 783-93; JouzeauJY 等人，Biorheology 2002; 39: 201-14; OhM等人，J Rheumatol 1998; 25: 2169-74)。
0089胃潰瘍與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。嗜中性粒 細胞-來源的氧化劑——取決于NADPH氧化酶的活性——是由NSAID 藥物誘導(dǎo)的胃潰瘍的關(guān)鍵介質(zhì)。因而，用過氧化物歧化酶進行預(yù)處理 保護嚙齒動物免于消炎痛(indomethacin)引起的對胃粘膜的損害。無 論在炎癥細胞還是在胃粘膜細胞中的NADPH氧化酶的過度活化可能 在幽門螺旋桿菌(//./^/^/)的慢性感染過程中促成胃潰瘍或胃癌的風險 是研究中的問題。(Vanaanen PM等人，Am J Physiol 1991; 261: G470-5; Park S等人，Antiox Redox Signal 2004; 6: 549-60)。
0090敗血癥性休克與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。內(nèi) 毒素引起的休克——最壞情況是嚴重的血壓過低和死亡——在Gurin 大鼠(具有組成型高血漿膽紅素水平的遺傳變型)、在接受持續(xù)的膽 紅素輸注的大鼠以及用口服藻藍蛋白預(yù)處理的小鼠中被大大改善。這 些發(fā)現(xiàn)完全與NADPH氧化酶活化在敗血癥性休克中的關(guān)鍵作用一致。 實際上，已有證據(jù)表明誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激對于可誘導(dǎo)的一氧化氮合成酶 的血管誘導(dǎo)是至關(guān)重要的，其過度活躍導(dǎo)致循環(huán)崩潰。在內(nèi)毒素暴露 的兔模型中，已經(jīng)顯示出同時用夾竹桃麻素處理可防止各種類型的組 織失常。(La廳eS等人，F(xiàn)ASEBJ 2005; 19: 1890-2; Wang WW等 人，Hepatology2004; 40: 424-33; KadiA等人，F(xiàn)ASEBJ 2005: 19: 685.19; LomnitzkiL等人，Toxicol Pathol 2000; 28: 580-7)。
0091肺纖維化與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。轉(zhuǎn)化生 長因子-(3活性在纖維化綜合癥中起關(guān)鍵的介導(dǎo)作用，并且，如.....l:::指出 的，NADPH氧化酶活化是TGF-P信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的介質(zhì)。因此，不驚訝的 是在嚙齒動物中已經(jīng)顯示出膽紅素施用或血紅素加氧酶-l(其促進細胞 內(nèi)膽紅素產(chǎn)生)的誘導(dǎo)可抑制博來霉素(bleomycin)引起的肺纖維化。 此外，博來霉素在NADPH氧化酶活性遺傳缺陷的小鼠中誘導(dǎo)肺纖維
33化的能力降低。在血清膽紅素水平由于膽管阻塞而變得慢性升高的患
者中先天性肺纖維化消退的病例報告已經(jīng)發(fā)表。(Mancmry B等人， Respir Res 2005; 6: 11; Thannickal VJ等人，J Biol Chem 1995; 270: 30334-8; Wang HD等人，Am J Respir Crit Care Med 2002; 165: 406-11; Morse D， Am J Respir Cell Mol Biol 2003; 29: S82-6; Ohrui T等人， TohokuJExpMed2001; 193: 245-9)。
0092肝纖維化與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。肝纖維 化反映了肝毒素介導(dǎo)的肝星狀細胞的活化，其導(dǎo)致肝星狀細胞的增殖 并轉(zhuǎn)化為分泌膠原的肌成纖維細胞。由NADPH氧化酶產(chǎn)生的氧化劑 在星狀細胞活化中發(fā)揮了專門作用并且也促進了這些細胞的增殖。在 NADPH氧化酶遺傳缺陷的小鼠中肝纖維化的誘導(dǎo)被抑制并且血紅素 加氧酶-1的誘導(dǎo)劑在體外抑制人肌成纖維細胞的增殖和膠原合成。 (AdachiT等人，Hepatology 2005; 41: 1272-81; BatellerR等人，J Clin Invest 2003; 112: 1383-94; Li L等人，Gastroenterology 2003; 125: 460-9)。
0093帕金森氏病與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。由活 化的小神經(jīng)膠質(zhì)細胞產(chǎn)生的過硝酸鹽是與慢性神經(jīng)變性狀況如帕金森 氏病或阿爾茨海默氏病有關(guān)的神經(jīng)元死亡和障礙的關(guān)鍵介質(zhì)。由活化 的NADPH氧化酶產(chǎn)生的過氧化物與一氧化氮反應(yīng)產(chǎn)生這種過硝酸鹽。 在嚙齒動物中，MTPT或魚藤酮誘導(dǎo)的神經(jīng)損傷被視為人帕金森氏病 的模型；在體外，與小神經(jīng)膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)加劇了 MPTP或魚藤酮誘 導(dǎo)的神經(jīng)損傷；同時暴露于NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃麻素或DPI 逆轉(zhuǎn)這種作用。此外，最近的報道是在MTPT施用之前和之后，給小 鼠喂養(yǎng)螺旋藻可部分地保護紋狀體多巴胺能神經(jīng)元免于這種毒素的作 用。該研究特別引起注意，原因在于其暗示口服施用藻藍膽素(PCB) 能夠穿過血腦屏障，抑制腦小神經(jīng)膠質(zhì)細胞的NADPH氧化酶活性。
(TieuK等人，IUBMB Life 2003; 55: 329-35; GaoHM等，F(xiàn)ASEB J 2003; 17: 1954-6; ManderP等人，J Neuroinflammation 2005; 2: 20; Gao HM等人，J Neurochem 2002; 81:1285-97; Gao HM等人，J Neurosci 2003; 23: 181-7; ChamorroG等人，Nutr Neurosci 2006; 9: 207- 12)。0094阿爾茨海黙氏病與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。(3-淀粉狀蛋白——其被認為是阿爾茨海黙氏病中神經(jīng)元退化的關(guān)鍵介質(zhì)——能夠活化小神經(jīng)膠質(zhì)細胞中的NADPH氧化酶。而且，組織學研究證明在這種病癥中小神經(jīng)膠質(zhì)細胞NADPH氧化酶被活化。在神經(jīng)元細胞培養(yǎng)物中，(3-淀粉狀蛋白能夠直接殺死神經(jīng)元；這種現(xiàn)象與神經(jīng)元中的NADPH氧化酶活化有關(guān)，并且反義抑制這種活性可防止神經(jīng)元死亡。因此，有理由懷疑NADPH-來源的氧化劑——在小神經(jīng)膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元中產(chǎn)生——可以促進阿爾茨海黙氏病中的神經(jīng)元退化。
(Zekry D等人,IUBMB Life 2003; 55: 307-13; Shimohama S等人，Biochem Biophys Res Comm 2000; 273: 5-9; Mander P等人，JNeuroinflammation2005; 2: 20; Jana A等人，J Biol Chem 2004; 279:51451-9)。
0095UV-介導(dǎo)的皮膚損害與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。與過多陽光暴露有關(guān)的皮膚光老化反映了 UV介導(dǎo)的對表皮角質(zhì)化細胞的作用，其導(dǎo)致角質(zhì)化細胞和黑色素細胞的增生，伴隨著真皮基底物質(zhì)的改變(膠原降解、彈性蛋白積聚)。角質(zhì)化細胞行為的這種改變又可能發(fā)生在UV-引發(fā)的角質(zhì)化細胞氧化應(yīng)激的增加中，其現(xiàn)在已知是由NADPH氧化酶的活化所介導(dǎo)。氧化應(yīng)激的這種增加也可能促成DNA誘發(fā)改變，所述:DNA誘發(fā)改變能引起皮膚癌(雖然UV也可以通過誘導(dǎo)胸腺嘧啶二聚體形成而更直接地使DNA突變)。因此，抑制NAPDH氧化酶活性的措施也使光老化過程減慢，提供保護免于曬傷，并且降低皮膚癌的風險。(BeakSM等人，Biochimie 2004; 86:425-9; Wang H等人，F(xiàn)ree Radical BiolMed 2005; 38: 890-7)。
0096癌癥與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。已經(jīng)在許多癌癥中鑒定出NADPH氧化酶活性，并且在-一些癌癥中，長期的或刺激的NADPH氧化酶活性增強生長因子信號傳導(dǎo)；部分地，這反映了氧化劑抑制酪氨酸磷酸酶的能力，酪氨酸磷酸酶與酪氨酸激酶生長因子受體的活性相反。所導(dǎo)致的生長因子活性的增加不僅促進了癌增殖增加，而且使癌癥相對耐凋亡并且刺激它們產(chǎn)生生血管因子。
0097此外，內(nèi)皮細胞中NADPH氧化酶的活化發(fā)生在血管生
35成過程中；這上調(diào)了某些生血管生長因子，如VEGF的作用并且更特
異地促進管內(nèi)皮形成。而最近的證據(jù)是肌纖維中NADPH氧化酶的活化是與癌癥惡病質(zhì)有關(guān)的骨骼肌量損失的介質(zhì)。因此，抑制NADPH氧化酶能夠減緩某些癌癥的生長和擴散，阻止支持癌癥擴散的血管發(fā)生過程并且?guī)椭乐辜∪饬康膼盒該p失。
0098這種抑制也具有預(yù)防癌癥的潛能。某些癌癥的風險增加與慢性炎癥有關(guān)可能部分反映了氧化劑介導(dǎo)的突變發(fā)生；過硝酸鹽特別具有顯著的誘變活性。NADPH氧化酶是活化白細胞中氧化劑的首要來源，所以其抑制可以降低發(fā)炎組織中的突變發(fā)生。同樣，長期的氧化應(yīng)激可以在通過擴增生長因子活性誘導(dǎo)癌癥中具有促進作用。(KimHW等人，Carcinogenesis 2003; 24: 235-41; Ohshima H等人，ArchBiochem Biophys 2003; 417: 3-11; Teufelhofer O等人，Carcinogenesis2005; 26: 319- 29; Brar SS等人，Protoplasma 2003; 221: 1 17-27; Szanto1等人，J Pathol 2005; 207: 64-76; Vaquero EC等人，J Biol Chem 2004;279: 34643-54; Brar SS等人，Am J Physiol Cell Physiol 2003; 285:C353-69; Lim SD等人，2005; 62: 200-7; Brar SS等人，Am J Physiol CellPhysiol 2002; 282: C1212-24; Dong JM等人，F(xiàn)ree Radic Res 2004; 38:629-379)。
0099風濕性關(guān)節(jié)炎與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。NADPH氧化酶活性在從患有類風濕性關(guān)節(jié)炎和相關(guān)的脊椎關(guān)節(jié)病狀況的患者的滑液中獲得的嗜中性粒細胞中升高。懷疑這種氧化應(yīng)激促進滑膜中的炎癥過程是合理的。在小鼠中，在酵母聚糖誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎中施用夾竹桃麻素具有保護性；特別是，其防止了關(guān)節(jié)軟骨的降解。在大鼠中，夾竹桃麻素也減輕膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎中的關(guān)節(jié)腫脹。類似地，在小鼠中也顯示口服施用螺旋藻對酵母多糖和佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的保護作用——可能反映由PCB引起的NADPH氧化酶的抑制作用。然而，負面影響嗜中性粒細胞NADPH氧化酶活性的小鼠中的幾種突變與某些類型的誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的嚴重性增加有關(guān)。因此，NADPH氧化酶抑制對關(guān)節(jié)炎過程具有復(fù)雜并且對抗的效果，并且在能夠進行確信的預(yù)測之前需要臨床評價。(EI Benna J等人，Inflammation 2002; 26:273-8; HougeeS等人，Eur J Pharmacol 2006; 531: 264-9; 'tHartBA等人，F(xiàn)ree Radic Biol Med 1990; 9: 127-31; Lafeber FP等人，Rheumatology 1999; 38: 1088- 93; Remirez D等人，Mediators lnflamm2002; 11: 75-9; Rasool M等人，Biol Pharm Bull 2006; 29: 2483-7;Hultqvist M等人，J Immunol 2007; 179: 1431 -7)。
0100潰瘍性結(jié)腸炎與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。源
自患有潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病(Crohn's disease)的患者中的粘膜損傷的淋巴細胞具有升高的NADPH氧化酶活性。這種活性也在結(jié)腸上皮細胞中見到，且當然也在浸潤這些損傷的其它淋巴細胞中見到。幾個研究小組已經(jīng)公開了氧化應(yīng)激是炎癥性腸病中組織損傷的關(guān)鍵介質(zhì)；NADPH氧化酶是這種氧化應(yīng)激的最可能來源。在小鼠中用l::=1服葡萄糖硫酸鈉誘導(dǎo)的結(jié)腸炎可通過同時施用血紅素加氧酶-1誘導(dǎo)劑或膽綠素來基本上緩解。(Szanto I等人，J Pathol 2005; 207: 164-76;Otamiri T等人，Dig Dis 1991; 9: 133-41; Berberat PO等人，InflammBowel Dis 2005; 11: 350-9)。
0101硬皮病與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。源自硬皮病損害的成纖維細胞比來自健康皮膚的成纖維細胞產(chǎn)生更多的氧化應(yīng)激，并且NADPH氧化酶已經(jīng)被鑒定為這種氧化應(yīng)激的來源。而且，抑制這種氧化應(yīng)激可壓制硬皮病成纖維細胞在體外增殖，并且也減少它們產(chǎn)生膠原。這些考慮教導(dǎo)了皮膚成纖維細胞中的NAPDH氧化酶活化可以是硬皮病皮膚損害特有的成纖維細胞高增殖和過多膠原產(chǎn)生的重要介質(zhì)。(Sambo P等人，Arthritis Rheum 2001; 44: 2653-64)。
0102病理性血管發(fā)生與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。刺激的血管發(fā)生在某些病癥中發(fā)揮致病作用，所述病癥包括癌癥、黃斑變性、類風濕性關(guān)節(jié)炎和糖尿病性視網(wǎng)膜癥。如上指出的，參與新血管形成過程的內(nèi)皮細胞中NAPDH氧化酶的活化增強了這些細胞對某些關(guān)鍵生長因子的響應(yīng)，同時促進內(nèi)皮細胞遷移和管形成。因此，抑制NADPH氧化酶活性減緩了血管發(fā)生過程。(Ushio-Fukai M等人,Mol Cell Biochem 2004; 264: 85-97; Abid MR等人，F(xiàn)EBS Lett 2000;486: 252-6)。0103移植排斥與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。最近的研究說明施用血紅素加氧酶-1誘導(dǎo)劑或膽綠素有助于防止大鼠中的心臟或腎臟同種異體移植排斥，并且還改善通常折磨移植器官的缺血再灌注損傷。因而，在移植醫(yī)學中抑制NADPH氧化酶具有潛力。
(Yamashita K等人，F(xiàn)ASEB J 2004; 18: 765-7; Bach FH， Hum Immunol2006; 67: 430-2; Nakao A等人，Am J Transplant 2005; 5: 282-91)。
0104慢性疼痛綜合癥/痛覺增敏與NADPH氧化酶活性有關(guān)或有關(guān)聯(lián)。己經(jīng)發(fā)現(xiàn)感覺神經(jīng)元中過氧化物產(chǎn)物的緩慢升高是通常伴隨著慢性炎癥的痛覺增敏的關(guān)鍵介質(zhì)。因此，已經(jīng)顯示有效歧化過氧化物的藥物可防止在大鼠中引起疼痛綜合癥。雖然這種過多的氧化應(yīng)激的來源還沒有被明確確定，但NADPH氧化酶表達在神經(jīng)元中并且可能是介導(dǎo)痛覺增敏的氧化應(yīng)激的關(guān)鍵介質(zhì)。(Chung JM， Mol Interv2004; 4: 248-50; Wang ZQ等人，J Pharmacol Exp Ther 2004; 309:869-78; Kim HK等人，Pain 2004; 111.. 116-24)。
權(quán)利要求
1.用于施用給哺乳動物對象的藻化學組合物，所述藻化學組合物具有抑制NADPH氧化酶活性的前體藥物活性，所述藻化學組合物包括分離的藻膽素，其溶解或懸浮在藥學上可接受的載體中，和膠囊，其具有用于容納所述分離的藻膽素的凝膠包裝，所述分離的藻膽素在被施用到所述哺乳動物對象用于抑制NADPH氧化酶活性時被轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻化學組合物，其中所述分離的藻膽素 選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每一種藻膽素任選地包括 結(jié)合到其......i::的藻藍蛋白肽片段。2a.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻化學組合物，其中所述藥學上可接受 的載體是干的，并且所述膠囊任選地是硬凝膠。2b.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻化學組合物，其中所述藥學......tl可接受的載體是液體，并且所述膠囊任選地是軟的。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的藻化學組合物，進一步包括---種或多種 選自F述的成分葉酸、L-精氨酸、普利醇、大豆異黃酮、綠茶提取 物、?；撬?、輔酶QIO、鉀鹽、鎂、魚油、維生素C、硒、葉黃素、 玉米黃質(zhì)、鋅、苯磷硫胺和吡哆胺。
4. 用于施用給哺乳動物對象的藻化學組合物，所述藻化學組合物 具有抑制NADPH氧化酶活性的前體藥物活性，所述藻化學組合物包 括分離的藻膽素，其與藥學上可接受的載體物質(zhì)或食品級填料混合， 并被壓成片劑，所述分離的藻膽素在施用給所述哺乳動物對象用于抑 制NADPH氧化酶活性時被轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的藻化學組合物，其中所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每 種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白肽片段。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的藻化學組合物，進一步包括一種或多種選自下述的成分葉酸、L-精氨酸、普利醇、大豆異黃酮、綠茶提取物、牛磺酸、輔酶QIO、鉀鹽、鎂、魚油、維生素C、硒、葉黃素、玉米黃質(zhì)、鋅、苯磷硫胺和吡眵胺。
7. 用于腸胃外施用給哺乳動物對象的藻化學組合物，所述藻化學組合物具有抑制NADPH氧化酶活性的前體藥物活性，所述藻化學組合物包括分離的藻膽素，其溶解或懸浮在適合注射的生理學上可接受的無菌溶劑中，所述分離的藻膽素在施用給所述哺乳動物對象用于抑制NADPH氧化酶活性時被轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的藻化學組合物，其中所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每 --種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白肽片段。
9. 用于局部施用給哺乳動物對象的藻化學組合物，所述藻化學組合物具有抑制NADPH氧化酶活性的前體藥物活性，所述藻化學組合物包括分離的藻膽素，其溶解或懸浮在皮膚病學上可接受的潤膚載體中，所述分離的藻膽素在局部施用給所述哺乳動物對象用于抑制NADPH氧化酶活性時被轉(zhuǎn)化為藻玉紅素。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的藻化學組合物，其中所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白肽片段。
11. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的藻化學組合物，其中所述分離的藻膽素額外地起防曬劑作用。
12. 營養(yǎng)食品組合物，其包括與分離的藻膽素混合的營養(yǎng)物質(zhì)。
13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的營養(yǎng)食品組合物，其中所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白肽片段。
14. 藥用化妝品組合物，其包括與分離的藻膽素混合的化妝品物質(zhì)。
15. 根據(jù)權(quán)利要求14所述的藥用化妝品組合物，其中所述分離的藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每-'種藻膽素任選地包括結(jié)合到其上的藻藍蛋白肽片段。
16. 預(yù)防或治療對象的與NADPH氧化酶活性有關(guān)或相關(guān)的醫(yī)學狀況的方法，所述方法包括步驟以預(yù)防或治療有效量給對象施用一種或多種分離的藻膽素，用于預(yù)防或治療與NADPH氧化酶活性有關(guān)或相關(guān)的醫(yī)學狀況。
17. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述狀況選自缺血性心臟病、心肌梗死、中風、外周動脈粥樣硬化、腦血管粥樣硬化、左心室肥厚、充血性心力衰竭、高動脈壓、肺動脈高壓、勃起機能障礙、代謝綜合癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病變、腎小球硬化癥、肺氣腫、哮喘、變態(tài)反應(yīng)、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、胃潰瘍、敗血癥性休克、纖維化、肺纖維化、肝纖維化、帕金森氏病、阿爾茨海默病性癡呆、對皮膚的紫外損害、癌癥、類風濕性關(guān)節(jié)炎、潰瘍性結(jié)腸炎、硬皮病、病理性血管發(fā)生、移植排斥和慢性疼痛綜合癥/痛覺增敏。
18. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述藻膽素選自藻藍膽素、藻紅膽素、植物生色膽素，每一種藻膽素任選地包括結(jié)合到其......匕的藻藍蛋白肽片段。
19. 根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述藻膽素被口服、腸胃外或局部施用。
全文摘要
本發(fā)明公開了藻膽素具有作為NADPH氧化酶活性抑制劑的前體藥物活性，并且公開了藻膽素用于預(yù)防和/或治療與NADPH氧化酶活性有關(guān)或相關(guān)的醫(yī)學狀況。描述了包含藻膽素的組合物，其便于藻膽素的施用。
文檔編號A61K31/40GK101677992SQ200780045897
公開日2010年3月24日 申請日期2007年11月13日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月13日
發(fā)明者D·M·羅爾維克, M·F·麥卡蒂, S·S·亨德勒, T·井口 申請人:M·F·麥卡蒂;S·S·亨德勒;D·M·羅爾維克;T·井口