專利名稱：：一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑及其制備方法、應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑及其制備方法、應(yīng)用涉及一種用作抗腫瘤奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液制劑及其制備方法、應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：奧沙利鉑作為抗腫瘤的藥物順鉑的衍生物，已被廣泛用于治療各種腫瘤。與順鉑相比奧沙利鉑有抑制骨髓功能較輕和消化道反應(yīng)弱，腎臟毒性低，與順鉑無交叉耐藥等特點(diǎn)。盡管如此，奧沙利鉑作為抗腫瘤藥還存在著溶解度低、易被分解破壞、骨髓抑制和腎臟毒性等缺點(diǎn)。脂質(zhì)體常被用來降低藥物的毒性，增加難溶性藥物在血液中的濃度，保持長時間有效的藥物濃度，特別是在癌組織中有豐富的血管但發(fā)育不完善，200nm以下的脂質(zhì)體能在血液中長時間循環(huán)，容易進(jìn)入癌組織,達(dá)到被動靶向的抗癌效果。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對上述不足之處提供一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑及其制備方法、應(yīng)用，通過兩層氫化磷酯膜，以納米粒形式包裹了奧沙利鉑，兩層膜之間嵌入膽固醇，兩層膜表面結(jié)合了N—(氨基甲酰基甲氧基聚乙二醇2000)—二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG2000),制備成脂質(zhì)體。溶解于葡萄糖溶液中，保持了脂質(zhì)體氫化磷脂兩層膜內(nèi)外的滲透壓，維持了脂質(zhì)體的穩(wěn)定。粒徑在200nm以內(nèi)的納米粒，能在血液中保持長時間穩(wěn)定，長時間有效地進(jìn)入癌組織，達(dá)到被動靶向的抗癌效果，解決了奧沙利鉑非脂質(zhì)體制劑在血液中溶解度低，容易被分解的問題，同時降低了奧沙利鉑的副作用，大大提高了奧沙利鉑的抗癌療效。一種奧沙利怕脂質(zhì)體葡萄糖制劑及其制備方法、應(yīng)用是采取以下方案實(shí)現(xiàn):一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑，其特征在于由奧沙利鉑、氫化磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000制備成的脂質(zhì)體，并且溶解于葡萄糖溶液中，其中氫化磷脂與奧沙利鉑的重量配比為1:150，其中氫化磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000之間的重量配比為i5:o.5i:i。所述的葡萄糖的濃度為410%。.所述的制劑為注射用溶液或凍干粉針。一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑及其制備方法:按處方重量配比稱取氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000,混合后加入10倍量的叔丁醇攪拌溶解，預(yù)冷到-35°C-40°C，經(jīng)過1224小時的冷凍干燥后，加入1030倍量的410%的葡萄糖的奧沙利鉑飽和水溶液，在45'C60'C加熱的條件下，經(jīng)乳均機(jī)攪拌溶解乳化后，通過均質(zhì)機(jī)、納米擠出機(jī)等制備成一定粒徑的脂質(zhì)體溶液，脂質(zhì)體溶液粒徑為50nm200nm;再經(jīng)過濾柱等分離精制，制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液，根據(jù)不同濃縮程度調(diào)制脂質(zhì)體中奧沙利鉑的濃度；經(jīng)過0.22Mm微孔濾膜過濾除菌，濾液分裝至西林瓶中，加塞，壓塞，包裝，制備成注射用溶液。奧沙利鉑包封率可高達(dá)99%以上，制備成注射用溶液或凍干粉針。將上述制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液分裝，半壓塞，裝盤，送入凍干機(jī)中，冷凍至干燥，充化，壓塞，包裝，制備成凍干粉針。上述制備方法中氫化磷脂與奧沙利鉑的重量配比為1:150;氫化磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000之間的重量配比為15:0.51:1。所述的奧沙利鉑濃度為0.55mg/ml，且存在于410%的葡萄糖溶液。所述的冷凍至干燥包括預(yù)凍和升華干燥，其中預(yù)凍過程中凍干機(jī)的前箱的預(yù)凍溫度為-35°C-40'C，保溫，保溫期間凍干機(jī)的后箱的溫度降至-4(TC-50°C;升華干燥過程中，在抽真空條件下，開機(jī)以每小時24小時升溫升華干燥，當(dāng)制品溫度達(dá)3035'C時，保持24小時，除去殘留水分。一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑的制備方法通過兩層氫化磷酯膜，以納米粒形式包裹了奧沙利鉑，兩層膜之間嵌入膽固醇，兩層膜表面結(jié)合了N—(氨基甲?；籽趸垡叶?000)—二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)，制備成脂質(zhì)體，溶解于葡萄糖溶液中，保持了脂質(zhì)體氫化磷脂兩層膜內(nèi)外的滲透壓，維持了脂質(zhì)體的穩(wěn)定，能在血液中保持長時間穩(wěn)定，長時間有效地進(jìn)入癌組織，達(dá)到被動耙向的抗癌效果。本發(fā)明的特點(diǎn)本發(fā)明奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑能在血液中保持長時間的穩(wěn)定，保證長時間有效地進(jìn)入癌組織，大大提高其抗腫瘤的效果，同時降低骨髓抑制和腎臟毒性等副作用，避免因奧沙利鉑副作用大而放棄治療的現(xiàn)象，減少病人的痛苦，延長病人的生命，提高病人的生活質(zhì)量。因此，奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑通過脂質(zhì)體對奧沙利鉑的包裹，在血液中能長時間保持穩(wěn)定，長時間有效地進(jìn)入癌組織，顯示出奧沙利鉑脂質(zhì)體極其重要的抗癌價值。本發(fā)明制備的新型奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液，粒徑在200mn以內(nèi)，奧沙利鉑脂質(zhì)體的穩(wěn)定性高，包封率可高達(dá)99%以上，奧沙利鉑濃度可高達(dá)5mg/ml。經(jīng)靜脈注射后，能保持血液中長時間的奧沙利鉑有效抗癌濃度，使得奧沙利鉑長時問有效地進(jìn)入癌組織，發(fā)揮被動靶向的抗癌作用，大大提高奧沙利鉑抗癌效果，同時降低了腎臟毒性、骨髓抑制、胃腸反應(yīng)等副作用，提高了病人的生活質(zhì)量。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:(配方1)氫化磷酯站膽固醇DSPE-PEG2000奧沙利鉑30g30g.30g7.2g稱取氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000,混合后加入叔丁醇900ml攪拌溶解，預(yù)冷到-35°C，經(jīng)過12小時的冷凍干燥后，加入4%的葡萄糖的奧沙利鉑飽和水溶液900ml，在45。C的加熱條件下，通過乳均機(jī)攪拌溶解乳化，通過均質(zhì)機(jī)、納米擠出機(jī)(裝有100200nm微孔過濾膜)等，制備成脂質(zhì)體溶液。再經(jīng)過濾柱等分離精制，制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液。經(jīng)過0.22Wn微孔濾膜過濾除菌，濾液分裝至30ml西林瓶中，每瓶25ml，加塞，壓塞，包裝，制備成注射用溶液。.將上述制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液分裝，半壓塞，裝盤，送入凍干機(jī)中，冷凍至干燥，充N,，壓塞，包裝，制備成凍干粉針。所述的冷凍至干燥包括預(yù)凍和升華干燥，其中預(yù)凍過程中凍干機(jī)的前箱的預(yù)凍溫度為-35°C,保溫，保溫期間凍干機(jī)的后箱的溫度降至-4(TC;升華干燥過程中，在抽真空條件下，開機(jī)以每小時2小時升溫升華干燥，當(dāng)制品溫度達(dá)3(TC時，保持2小時，除去殘留水分。實(shí)施例2:(配方2)氫化磷酯50g膽固醇20gDSPE-PEG200020g奧沙利鉑14.4g稱取氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000，混合后加入叔丁醇900ml攪拌溶解，預(yù)冷到-38'C，經(jīng)過18小時的冷凍干燥后，加入7%的葡萄糖的奧沙利鉑飽和水溶液1800ml，在55'C加熱的條件下，通過乳均機(jī)攪拌溶解乳化，通過均質(zhì)機(jī)、納米擠出機(jī)(裝有100200nm微孔過濾膜)等，制備成脂質(zhì)體溶液。再經(jīng)過濾柱等分離精制，制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液。經(jīng)過0.22Mm微孔濾膜過濾除菌，濾液分裝至30ml西林瓶中，每瓶25ml，加塞，壓塞，包裝，制備成注射用溶液。將上述制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液分裝，半壓塞，裝盤，送入凍干機(jī)中，冷凍至干燥，充N,,壓塞，包裝，制備成凍干粉針。所述的冷凍至干燥包括預(yù)凍和升華干燥，其中預(yù)凍過程中凍干機(jī)的前箱的預(yù)凍溫度為-38°C，保溫，保溫期間凍干機(jī)的后箱的溫度降至-45t:;升華干燥過程中，在抽真空條件下，開機(jī)以每小時.3小時升溫升華干燥，當(dāng)制品溫度達(dá)32'C時，保持34小時，除去殘留水分。實(shí)施例3:(配方3)氫化磷酯50g膽固醇5gDSPE-PEG200010g奧沙利鉑15.6g稱取氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000，混合后加入叔丁醇900ml攪拌溶解,預(yù)冷到-40°C,經(jīng)過24小時的冷凍干燥后，加入10%的葡萄糖的奧沙利鉑飽和水溶液1950ml，在60'C加熱的條件下，通過乳均機(jī)攪拌溶解乳化，通過均質(zhì)機(jī)、納米擠出機(jī)(裝有100200nm微孔過濾膜)等，制備成脂質(zhì)體溶液。再經(jīng)過濾柱等分離精制，制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液。經(jīng)過0.22陶微孔濾膜過濾除菌，濾液分裝至30ml西林瓶中，每瓶25ml，加塞，壓塞，包裝制備成注射用溶液。將上述制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液分裝，半壓塞，裝盤，送入凍干機(jī)中，冷凍至干燥，充N:"壓塞，包裝，制備成凍干粉針。所述的冷凍至干燥包括預(yù)凍和升華干燥，其中預(yù)凍過程中凍干機(jī)的前箱的預(yù)凍溫度為-40'C，保溫，保溫期間凍干機(jī)的后箱的溫度降至-5(TC;升華干燥過程中，在抽真空條件下，開機(jī)以每小時4小時升溫升華干燥，當(dāng)制品溫度達(dá)35'C時，保持4小時，除去殘留水分。實(shí)施例4:奧沙利鉑脂質(zhì)體的粒度和Zeta電位測定通過納米粒度測定儀，測定奧沙利鉑脂質(zhì)體的粒度和Zeta電位。平均粒度為133nm，Zeta電位為-8.85mV。實(shí)施例5:奧沙利鉑脂質(zhì)體的奧沙利鉑總量測定奧沙利鉑脂質(zhì)體1050倍稀釋后，通過色譜分析法進(jìn)行奧沙利鉑總含量測定。測得濃度為1.045mg/ml。實(shí)施例6:奧沙利鉑脂質(zhì)體的游離奧沙利鉑濃度測定奧沙利鉑脂質(zhì)體IO倍稀釋后通過離心分離法，在離心力為300,000g的超速離心后取得上清液，通過色譜分析法測定游離奧沙利鉑濃度。與奧沙利鉑總量進(jìn)行比較，計算出奧沙利鉑的包封率為99.4%。實(shí)施例7:氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000的濃度測定通過蒸發(fā)光散射檢測儀，定量分析氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000的濃度。測得氫化磷酯為52.23mg/ml，膽固醇為13.74mg/ml，DSPE-PEG2000為17.74mg/ml。實(shí)施例8:奧沙利鉑脂質(zhì)體的穩(wěn)定性試驗(yàn)所制備的奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液，分別置于4。C的恒溫恒濕箱中長期保存，定期進(jìn)行粒徑、Zeta電位、滲透壓、pH值、奧沙利鉑總量、包封率、氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000的含量的測定，3個月的粒徑、包封率、奧沙利鉑含量等主要指標(biāo)的變動范圍均在2%以內(nèi)，其他項(xiàng)指標(biāo)的變動范圍也均小于6%(見表l)。表明奧沙利鉑脂質(zhì)體穩(wěn)定性好，并正繼續(xù)動態(tài)觀測中。表1奧沙利鉑脂質(zhì)體注射液的長期試驗(yàn)穩(wěn)定性結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實(shí)施例9:(動物實(shí)驗(yàn))在裸鼠上種植人體乳腺癌(MX-1)，第10天開始靜脈注射5mg/Kg藥物，分成四組，每組10只雌鼠，每4天靜脈注射一次，共四次，第30天解剖白鼠，稱得癌組織的重量，進(jìn)行分析統(tǒng)計。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示治療后，奧沙利鉑脂質(zhì)體組的癌組織的重量是5%葡萄糖對照組的42.5%，充分顯示出奧沙利鉑脂質(zhì)體的抗癌效果；奧沙利鉑脂質(zhì)體組的癌組織的重量是奧沙利鉑注射液組的一半左右(42.5/81.2=0.52)，即奧沙利鉑脂質(zhì)體的抗癌效果是奧沙利鉑注射液的2倍左右，顯示出奧沙利鉑脂質(zhì)體更強(qiáng)的抗癌效果。表2奧沙利鉑脂質(zhì)體的抗癌效果(癌種MX-1)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>權(quán)利要求1、一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑，其特征在于由奧沙利鉑、氫化磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000制備成的脂質(zhì)體，并且溶解于葡萄糖溶液中，其中氫化磷脂與奧沙利鉑的重量比為1∶1～50，其中氫化磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000之間的重量比為1～5∶0.5～1∶1。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑，其特征在于所述的制劑為注射用溶液或凍干粉針。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑，其特征在于所述的葡萄糖的濃度為410%。4、一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑的制備方法，其特征在于按處方重量配比稱取氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000，混合后加入10倍量的叔丁醇攪拌溶解，預(yù)冷到-35°C-40。C，經(jīng)過1224小時的冷凍干燥后，加入1030倍量的410%的葡萄糖的奧沙利鉑飽和水溶液，在45'C6(TC加熱的條件下，經(jīng)乳均機(jī)攪拌溶解乳化后，通過均質(zhì)機(jī)、納米擠出機(jī)制備成一定粒徑的脂質(zhì)體溶液，脂質(zhì)體溶液粒徑為50nm200nm;再經(jīng)過濾柱分離精制，制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液，根據(jù)不同濃縮程度調(diào)制脂質(zhì)體中奧沙利鉑的濃度；經(jīng)過0.22Mm微孔濾膜過濾除菌，濾液分裝至西林瓶中，加塞，壓塞，包裝，制備成注射用溶液；將上述制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液分裝，半壓塞，裝盤，送入凍干機(jī)中，冷凍至干燥，充Na，壓塞，包裝，制備成凍干粉針；上述制備方法中氫化磷脂與奧沙利鉑的重量配比為1:150;氫化磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000之間的重量配比為15:0.51:1。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑的制備方法，其特征在于所述的冷凍至干燥包括預(yù)凍和升華干燥，其中預(yù)凍過程中凍干機(jī)的前箱的預(yù)凍溫度為-35'C-4(TC，保溫，保溫期間凍干機(jī)的后箱的溫度降至-40°C~-5(TC;升華干燥過程中，在抽真空條件下，開機(jī)以每小時24小時升溫升華干燥，當(dāng)制品溫度達(dá)3035'C時，保持24小時，除去殘留水分。6、根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑的制備方法，其特征在于奧沙利鉑濃度為0.55mg/ml，且存在于410%的葡萄糖溶液。7、根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑的制備方法，其特征在于通過兩層氫化磷酯膜，以納米粒形式包裹了奧沙利鉑，兩層膜之間嵌入膽固醇，兩層膜表面結(jié)合了N—(氨基甲?；籽趸垡叶?000)—二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)，制備成脂質(zhì)體，溶解于葡萄糖溶液中，保持了脂質(zhì)體氫化磷脂兩層膜內(nèi)外的滲透壓，維持了脂質(zhì)體的穩(wěn)定。8、權(quán)利要求1或4所述的一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑及其制備方法、應(yīng)用涉及一種用作抗腫瘤奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液制劑及其制備方法、應(yīng)用。一種奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖制劑由奧沙利鉑、氫化磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000制備成的脂質(zhì)體，并且溶解于葡萄糖溶液中，其中氫化磷脂與奧沙利鉑的重量比為1∶1～50，其中氫化磷脂、膽固醇、DSPE-PEG2000之間的重量比為1～5∶0.5～1∶1。制備方法按處方重量配比稱取氫化磷酯、膽固醇、DSPE-PEG2000，混合后加入叔丁醇攪拌溶解，預(yù)冷，經(jīng)過冷凍干燥后，加入4～10％的葡萄糖的奧沙利鉑飽和水溶液，在加熱的條件下，經(jīng)乳均機(jī)攪拌溶解乳化后，通過均質(zhì)機(jī)、納米擠出機(jī)制備成脂質(zhì)體溶液，再經(jīng)過濾柱分離精制，制備成奧沙利鉑脂質(zhì)體葡萄糖溶液。文檔編號A61K9/127GK101103972SQ200710025130公開日2008年1月16日申請日期2007年7月13日優(yōu)先權(quán)日2007年7月13日發(fā)明者蔡課霞,陳祥峰申請人:陳祥峰;蔡課霞