專利名稱：一種獨(dú)活提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物的制備方法。更具體的說(shuō)是一種獨(dú)活提取物的制備方法。
背景技術(shù)：
獨(dú)活為常用中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，藥理試驗(yàn)有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、收縮血管的作用。臨床上主要用于治療風(fēng)寒濕痹，腰膝疼痛，少陰伏風(fēng)頭痛等。獨(dú)活的主要化學(xué)成分為香豆素，包括二氫歐山芹醇(columbianetin)，二氫歐山芹醇乙酸酯(columbianetin acetate)，二氫歐山芹素(columbianadin)，甲氧基歐芹素(osthol)等。藥理實(shí)驗(yàn)證明二氫歐山芹醇、二氫歐山芹醇乙酸酯、二氫歐山芹素、甲氧基歐芹素等對(duì)大白鼠體外血小板聚集有明顯的抑制活性，可延長(zhǎng)小白鼠尾出血時(shí)間，調(diào)節(jié)心血管功能。獨(dú)活在藥理和臨床方面研究報(bào)道較多，但就獨(dú)活提取工藝的優(yōu)化和改進(jìn)，特別是制備符合國(guó)家新藥審批標(biāo)準(zhǔn)的有效成分含量＞50％的提取物方面的研究較少。根據(jù)傳統(tǒng)工藝對(duì)中藥材的提取，一般采用有機(jī)溶劑提取、柱層析分離等方式，達(dá)到提取純化的目的，然而這種方法可操控性、重現(xiàn)性差，工藝復(fù)雜，浪費(fèi)資金。本發(fā)明專利的優(yōu)勢(shì)在于利用簡(jiǎn)單的溶劑萃取法，達(dá)到提取純化的目的，工藝簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好，節(jié)省資金，提取物有效成分含量高，適宜大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)，有利于中藥現(xiàn)代化。
與本發(fā)明專利有關(guān)的專利檢索如下中國(guó)專利-CN200410068803.7-獨(dú)活提取物、其制備方法及含有該提取物的藥物，介紹了超臨界萃取法制備獨(dú)活提取物，但提取物中沒(méi)有提及總香豆素的含量控制，含量可控性差，操作雖較為簡(jiǎn)單，且超臨界萃取設(shè)備昂貴，單次提取量受限，工業(yè)化生產(chǎn)工藝有待加強(qiáng)。中國(guó)專利-CN03112227.2-一種防治關(guān)節(jié)炎的藥物，該專利中只提到獨(dú)活提取物，并沒(méi)有具體的制備方法。中國(guó)專-CN200610011012.X-具有增香、保健作用的天然香料及應(yīng)用，該專利只提到揮發(fā)油成分的提取，并未涉及到香豆素類成分的提取。
與本發(fā)明專利有關(guān)的文獻(xiàn)檢索如下才謙，中藥獨(dú)活有效部位抗風(fēng)濕新藥研究，中國(guó)優(yōu)秀博碩士論文數(shù)據(jù)庫(kù)，文中涉及到用大孔吸附樹(shù)脂、硅膠柱方法制備香豆素提取物的方法，其有效成分含量未能達(dá)到50％以上。在上述柱層析工藝后再使用超臨界提取工藝制備香豆素提取物，才使提取物中總香豆素含量略大于50％。該方法工藝復(fù)雜，設(shè)備昂貴。在有關(guān)獨(dú)活的其他文獻(xiàn)中并未提及獨(dú)活總香豆素的提取和純化，這里將不贅述。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有獨(dú)活提取物文獻(xiàn)存在的問(wèn)題，兼顧獨(dú)活提取物香豆素有效成分含量和提取物大生產(chǎn)的需要提出本發(fā)明專利。本發(fā)明專利利用簡(jiǎn)單回流提取和液液萃取方法制備獨(dú)活提取物，使獨(dú)活提取物中總香豆素的含量大于60％，且工藝成熟，操作簡(jiǎn)單，適用于大生產(chǎn)。
本發(fā)明的一種獨(dú)活提取物的制備方法，其制備方法的技術(shù)方案為(1)藥材回流提取將獨(dú)活藥材粉碎成粗粉，過(guò)10～80目篩，2～50倍量50％～95％乙醇或甲醇提取1～7次，每次0.5～6小時(shí)，合并提取溶劑，減壓回收溶劑，得浸膏A。
(2)液液萃取將浸膏A用0.2～30倍量水充分分散后，用0.2～30倍量石油醚∶乙酸乙酯(8～10∶2～0)作萃取有機(jī)溶劑，振搖萃取2～6次，合并萃取液，減壓濃縮至小體積(浸膏的0.1～10倍量)，在溫度為-10～10℃條件下靜止，析出晶體，過(guò)濾，真空干燥，即得獨(dú)活提取物。
本發(fā)明的技術(shù)方案的優(yōu)選方案為(1)藥材回流提取將獨(dú)活藥材粉碎成粗粉，過(guò)20～40目篩，4～10倍量70％～95％乙醇或甲醇提取1～5次，每次1～4小時(shí)，合并提取溶劑，減壓回收溶劑，得浸膏A。
(2)液液萃取將浸膏A用0.5～5倍量水充分分散后，用0.5～5倍量石油醚∶乙酸乙酯(9～10∶1～0)作萃取有機(jī)溶劑，振搖萃取3～4次，合并萃取液，減壓濃縮至小體積(浸膏的0.1～5倍量)，在溫度為-5～10℃條件下靜止，析出晶體，過(guò)濾，真空干燥，即得獨(dú)活提取物。
本發(fā)明制備的獨(dú)活提取物，主要由總香豆素組成，其含量測(cè)定方法采用紫外分光光度法(中國(guó)藥典2005年版一部)，以蛇床子素對(duì)照品作標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm。具體測(cè)定方法為(1)對(duì)照品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取蛇床子素，甲醇溶解，配制成3、4、6、8、10ug/ml的系列濃度溶液。以甲醇為空白對(duì)照，在波長(zhǎng)為327nm下測(cè)定吸收度，以濃度C對(duì)吸收度A作線性回歸，得回歸方程為C＝13.792A+0.1034(相關(guān)系數(shù)r＝0.999)。
(2)樣品含量測(cè)定精密稱取適量獨(dú)活提取物，甲醇溶解。必要時(shí)用甲醇稀釋，在327nm處測(cè)定A值，代入對(duì)照品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程中，計(jì)算總香豆素含量。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)(1)本發(fā)明采用藥材回流提取和有機(jī)溶劑萃取精制的制備工藝制備獨(dú)活提取物，具有工藝成熟、簡(jiǎn)單，節(jié)省工藝步驟，生產(chǎn)周期短，適宜大生產(chǎn)。
(2)本發(fā)明制備方法制備的獨(dú)活提取物，其香豆素有效成分含量高，總香豆素含量高于50％，超過(guò)60％，大大減少了無(wú)效雜質(zhì)成分，有利于中藥現(xiàn)代化，達(dá)到國(guó)家藥品食品監(jiān)督局新藥提取物的要求，具有良好的應(yīng)用前景。
用以下實(shí)施例更好地說(shuō)明上述發(fā)明。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1將獨(dú)活藥材粉碎成粗粉，過(guò)20目篩，6倍量90％乙醇提取3次，每次2小時(shí)，合并提取溶劑，減壓回收溶劑，得浸膏A。將浸膏A用1倍量水充分分散后，3倍量石油醚振搖萃取，萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至小體積(浸膏的0.8倍量)，在溫度為-4℃下靜止，析出晶體，過(guò)濾，真空干燥，即得獨(dú)活提取物。經(jīng)檢測(cè)總香豆素含量為65.33％。
實(shí)施例2將獨(dú)活藥材粉碎成粗粉，過(guò)20目篩，8倍量甲醇提取2次，每次2小時(shí)，合并提取溶劑，減壓回收溶劑，得浸膏A。將浸膏A用1倍量水充分分散后，1倍量石油醚∶乙酸乙酯(99∶1)振搖萃取，萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至小體積(浸膏的1倍量)，在溫度為-3℃下靜止，析出晶體，過(guò)濾，真空干燥，即得獨(dú)活提取物。經(jīng)檢測(cè)總香豆素含量為61.23％。
實(shí)施例3將獨(dú)活藥材粉碎成粗粉，過(guò)20目篩，10倍量90％乙醇或甲醇提取3次，每次2小時(shí)，合并提取溶劑，減壓回收溶劑，得浸膏A。將浸膏A用1倍量水充分分散后，1倍量石油醚乙酸乙酯(98∶1)振搖萃取，萃取4次，合并萃取液，減壓濃縮至小體積(浸膏的1.5倍量)，在溫度為-4℃下靜止，析出晶體，過(guò)濾，真空干燥，即得獨(dú)活提取物。經(jīng)檢測(cè)總香豆素含量為60.78％。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種獨(dú)活提取物的制備方法。其特征在于(1)藥材回流提取將獨(dú)活藥材粉碎成粗粉，過(guò)10～80目篩，2～50倍量50％～95％乙醇或甲醇提取1～7次，每次0.5～6小時(shí)，合并提取溶劑，減壓回收溶劑，得浸膏A。(2)液液萃取將浸膏A用0.2～30倍量水充分分散后，用0.2~30倍量石油醚∶乙酸乙酯(8～10∶2～0)作萃取有機(jī)溶劑，振搖萃取2～6次，合并萃取液，減壓濃縮至小體積(浸膏的0.1～10倍量)，在溫度為-10～10℃條件下靜止，析出晶體，過(guò)濾，真空干燥，即得獨(dú)活提取物。該提取物主要由總香豆素組成，其中總香豆素含量為50％以上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中的一種獨(dú)活提取物的制備方法，其特征在于其制備工藝流程為(1)藥材回流提取將獨(dú)活藥材粉碎成粗粉，過(guò)20～40目篩，4～10倍量70％～95％乙醇或甲醇提取1～5次，每次1～4小時(shí)，合并提取溶劑，減壓回收溶劑，得浸膏A。(2)液液萃取將浸膏A用0.5～5倍量水充分分散后，用0.5～5倍量石油醚∶乙酸乙酯(9～10∶1～0)作萃取有機(jī)溶劑，振搖萃取3～4次，合并萃取液，減壓濃縮至小體積(浸膏的0.1～5倍量)，在溫度為-5～10℃條件下靜止，析出晶體，過(guò)濾，真空干燥，即得獨(dú)活提取物。該提取物主要由總香豆素組成，其中總香豆素含量為50％以上。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種獨(dú)活提取物的制備方法。其特征在于通過(guò)藥材的回流提取和液液萃取的方法，制備獨(dú)活提取物。該獨(dú)活提取物制備方法特點(diǎn)在于工藝簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、適宜大生產(chǎn)、提取物有效成分含量高。該提取物中總香豆素含量為50％以上。
文檔編號(hào)A61P29/00GK101091734SQ20071002486
公開(kāi)日2007年12月26日 申請(qǐng)日期2007年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月5日
發(fā)明者欒立標(biāo), 吳雅娜 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)