專利名稱：吡啶鎓鹽作為血管保護(hù)劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及某些吡啶鹽制備血管保護(hù)劑的用途，該血管保護(hù)劑用于治療和/或預(yù)防與血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮前列環(huán)素(PGI2)產(chǎn)生不足有關(guān)的病癥或疾病，特別是但不唯一的是治療和/或預(yù)防伴有高膽固醇血癥/高甘油三酯血癥的上述病癥或疾病，以及吡啶鹽口服使用作為飲食輔助治療的用途。
越來越多的證據(jù)表明內(nèi)皮機(jī)能不良在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成和發(fā)展中起至關(guān)重要的作用。最近人們已經(jīng)認(rèn)識(shí)到內(nèi)皮機(jī)能不良在粥狀動(dòng)脈栓塞癥診斷、預(yù)斷和治療中的重要性(Heitzer T，SchlinzigT，Krohn K，Meinertz T，Munzel T.內(nèi)皮機(jī)能不良，氧化應(yīng)激和冠心病患者心血管疾病發(fā)作的危險(xiǎn)性.Cirrculation 2001；1042673-2678；Schachinger V，Britten MB，Zeiher AM.冠狀動(dòng)脈血管舒張機(jī)能不良對于冠心病的長期反向輸出的預(yù)后影響.Circulation 2000；1011899-1906；Perticone F，CeravoloR，Pujia A，Ventura G，Iacopino S，Scozzafava A，F(xiàn)erraro A，ChelloM，Mastroroberto P，Verdec-chia P，Schillaci G.高血壓患者內(nèi)皮機(jī)能不良預(yù)斷重要性.Circulation 2001；104191-196；SuwaidiJA，Hamasaki S，Higano ST，Nishimura RA，Holmes DR，Jr.，LermanA.輕微冠心病和內(nèi)皮機(jī)能不良患者的長期隨訪.Circulation2000；101948-954)。臨床上，內(nèi)皮機(jī)能不良與被診斷為血管舒張NO活性減退的NO生物活性減退視為等同。雖然PGI2的全身水平可能提高，但是NO活性減退伴隨著氧化應(yīng)激(Heitzer T，Schlinzig T，Krohn K，Meinertz T，Munzel T.內(nèi)皮機(jī)能不良，氧化應(yīng)激和冠心病患者心血管疾病發(fā)作的危險(xiǎn)性.Circulation 2001；1042673-2678)和PGI2合成減少(Kyrle PA，Minar E，Brenner B，EichlerHG，Heistinger M，Marosi L，LechnerK.在動(dòng)脈粥樣硬化患者微脈管系統(tǒng)中產(chǎn)生血栓素A2和前列環(huán)素-低劑量阿司匹林的作用.ThrombHaemost 1989；61374-377)。事實(shí)上，幾年前就提出了增強(qiáng)脂質(zhì)過氧化作用使內(nèi)皮細(xì)胞中前列環(huán)素合成的選擇性減少隨后激活血小板，從而可能促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展(Gry-glewski RJ.前列環(huán)素和動(dòng)脈粥樣硬化.TIPS 1980；1164-168；Gryglewski RJ.前列腺素，血小板和動(dòng)脈粥樣硬化.CRC Crit Rev Biochem 1980；7291-338；Gryglewski RJ，Szczeklik A.前列環(huán)素和動(dòng)脈粥樣硬化-實(shí)驗(yàn)和臨床方法.1983；213-226)。這一觀念后來為實(shí)驗(yàn)所支持?，F(xiàn)在很顯然內(nèi)皮組織中PGI2合成的減少可以導(dǎo)致內(nèi)皮組織和血管平滑肌細(xì)胞中的TP受體被TXA2、PGH2或其它類花生酸類物質(zhì)過度刺激，繼而發(fā)生血管收縮、血小板凝集、內(nèi)皮組織的炎癥應(yīng)答以及內(nèi)皮細(xì)胞凋亡(Chlopicki S，Gryglewski RJ.“類花生酸”中的內(nèi)皮分泌作用和粥狀動(dòng)脈栓塞癥，第23章，267-276頁，ed.P.Curtis-Prior，John Wiley和Sons公司，2004)。這表示PGI2缺乏可觸發(fā)或增強(qiáng)被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)鍵因素的血管壁中的炎癥和血栓形成進(jìn)程。
已經(jīng)公認(rèn)低密度脂蛋白膽固醇(LDL)和/或甘油三酯(TG)血漿水平的升高是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的主要危險(xiǎn)因子(Levine GN，KeaneyJF Jr，Vita JA.心血管疾病中膽固醇減少.臨床益處和可能機(jī)制.NEngl J Med 1995；332512-521)。而且，低的高密度脂蛋白膽固醇(HDL)是動(dòng)脈粥樣硬化的重要獨(dú)立危險(xiǎn)因子。HDL由于增加NO和PGI2的利用度而具有預(yù)防和校正內(nèi)皮機(jī)能不良的潛在能力。(Ng DS.治療低的HDL-從實(shí)驗(yàn)室到臨床.Clin Biochem 2004；37649-659；Chapman MJ，Assman G，F(xiàn)ruchartJC，Shepherd J，Sirtoti C.升高高密度脂蛋白膽固醇減少患心血管疾病的危險(xiǎn)性煙酸的作用-關(guān)于HDL-C的歐洲共識(shí)小組的意見書.Curr Med Res Opin 2004；201253-1268；Calabresi L，Gomarashi M，F(xiàn)ranceschini G.高密度脂蛋白的內(nèi)皮保護(hù)作用.Arterioscler Thromb Vasc Biol.2003；2902292-2300)。
WO 00/40559中公開了某些煙酰胺衍生物，1，3-二取代吡啶鹽，包括1-甲基煙酰胺(MNA+)和1-甲基-N′-(羥甲基)煙酰胺(MNAF+)鹽的治療學(xué)和美容用途。據(jù)報(bào)道，所述衍生物具有局部治療皮膚疾病特別是腿潰瘍、痤瘡、牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、白癜風(fēng)以及燒傷燙傷和促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的功用。所述衍生物還有促進(jìn)毛發(fā)再生的活性，因此用于治療不同起因的脫發(fā)。描述了這些化合物施用于皮膚或粘膜表面的不同類型的局部用制劑，如洗發(fā)劑、軟膏、乳膏、凝膠、洗劑、溶液劑、噴霧劑等等，以及口服給藥治療皮膚病的制劑。還描述了這些化合物的美容作用，特別是使皮膚再生和變光滑。
最近出版物中描述了1-甲基煙酰胺氯化物(MNA+)在一些皮膚疾病中的作用(Gebicki J，Sysa-Jedrzejowska A，Adamus J，WozniackaA，Rybak M，Zielonka J.1-甲基煙酰胺一種有效的維生素源抗炎藥.Pol J Pharmacol.2003；55109-112)。雖然沒有闡述作用機(jī)制，但是猜想MNA+顯示了抗炎作用。
出版物(Takashi Sakurai，Haruo Hosoya.煙酰胺-腺嘌呤二核苷酸類似物和吖啶黃單核苷酸的電荷轉(zhuǎn)移復(fù)合物.Bio-chim.Biophys.Acta 1966；112(3)359-468)中描述了1-甲基-3-乙酰吡啶鹽(MAP+)。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)MAP+和WO00/40559中描述的一些化合物特別是MNA+和MNAF+具有獨(dú)特的與其從血管內(nèi)皮中釋放內(nèi)源性前列環(huán)素(PGI2)能力有關(guān)的藥理學(xué)性質(zhì)，這種性質(zhì)使其區(qū)別于結(jié)構(gòu)近似的有關(guān)煙酰胺、煙酸、葫蘆巴堿及內(nèi)源性MNA+代謝物，如1-甲基-2-吡啶酮-5-羧基酰胺(2-PYR)和1-甲基-4-吡啶酮-3-羧基酰胺(4-PYR)。令人驚訝的是本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)某些化合物具有校正脂蛋白分布，特別是降低LDL和/或TG的血漿水平，升高HDL血漿水平的能力，導(dǎo)致其抗動(dòng)脈粥樣硬化效應(yīng)。與本發(fā)明的某些吡啶鹽對于脂蛋白分布的效應(yīng)無關(guān)，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)吡啶鹽增加PGI2的合成，顯示了在下述多種疾病包括伴隨著高膽固醇血癥/高甘油三酯血癥疾病中的治療可能性，內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或PGI2不足在上述疾病中起致病機(jī)制的作用。
附圖簡要說明

圖1檢測藥物在大鼠體內(nèi)溶血栓作用的方法的圖解(依照Gryglewski)圖2靜脈內(nèi)給藥MNA+(30mg/kg)誘導(dǎo)產(chǎn)生的體內(nèi)溶血栓響應(yīng)圖3靜脈內(nèi)給藥MNA+(30mg/kg)后6-酮(keto)-PGF1α(·)和TXB2(o)血漿水平的變化圖4靜脈內(nèi)給藥煙酰胺和煙酸(30mg/kg)后沒有溶血栓響應(yīng)圖5靜脈內(nèi)給藥2-PYR或葫蘆巴堿(30mg/kg)后沒有溶血栓響應(yīng)圖6靜脈內(nèi)給藥MAP+(30mg/kg)誘導(dǎo)產(chǎn)生的體內(nèi)溶血栓響應(yīng)圖7靜脈內(nèi)給藥MAP+(30mg/kg)后體內(nèi)6-酮-PGF1α(·)和TXB2(o)血漿水平的變化圖8靜脈內(nèi)給藥MNAF+(30mg/kg)誘導(dǎo)產(chǎn)生的溶血栓響應(yīng)圖9MNA+對于膠原誘導(dǎo)的血小板凝集(1mg/mL)無作用圖10MNA+對于膠乳誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞激活作用無影響首先一方面本發(fā)明提供式I的吡啶鹽制備用于治療或預(yù)防與血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮前列環(huán)素(PGI2)產(chǎn)生不足有關(guān)的病癥或疾病的血管保護(hù)劑的用途， 其中R是NH2、CH3或N(H)CH2OH，X是藥學(xué)可接受的平衡離子。
優(yōu)選地，所述的血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮前列環(huán)素(PGI2)產(chǎn)生不足伴著高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或者低HDL水平。
式I化合物特別有利的活性是伴隨PGI2釋放的內(nèi)皮作用，由此所述的式I化合物可以改善組織灌流，產(chǎn)生抗凝集、血栓溶解、抗細(xì)胞凋亡、抗動(dòng)脈粥樣硬化活性，以及保護(hù)胃腸粘膜。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)還在于式I化合物的血栓溶解作用不伴隨降壓活性。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病是任何種類的血管床的動(dòng)脈粥樣硬化，包括慢性冠心病、腦血管局部缺血性發(fā)作或四肢動(dòng)脈粥樣硬化，包括血栓性脈管炎閉塞。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的狀況或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)的急性心血管事件特別是心臟性猝死，急性冠脈綜合征(包括不穩(wěn)定型冠心病、心肌梗塞)，需要冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)(PCI)、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、缺血性中風(fēng)或末梢循環(huán)血管形成術(shù)。
又一實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病選自動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素組，包括以下高膽固醇血癥、動(dòng)脈高血壓、吸煙、高同型半胱氨酸血癥、胰島素抵抗、糖尿病、絕經(jīng)、衰老、肥胖癥、心理應(yīng)激、感染、炎癥狀態(tài)包括牙周疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、異體移植物血管病變或硝酸鹽耐藥性。
還有另一實(shí)施方案，所述的病癥或疾病是血脂障礙，特別是高膽固醇血癥或高甘油三酯血癥，尤其是伴有低HDL血漿水平的高膽固醇血癥或高甘油三酯血癥。
還有另一實(shí)施方案，所述病癥或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化非直接相關(guān)的血栓形成，特別是與金屬人工血管(支架)移植、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、任意類型體外循環(huán)手術(shù)、血液透析、靜脈血栓栓塞性疾病相關(guān)的血栓形成。
還有一個(gè)實(shí)施方案，所述的病癥或疾病選自以下的組慢性心力衰竭、肺動(dòng)脈高壓、微脈管糖尿病并發(fā)癥、類糖尿病性視網(wǎng)膜病和腎病、糖尿病性神經(jīng)病變、腎病綜合征、慢性腎功能衰竭、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、囊性纖維病變、慢性閉塞性肺部疾病(COPD)、先兆子癇/子癇、勃起機(jī)能障礙、多囊卵巢綜合征、睡眠性呼吸暫停、全身性紅斑狼瘡、鐮狀細(xì)胞性貧血、非特異性炎性腸病、胃或十二指腸潰瘍、青光眼、慢性肝病、原發(fā)性淀粉樣變性、神經(jīng)退行性疾病、特別是選自血管性癡呆、阿爾茨海默氏病和帕金森氏病的神經(jīng)退行性疾病。
另一優(yōu)點(diǎn)是式I化合物制備預(yù)防或治療胃或十二指腸潰瘍藥物的用途。
一個(gè)更加優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病是慢性肝病，特別是慢性病毒性肝炎。
一個(gè)更加優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病是慢性閉塞性肺部疾病(COPD)。
所述的藥劑可以是適于任何給藥途徑，如經(jīng)口、胃腸道外、鼻內(nèi)或吸入途徑給藥的劑型。當(dāng)然給藥途徑取決于被治療的具體情況或疾病。
在藥劑預(yù)期用來治療慢性閉塞性肺部病變(COPD)的情況下，優(yōu)選以適用于經(jīng)呼吸途徑吸入給藥的劑型存在。
如上所述，X可以是任意的生理學(xué)上可接受的平衡離子。因此，式I的鹽可以衍生自任意生理學(xué)上可接受的有機(jī)酸和無機(jī)酸。與無機(jī)酸形成的適合鹽例如氯化物、溴化物、碘化物和碳酸鹽；與有機(jī)酸形成的適合鹽可以是與單、二和三羧酸形成的鹽，如醋酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、羥乙酸鹽、乳酸鹽、丙二酸鹽和檸檬酸鹽。優(yōu)選的鹽是氯化物、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽和乳酸鹽，特別有利的是氯化物。
式I的具體化合物是1-甲基煙酰胺鹽(MNA+)、1-甲基-3-乙酰吡啶鹽(MAP+)和1-甲基-N′-(羥甲基)煙酰胺鹽(MNAF+)。
本發(fā)明第二方面提供治療和/或預(yù)防與血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮PGI2產(chǎn)生不足有關(guān)的病癥或疾病(伴有或不伴有高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或低HDL水平)，特別是例如上面討論過的病癥或疾病的方法，包括給予需要這種治療的受體治療有效量的上面定義的式I吡啶鹽。
本發(fā)明治療方法的一個(gè)實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病是任何種類血管床的動(dòng)脈粥樣硬化，包括慢性冠心病、腦血管局部缺血性發(fā)作或四肢動(dòng)脈粥樣硬化，包括血栓閉塞性脈管炎。
本發(fā)明治療方法的另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的狀況或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)的急性心血管疾病事件，特別是心臟性猝死、急性冠脈綜合征(包括不穩(wěn)定型冠心病、心肌梗塞)、需要冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)(PCI)、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、缺血性中風(fēng)或末梢循環(huán)血管形成術(shù)。
本發(fā)明治療方法的又一實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病選自動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素組，包括以下高膽固醇血癥、動(dòng)脈高血壓、吸煙、高同型半胱氨酸血癥、胰島素抵抗、糖尿病、絕經(jīng)、衰老、肥胖癥、心理應(yīng)激、感染、炎癥狀態(tài)包括牙周疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、異體移植物血管病變或硝酸鹽耐藥性。
本發(fā)明治療方法的又一實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病是血脂障礙，特別是高膽固醇血癥或高甘油三酯血癥，尤其是伴有低HDL血漿水平的高膽固醇血癥或高甘油三酯血癥。
本發(fā)明治療方法中還有另一實(shí)施方案，所述病癥或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化非直接相關(guān)的血栓形成，特別是與金屬人工血管(支架)移植、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、任意類型的體外循環(huán)手術(shù)、血液透析、靜脈血栓栓塞性疾病相關(guān)的血栓形成。
本發(fā)明治療方法的又一個(gè)實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病選自以下的組慢性心力衰竭、肺動(dòng)脈高壓、微脈管糖尿病并發(fā)癥、類糖尿病性視網(wǎng)膜病和腎病、糖尿病性神經(jīng)病變、腎病綜合征、慢性腎功能衰竭、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、囊性纖維病變、慢性閉塞性肺部疾病(COPD)、先兆子癇/子癇、勃起機(jī)能障礙、多囊卵巢綜合征、睡眠性呼吸暫停、全身性紅斑狼瘡、鐮狀細(xì)胞性貧血、非特異性炎性腸病、胃或十二指腸潰瘍、青光眼、慢性肝病、原發(fā)性淀粉樣變性、神經(jīng)退行性疾病、特別是選自血管性癡呆、阿爾茨海默氏病和帕金森氏病的神經(jīng)退行性疾病。
一個(gè)更加優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病是慢性肝病，特別是慢性病毒性肝炎。
一個(gè)更加優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的病癥或疾病是慢性閉塞性肺部疾病(COPD)。
另一優(yōu)點(diǎn)是式I化合物在預(yù)防或治療胃或十二指腸潰瘍的方法中的用途。
式I的吡啶鹽可以單獨(dú)給藥或者與其它心血管藥物聯(lián)合給藥。
式I的吡啶鹽尤其可以以常規(guī)的口服制劑形式如片劑、膠囊劑、藥物可接受的液體載體的口服溶液劑/混懸液經(jīng)口服給藥。所述制劑可以用本領(lǐng)域已知的常規(guī)方法制備，包含常規(guī)的藥物賦形劑和載體。
式I的吡啶鹽也可以以注射劑的形式包括皮下和靜脈內(nèi)注射的注射液和輸液經(jīng)胃腸道外給藥。
其它預(yù)期的給藥途徑是吸入、鼻內(nèi)和直腸給藥。
當(dāng)然無論如何，給藥途徑都取決于被治療的特定疾病。
例如，在吡啶鹽用來治療慢性閉塞性肺部病變(COPD)時(shí)，優(yōu)選適用于經(jīng)呼吸途徑吸入給藥的劑型。
式I吡啶鹽的日劑量范圍是10-1000mg，可以單次或分多次給藥。
本發(fā)明還涉及提高哺乳動(dòng)物前列環(huán)素水平的方法，包括口服給予有效量的上述式I吡啶鹽。
本發(fā)明還提供用于飲食輔助治療中的上述式I吡啶鹽。式I吡啶鹽用作飲食輔劑時(shí)，提高前列環(huán)素水平，因此作為血管保護(hù)劑。
本發(fā)明進(jìn)一步提供上述式I吡啶鹽制備營養(yǎng)制劑的用途，用于哺乳動(dòng)物與血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮前列環(huán)素(PGI2)產(chǎn)生不足，特別是還伴隨著高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或低HDL水平有關(guān)的狀態(tài)或疾病下的血管保護(hù)。
所述的可以給予營養(yǎng)制劑的病癥或疾病是動(dòng)脈粥樣硬化，特別是患有慢性冠心病、局部缺血性腦血管發(fā)作或四肢動(dòng)脈粥樣硬化包括血栓閉塞性脈管炎患者的動(dòng)脈粥樣硬化。
所述的可以給予營養(yǎng)制劑的病癥或疾病還可以選自動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素組，包括以下高膽固醇血癥、動(dòng)脈高血壓、吸煙、高同型半胱氨酸血癥、胰島素抵抗、糖尿病、絕經(jīng)、衰老、肥胖癥、心理應(yīng)激、感染、炎癥狀態(tài)包括牙周疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、異體移植物血管病變或硝酸鹽耐藥性。
所述的可以施用營養(yǎng)制劑的病癥或疾病是血脂障礙，特別是高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥，尤其是伴有低HDL血漿水平的高膽固醇血癥或高甘油三酯血癥。
所述的可以施用營養(yǎng)制劑的癥狀或疾病可以是與動(dòng)脈粥樣硬化非直接相關(guān)的血栓形成，特別是與金屬人工血管(支架)移植、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、任意類型體外循環(huán)手術(shù)、血液透析、靜脈血栓栓塞性疾病相關(guān)的血栓形成。
用作飲食輔助治療和/或營養(yǎng)制劑的具體的吡啶鹽是式I化合物，其中R是CH3。
用作飲食輔助治療和/或營養(yǎng)制劑的具體的吡啶鹽是式I化合物，其中R是NH2。
用作飲食輔助治療和/或營養(yǎng)制劑的具體的吡啶鹽是式I化合物，其中R是N(H)CH2OH。
飲食補(bǔ)劑和營養(yǎng)制劑可以是適合經(jīng)口攝取的劑型，如片劑、膠囊劑、飲用的溶液劑和混懸液以及類似的、常規(guī)的、制劑領(lǐng)域公知的、用常規(guī)的輔料和載體按照本領(lǐng)域公知方法制備的劑型。
飲食補(bǔ)劑或營養(yǎng)制劑中混合至少5％重量的式I吡啶鹽是有益的。
通過以下顯示吡啶鹽藥學(xué)活性的實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，實(shí)施例1血栓溶解活性應(yīng)用Gryglewski等人的原始方法評(píng)價(jià)吡啶鹽的血栓溶解活性(Gryglewski RJ，Korbut R，Ocet-kiewicz A，Stachura J.測定藥物在體內(nèi)抗血小板效力的方法.Naunyn Schmiedebergs ArchPharmacol 1978；30225-30)，圖解見圖1。
將體重300-350g的Wistar大鼠麻醉(腹腔內(nèi)注射硫噴妥鈉30mg·kg-1)并肝素化(靜脈內(nèi)注射未分級(jí)肝素800i.u.·kg-1)。
從插套管的右側(cè)頸動(dòng)脈測定動(dòng)脈血壓，在左側(cè)頸動(dòng)脈和左側(cè)頸靜脈之間建立體外循環(huán)。以1.5mL·min-1的速度向家兔跟腱的膠原帶中灌注體外循環(huán)的動(dòng)脈血，用Harvard張力傳感器連續(xù)監(jiān)測其重量。
在灌注的最初20-30分鐘內(nèi)，由于富血小板血栓的沉積作用膠原帶增加重量80-120mg，在隨后的3-5小時(shí)內(nèi)控制條件不變。通過血栓重量的降低檢測血栓溶解響應(yīng)。同時(shí)監(jiān)測動(dòng)脈血壓，所以這一模型能夠分析化合物的血栓溶解和降壓作用(圖1)。
這一實(shí)驗(yàn)設(shè)置中血栓溶解響應(yīng)的分析還補(bǔ)充了動(dòng)脈血中6-氧代-PGF1α、TXB2和PGE2的測定。為此在Eppendorff管中收集血樣(500μL)，其中吲哚美辛的終濃度為10μM，EDTA終濃度為1mM。然后以2,000xg轉(zhuǎn)速離心血樣5分鐘。血漿樣品保存在-70℃。用酶免疫分析試劑盒(Cayman Chemical Co，Ann Arbor，MI)測定前列腺素。
靜脈內(nèi)給藥MNA+(3-30mg/kg)在體外循環(huán)Wistar大鼠中產(chǎn)生濃度依賴性血栓溶解作用。在MNA+劑量為30mg/kg時(shí)觀察到最大響應(yīng)。以30mg/kg單次注射MNA+誘導(dǎo)產(chǎn)生42±4％水平的長效溶栓響應(yīng)，在觀測期間內(nèi)保持大約相同的水平2-3小時(shí)。與MNA+相比，煙酰胺、煙酸、葫蘆巴堿和2-PYR(內(nèi)源性MNA+代謝物)在30mg/kg劑量時(shí)沒有誘導(dǎo)產(chǎn)生顯著的溶栓響應(yīng)。煙酰胺和煙酸誘導(dǎo)的響應(yīng)非常短暫(少于15-20分鐘)，在其最大劑量時(shí)分別僅為9±0.6％，5±0.9％)。葫蘆巴堿不誘導(dǎo)產(chǎn)生任何溶栓響應(yīng)，對2-PYR的響應(yīng)也非常微弱(＜10％)并且短暫(＜15分鐘)。對MNA+、煙酰胺和煙酸產(chǎn)生溶栓作用的效能和持續(xù)時(shí)間與這些化合物誘導(dǎo)6-氧代-PGF1α釋放入動(dòng)脈血中的模式有關(guān)。在注射MNA+(30mg/kg)15分鐘后就誘導(dǎo)產(chǎn)生6-氧代-PGF1α水平的極大增加(由104±7pg/mL增至460±58pg/mL)，隨后達(dá)到平臺(tái)值大約400pg/mL至少維持1小時(shí)。另一方面，在對MNA+的響應(yīng)中TXB2和PGE2水平均無顯著變化。TXB2水平的緩慢增加是時(shí)間依賴性的，注射鹽溶液后也觀察的到。在注射煙酰胺或注射煙酸(30mg/kg)后6-氧代-PGF1α的水平不增加。
在吲哚美辛(5mg/kg)存在時(shí)，對MNA+的溶栓響應(yīng)消失，類似于MNA-誘導(dǎo)的6-氧代-PGF1α的釋放。重要的是，MNA+(30mg/kg)誘導(dǎo)的血栓溶解與動(dòng)脈血壓降低無關(guān)。在體外，膠原誘導(dǎo)的富血小板血漿的凝集作用在MNA+濃度高達(dá)10mM時(shí)也不受影響，由于MNA+直接作用于血小板，因此排除了富血小板血栓在體內(nèi)消散的可能性。而且，MNA+(1mM)不抑制膠乳誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞的激活作用，暗示MNA+可能選擇性地作用于內(nèi)皮。
圖2顯示了在體內(nèi)MNA+誘導(dǎo)的溶栓響應(yīng)，圖3顯示血液中6-氧代-PGF1α(穩(wěn)定的PGI2代謝物)水平附隨增加。煙酰胺、煙酸(圖4)、葫蘆巴堿和2-PYR(圖5)沒有表現(xiàn)出顯著的血栓溶解活性。然而，MAP+(30mg/kg)和MNAF+(30mg/kg)均誘導(dǎo)產(chǎn)生與30mg/kgMNA+誘導(dǎo)的血栓溶解響應(yīng)相當(dāng)?shù)娜芩憫?yīng)(圖6和圖8)。MAP+誘導(dǎo)的血栓溶解作用與PGI2的釋放有關(guān)(圖7)，與MNA+誘導(dǎo)的血栓溶解情形相似。MNA+(30-300mg/kg)不引起低血壓。如圖9和圖10顯示，MNA+不抑制膠原誘導(dǎo)的血小板凝集作用和膠乳誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞激活作用。前一種響應(yīng)依賴于COX1-TXA2，被阿司匹林所消除，而后一種則依賴于NADPH氧化酶，被DPI或夾竹桃麻素所消除。
實(shí)施例2患者體內(nèi)抗動(dòng)脈硬化作用在15名脂質(zhì)代謝障礙患者中研究MNA+的抗動(dòng)脈硬化作用。
入組標(biāo)準(zhǔn)是高TG水平(≥250mg/dl)，低HDL水平(男性≤35mg/dl，女性≤45mg/dl)。患者平均年齡是61.4歲(45-81歲之間)。
患者用MNA+治療2周。MNA+經(jīng)口服給藥，一日三次，餐后一個(gè)膠囊(30mg MNA+)。
在基線和治療后2周測定TC、TG、HDL的血漿水平。如果可能的話(歸因于高TG水平)在上述情況下測定LDL水平。
發(fā)現(xiàn)在基線和測定2周之間MNA+降低了TC(267.0相對于225.1mg/dl)(-15.7％)和TG(472.6相對于249.9mg/dl)(-47.1％)的水平。在2周的治療后還觀察到HDL水平增高(39.2對53.4mg/dl)(36.2％)。觀察到TG/HDL比顯著降低(13.9對5.8)。
權(quán)利要求
1.式I的吡啶鹽 其中R是NH2、CH3或N(H)CH2OH，X是藥學(xué)可接受的平衡離子，制備治療和/或預(yù)防與血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮前列環(huán)素PGI2產(chǎn)生不足有關(guān)的病癥或疾病的血管保護(hù)劑的用途。
2.如權(quán)利要求1的用途，其中所述的血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮前列環(huán)素PGI2產(chǎn)生不足伴隨著高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或低HDL水平。
3.如權(quán)利要求1或2的用途，其中所述的病癥或疾病是動(dòng)脈粥樣硬化。
4.如權(quán)利要求1或2的用途，其中所述的病癥或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)的急性心血管事件特別是心臟性猝死、急性冠脈綜合征(包括不穩(wěn)定型冠心病和心肌梗塞)、需要冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)(PCI)、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、任意類型的體外循環(huán)手術(shù)、缺血性中風(fēng)或末梢循環(huán)血管形成術(shù)。
5.如權(quán)利要求1或2的用途，其中所述的病癥或疾病是慢性冠心病、局部缺血性腦血管發(fā)作或者是四肢動(dòng)脈粥樣硬化包括血栓閉塞性脈管炎患者的動(dòng)脈粥樣硬化。
6.如權(quán)利要求1的用途，其中所述的病癥或疾病選自動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素組，包括以下高膽固醇血癥、動(dòng)脈高血壓、吸煙、高同型半胱氨酸血癥、胰島素抵抗、糖尿病、絕經(jīng)、衰老、肥胖癥、心理應(yīng)激、感染、炎癥狀態(tài)包括牙周疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、異體移植物血管病變或硝酸鹽耐藥性。
7.如權(quán)利要求1的用途，其中所述的病癥或疾病是血脂障礙，特別是高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥，尤其是伴有低HDL血漿水平的高膽固醇血癥或高甘油三酯血癥。
8.如權(quán)利要求1的用途，其中所述的病癥或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化非直接相關(guān)的血栓形成，特別是與金屬人工血管(支架)移植、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、血液透析、靜脈血栓栓塞性疾病相關(guān)的血栓形成。
9.如權(quán)利要求1的用途，其中所述的病癥或疾病選自以下的組慢性心力衰竭、肺動(dòng)脈高壓、微脈管糖尿病并發(fā)癥如糖尿病性視網(wǎng)膜病和腎病、糖尿病性神經(jīng)病變、腎病綜合征、慢性腎功能衰竭、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、囊性纖維病變、慢性阻塞性肺病(COPD)、先兆子癇/子癇、勃起機(jī)能障礙、多囊卵巢綜合征、睡眠性呼吸暫停、全身性紅斑狼瘡、鐮狀細(xì)胞性貧血、非特異性炎性腸病、胃或十二指腸潰瘍、青光眼、慢性肝病、原發(fā)性淀粉樣變性、神經(jīng)退行性疾病。
10.如權(quán)利要求9的用途，其中所述的病癥或疾病是慢性阻塞性肺病。
11.如權(quán)利要求9的用途，其中所述的病癥或疾病是慢性肝病，特別是病毒性肝炎。
12.如權(quán)利要求9的用途，其中所述的神經(jīng)退行性疾病選自血管性癡呆、阿爾茨海默氏病和帕金森氏病。
13.如權(quán)利要求9的用途，其中所述的疾病是胃或十二指腸潰瘍。
14.如權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的用途，其中所述的血管保護(hù)劑是口服給藥劑型。
15.如權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的用途，其中所述的血管保護(hù)劑是胃腸道外給藥劑型。
16.如權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的用途，其中所述的血管保護(hù)劑是通過吸入給藥至氣管的劑型。
17.如權(quán)利要求10的用途，其中所述的病癥或疾病是慢性阻塞性肺病，藥劑是吸入給藥劑型。
18.如權(quán)利要求1至17任一項(xiàng)的用途，其中R是CH3基團(tuán)。
19.如權(quán)利要求1至17任一項(xiàng)的用途，其中R是NH2基團(tuán)。
20.如權(quán)利要求1至17任一項(xiàng)的用途，其中R是N(H)CH2OH基團(tuán)。
21.如權(quán)利要求1或2的用途，其中所述的吡啶鹽是1-甲基煙酰胺鹽，所述的病癥或疾病是高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或低HDL水平。
22.一種治療或預(yù)防與血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和內(nèi)皮PGI2產(chǎn)生不足有關(guān)的病癥或疾病的方法，包括給予有需要的受試者治療有效量的式I吡啶鹽 其中R是NH2、CH3或N(H)CH2OH，X是藥學(xué)可接受的平衡離子。
23.如權(quán)利要求22的方法，其中所述的血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮PGI2產(chǎn)生不足伴隨著高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或低HDL水平。
24.如權(quán)利要求22或23的方法，其中所述的病癥或疾病是動(dòng)脈粥樣硬化。
25.如權(quán)利要求22或23的方法，其中所述的狀況或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)的急性心血管事件特別是心臟性猝死、急性冠脈綜合征(包括不穩(wěn)定型冠心病和心肌梗塞)、需要冠狀動(dòng)脈血管成形術(shù)(PCI)、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、缺血性中風(fēng)或末梢循環(huán)血管形成術(shù)。
26.如權(quán)利要求22或23的方法，其中所述的病癥或疾病是慢性冠心病、局部缺血性腦血管發(fā)作或者是四肢動(dòng)脈粥樣硬化包括血栓閉塞性脈管炎患者的動(dòng)脈粥樣硬化。
27.如權(quán)利要求22或23的方法，其中所述的病癥或疾病選自動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素組，包括以下高膽固醇血癥、動(dòng)脈高血壓、吸煙、高同型半胱氨酸血癥、胰島素抵抗、糖尿病、絕經(jīng)、衰老、肥胖癥、心理應(yīng)激、感染或炎癥狀態(tài)包括牙周疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、異體移植物血管病變或硝酸鹽耐藥性。
28.如權(quán)利要求22或23的方法，其中所述的病癥或疾病是血脂障礙，特別是高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥，尤其是伴有低HDL血漿水平的高膽固醇血癥或高甘油三酯血癥。
29.如權(quán)利要求22或23的方法，所述病癥或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化非直接相關(guān)的血栓形成，特別是與金屬人工血管(支架)移植、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、任意類型的體外循環(huán)手術(shù)、血液透析、靜脈血栓栓塞性疾病相關(guān)的血栓形成。
30.如權(quán)利要求22或23的方法，其中所述的病癥或疾病選自以下的組慢性心力衰竭、肺動(dòng)脈高壓、微脈管糖尿病并發(fā)癥如糖尿病性視網(wǎng)膜病和腎病、糖尿病性神經(jīng)病變、腎病綜合征、慢性腎功能衰竭、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、囊性纖維病變、慢性阻塞性肺病(COPD)、先兆子癇/子癇、勃起機(jī)能障礙、多囊卵巢綜合征、睡眠性呼吸暫停、全身性紅斑狼瘡、鐮狀細(xì)胞性貧血、非特異性炎性腸病、胃或十二指腸潰瘍、青光眼、慢性肝病、原發(fā)性淀粉樣變性、神經(jīng)退行性疾病。
31.如權(quán)利要求30的方法，其中所述的神經(jīng)退行性疾病選自血管性癡呆、阿爾茨海默氏病和帕金森氏病。
32.如權(quán)利要求30的方法，其中所述的疾病是胃或十二指腸潰瘍。
33.如權(quán)利要求30的方法，其中所述的病癥或疾病是慢性阻塞性肺病。
34.如權(quán)利要求30的方法，其中所述的病癥或疾病是慢性肝病，特別是病毒性肝炎。
35.如權(quán)利要求22或23的方法，其中式I的吡啶鹽通過口服給藥。
36.如權(quán)利要求22或23的方法，其中式I的吡啶鹽經(jīng)胃腸道外給藥。
37.如權(quán)利要求22或23的方法，其中式I的吡啶鹽通過吸入給藥至氣管。
38.如權(quán)利要求22或23的方法，其中所述的病癥或疾病是慢性阻塞性肺病，藥劑為吸入給藥劑型。
39.如權(quán)利要求22或23的方法，其中R是CH3基團(tuán)。
40.如權(quán)利要求22或23的方法，其中R是NH2基團(tuán)。
41.如權(quán)利要求22或23的方法，其中R是N(H)CH2OH基團(tuán)。
42.如權(quán)利要求22或23的方法，其中吡啶衍生物與心血管藥一起給藥。
43.如權(quán)利要求22或23的方法，其中所述的吡啶鹽是1-甲基煙酰胺鹽，所述的病癥或疾病是高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或低HDL水平。
44.提高哺乳動(dòng)物前列環(huán)素水平的方法，包括口服給藥有效量的式I吡啶鹽 其中R是NH2、CH3或N(H)CH2OH，X是藥學(xué)可接受的平衡離子。
45.式I吡啶鹽 其中R是NH2、CH3或N(H)CH2OH，X是身體消耗可接受的平衡離子，在口服食品補(bǔ)充劑中的用途。
46.式I吡啶鹽 其中R是NH2，CH3或N(H)CH2OH，X是身體消耗可接受的平衡離子，制備用于哺乳動(dòng)物與血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮前列環(huán)素(PGI2)產(chǎn)生不足有關(guān)的狀態(tài)或疾病下血管保護(hù)的營養(yǎng)制劑的用途。
47.如權(quán)利要求46的用途，其中所述的血管內(nèi)皮機(jī)能不良、氧化應(yīng)激和/或內(nèi)皮前列環(huán)素(PGI2)產(chǎn)生不足伴隨著高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或低HDL水平。
48.如權(quán)利要求46或47的用途，其中所述的病癥或疾病是慢性冠心病、局部缺血性腦血管發(fā)作或者是四肢動(dòng)脈粥樣硬化包括血栓閉塞性脈管炎患者的動(dòng)脈粥樣硬化。
49.如權(quán)利要求46或47的用途，其中所述的病癥或疾病選自動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素組，包括以下高膽固醇血癥、動(dòng)脈高血壓、吸煙、高同型半胱氨酸血癥、胰島素抵抗、糖尿病、絕經(jīng)、衰老、肥胖癥、心理應(yīng)激、感染、炎癥狀態(tài)包括牙周疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、異體移植物血管病變或硝酸鹽耐藥性。
50.如權(quán)利要求46或47的用途，其中所述的病癥或疾病是血脂障礙，特別是高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥，尤其是伴有低HDL血漿水平的高膽固醇血癥或高甘油三酯血癥。
51.如權(quán)利要求46或47的用途，所述病癥或疾病是與動(dòng)脈粥樣硬化非直接相關(guān)的血栓形成，特別是與金屬人工血管(支架)移植、冠狀主動(dòng)脈旁通道手術(shù)(CABG)、任意類型的體外循環(huán)手術(shù)、血液透析、靜脈血栓栓塞性疾病相關(guān)的血栓形成。
52.如權(quán)利要求46的用途，其中內(nèi)皮前列環(huán)素產(chǎn)生不足與衰老有關(guān)。
53.如權(quán)利要求46至52的用途，其中R是CH3基團(tuán)。
54.如權(quán)利要求46至52的用途，其中R是NH2基團(tuán)。
55.如權(quán)利要求46至52的用途，其中R是N(H)CH2OH基團(tuán)。
56.如權(quán)利要求46至52的用途，其中所述的吡啶鹽是1-甲基煙酰胺鹽，所述的病癥或疾病是高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或低HDL水平。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I的吡啶鎓鹽其中R是NH
文檔編號(hào)A61P3/10GK1905875SQ200580001712
公開日2007年1月31日 申請日期2005年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月12日
發(fā)明者J·戈比克, S·馳羅匹克 申請人:法米納有限公司