專利名稱：一種控制家畜性別及防治其子宮炎的制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種控制家畜性別及防治其子宮炎的制劑配方。
背景技術：
控制家畜的遺傳和表型性別可增加選育強度，獲得最大的遺傳進展，提高母畜的繁殖效率，增加畜牧業(yè)的經濟效益，再者，性別控制還可防止牛的異性孿生不育癥，它的應用必將促進畜牧業(yè)的發(fā)展。當前，控制性別的方法主要有三類受精前X、Y精子分離技術，附植前胚胎的性別鑒定技術，妊娠早期胎兒性別診斷技術。
受精前X、Y精子分離技術主要包括精子的核型分析法、免疫學方法、沉降法、流式細胞儀法。精子的核型分析法是用Quinaerine對精子染色后，根據(jù)Y染色體是否產生熒光來區(qū)別X、Y精子，有39-47％Y染色體顯示出熒光點(F-小體)；免疫學方法是用H-Y抗血清免疫親和柱層析方法對小鼠的精液進行分離，H-Y陽性的小鼠精z液授精后得到了90％的雄性后代；沉降法是根據(jù)非平衡沉降或密度梯度的平衡沉降原理進行的，離心富集X精子，其富集率為94％，盡管這一結果非常理想，但是后來沒有人能重復這些數(shù)據(jù)；流式細胞儀法分離X、Y精子是根據(jù)X、Y精子的密度大小(因X染色體帶有更多的DNA)進行的，用這項技術生產的所有后代的形態(tài)都很正常，豬和兔的后代經兩代繁殖表現(xiàn)出了正常的繁殖性能(Johnson，1994)。然而，當前用流式細胞儀分離精子這項技術的主要缺陷是分離精子的效率太低，每小時只能分離3.5×105個精子，就很難在人工授精技術的常規(guī)使用中被接受。受精前X、Y精子分離技術是利用X、Y精子之間在物理和化學方面存在差異為出發(fā)點，如精子的大小、形狀、重量、密度、活力(含運動類型和速度)、表面電荷、DNA含量以及酶活性等，這些差異為X、Y精子的分離提供了理論依據(jù)，然而，這些方法分離后的X、Y精子的比例的改變不太穩(wěn)定，同時精子活力受到影響導致人工受精難度加大，換句話說，這些技術日前還不能真正地應用于畜牧生產。(GREENFIELD A.Gene，celland organsrecent developments in the molecular genetics of mammaliansex determination[J].Mammalian Genome，1998，9683-687；葛寶生，李善如，張忠誠，陳永福，哺乳動物的性別控制，內蒙古畜牧科學，1998，2期P16-17)附植前胚胎的性別鑒定技術主要是指免疫學方法、X染色體連鎖酶定量法、細胞遺傳學方法(核型分析)、分子生物學方法、胚胎克隆法。免疫學方法又包括間接免疫熒光法、囊胚形成抑制法、細胞毒法。間接免疫熒光法是將胚胎在含有H-Y抗血清或單克隆抗體的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，然后再加入熒光素標記的第一抗體，在熒光顯微鏡下觀察是否呈現(xiàn)特異熒光，White等(1987)用染色體分析法對間接免疫熒光法鑒別的牛、豬和綿羊胚胎的結果進行了驗證，在牛胚胎中雄性符合率為85％，雌性為97％；綿羊胚胎雄性符合率為84％，雌性為85％，豬胚胎雄性符合率為77％，雌性為86％(Wbite，1987；Wach-tel，1988)，然而，該法鑒定準確率不是很高，主要是因為H-Y抗原是一個弱抗原，H-Y抗血清的特異性較差，判斷熒光胚或無熒光胚參與了較多的人為主觀因素；囊胚形成抑制法是利用H-Y抗體和胚胎發(fā)育的差異來可逆地抑制雄性?？芭呦蚰遗叩陌l(fā)育，從而達到性別鑒定的目的；細胞毒法鑒定胚胎性別是用含有H-Y抗血清及補體的培養(yǎng)液培養(yǎng)胚胎，表達H-Y抗原的雄性胚胎有一定程度的細胞裂解或發(fā)育受阻不能形成正常的囊胚，此類胚胎判為雄性，因這種方法對雄性胚胎有損傷性，故日前已很少使用。X染色體連鎖酶定量法是根據(jù)X染色體編碼的酶的活性雌性是雄性的兩倍這一事實，用此法鑒定胚胎性別的準確率為64％，但是，鑒于X染色體失活機理和失活時間還不很清楚，加之酶活性差異甚微，故本法難以應用。細胞遺傳學方法(核型分析)是經典的胚胎性別鑒定法，在胚胎發(fā)育早期，雌性胚胎中的一條X染色體處于暫時失活狀態(tài)，在雌性胚胎細胞的核膜附近會出現(xiàn)一個著色較深的異染色質小塊，稱為Barr氏小體，這種方法雖然準確率達100％，但屬損傷法，再者得到中期分裂相的難度很大，也相當費時，不適用于生產實際，只可用來驗證其它性別鑒定技術。分子生物學方法是從胚胎取10-20個細胞做原位雜交(Leonard等)，其胚胎性別鑒定準確率為95％(81/85)，用PCR技術檢測SRY基因的有無即可判定胚胎的性別，1992年，曾溢濤和胡明信等參照人和小鼠的SRY基因序列設計了一對引物，對17枚胚胎樣本(其中4枚整胚，11枚切割胚，2枚二分胚)進行PCR體外擴增作對照驗證，其性別鑒定結果準確率達100％，這種方法準確度較高，只需取2-3個卵裂球細胞，且3h內可完成，但是PCR擴增SRY法的操作過程極易污染，且對胚胎有一定損傷，選出的胚胎妊娠率達到45％左右，經濟效益不可觀。胚胎克隆法(核移植法)是將分離的卵裂球或成體細胞(核供體)與成熟并去核的卵母細胞(核受體)融合，不經有性繁殖過程連續(xù)地復制遺傳相同的胚胎，并經胚胎移植獲得大量性別一致的復制后代，用胚胎克隆方法來實現(xiàn)性別控制，具有誘人的前景，但日前該項技術在生產上還不成熟。(Johnson L A.Isolation of X-and Y-bearingspermatozoa preseletion[J].Therionenolony，1994(41)51-56；葛寶生，李善如，張忠誠，陳永福，哺乳動物的性別控制，內蒙古畜牧科學，1998，2期P16-17)妊娠早期胎兒性別診斷技術是用核型分析、H-Y抗原、DNA探針鑒定經羊膜穿刺得到的細胞，或者是直腸超聲波診斷法鑒定胎兒性別。這種方法只在農場條件下鑒定牛(Curran，1992)和馬(Curran等，1989)胎兒的性別，是通過鑒別和確定生殖結節(jié)與周圍結腸的相對位置來鑒定胎兒的性別的。(聶光軍，奶牛的性別控制，中國奶牛，2002，539-41；陳從英，黃路生，陳靜波等，牛早期胚胎性別鑒定PCR反應體系的優(yōu)化研究[J]，畜牧獸醫(yī)學報2003，34(3)，209-212；朱曉華，趙力里，王志躍，家畜性別決定的機制及其控制的研究進展[J]，動物科學與動物醫(yī)學，2001，18(1)22-24)控制外環(huán)境方法是通過調整家畜的營養(yǎng)、控制授精時間和子宮pH值等手段來實現(xiàn)對家畜性別比例的控制。母牛在飼料不足或飼喂酸性飼料類型后多產雄犢，反之飼料豐富或飼喂堿性飼料多產雌犢。排卵前一定時間輸精多產雌犢，控制授精時間的方法較簡便，但對掌握適時輸精的技術要求較高。Y精子對酸性環(huán)境的耐受力比X精子差，而堿性環(huán)境則相反，當解凍液或母牛生殆道的pH值低于6.8時，Y精子的活力減弱，運動緩慢，失去了較多與卵子結合的機會故后代雄性牛犢數(shù)少，當pH值大于7.0時，則Y精子的活力增強，有較多的與卵子結合的機會故后代雄性牛犢多。(姜忠玲，王國志，奶牛性別控制的研究途徑與現(xiàn)狀，黑龍江動物繁殖，第13卷第2期2004年P10-12；李馨，楊雋，郭志光，家畜性別控制研究現(xiàn)狀與展望，內蒙古畜牧科學，1997，(2)15-18)控制外環(huán)境方法是難以穩(wěn)定其控制條件的，從而使家畜后代比例難以得到理想的控制，這種方式在生產上也只是輔助手段。(陳元明，蔡正華，劉殿奎等，不同授精時間對仔豬性比影響的研究，畜牧與獸醫(yī)，1996，26(3)，P251-254)子宮內膜炎是家畜子宮粘膜的粘液性或化膿性炎癥，子宮感染是導致本病的主要原因。子宮內膜炎多繼發(fā)于家畜難產處理、胎衣不下及子宮脫垂的治療處理過程中；家畜配種消毒不嚴格、生殖器官傳染病也是引起子宮內膜炎的常見原因。子宮內膜炎是引起家畜難配、難產的一種既常見又麻煩的不孕癥。家畜子宮內膜炎隱性、急性、慢性病之分隱性子宮內膜炎指家畜生殖器官無明顯異常，發(fā)情周期正常，但屢配不孕，只在發(fā)情時，從陰道流出的粘液帶有渾濁狀；急性子宮內膜炎一般發(fā)生于流產后或產后胎衣不下時，體溫升高，食欲減退，精神沉郁，嚴重時拱背，努責，常做排尿姿勢，從陰道流出粘性或粘膿性分泌物，直腸檢查，發(fā)現(xiàn)子宮角粗大而肥厚，下沉，子宮收縮反應微弱，觸摸時有波動感。慢性子宮內膜炎是由急性子宮內膜炎繼發(fā)而來，發(fā)情周期不正常，當發(fā)情時，從陰道中可排出渾濁帶有絮狀物或膿汁的分泌物，外陰部常略帶腫脹、外翻。直腸檢查發(fā)現(xiàn)子宮角變粗、增大，收縮反映微弱，如有分泌物積聚，則感覺有輕微波動感。(北京農業(yè)大學主編，家畜繁殖學(第二版)，農業(yè)出版社，1988；張彥明，牛子宮內膜炎的研究與臨床進展，黃牛雜志，1998，24(1)，P34-37)目前治療家畜子宮內膜炎的總體原則是消除炎癥，防止擴散，促進子宮機能恢復。利用抗生素、中藥或西藥清洗子宮及子宮內用藥是當前治療家畜子宮內膜炎的常用方法，慢性卡他性和慢性卡他膿性子宮內膜炎一般先用消毒性沖洗液(0.5％的來蘇兒或0.1％高錳酸鉀液)沖洗，再用5％熱鹽水沖洗，洗后灌注抗生素，待子宮病變明顯消失后，再用1％的生理鹽水或1-2％的小蘇打水沖洗，洗后灌注抗生素；慢性膿性子宮內膜炎則先用0.1％碘溶液沖洗，再用0.1％雷佛奴兒或0.1％高錳酸鉀溶液沖洗，然后用5％的熱鹽水沖洗。當子宮病變消失后，再用糖、小蘇打、鹽溶液(糖90克、小蘇打0.5-3克、食鹽1克、蒸餾水加至1000毫升)沖洗，然后向子宮內灌注青霉素、鏈霉素；子宮積液、積膿及胎兒干尸化經常先肌注苯甲酸雌二醇或己烯雌酚，待子宮頸口開張后，再肌注腦垂體后葉素或催產素，然后清除子宮內容物，按卡他性或膿性子宮內膜炎的沖洗灌注程序進行處理，待治愈后，配種前4-8小時再向家畜子宮灌注抗生素；隱性子宮內膜炎因病變較輕，在家畜發(fā)情當天用1％小蘇打水或生理鹽水沖洗子宮，沖洗后導出洗液，再向子宮內注入青霉素，鏈霉素或10％磺胺嘧啶鈉。在配種前4-8小時，再向子宮注入青霉素、鏈霉素；目前家畜子宮內膜炎常用的灌注子宮的西藥有各種抗生素，如青霉素、鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、金霉素、紅霉素等和磺胺類藥物；中藥有苦參、當歸、益母草、黃芩。以上各種方劑用量按家畜的體重定量。(Paisley L G，Mickelsen W D，Anderson P B.Mechanismsand therapy for retained fetal membrans and uterine infections ofcowsareview[J]，Theriogenology，1986，25353-381；王志榮，母牛隱性子宮炎的診斷治療，中國獸醫(yī)雜志，1995，21(10)，P43；王祖昆，黃勝，黃金祿等，新奶牛子宮炎防止藥物的研究，黑龍江動物繁殖，2003，11(4)，P7-8)利用抗生素類藥物治療子宮內膜炎易產生殘留，而且過度使用抗生素，會使家畜子宮與陰道內的有害菌群產生抗藥性；上述中藥復方制劑對子宮內膜炎的治療較慢，而且難以治療中、重度子宮內膜炎。

發(fā)明內容
本發(fā)明利用下述方案實現(xiàn)了解決目前家畜性別控制繁育和其子宮內膜炎治療中存在的問題。
本發(fā)明做成的制劑的主要成份和配比如下碘酊(5％)15-25ml(內蒙古蒙東動物藥品廠)；甘油(分析純)5-20ml(天津大學化學試劑廠)；維生素B115-20ml(上海申廣動物保健品有限公司)；維生素A、D、E合劑5-10ml(中國農業(yè)科學院畜牧研究所)；氯化鈉(1％)15-25ml；(內蒙古向陽赤峰獸藥廠)；硫酸鹽類(15-25％硫酸銅)15-25ml。(徐州摩爾醫(yī)藥試劑廠)。
將上述配伍成份按氯化鈉、硫酸鹽類、維生素B1、維生素A、D、E合劑、甘油、碘酊順序混合，在常溫下攪拌均勻。
本發(fā)明做成的制劑呈棕紅色液體，無沉淀，無懸浮顆粒。本發(fā)明做成的制劑注入家畜子宮體后約10-15小時，會隨著家畜子宮平滑肌的收縮而排出體外，制劑不會殘留在家畜子宮體內。
本發(fā)明配方中的碘能氧化病原體胞漿蛋白的活性基因，并能與蛋白質氨基結合使其變性，對細菌、芽胞、病毒、阿米巴原蟲都有很強的殺滅作用；甘油為潤滑性瀉藥，能潤滑并刺激腸壁，作用溫和。而本發(fā)明配方中的硫酸鹽類(硫酸銅)藥品性味酸疼，解毒殺蟲，止癢燥濕，止血止瀉、清熱消炎、收斂濕瘡等功效(《本草綱目》記載)，再者，硫酸鹽類(硫酸銅)易溶于水，水溶液呈弱酸性，水解的銅離子(Cu2+)能與蛋白質結合成蛋白鹽；維生素E又叫生育酚，能維持生殖器官的正常機能，可提高子宮內膜對雌激素的感受性作用；維生素A是維持生長，生殖和視覺功能的必需物質，具有促進胎兒、幼兒生長發(fā)育，增強人體免疫抗病的能力。
本發(fā)明做成的制劑注入家畜子宮體時，由于制劑的作用會使宮頸粘液變得粘稠濃厚，精子在里面游動受到限制，尤其是Y精子比X精子更難以穿過粘稠的宮頸粘液而與卵子結合，起到隔離一部分Y精子的作用。在用本發(fā)明做成的制劑治療家畜子宮疾病的同時，制劑中的碘、鉀、氯、鈉、碳、氫、銅和硫等離子，在丙三醇滲透壓的作用下，參與子宮內膜組織、細胞原漿蛋白質的結合使宮頸粘液變得粘稠濃厚，精子在里面游動受到限制，尤其是纖弱的Y精子比起魁梧強健的X精子更顯得元氣不足，無力穿過粘調的宮頸粘液去同卵子會見，從而影響了正常的性控比例。再者，本發(fā)明做成的制劑呈酸性，改變了家畜子宮局部環(huán)境的PH值，抑制了Y精子的活力，從而也影響了正常的性控比例，在適應環(huán)境能力方面，X精子比Y精子強得多，一般來說，精子都是嗜堿而厭酸，尤以Y精子更為明顯，如果雌性家畜生殖道酸性偏高時，行動敏捷的Y精子很快變得遲鈍起來，但X精子對酸性耐受能力較強，受酸性環(huán)境影響不太大。
利用本發(fā)明做成的制劑改變家畜子宮內的生理生化環(huán)境，抑制Y精子的活力，增強X精子授精機率，不會降低超排家畜胚胎的數(shù)量和質量，雌性率可達80-90％。另外，由于操作簡便，成本低，比日前人工授精母牛的產母犢率48％提高了32％-42％，故可以在家畜生產中推廣應用。
具體實施例方式
本發(fā)明具體實施方式
如下在常溫下，將氯化鈉(1％)，15-25ml；硫酸鹽類(15-25％硫酸銅)，15-25ml；維生素B1，15-20ml；維生素A、D、E合劑，5-10ml；甘油(分析純)，5-20ml；碘酊(5％)，15-25ml依次混合，攪拌均勻。
家畜發(fā)情前2-4天，將本發(fā)明做成的制劑40-50ml注入其子宮內，正常授精，產母率可達80-90％。
對家畜輕、中度子宮內膜炎，將本發(fā)明做成的制劑40-50ml注入其子宮內，間隔5-7天，連用2-3次，對家畜重子宮內膜炎用藥3-5次，治愈率達98％以上。
實施例1配方(100ml毫升)主要成份與配比如下碘酊(5％)20ml；甘油(分析純) 10ml；維生素B1 20ml；維生素A、D、E合劑10ml；氯化鈉(1％) 20ml；硫酸銅(15-25％) 20ml。
將上述配伍成份按氯化鈉、硫酸鹽類、維生素B1、維生素A、D、E合劑、甘油、碘酊順序混合，在常溫下攪拌均勻。
在奶牛性周期12-16天內，將本發(fā)明做成的制劑40-50ml注入其子宮內，正常人工授精，產母率可達80-90％。
對奶牛輕、中度子宮內膜炎，將本發(fā)明做成的制劑40-50ml注入其子宮內，間隔5-7天，連用2-3次，對奶牛重子宮內膜炎用藥3-5次，治愈率達98％以上。
實施例2配方(100ml毫升)主要成份如下碘酊(5％)25ml；甘油(分析純) 15ml；維生素B1 15ml；維生素A、D、E合劑5ml；氯化鈉(1％) 15ml；硫酸銅(15-25％) 25ml。
將上述配伍成份按氯化鈉、硫酸鹽類、維生素B1、維生素A、D、E合劑、甘油、碘酊順序混合，在常溫下攪拌均勻。
在母豬性周期15-18天內，將本發(fā)明做成的制劑25-30ml注入其子宮內，正常授精，產母率可達80-85％。
對母豬輕、中度子宮內膜炎，將本發(fā)明做成的制劑25-30ml注入其子宮內，間隔5-7天，連用2-3次，對母豬重子宮內膜炎用藥3-5次，治愈率達98％以上。
權利要求
1.一種控制家畜性別及防治其子宮炎的制劑配方。其特征是該制劑影響家畜性別比例，并可治療家畜子宮內膜炎等不孕癥。
2.根據(jù)權利要求1的方法，本發(fā)明做成的制劑的主要成份和配比如下碘酊(5％)，15-25ml；甘油(分析純)，5-20ml；維生素B1，15-20ml；維生素A、D、E合劑，5-10ml；氯化鈉(1％)，15-25ml；硫酸鹽類(15-25％硫酸銅)，15-25ml。
3.根據(jù)權利要求1-2的方法，其特征在于將權利要求2中所述的成份按氯化鈉、硫酸鹽類、維生素B1、維生素A、D、E合劑、甘油、碘酊順序混合，在常溫下攪拌均勻。
4.根據(jù)權利要求1-3中之一所述的方法，其特征在于本發(fā)明做成的制劑呈棕紅色液體，無沉淀，無懸浮顆粒。
5.根據(jù)權利要求1-4中之一所述的方法，其特征在于家畜發(fā)情前2-4天，將本發(fā)明做成的制劑40-50ml注入其子宮內，正常授精，產母率可達80-90％。
6.根據(jù)權利要求1-4中之一所述的方法，其特征在于對家畜輕、中度子宮內膜炎，將本發(fā)明做成的制劑40-50ml注入其子宮內，間隔5-7天，連用2-3次，對家畜重子宮內膜炎用藥3-5次，治愈率達98％以上。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種控制家畜性別及防治其子宮炎的制劑配方。本發(fā)明做成的制劑的主要成份和配比碘酊(5％)，15－25ml；甘油(分析純)，5－20ml；維生素B1，15－20ml；維生素A、D、E合劑，5－10ml；氯化鈉(1％)，15－25ml；硫酸鹽類(15－25％硫酸銅)，15－25ml。家畜發(fā)情前2－4天，將本發(fā)明做成的制劑40－50ml注入其子宮內，正常授精，產母率可達80－90％。對家畜輕、中度子宮內膜炎，將本發(fā)明做成的制劑40－50ml注入其子宮內，間隔5－7天，連用2－3次，對家畜重子宮內膜炎用藥3－5次，治愈率達98％以上。
文檔編號A61K31/07GK1931185SQ20051010276
公開日2007年3月21日 申請日期2005年9月15日 優(yōu)先權日2005年9月15日
發(fā)明者白俊品, 童志清 申請人:白俊品, 北京頤和天韻新技術研究所