專利名稱：含有藥物的緩釋性微粒、其制備方法、以及含有該微粒的制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及以在生物體內消失的多孔性磷灰石衍生物的微粒為基劑的含有藥物的緩釋性微粒、其制備方法、以及含有該微粒的制劑。
背景技術：
藥物的經過長時間的微粒緩釋性注射劑迄今為止以聚乳酸-乙醇酸(PLGA)作為基劑(參見特開平11-286403，特開2000-239104以及特開2002-326960)的研究進行得很多。另外，還報告了以含有人生長激素(hGH)的PLGA作為基劑的緩釋性微膠囊(Nature Medicine，2795-799，1996)。另外以LHRH激動劑-含有亮丙瑞林的PLGA作為基劑的緩釋性微膠囊也有報告(Chemical Pharmaceutical Bulletin，361095-1103，1988)。PLGA是在生物體內水解消失的基劑，具有作為注射劑良好的性質。但是，在一般使用PLGA的微粒型的緩釋制劑中如果內封的藥物水溶性高的話，存在不能避免在給藥初期過量釋放(初期突釋)的問題。另外在制備時，不能避免有機溶劑的使用，在蛋白質性藥物中存在失活的問題。進一步，如采用作為通常使用的制備方法的溶劑除去法，在水溶性藥物的場合，其封入量在10重量％以下，對于活性弱的藥物整體給藥量增大，難于給藥。另外，制劑的平均粒徑在20μm或以上時，比較大，注射用針需要21-23G的粗針頭。還有，對于使用羥基磷灰石的藥物的緩釋性粒子已經有若干個報告(H.Gautier et al.，Journal of Biomedical Material Research，40，606-613，1998；和J.Guicheux et al.，Journal of BiomedicalMaterial Research，34，165-170，1997)。然而，所有的都是藥物和羥基磷灰石的2種成分體系，羥基磷灰石的粒徑也為40-80μm或者200μm這樣大，另外在體內的緩釋效果不清楚。進一步，吸附在羥基磷灰石粒子上的藥物(封入量)在1％以下這樣小。

發(fā)明內容
緩釋性基劑必須要選擇在給藥后、接近藥物放出結束的時間內具有從生物體消失即所謂生物體內降解或生物體內消失的性質的材料。在高水溶性藥物的場合，在給藥初期過量藥物的釋放、即初期突釋也必須要小。進一步，考慮到藥物是蛋白質藥物的場合，必須要找到極力不使用有機溶劑就可制備的緩釋性基劑和制造方法。必須要調制含有藥物的微粒中的藥物封入量在10重量％或以上，即使是23G以下的細小注射針也容易通過、藥物釋放期間至少在3天或以上的微粒制劑。
本發(fā)明人為了解決上述問題，發(fā)現通過利用多孔性磷灰石衍生物的微粒，獲得了對各種藥物的緩釋性微粒。此外還發(fā)現，通過并用水溶性二價金屬化合物和除了人成長激素的藥物，藥物釋放至少在3天或以上，以及即使高水溶性藥物也能抑制初期突釋。此外還發(fā)現，在不使用水溶性二價金屬化合物的場合也具有同樣的效果。
因此，本發(fā)明的目的是提供一種獲得對各種藥物的緩釋微粒，并提供含有藥物的緩釋性微粒、其制備法、以及含有該微粒的制劑，其中，前述含有藥物的緩釋性微粒是藥物緩釋至少在3天以上、并且即使對水溶性高的藥物也能避免初期突釋的含藥緩釋性微粒。
本發(fā)明的含有藥物緩釋性微粒包含除了人生長激素的藥物以及多孔性磷灰石衍生物，進一步，含有除了人生長激素的藥物、多孔性磷灰石衍生物以及水溶性多價金屬化合物，作為水溶性多價金屬化合物，可舉出氯化鋅、氯化鈣、氫氧化鈣、氯化鐵、氫氧化鐵、氯化鈷、氯化鋁、醋酸鋅等，其中最優(yōu)選水溶性二價金屬化合物。作為水溶性二價金屬化合物，適合的有鋅化合物以及鈣化合物，最優(yōu)選氯化鋅。其他合適的有醋酸鋅、氯化鈣等。
另外本發(fā)明的非口服用制劑以含有藥物的緩釋性微粒作為有效成分來構成。
另外，非口服給藥制劑優(yōu)選皮下注射劑或肌肉注射劑。
另外，多孔性磷灰石衍生物優(yōu)選將羥基磷灰石的構成成分-鈣的一部分作為組成在制備時置換為鋅的多孔性磷灰石衍生物。
另外，多孔性磷灰石衍生物的鋅置換率或含有比例優(yōu)選0.1-2.0。
另外，本發(fā)明的含有藥物的緩釋性微粒的制備法構成如下將多孔性磷灰石衍生物的微粒在含有藥物的水溶液中攪拌、分散，在水溶液浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中后添加含有水溶性二價金屬化合物的水溶液，使水溶性二價金屬化合物浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中，其后加入穩(wěn)定劑等添加物，冷凍干燥或真空干燥。
進一步，該制備法中，不添加含有水溶性二價金屬化合物的水溶液，因此也存在水溶性二價金屬化合物不浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中的情形。
此外，同樣，優(yōu)選在制備時將多孔性磷灰石衍生物為羥基磷灰石構成部分的鈣的一部分置換為鋅的多孔性磷灰石衍生物、多孔性磷灰石衍生物的鋅的置換或含有率為0.1-2.0、水溶性二價金屬化合物是氯化鋅或醋酸鋅。
另外對于在這里使用的除去人生長激素的藥物沒有特別的限定，優(yōu)選水溶性藥物。例如，可舉出在蛋白質藥物中，可舉出干擾素、白細胞介素、G-CSF、BDNF、FGF、EGF、各種抗體等。作為肽類藥物，可舉出GnRH及其衍生物、TRH、腦啡肽、PTH、以及降鈣素等。作為DNA關聯(lián)物質，可舉出反義鏈、RNA構成酶等。此外，還可舉出抗炎藥、類固醇、抗癡呆藥、循環(huán)系統(tǒng)疾病治療藥等。
基本的制備方法是將多孔性磷灰石衍生物的微粒在含有藥物的水溶液中攪拌、分散，充分地使水溶液浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中后，進一步添加含有水溶性二價金屬化合物的水溶液，使水溶性二價金屬化合物充分浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中。其后，加入適當的穩(wěn)定劑等添加劑，通過冷凍干燥或真空干燥得到以含有藥物的多孔性磷灰石衍生物微粒作為基劑的粉末的含有藥物的緩釋性微粒。在實際給藥時，將該獲得的粉末分散在適當的分散介質中，注射給藥到皮下或者肌肉內。通過這樣得到的微粒在室溫分散到大量的精制水中測定封入的藥物的放出，雖因藥物而異，但是相對于多孔性磷灰石衍生物達到一定的量時藥物沒有放出。即，認為是藥物浸潤到多孔性磷灰石衍生物的細孔內吸附的緣故。
這里使用的多孔性磷灰石衍生物微?？梢杂霉姆椒ǐ@得。例如可舉出記載在“山口喬、柳田博明編，牧島亮男、青木秀希著Ceramic Science Series 7Bioceramics，GIHODO SHUPPAN Co.，Ltd.，pp.7-9，1984年”中的方法等。作為多孔性磷灰石衍生物，最優(yōu)選作為羥基磷灰石組成的Ca的一部分置換為鋅的衍生物。其置換率(相對于10Ca原子的Zn的原子數)優(yōu)選為0.1-5.0，更優(yōu)選為0.1-2.0。此時，根據(Ca+Zn)/P的比率在生物體內的消失速度不同，比1.67還小的容易溶解于水，即，在生物體內消失速度快。優(yōu)選(Ca+Zn)/P的比率在1.67-1.51的范圍內。如果使用在該范圍的多孔性磷灰石衍生物，在生物體內從幾周到幾個月以內消失。其置換率或含有率(相對于10Ca原子的Zn的原子數)優(yōu)選為0.1-5.0，更優(yōu)選為0.1-2.0。在制備多孔性磷灰石時的燒結溫度低的容易溶解在水中，因此在生物體內的消失速度也變快。燒結溫度為室溫～800℃，優(yōu)選150℃-600℃。更優(yōu)選150℃-400℃。在800℃以上燒結的話在生物體內就不消失了。微粒的直徑通過燒結溫度可以控制，在0.1μm-100μm可以使用。其中優(yōu)選0.1μm-20μm。進一步，0.2μm-10μm能更優(yōu)選地利用。
上述藥物在多孔性磷灰石衍生物中的吸附率與不置換鋅的羥基磷灰石相比，多孔性磷灰石衍生物一方相當地大。這是因為通過置換或含有鋅，比表面積、氣孔率顯著變高的緣故。吸附率越大，含有藥物的緩釋性微粒的總給藥量變少，因而優(yōu)選。優(yōu)選的吸附率根據藥物的最適給藥量而異，一般地，為多孔性磷灰石類的2-30重量％。其中優(yōu)選使用5-25重量％。進一步優(yōu)選10重量％或以上的吸附物。
使藥物吸附在多孔性磷灰石衍生物中后添加的水溶性二價金屬化合物優(yōu)選Zn或Ca。其中最優(yōu)選Zn。其使用量根據藥物的物理化學性質而異，一般在多孔性磷灰石衍生物的1-70重量％范圍內使用。為了維持充分的緩釋性，優(yōu)選使用5-70重量％。使用的水溶性二價金屬化合物優(yōu)選使用氯化物、有機酸的鹽。例如可舉出氯化鋅、醋酸鋅、氯化鈣等。
以上那樣得到的含有藥物的緩釋性微粒的緩釋期間根據HAP衍生物的燒結溫度、二價金屬化合物的使用量可以控制，藥物的緩釋可在3天以上。在1周以上的緩釋也是可能的，在實用上優(yōu)選1周以上的緩釋。
最終獲得的含有藥物的緩釋性微粒的粒徑只要通過通常給藥時所用的注射針頭即可。實際上，注射針孔徑越細，對患者來說擔心越小。以表示注射針的粗度的國際標準為準，優(yōu)選通過25G以下(數字越大針頭越細)粗細的針。因此，含有藥物的緩釋性微粒的粒徑越小越優(yōu)選，但是極端小時藥物的保持量變少，且初期突釋變大。實際上優(yōu)選0.5μm-20μm。進一步更優(yōu)選0.5μm-10μm。如是10μm以下的粒子容易通過27G的注射針。這里對于使用的藥物沒有特別限制，只要是水溶性以及吸附在多孔性磷灰石衍生物上即可。水溶性的尺度可以用對于水的溶解度進行評價。其溶解度只要在100μg/ml或以上，通常就可以調制含有藥物的緩釋性微粒。更優(yōu)選溶解度在500μg/ml以上，特別優(yōu)選溶解度在1mg/ml以上。
實施例以下給出實施例對本發(fā)明進行詳細說明，當然本發(fā)明并不受到這些實施例的限制。
實施例1在磷酸倍他米松或者磷酸氫化可的松水溶液(100μL、100μg/mL)中混合規(guī)定量的多孔性羥基磷灰石(HAP)或多孔性磷灰石0.5摩爾鋅置換衍生物(HAP-Zn-0.5)的水懸浮液(100μL)，在室溫放置10分鐘后在2500G下離心，從其上清液在230nm的吸收值來定量上清液中游離的磷酸倍他米松或者磷酸氫化可的松。將期初適用的規(guī)定量的藥物量流失在上清中殘留的藥物量作為吸附量。結果示于以下表1。從表1中可知，HAP或多孔性磷灰石衍生物的量相對于藥物的量越大，藥物越以高比率吸附在HAP或多孔性磷灰石衍生物中。其吸附比與HAP相比使用多孔性磷灰石衍生物的一方顯著變高。
表1 表1中Beta表示磷酸倍他米松，Hyd表示磷酸氫化可的松。另外所謂“類固醇”表示磷酸倍他米松或者磷酸氫化可的松。
實施例2精確稱量45mg多孔性羥基磷灰石(HAP)或多孔性磷灰石衍生物(0.5摩爾鋅置換或含鋅的衍生物(HAP-Zn-0.5))，向其中加入來自干擾素-α(IFN)的2.4mg/mL溶液的IFN30μg，放置10分鐘。其后，向其中加入20mM的醋酸鋅溶液1mL，振蕩30分鐘。在該分散液中加入1.5mL水，洗滌，在定量洗滌液中的IFN時，無論是HAP的場合還是HAP-Zn-0.5的場合都沒有檢測出IFN。即，確認所有的IFN都吸附在HAP或HAP-Zn-0.5上。這樣不使用有機溶劑可以得到吸附了蛋白質-IFN的含藥微粒。洗滌后，在得到的粉末中加入含有20％FCS的PBS溶液20mL，在37℃振蕩16小時。定量在上清中溶出來的IFN，算出溶出率。得到以下表2所示的結果。
表2吸附在HAP以及HAP-Zn-0.5中的IFN的溶出率

所有的系統(tǒng)中通過添加醋酸鋅都抑制了溶出，與沒有添加的比較，顯示了長時間的緩釋性。HAP與HAP-Zn-0.5比較的話，可知HAP-Zn-0.5一方溶出延遲，顯示了更常時間的緩釋性。
權利要求
1.含有藥物的緩釋性微粒，其特征在于，包含除了人生長激素的藥物以及多孔性磷灰石衍生物。
2.含有藥物的緩釋性微粒，其特征在于，包含除了人生長激素的藥物、多孔性磷灰石衍生物、以及水溶性二價金屬化合物。
3.權利要求1或2所述的含有藥物的緩釋性微粒，其特征在于，多孔性磷灰石衍生物是將羥基磷灰石的構成成分-鈣的一部分在制備時置換為鋅的多孔性磷灰石衍生物。
4.權利要求3所述的含有藥物的緩釋性微粒，其特征在于，多孔性磷灰石衍生物的鋅置換率或含有比例為0.1-2.0。
5.權利要求2所述的含有藥物的緩釋性微粒，其特征在于，水溶性二價金屬化合物為鋅化合物。
6.權利要求5所述的含有藥物的緩釋性微粒，其特征在于，水溶性二價金屬化合物為氯化鋅或醋酸鋅。
7.非口服給藥用制劑，其特征在于，含有權利要求1-6的任一項所述的含有藥物的緩釋性微粒作為有效成分。
8.權利要求7所述的非口服給藥用制劑，其特征在于，非口服給藥用制劑是皮下注射劑或肌肉內注射劑的任一種。
9.含有藥物的緩釋性微粒的制備法，其特征在于，將多孔性磷灰石衍生物的微粒在含有藥物的水溶液中攪拌、分散，水溶液浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中后，添加含有水溶性二價金屬化合物的水溶液，使水溶性二價金屬化合物浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中，其后加入穩(wěn)定劑等添加物，冷凍干燥或真空干燥。
10.權利要求9所述的制備法，其特征在于，多孔性磷灰石衍生物是將羥基磷灰石的構成成分-鈣的一部分在制備時置換為鋅的多孔性磷灰石衍生物。
11.權利要求10所述的制備法，其特征在于，多孔性磷灰石衍生物的鋅置換率或含有比例為0.1-2.0。
12.權利要求9所述的制備法，其特征在于，水溶性二價金屬化合物為氯化鋅或醋酸鋅。
全文摘要
本發(fā)明提供一種獲得對各種藥物的緩釋微粒，并提供含有藥物的緩釋性微粒、其制備法、以及含有該微粒的制劑。其中，前述含有藥物的緩釋性微粒是藥物緩釋至少在3天以上、并且即使對高水溶性的藥物也能避免初期突釋的含藥緩釋性微粒。本發(fā)明的含有藥物的緩釋性微粒包含除了人生長激素的藥物以及多孔性磷灰石衍生物；或者是包含除了人生長激素的藥物、多孔性磷灰石衍生物、以及水溶性二價金屬化合物。其制備法是，將多孔性磷灰石衍生物的微粒在含有藥物的水溶液中攪拌、分散，在水溶液浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中后，添加含有水溶性二價金屬化合物的水溶液，使水溶性二價金屬化合物浸潤在該多孔性磷灰石衍生物中，其后加入穩(wěn)定劑等添加物，冷凍干燥或真空干燥。
文檔編號A61K45/06GK1798547SQ200480015548
公開日2006年7月5日 申請日期2004年6月11日 優(yōu)先權日2003年6月18日
發(fā)明者小川泰亮, 水島裕, 田中順三, 生駒俊之 申請人:Ltt生物醫(yī)藥株式會社, 獨立行政法人物質·材料研究機構, 格蘭尼探索研究所