專利名稱：穩(wěn)定性提高的無鋅或低鋅胰島素制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及穩(wěn)定的藥物制劑，其含有選自胰島素(例如人胰島素、牛胰島素或豬胰島素)、胰島素類似物、胰島素衍生物、活性胰島素代謝物或它們的組合的多肽；表面活性劑或多種表面活性劑的組合以及任選地防腐劑或多種防腐劑的組合；以及任選地等滲劑、緩沖劑或其它賦形劑或它們的組合，所述藥物制劑不含鋅或含有低含量的鋅。這些制劑可用于治療糖尿病，并且特別可用于胰島素泵、筆、注射器、吸入器中或者用于必須具有增強的物理穩(wěn)定性的制劑。本發(fā)明同樣涉及含有這種制劑并且能用于糖尿病的腸胃外制劑，并且涉及用于生產(chǎn)所述制劑和提高胰島素制劑穩(wěn)定性的方法。
在世界范圍內(nèi)有約1億2千萬人患糖尿病。其中，約1200萬是I型糖尿病患者。對于這種患者而言，針對其內(nèi)源性胰島素缺乏而進行的胰島素替代治療是現(xiàn)今唯一可能的治療方法。這些患者終身都依賴于胰島素注射，通常每天要注射多次。和I型糖尿病相比，II型糖尿病中基本上不缺乏胰島素，但在許多病例中，特別是在晚期，使用胰島素并任選地和口服抗糖尿病藥物聯(lián)合進行治療被認為是最滿意的治療形式。
在健康人體中，胰臟胰島素的釋放和血糖濃度精確對應。(比如飯后出現(xiàn)的)血糖水平的升高迅速地被相應的胰島素分泌的增加所補償。在空腹狀態(tài)下，血漿胰島素水平降低至基礎(chǔ)值，此基礎(chǔ)值足以保證對胰島素敏感器官和組織的葡萄糖的連續(xù)供應并使夜間肝糖的合成保持低水平。用外源性的、主要是皮下施用的胰島素代替內(nèi)源性胰島素分泌通常不能非常近似地達到上述血糖生理調(diào)節(jié)的質(zhì)量。通常，血糖可發(fā)生向上或向下的偏差，最嚴重時可能危及生命。此外，血糖水平升高多年卻無初發(fā)癥狀是嚴重的健康風險。在美國進行的大規(guī)模的DCCT研究(糖尿病控制和并發(fā)癥臨床研究組(1993)N.Engl.J.Med.329，977-986)清楚的證明長期升高的血糖水平基本上是造成糖尿病晚期損傷的原因。糖尿病晚期損傷是微血管和大血管損傷，其在一些情況下表現(xiàn)為視網(wǎng)膜病變、腎病或神經(jīng)病并可導致視力喪失、腎衰竭、截肢，而且還伴隨著患心血管疾病的風險增加。由此可以得出改進的糖尿病治療方法的主要目的是使血糖盡可能保持在生理范圍內(nèi)。根據(jù)強化胰島素治療的概念，應該通過反復每天注射快速起效和慢速起效的胰島素制劑達到該目的。快速起效制劑可在用餐時給藥以平衡餐后血糖的增加。慢速起效的基礎(chǔ)胰島素應該可以(特別是在夜間)保證胰島素的基本供給而不導致低血糖。
胰島素是由51個氨基酸組成的多肽，所述氨基酸被分為兩個氨基酸鏈A鏈有21個氨基酸，B鏈有30個氨基酸。這兩條鏈通過2個二硫鍵相互連接。胰島素制劑用于治療糖尿病已經(jīng)多年。其中不僅使用了天然產(chǎn)生的胰島素，而且最近還使用了胰島素的衍生物和類似物。
胰島素類似物是天然產(chǎn)生的胰島素即人胰島素或動物胰島素的類似物，所述類似物通過用其它氨基酸殘基代替至少一個天然的氨基酸殘基和/或增加/除去至少一個氨基酸殘基而和相應的天然產(chǎn)生的胰島素不同(否則相同)。所增加的和/或替換的氨基酸殘基也可以是非天然氨基酸殘基。
胰島素衍生物是通過化學修飾得到的天然產(chǎn)生的胰島素或胰島素類似物的衍生物?；瘜W修飾可以是例如將一個或多個特定的化學基團加到一個或多個氨基酸上。
通常，胰島素衍生物和胰島素類似物的作用與人胰島素的作用相比有些改變。
起效加速的胰島素類似物在EP 0214826，EP 0375437和EP 0678522中述及。EP 0124826尤其涉及B27和B28的替換。EP 0678522描述了B29位可以是各種氨基酸優(yōu)選脯氨酸但不是谷氨酸的胰島素類似物。EP 0375437包括B28位是賴氨酸或精氨酸的胰島素類似物，其還可以任選地在B3和/或A21位被修飾。
在EP 0419504中公開了被保護以不受化學修飾的胰島素類似物，其中B3位的天冬氨酸和至少另一個在A5、A15、A18或A21位的氨基酸被修飾。
在WO 92/00321中描述了至少一個B1-B6處的氨基酸被賴氨酸或精氨酸代替的胰島素類似物。根據(jù)WO 92/00321，這種類型的胰島素具有持久的作用。
市售的用于胰島素替代治療的天然胰島素的胰島素制劑在胰島素來源(例如牛、豬、人胰島素)以及組成方面存在差異，因此作用模式(起效和作用持續(xù)時間)可能受到影響。通過對各種胰島素制劑進行組合，可得到截然不同的作用模式，并且可以得到盡可能接近生理狀況的血糖值。目前，已上市的具有改良的動力學的胰島素不僅有所提到的天然產(chǎn)生的胰島素而且還有胰島素衍生物或類似物的制劑。現(xiàn)今的重組DNA技術(shù)使得這種改良胰島素的制備成為可能。這些胰島素包括起效迅速的“單體胰島素類似物”如胰島素Lispro、胰島素Aspart和HMR1964(Lys(B3)，Glu(B29)人胰島素)，還包括作用時間持久的胰島素Glargin。
除作用持續(xù)時間外，制劑的穩(wěn)定性對患者也是非常重要的。特別是對于暴露于特定機械壓力或較高溫度下的制劑，需要具有增強的長期物理穩(wěn)定性的穩(wěn)定化胰島素制劑。這些制劑包括例如給藥系統(tǒng)如筆、吸入系統(tǒng)，無針注射系統(tǒng)或胰島素泵中的胰島素。胰島素泵或者被佩戴在患者身上或者被植入到患者體內(nèi)。在這兩種情況下，所述制劑都暴露于體熱或運動中，并且暴露于泵的輸送運動并因此受到非常高的熱機械壓力。由于胰島素筆(一次性的和可反復使用的筆)也通常被佩戴在身體上，所以也會產(chǎn)生同樣的情況。以往的制劑在這些條件下僅具有有限的穩(wěn)定性。
胰島素可以以藥用濃度、以穩(wěn)定的含鋅六聚物的形式存在與中性溶液中，所述六聚物由3個相同的二聚體單元組成(Brange等人，Diabetes Care13923-954(1990))。通過修飾氨基酸序列可以減少胰島素的聚集。這樣，胰島素類似物Lispro例如可以主要以單體的形式存在，從而可以被吸收得更快且作用時間更短(HPT Ammon and C.Werning；Antidiabetika[Antidiabetics]；第二版；Wiss.Verl.-Ges.Stuttgart；2000；p.94.f)。然而，特別是這些以單體或二聚體形式存在的迅速起效的胰島素類似物當處于熱或機械壓力下時，表現(xiàn)出穩(wěn)定性降低且更易聚集。這使得在其中可觀察到混濁和不溶的聚集物沉淀(Bakaysa等人，美國專利5474978號)。這些高分子量的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物(二聚體、三聚體、多聚體)和聚集物不僅可降低所施用的胰島素的劑量而且也可以在病人中引起刺激或免疫反應。而且，這種不溶性聚集物可以影響和堵塞泵的套管和配管。由于鋅可以增強胰島素的穩(wěn)定性，所以無鋅或低鋅的胰島素和胰島素類似物的制劑特別容易不穩(wěn)定。特別地，因為不溶性聚集物的形成是通過單體胰島素進行的，所以起效迅速的單體胰島素類似物更易迅速聚集而且物理穩(wěn)定性差。為了保證胰島素制劑的質(zhì)量，必須避免聚集物的形成。
有各種方法可用于穩(wěn)定胰島素制劑。因此，在國際專利申請WO98/56406中已經(jīng)描述了用TRIS或精氨酸緩沖液進行穩(wěn)定的制劑。美國專利5866538描述了含有濃度為5至100mM的甘油和氯化鈉并且其穩(wěn)定性應該增強的胰島素制劑。美國專利5948751描述了通過加入甘露醇或類似的糖獲得的物理穩(wěn)定性增強的胰島素制劑。將過量的鋅加入到含鋅的胰島素溶液中同樣也能增強穩(wěn)定性(J.Brange等人，Diabetic Medicine，3532-536，1986)。pH和各種賦形劑對胰島素制劑的穩(wěn)定性的影響也已被詳細描述(J.Brange&L.Langkjaer，Acta Pharm.Nordica 4149-158)。
對于增長的需求(提高在室溫或體溫下、在機械壓力下保存的能力)或者對于特別容易受物理壓力影響的“單體”胰島素類似物或起效迅速的胰島素，這些穩(wěn)定化方法常常是不夠的。而且，所有商品化的胰島素制劑都含有為穩(wěn)定所述制劑而加入的鋅。因此，Bakaysa等人在美國專利5474978中描述了胰島素復合物的穩(wěn)定化制劑，所述復合物由6個胰島素類似物單體、2個鋅原子和至少3個分子的酚防腐劑組成。這些制劑還可以額外地含有生理上可接受的緩沖劑和防腐劑。但是，如果想制備不含鋅或低鋅的胰島素制劑，所提及的穩(wěn)定化方法對于可出售的制劑是不夠的。例如，由于缺乏物理穩(wěn)定性，開發(fā)不含鋅的胰島素Lispro制劑是不可能的(Bakaysa等，Protein Science(1996)，52521-2531)。具有足夠穩(wěn)定性特別是物理穩(wěn)定性的低鋅或無鋅的胰島素制劑在現(xiàn)有技術(shù)中還沒有被述及。
因此，本發(fā)明的目的是發(fā)現(xiàn)胰島素和其衍生物與類似物的無鋅制劑，所述制劑特別地具有較高的穩(wěn)定性。
現(xiàn)已令人驚訝地發(fā)現(xiàn)加入表面活性劑(乳化劑)如泊洛沙姆或聚山梨酯(Tween)能夠顯著地增加胰島素制劑的穩(wěn)定性從而甚至可以制備具有超穩(wěn)定性的無鋅制劑以使之能夠用于輸液泵或其它給藥系統(tǒng)。這些制劑顯示出特別是在壓力條件下的增強的穩(wěn)定性。這可以應用于胰島素、胰島素類似物、胰島素衍生物或它們的混合物。
在中性制劑中，胰島素和鋅離子形成復合物。此時，在鋅的濃度足夠的條件下，6個胰島素分子和2個鋅離子可以形成穩(wěn)定的六聚體。為了形成該結(jié)構(gòu)，鋅濃度相對于胰島素必須至少為0.4％(w/w)。這相當于在含有100 IU/ml胰島素的制劑中鋅的濃度約為13μg/ml。過量的鋅(例如每個六聚體含4個鋅離子)也可以顯著地增強制劑對物理壓力的穩(wěn)定性(J.Brange等人，“通過加入Zn2+提高中性胰島素溶液的物理穩(wěn)定性”，Diabetic Med.3，532-536(1986))。與此相對，在鋅濃度較低(基于胰島素以重量計＜0.4％)的制劑中，六聚體的形成減少。這導致制劑的穩(wěn)定性顯著降低(J.Brange和L.Langkjaer；Acta Pharm Nord，4149-158(1992))。因此，本申請中“無鋅”或“低鋅”的意思是基于制劑中胰島素的含量鋅的含量以重量計小于0.4％，優(yōu)選基于胰島素含量鋅的含量以重量計小于0.2％。對于通常的每毫升含100單位(0.6μmol/ml)的胰島素制劑，這意味著例如在藥物制劑中，基于100單位/ml的胰島素濃度，Zn++離子濃度小于13μg/ml(0.2μmol/ml)，優(yōu)選小于6.5μg/ml。也可以通過加入可絡合鋅的物質(zhì)例如檸檬酸或EDTA從而使鋅離子的量不足以形成胰島素/鋅六聚體復合物而達到不含鋅的目的。
所述藥物制劑含有60-6000nmol/ml，優(yōu)選240-3000nmol/ml的胰島素、胰島素代謝物、胰島素類似物或胰島素衍生物?？梢允褂玫谋砻婊钚詣┯绕淇梢允欠请x子型或離子(陰離子、陽離子或兩性的)型表面活性劑。特別地，優(yōu)選的藥學上常用的表面活性劑有例如堿金屬皂、胺皂和堿土金屬皂(硬脂酸鹽、軟脂酸鹽、油酸鹽、蓖麻油酸鹽)、烷基硫酸鹽和烷基磺酸鹽(十二烷基硫酸鈉、十六烷基硫酸鈉、十八烷基硫酸鈉)、天然表面活性劑(膽汁酸鹽、皂角苷、阿拉伯樹膠)、陽離子表面活性劑(alkoniumbromide、氯化十六烷基吡啶鎓、溴化十六烷基三甲銨)，脂肪醇(十六醇、十八醇、膽固醇)、多元醇如丙三醇和山梨醇等的偏酯和脂肪酸酯(Span，Tween，Myrj，Brij)，Cremophor或泊洛沙姆。所述表面活性劑在藥物組合物中的濃度為0.1μg/ml至10000μg/ml，優(yōu)選1μg/ml至1000μg/ml。
所述制劑還可以含有防腐劑(例如苯酚、甲酚、對羥基苯甲酸酯)、等滲劑(例如甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、海藻糖、氯化鈉、甘油)、緩沖物質(zhì)、鹽類、酸和堿以及其它賦形劑。這些物質(zhì)在每種情況下都可以單獨或者作為混合物存在。
通常，甘油、葡萄糖、乳糖、山梨醇和甘露醇在所述藥物制劑中的濃度為100至250mM，NaCl濃度不超過150mM。緩沖物質(zhì)如，例如磷酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、精氨酸、雙甘氨肽或TRIS(即2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇)緩沖液和相應的鹽的濃度為5至250mM，優(yōu)選10至100mM。
其它的賦形劑尤其可以是鹽類、精氨酸、魚精蛋白或Surfen。
因此，本發(fā)明涉及一種藥物制劑，其含有選自胰島素、胰島素類似物、胰島素衍生物、活性胰島素代謝物或它們的組合的多肽；表面活性劑或多種表面活性劑的組合；任選地防腐劑或多種防腐劑的組合；以及任選地等滲劑、緩沖物質(zhì)和/或其它賦形劑或它們的組合，所述藥物制劑不含鋅或含低量的鋅；優(yōu)選這樣的藥物制劑，其中的表面活性劑選自堿金屬皂、胺皂、堿土金屬皂、烷基硫酸鹽、烷基磺酸鹽、天然表面活性劑、陽離子表面活性劑、脂肪醇、多元醇如丙三醇和山梨醇的偏酯和脂肪酸酯、多元醇；其中所提及的皂類物質(zhì)選自硬脂酸鹽、軟脂酸鹽、油酸鹽、蓖麻油酸鹽；其中的烷基硫酸鹽選自十二烷基硫酸鈉、十六烷基硫酸鈉、十八烷基硫酸鈉；其中的天然表面活性劑選自膽酸鹽、皂角苷、阿拉伯樹膠、卵磷脂；其中的陽離子表面活性劑選自alkonium bromide、氯化十六烷基吡啶鎓、Cetrimid；其中的脂肪醇選自十六醇、十八醇、膽固醇；其中的丙三醇和山梨醇的偏酯和脂肪酸酯和醚選自Span、Tween、Myrj、Brij、Cremophor；其中的多元醇選自聚丙二醇、聚乙二醇、泊洛沙姆、Pluronics、Tetronics；其中的防腐劑選自苯酚、甲酚、對羥基苯甲酸酯；其中的等滲劑選自甘露醇、山梨醇、氯化鈉、甘油；其中的賦形劑選自緩沖物質(zhì)、酸、堿；其中的胰島素為天然胰島素，例如人、?；蜇i胰島素；其中的胰島素類似物選自Gly(A21)-Arg(B31)-Arg(B32)人胰島素、Lys(B3)-Glu(B29)人胰島素、LysB28ProB29人胰島素、B28Asp人胰島素、B28位脯氨酸被Asp、Lys、Leu、Val或Ala取代且B29位Lys可被Pro取代的人胰島素、AlaB26人胰島素、des(B28-B30)人胰島素、des(B27)人胰島素或des(B30)人胰島素；其中的胰島素衍生物選自B29-N-肉豆蔻酰-des(B30)人胰島素、B29-N-棕櫚酰-des(B30)人胰島素、B29-N-肉豆蔻酰人胰島素、B29-N-棕櫚酰人胰島素、B28-N-肉豆蔻酰LysB28ProB29人胰島素、B28-N-棕櫚酰LysB28ProB29人胰島素、B30-N-肉豆蔻酰-ThrB29LysB30人胰島素、B30-N-棕櫚酰-ThrB29LysB30人胰島素、B29-N-(N-棕櫚酰-γ-谷氨?；?-des(B30)人胰島素、B29-N-(N-石膽酰-γ-谷氨?；?-des(B30)人胰島素、B29-N-(ω-羧基十七酰)-des(B30)人胰島素和B29-N-(ω-羧基十七酰)人胰島素。
本發(fā)明還涉及以上所述的藥物制劑，其中所述胰島素、胰島素類似物、活性胰島素代謝物和/或胰島素衍生物的濃度為60至6000nmol/ml，優(yōu)選240至3000nmol/ml(這大約相當于1.4至35mg/ml或40至500單位/ml)；其中表面活性劑濃度為0.1-10000μg/ml，優(yōu)選1-1000μg/ml。
本發(fā)明還涉及以上所述的藥物制劑，其中甘油和/或甘露醇的濃度為100至250mM，和/或氯化物的濃度優(yōu)選不超過150mM。
本發(fā)明還涉及以上所述的藥物制劑，其中緩沖物質(zhì)的濃度為5至250mM。
本發(fā)明還涉及藥用胰島素制劑，其還含有可延緩胰島素釋放的添加劑如，例如鹽類、魚精蛋白或Surfen。這種緩釋胰島素與所述制劑的混合物也包括在本發(fā)明中。
本發(fā)明還涉及用于制備這種藥物制劑的方法。本發(fā)明同樣還涉及用于治療糖尿病的這種制劑的施用。
本發(fā)明還涉及在制備胰島素、胰島素類似物或胰島素衍生物或它們的制劑的過程中使用或加入表面活性劑作為穩(wěn)定劑。
在所述含有選自胰島素、胰島素類似物、胰島素衍生物、活性胰島素代謝物或它們的組合的多肽的藥物制劑中，pH為2至12，優(yōu)選6至8.5，并且特別優(yōu)選7至7.8。
下面通過實施例對本申請進行了描述，但這些實施例絕不是對本發(fā)明進行限制。
實施例比較研究制備了各種含胰島素類似物HMR1964(Lys(B3)，Glu(B29)，人胰島素)的無鋅制劑。為此，將無鋅HMR1964和其它組分溶解于一份注射用水中，用鹽酸/NaOH調(diào)節(jié)pH至7.3±0.2并用水定容。在下述每個實驗中HMR1964的濃度都是3.5mg/ml(相當于100單位/ml)。用相同的方法制備第二種制劑，但額外地加入了特定量的表面活性劑。將溶液分裝至5ml或10ml玻璃容器(小瓶)中并用鉗口蓋密封。然后使這些容器暴露在壓力條件下1.旋轉(zhuǎn)試驗在每種情形中，將實驗組的5個容器和對照組的5個容器進行旋轉(zhuǎn)試驗。為此，將容器放置在旋轉(zhuǎn)器上并使之在37℃以60rmp的速度至上而下地旋轉(zhuǎn)(360°)。在規(guī)定時間后，將容器中制劑的濁度與濁度標準液相比或者用實驗室濁度光度計(比濁計)測定其濁度，其單位是formazine比濁單位(FNU)。使實驗進行至所有容器中的濁度值都超過18FNU為止。
2.振蕩試驗將容器放置于孵育器中的實驗室振蕩器上，并在30℃下以100次/分鐘的速度振蕩。在規(guī)定時間后，用實驗室濁度光度計(比濁計)測定樣品的濁度值，濁度單位是formazine比濁單位(FNU)。
實施例1旋轉(zhuǎn)試驗中通過加入鋅穩(wěn)定HMR1964(a)將無鋅HMR1964(通過計算使其在最終制劑中的濃度為3.5mg/ml)溶解成為水溶液，其最終制劑中含有2.7mg/ml的間甲酚、20mg/ml的甘油和6mg/ml的氨丁三醇(tris)，并用1N鹽酸/1 N NaOH調(diào)節(jié)pH至7.2-7.4(室溫下測量)。將溶液用水定容并用0.2μm的過濾器進行無菌過濾。然后將其裝入5ml注射小瓶并用蓋子密封。
(b)用相同的方法制備對照溶液，但在加水定容之前加入濃度為0.1％的氯化鋅貯備液，以使最終制劑中鋅的含量為15μg/ml。
在所有情況下，然后使5個樣品在旋轉(zhuǎn)實驗中受壓，并在不同時間段后測定濁度。結(jié)果顯示于下表。
加入鋅可以顯著地延緩溶液產(chǎn)生混濁的時間從而穩(wěn)定了HMR1964制劑。不加鋅的制劑在旋轉(zhuǎn)試驗中甚至在8小時后就出現(xiàn)了顯著的混濁。
實施例2旋轉(zhuǎn)試驗中通過加入聚山梨酯20(Tween20)穩(wěn)定HMR1964(a)將無鋅HMR1964(通過計算使其在最終制劑中的濃度為3.5mg/ml)溶解成為水溶液，其最終制劑中含有3.15mg/ml的間甲酚、5mg/ml的NaCl和6mg/ml的氨丁三醇，并用1N鹽酸/1N NaOH調(diào)節(jié)pH至7.2-7.4(室溫下測量)。將溶液用水定容并用0.2μm的過濾器進行無菌過濾。然后將其裝入5ml注射小瓶中并用蓋子密封。
(b)用相同的方法制備對照溶液，但在加水定容之前加入濃度為0.1％的聚山梨酯20(Tween20)貯備液，以使其在最終制劑中的濃度為10μg/ml。
在所有情況下，然后使5個樣品在旋轉(zhuǎn)實驗中受壓，并在不同時間段后測定濁度。結(jié)果顯示于下表。
加入聚山梨酯20非常顯著地延緩了混濁的出現(xiàn)。
實施例3旋轉(zhuǎn)試驗中通過加入泊洛沙姆穩(wěn)定HMR1964(a)將無鋅HMR1964(通過計算使其在最終制劑中的濃度為3.5mg/ml)溶解成為水溶液，其最終制劑中含有4.5mg/ml的苯酚，5mg/ml的NaCl和6mg/ml的氨丁三醇，并用1N鹽酸/1N NaOH調(diào)節(jié)pH至7.2-7.4(室溫下測量)。將溶液用水定容并用0.2μm的過濾器進行無菌過濾。然后將其裝入5ml注射小瓶并用蓋子密封。
(b)用相同的方法制備對照溶液，但在加水定容之前加入濃度為0.1％的泊洛沙姆171(例如Genapol)貯備液，以使其在最終制劑中的濃度為10μg/ml。
在所有情況下，然后使5個樣品在旋轉(zhuǎn)實驗中受壓，并在不同時間段后測定濁度。結(jié)果顯示于下表。
加入泊洛沙姆171也可以非常顯著地延緩混濁的出現(xiàn)并可以穩(wěn)定所述制劑。
實施例4在振蕩試驗中通過加入聚山梨酯20或聚山梨酯80穩(wěn)定HMR1964(a)將無鋅HMR1964(通過計算使其在最終制劑中的濃度為3.5mg/ml)溶解成為水溶液，其最終制劑中含有3.15mg/ml的間甲酚、5mg/ml的NaCl和6mg/ml的氨丁三醇，并用1N鹽酸/1N NaOH調(diào)節(jié)pH至7.2-7.4(室溫下測量)。將溶液用水定容并用0.2μm的過濾器進行無菌過濾。然后將其裝入5ml注射小瓶并用蓋子密封。
(b)用相同的方法制備對照溶液，但在加水定容之前加入濃度為0.1％的聚山梨酯20(Tween20)貯備液，以使其在最終制劑中的濃度為10μg/ml。
(c)用與b)相同的方法制備另一份對照溶液，但此次使用的是聚山梨酯80而不是聚山梨酯20。
將樣品在30℃下于實驗室振蕩器中振蕩(60rpm)并在特定時間后測定樣品的濁度。結(jié)果顯示于下表。
在振動試驗中，加入聚山梨酯20和聚山梨酯80都對HMR1964有穩(wěn)定作用。
實施例5振動試驗中通過加入鋅或泊洛沙姆(Genapol)穩(wěn)定HMR1964
(a)將無鋅HMR1964(通過計算使其在最終制劑中的濃度為3.5mg/ml)溶解成為水溶液，其最終制劑中含有3.3mg/ml的苯酚、5mg/ml的NaCl和6mg/ml的氨丁三醇，并用1N鹽酸/1N NaOH調(diào)節(jié)pH至7.2-7.4(室溫下測量)。將溶液用水定容并用0.2μm的過濾器進行無菌過濾。然后將其裝入5ml注射小瓶并用蓋子密封。
(b)用相同的方法制備對照溶液，但在加水定容之前加入濃度為0.1％的泊洛沙姆171(Genapol)貯備液，以使其在最終制劑中的濃度為10μg/ml。
(c)用與(a)相同的方法制備另一份對照溶液，但在加水定容之前向溶液中加入的是濃度為0.1％的氯化鋅貯備液而不是泊洛沙姆貯備液，以使最終制劑中鋅的濃度為15μg/ml。
加入鋅和加入泊洛沙姆都能夠防止振動試驗中混濁的出現(xiàn)。
實施例6旋轉(zhuǎn)試驗中通過加入泊洛沙姆穩(wěn)定HMR1964(a)將無鋅HMR 1964(通過計算使其在最終制劑中的濃度為3.5mg/ml)溶解成為水溶液，其最終制劑含有3.3mg/ml的苯酚，5mg/ml的NaCl和6mg/ml的氨丁三醇，并用1N鹽酸/1N NaOH調(diào)節(jié)pH至7.2-7.4(室溫下測量)。將溶液用水定容并用0.2μm的過濾器進行無菌過濾。然后將其裝入5ml注射小瓶并用蓋子密封。
(b)用相同的方法制備對照溶液，但在加水定容之前加入濃度為0.1％的泊洛沙姆171(Genapol)貯備液，以使其在最終制劑中的含量為100μg/ml。
在所有情況下，然后使5個樣品在旋轉(zhuǎn)實驗中受壓，并在不同時間段后測定濁度。結(jié)果顯示于下表。
加入100μg/ml泊洛沙姆同樣可以非常顯著地穩(wěn)定HMR1964制劑。
權(quán)利要求
1.一種藥物制劑，其含有選自胰島素、胰島素類似物、胰島素衍生物、活性胰島素代謝物或它們的組合的多肽；表面活性劑或多種表面活性劑的組合；任選地防腐劑或多種防腐劑的組合；以及任選地等滲劑、緩沖劑或其它賦形劑或它們的組合，所述藥物制劑不含鋅或含有低含量的鋅。
2.權(quán)利要求1所述的藥物制劑，其中的表面活性劑選自堿金屬皂；胺皂；堿土金屬皂；烷基硫酸鹽；烷基磺酸鹽；天然表面活性劑；陽離子表面活性劑；脂肪醇；脂肪酸；多元醇、甘油、山梨醇和蔗糖的偏酯和脂肪酸酯和醚；多元醇。
3.權(quán)利要求2所述的藥物制劑，其中所述的皂類物質(zhì)選自硬脂酸鹽、軟脂酸鹽、油酸鹽、蓖麻油酸鹽。
4.權(quán)利要求2或3所述的藥物制劑，其中的硫酸鹽選自十二烷基硫酸鈉、十六烷基硫酸鈉、十八烷基硫酸鈉。
5. 權(quán)利要求2至4的其中一項所述的藥物制劑，其中的天然表面活性劑選自膽酸鹽、皂角苷、阿拉伯樹膠、卵磷脂。
6. 權(quán)利要求2至5的其中一項所述的藥物制劑，其中的陽離子表面活性劑選自alkonium halides、氯化十六烷基吡啶鎓、Cetrimid。
7.權(quán)利要求2至6的其中一項所述的藥物制劑，其中的脂肪醇選自十六醇、十八醇、膽固醇。
8.權(quán)利要求2至7的其中一項所述的藥物制劑，其中的多元醇、甘油和山梨醇的偏酯和脂肪酸酯以及醚選自Span、Tween(聚山梨酯)、Myrj、Brij、Triton、Cremophor。
9.權(quán)利要求2至8的其中一項所述的藥物制劑，其中的多元醇選自聚丙二醇、聚乙二醇、泊洛沙姆、Pluronics、Tetronics。
10.權(quán)利要求1至9的其中一項所述的藥物制劑，其中的防腐劑選自苯酚、甲酚、氯代甲苯酚、苯甲醇、對羥基苯甲酸酯。
11.權(quán)利要求1至10的其中一項所述的藥物制劑，其中等滲劑選自甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、海藻糖、氯化鈉、甘油。
12.權(quán)利要求1至11的其中一項所述的藥物制劑，其中的賦形劑選自緩沖物質(zhì)例如TRIS、磷酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、雙甘氨肽或其它物質(zhì)如酸、堿、鹽、魚精蛋白、精氨酸、Surfen。
13.權(quán)利要求1至12的其中一項所述的藥物制劑，其中的胰島素類似物選自Gly(A21)Arg(B31)Arg(B32)人胰島素、Lys(B3)Glu(B29)人胰島素、Asp(B28)人胰島素、Lys(B28)Pro(B29)人胰島素、des(B30)人胰島素。
14.權(quán)利要求1至13的其中一項所述的藥物制劑，其中的胰島素衍生物選自B29-N-肉豆蔻酰-des(B30)人胰島素、B29-N-棕櫚酰-des(B30)-人胰島素、B29-N-肉豆蔻酰人胰島素、B29-N-棕櫚酰人胰島素、B28-N-肉豆蔻酰-LysB28ProB29人胰島素、B28-N-棕櫚酰-LysB28ProB29人胰島素、B30-N-肉豆蔻酰-ThrB29LysB30人胰島素、B30-N-棕櫚酰-ThrB29LysB30人胰島素、B29-N-(N-棕櫚酰-γ-谷氨?；?-des(B39)人胰島素、B29-N-(N-石膽酰-γ-谷氨酰基)-des(B30)人胰島素、B29-N-(ω-羧基十七酰)-des(B30)人胰島素和B29-N-(ω-羧基十七酰)人胰島素。
15.前述權(quán)利要求的其中一項所述的藥物制劑，其中胰島素、胰島素類似物、胰島素衍生物和/或胰島素代謝物的濃度為60至6000nmol/ml。
16.權(quán)利要求15所述的藥物制劑，其中胰島素、胰島素類似物、胰島素衍生物和/或胰島素代謝物的濃度為240至3000nmol/ml。
17.前述權(quán)利要求的其中一項所述的藥物制劑，其中表面活性劑的濃度為0.1至10000μg/ml。
18.權(quán)利要求17所述的藥物制劑，其中表面活性劑的濃度為1至1000μg/ml。
19.權(quán)利要求10至18中的一項或多項所述的藥物制劑，其中甘油和/或甘露醇的濃度為100至250mM。
20.權(quán)利要求19所述的藥物制劑，其中氯化物的濃度不超過150mM。
21.前述權(quán)利要求的其中一項所述的藥物制劑，其中緩沖物質(zhì)的濃度為5至250mM。
22.用于制備權(quán)利要求1至21中的一項或多項所述的藥物制劑的方法，其中將各組分以水溶液的形式混合，然后調(diào)節(jié)至所需的pH并用水將混合物補充至最終的體積。
23.權(quán)利要求22所述的制備藥物制劑的方法，其中使甲酚的最終濃度為3.15mg/ml、HMR1964的最終濃度為3.5mg/ml、氨丁三醇的最終濃度為6.0mg/ml、NaCl的最終濃度為5.0mg/ml、Tween20的最終濃度為0.1mg/ml。
24.可以按照權(quán)利要求22或23所述的方法得到的藥物制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥物制劑，其含有選自胰島素、胰島素代謝物、胰島素類似物、胰島素衍生物或它們的組合的多肽；表面活性劑或幾種表面活性劑的組合；任選地防腐劑或幾種防腐劑的組合以及任選地等滲劑、緩沖劑或附加的輔料或它們的組合，所述藥物制劑不含有任何鋅或僅含少量的鋅。本發(fā)明還涉及上述類型的胰島素制品的制備。
文檔編號A61K47/24GK1498113SQ02807114
公開日2004年5月19日 申請日期2002年3月9日 優(yōu)先權(quán)日2001年3月23日
發(fā)明者P·博德克, P 博德克 申請人:安萬特醫(yī)藥德國有限公司