專(zhuān)利名稱(chēng)：一種防治糖尿病的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其制備方法，特別是涉及一種防治糖尿病的藥物組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
糖尿病是一類(lèi)由遺傳、環(huán)境、免疫等多病因引起的內(nèi)分泌代謝紊亂疾病。其特點(diǎn)是慢性高血糖，伴隨因胰島素分泌及/或作用缺陷引起的糖、脂肪和蛋白質(zhì)代謝紊亂?；静±砩硎墙^對(duì)或相對(duì)性胰島素分泌不足及胰高糖素活性增高所引起的代謝紊亂。臨床出現(xiàn)多飲、多食、多尿、消瘦、疲勞等癥狀，并發(fā)癥廣泛而嚴(yán)重，?？梢l(fā)心、腦血管、腎、眼底、視網(wǎng)膜及神經(jīng)系統(tǒng)病變，嚴(yán)重時(shí)可發(fā)生酮癥酸中毒，高滲性昏迷等并發(fā)癥。
糖尿病為慢性終身性疾病，一旦發(fā)生，需終身服藥。糖尿病為常見(jiàn)病、多發(fā)病，年發(fā)病率為930/10萬(wàn)，現(xiàn)今糖尿病有擴(kuò)大化和年輕化的傾向，我國(guó)新患糖尿病人數(shù)每年以125萬(wàn)，每天以3500人的速度遞增[1]，這個(gè)驚人的成長(zhǎng)，使糖尿病正式擠入十大代表性國(guó)民病之列。糖尿病是現(xiàn)代疾病中的第二殺手，其對(duì)人體的危害僅次于癌癥，造成嚴(yán)重的身心損害和社會(huì)負(fù)擔(dān)。因此，積極開(kāi)展糖尿病的防治研究，已成為當(dāng)今衛(wèi)生工作的一項(xiàng)重要課題。糖尿病的治療目的是糾正糖代謝紊亂，促進(jìn)胰島功能恢復(fù)，改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，并及時(shí)防治各種并發(fā)癥。西醫(yī)口服降糖藥療效肯定，但長(zhǎng)期使用會(huì)出現(xiàn)抗體，導(dǎo)致繼發(fā)性失效，且具有不同程度的副作用，如低血糖、胃腸道不適等。胰島素療效確切，但需注射給藥，使用不便，且久用易產(chǎn)生抗體，使其生物活性降低，劑量增加則易產(chǎn)生高胰島素血癥而加速各種慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。中醫(yī)藥文獻(xiàn)無(wú)“糖尿病”病名，根據(jù)糖尿病的臨床表現(xiàn)，如多尿、多食、多飲等“三多”癥，與中醫(yī)學(xué)“消渴”病的臨床表現(xiàn)相一致。中醫(yī)治療糖尿病是以整體觀(guān)念、辨證論治為主，針對(duì)氣血盛衰、陰陽(yáng)消長(zhǎng)及氣機(jī)、痰瘀狀況，調(diào)整人體內(nèi)環(huán)境，改善患者代謝狀況而達(dá)治療目的。中藥降血糖效果雖較西藥弱，但作用緩和而持久，能有效地改善癥狀、降低血糖、防治并發(fā)癥、控制病情發(fā)展且由于許多中藥具有雙向調(diào)節(jié)作用，一般不會(huì)引起低血糖等不良反應(yīng)，有著西藥不可替代的優(yōu)勢(shì)，日益受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視。因此，充分繼承祖國(guó)醫(yī)學(xué)防治糖尿病的寶貴遺產(chǎn)，突出中醫(yī)特色，發(fā)揮其優(yōu)勢(shì)，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)糖尿病的研究和中醫(yī)藥治療最新進(jìn)展，開(kāi)發(fā)出高效、無(wú)毒副作用的純天然藥物，具有十分重要的理論意義與臨床實(shí)用價(jià)值，將產(chǎn)生良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。本發(fā)明目的在于提供一種防治糖尿病的藥物組合物及其制備方法。本發(fā)明目的在于提供一種質(zhì)量控制方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，原料藥按重量比為黃芪400-800重量份葛根300-500重量份山藥300-500重量份蒼術(shù)200-400重量份知母200-400重量份天花粉200-400重量份地黃300-500重量份馬齒莧200-400重量份 丹參200-400重量份鬼箭羽200-400重量份 桑枝200-400重量份上述原料藥可以制成任何臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體制劑，皮下給藥制劑，栓劑等。
本發(fā)明藥物組合物的制備方法為取蒼術(shù)、丹參二味用4-8倍量85-95％乙醇回流提取1-2小時(shí)，濾過(guò)，藥渣與葛根合并，用60-80％乙醇回流提取2-4次，每次4-7倍量，分別提取0.5-2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓回收乙醇，水液備用；取黃芪等八味藥加水煎煮2-3次，每次加8-12倍水，煎煮1-2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10~1.12/60℃，兌入上述醇提濃縮液，噴霧干燥，制成臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體制劑，皮下給藥制劑，栓劑等。
本發(fā)明顆粒劑的質(zhì)量控制方法中包括鑒別和/或含量測(cè)定，鑒別包括如下方法中的一種或幾種
鑒別a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超聲提取20-40分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，用乙醚分2-4次萃取，每次15-30ml，棄去乙醚液，取水層用水飽和正丁醇分2-4次萃取，每次15-30ml，合并正丁醇層用0.5-2％，氫氧化鈉溶液分2-3次洗滌，每次10-20ml，棄去堿液，正丁醇用正丁醇飽和的水洗至中性，取正丁醇液，濃縮至干，殘?jiān)铀?ml使溶解，加于已處理好的D101大孔樹(shù)脂柱，分別用水40-60ml，30-50％乙醇20-40ml，60-80％乙醇40-60ml洗脫，收集60-80％乙醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)；吸取供試品溶液8μl，黃芪甲苷對(duì)照品4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以11-14∶6-9∶1-2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10硫酸乙醇溶液，100-110℃加熱5-8min，至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b.取本品3g，加乙醇30ml，超聲提取20-40分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取蒼術(shù)對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液4μ1，對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以石油醚60-90℃為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
c.取鑒別b項(xiàng)下供試品溶液作為供試品溶液，另取丹參對(duì)照藥材2g，加乙醇30ml，超聲提取20-40分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為對(duì)照藥材溶液。再取丹參酮IIA對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4μ1，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以16-19∶1-4苯—醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
d.取本品2g，用甲醇20ml超聲20-40分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 ml使溶解，再加鹽酸0.5～2ml，沸水浴回流1-2小時(shí)，回流液用氯仿分2-3次萃取，每次20ml。合并氯仿液，水浴蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取山藥對(duì)照藥材2g同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以5-10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加熱3-8min至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
e.取鑒別d項(xiàng)下供試品液作為供試品液，另取菝葜皂苷元對(duì)照品，加苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，100-110℃加熱5min至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；19-17∶79-82∶1-2甲醇—水—冰醋酸為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取葛根素對(duì)照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加20-40％乙醇至刻度，搖勻，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品顆粒研細(xì)，稱(chēng)取1.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱(chēng)定重量，超聲提取30-50分鐘，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少于0.85mg。
本發(fā)明藥物組合物(芪黃降糖顆粒)藥效學(xué)研究表明芪黃降糖顆粒具有滋陰清熱、益氣養(yǎng)陰、活血化瘀；適用于NIDDM糖尿病(氣陰兩虛兼血瘀證)。(1)芪黃降糖顆粒對(duì)ALX-DM家兔的血糖升高有明顯的降低作用，對(duì)ALX-DM家兔糖代謝有明顯的改善作用，可明顯的拮抗葡萄糖引起的血糖升高，并能明顯降低AUC血糖區(qū)線(xiàn)下面積。(2)芪黃降糖顆粒對(duì)STZ-DM大鼠的體重下降和血糖升高有明顯的降低作用，對(duì)STZ-DM大鼠糖代謝有明顯的改善作用，對(duì)葡萄糖引起的血糖升高有明顯的拮抗作用，并能明顯降低AUC血糖區(qū)線(xiàn)下面積。(3)芪黃降糖顆粒對(duì)STZ-DM大鼠的血脂代謝障礙有明顯的改善作用，表現(xiàn)在血CHO、TG水平的降低。(4)芪黃降糖顆粒對(duì)STZ-DM大鼠的血MDA水平有明顯的降低作用，表明本品有一定的抗氧化作用。(5)芪黃降糖顆粒對(duì)STZ所造成的胰島細(xì)胞損傷有一定的修復(fù)作用，表現(xiàn)在給糖負(fù)荷前、后血清胰島素水平明顯高于模型對(duì)照組，病理組織學(xué)檢查證實(shí)芪黃降糖顆粒對(duì)STZ所致大鼠胰島β-細(xì)胞損傷有一定的修復(fù)作用。(6)芪黃降糖顆粒對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠的體重、耐力下降有明顯的改善作用，并可顯著降低空腹血糖水平；動(dòng)態(tài)血糖監(jiān)測(cè)提示藥后21天降糖作用比較顯著(7)芪黃降糖顆粒對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠的耳廓微循環(huán)障礙有明顯的改善作用。(8)芪黃降糖顆粒對(duì)正常大鼠的血糖、血脂代謝亦沒(méi)有顯著的影響。
下述實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例一、芪黃降糖顆粒對(duì)四氧嘧啶家兔糖代謝的影響取家兔30只，穩(wěn)定飼養(yǎng)一周，其間抽測(cè)空腹血糖兩次，以3.6-5.4mmol/L為入選動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)。按文獻(xiàn)[1]方法給四氧嘧啶120mg/kg耳緣靜脈注射，造模后48-72h復(fù)測(cè)空腹血糖，以＞15.0mmol/L作為模型成功動(dòng)物。
根據(jù)血糖升高幅度，隨機(jī)分為水對(duì)照組、藥物高、中、低劑量組，降糖靈組。分別按2.8g/kg、1.4g/kg、0.7g/kg、40mg/kg給藥，給藥體積為5.0ml/kg體重，對(duì)照組給等體積水灌胃，連續(xù)給藥15天，試驗(yàn)前禁食6h，末次藥后12h，耳緣靜脈采血做口服葡萄糖耐量試驗(yàn)[2](2.0g/kg葡萄糖灌胃)，并分別在口服葡萄糖0、30、60、120分鐘復(fù)測(cè)血糖水平，計(jì)算空腹及葡萄糖灌胃后60分鐘血糖區(qū)線(xiàn)下面積(Area Under Curve)。結(jié)果進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，見(jiàn)表1、表2。
AUC＝0.5×30分×[空腹血糖+30分血糖+30分血糖+60分血糖值]表1對(duì)四氧嘧啶模型家兔空腹血糖(mmol/L)的影響(X±S，n＝6)組別試驗(yàn)前血糖造模后血糖 給藥后血糖水組4.12±0.2319.45±1.6817.93±1.82高劑量組4.20±0.3218.47±2.269.35±1.34***中劑量組4.25±0.2919.57±2.0711.02±2.11***&
低劑量組4.17±0.3118.38±2.2011.35±2.60***&
降糖靈組4.25±0.3419.43±1.968.63±1.35***糖脈康組4.35±0.3419.52±2.2711.08±3.06***注與自身試驗(yàn)前比較###示P＜0.001.
藥后與造模對(duì)照組比較*示P＜0.05，***示P＜0.001.
表1結(jié)果表明芪黃降糖顆粒對(duì)四氧嘧啶模型家兔的血糖升高有明顯的降低作用，高、中劑量組與模型對(duì)照組比較均有極顯著性差異，低劑量組與模型對(duì)照組比較均有顯著性差異；芪黃降糖顆粒對(duì)四氧嘧啶模型家兔糖代謝有明顯的改善作用，對(duì)葡萄糖引起的血糖升高有明顯的降低作用，高、中、低劑量組與模型對(duì)照組比較均有顯著性差異。
實(shí)驗(yàn)例二、芪黃降糖顆粒的抗氧化作用——對(duì)STZ-DM大鼠血MDA含量的影響取大鼠70只，穩(wěn)定飼養(yǎng)一周，其間抽測(cè)空腹血糖兩次，以3.6-5.4mmol/L為入選動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)。其中10只大鼠作為正常對(duì)照組，另外60只大鼠按文獻(xiàn)[3]方法以0.1mol/LpH4.5檸檬酸鈉-檸檬酸緩沖液，在冰域中新鮮配置10mg/ml的STZ溶液，每只大鼠按50mg/kg靜脈注射，造模后7-10天復(fù)測(cè)空腹血糖，以＞13.8mmol/L作為模型成功大鼠。將STZ-DM大鼠60只按血糖升高幅度隨機(jī)分為水對(duì)照組、藥物高、中、低劑量組，降糖靈組、糖脈康組。分別按3.24g/kg、1.62g/kg、0.81g/kg、0.009g/kg、1.35g/kg給藥，給藥體積為1.0ml/100g體重，對(duì)照組給等體積水灌胃，連續(xù)給藥20天；眶靜脈采血，按TCA-TBA法，于波長(zhǎng)535nm檢測(cè)樣品吸收度A值，以反映血MDA水平，結(jié)果進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，見(jiàn)表2表2.芪黃降糖顆粒對(duì)STZ—DM大鼠血MDA含量的影響(X±s，n＝10)組別 血MDA含量正常對(duì)照組0.071±0.023模型對(duì)照組0.148±0.024###高劑量組 0.112±0.027##**中劑量組 0.118±0.027####*低劑量組 0.124±0.022###*降糖靈組 0.121±0.033###糖脈康組 0.116±0.026###*表2結(jié)果表明MDA是組織過(guò)氧化過(guò)程中很重要的中間產(chǎn)物，芪黃降糖顆粒對(duì)STZ-DM大鼠的血MDA水平有明顯的降低作用，高、中、低劑量組與模型對(duì)照組比較均有顯著性差異。表明本品有一定的抗氧化作用。
實(shí)驗(yàn)例三、芪黃降糖顆粒對(duì)STZ-DM大鼠胰島β-細(xì)胞功能的影響試驗(yàn)動(dòng)物分組、造模、給藥時(shí)間及劑量均同實(shí)驗(yàn)例2，試驗(yàn)前禁食8h，末次藥后12h，在做口服葡萄糖耐量試驗(yàn)同時(shí)，分別在口服葡萄糖0、30、60、120分鐘，眼眶靜脈采血測(cè)胰島素水平。結(jié)果進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，見(jiàn)表3。
表3.對(duì)STZ模型大鼠血清胰島素水平的影響(X±S，n＝8)組別 給葡萄糖后0分 給葡萄糖后30分 給葡萄糖后60分給葡萄糖后120分正常組 4.99±1.184.81±1.09 5.06∶0.593.26∶1.86模型組 1.49±0.93### 1.26±0.33 1.30∶0.40### 1.47∶0.51高劑量 3.19±2.02#* 3.75±1.33***2.93∶1.26###** 2.82∶0.71***中劑量 3.76±1.72**& 3.03±1.79#* 2.06∶0.42###** 2.19∶0.72*低劑量 1.97±0.54### 2.07±0.37###***$$& 2.13∶1.01 ###* 1.69∶0.86#$&
降糖靈 2.23±0.78### 3.51±1.83** 2.49∶0.85###** 2.78∶0.69***糖脈康 2.68±0.71###*2.83±1.53##*1.57∶0.76###$& 1.96∶0.60$&
表3結(jié)果表明給糖負(fù)荷前模型對(duì)照組血胰島素水平明顯低于正常對(duì)照組，說(shuō)明STZ對(duì)胰島β細(xì)胞造成一定損傷。藥物高、中劑量組胰島素水平明顯高于模型對(duì)照組，說(shuō)明藥物對(duì)STZ造成的β細(xì)胞損傷有一定的修復(fù)作用。正常大鼠給糖負(fù)荷后30分鐘胰島素分泌增多，60分鐘出現(xiàn)胰島素分泌高峰，其后逐漸下降。藥物高、中劑量組在給糖負(fù)荷后30分鐘血清胰島素水平迅速升高，且明顯高于造模對(duì)照組，對(duì)于改善STZ-DM大鼠的糖代謝有一定的作用。
實(shí)施例1黃芪600g葛根400g 山藥400g蒼 術(shù)300g知母300g天花粉300g地黃400g馬齒莧300g丹參300g鬼箭羽300g桑枝300g以上十一味，取蒼術(shù)、丹參二味用6倍量95％乙醇回流提取1小時(shí)，濾過(guò)，藥渣與葛根合并，用70％6乙醇回流提取三次，每次5倍量，分別提取2小時(shí)，1小時(shí)，0.5小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓回收乙醇(60~70℃，-0.08Mpa)，水液備用；取黃芪等八味藥加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時(shí)，第二次加8倍水煎煮1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10~1.12(60℃)，兌入上述醇提濃縮液，加入適量糊精(約150g)攪勻，噴霧干燥(進(jìn)風(fēng)180~200℃，出風(fēng)80~85℃)，干粉加蛋白糖5g，并加糊精至1000g，干壓制成顆粒，每袋裝5g，口服，一次1袋，一日3次。
實(shí)施例2本發(fā)明藥物組合物顆粒劑的質(zhì)量控制方法鑒別a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超聲提取30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，30ml，30ml，15ml，15ml用乙醚分四次萃取，棄去乙醚液，30ml，30ml，15ml取水層用水飽和正丁醇分三次萃取，合并正丁醇層用1％氫氧化鈉分兩次洗滌，每次15ml，棄去堿液，正丁醇用正丁醇飽和的水洗至中性，取正丁醇液，濃縮至干，殘?jiān)铀?ml使溶解，加于內(nèi)徑1.5cm，高10cm已處理好的D101大孔樹(shù)脂柱，分別用水50ml，40％乙醇30ml，70％乙醇50ml洗脫，收集70％乙醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)；吸取供試品溶液8μl，黃芪甲苷對(duì)照品4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以13∶7∶2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5min，至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
b.取本品3g，加乙醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取蒼術(shù)對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液4μl，對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以60—90℃石油醚為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
c.取鑒別b項(xiàng)下供試品溶液作為供試品溶液，另取丹參對(duì)照藥材2g，加乙醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為對(duì)照藥材溶液。再取丹參酮IIA對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19∶1苯—醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
d.取本品2g，用甲醇20ml超聲30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，再加鹽酸1ml，沸水浴回流1小時(shí)，回流液用氯仿分兩次萃取，每次20ml。合并氯仿液，水浴蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取山藥對(duì)照藥材2g同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9.1苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5min至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
e.取鑒別d項(xiàng)下供試品液作為供試品液，另取菝葜皂苷元對(duì)照品，加苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，105℃加熱5min至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；19∶81∶1甲醇—水—冰醋酸為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取葛根素對(duì)照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加30％乙醇至刻度，搖勻，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品顆粒研細(xì)，稱(chēng)取1.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱(chēng)定重量，250w，50kHz超聲提取40分鐘，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少于0.85mg。
權(quán)利要求
1.一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由如下原料藥制成的黃芪400-800重量份葛根300-500重量份山藥300-500重量份蒼術(shù)200-400重量份知母200-400重量份天花粉200-400重量份地黃300-500重量份馬齒莧200-400重量份丹參200-400重量份鬼箭羽200-400重量份桑枝200-400重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由如下原料藥制成的黃芪600重量份葛根400重量份山 藥400重量份蒼術(shù)300重量份知母300重量份天花粉300重量份地黃400重量份齒莧300重量份丹參300重量份鬼箭羽300重量份 桑枝300重量份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物原料藥可以制成任何臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體制劑，皮下給藥制劑，栓劑。
4.如權(quán)利要求5所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的制備方法為取蒼術(shù)、丹參二味用4-8倍量85-95％乙醇回流提取1-2小時(shí)，濾過(guò)，藥渣與葛根合并，用60-80％乙醇回流提取2-4次，每次4-7倍量，分別提取0.5-2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓回收乙醇，水液備用；取黃芪等八味藥加水煎煮2-3次，每次加8-12倍水，煎煮1-2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10~1.12/60℃，兌入上述醇提濃縮液，噴霧干燥，制成臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體制劑，皮下給藥制劑，栓劑。
5.如權(quán)利要求4所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的制備方法為取蒼術(shù)、丹參二味用6倍量95％乙醇回流提取1小時(shí)，濾過(guò)，藥渣與葛根合并，用70％乙醇回流提取三次，每次5倍量，分別提取2小時(shí)，1小時(shí)，0.5小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，60~70℃，-0.08Mpa減壓回收乙醇，水液備用；取黃芪等八味藥加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時(shí)，第二次加8倍水煎煮1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10~1.12/60℃，兌入上述醇提濃縮液，加入糊精攪勻，噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)180~200℃，出風(fēng)80~85℃，干粉加蛋白糖，并加糊精至1000重量份，干壓制成顆粒。
6.如權(quán)利要求5所述顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括鑒別和/或含量測(cè)定，其中鑒別包括如下方法中的一種或幾種鑒別a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超聲提取20-40分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，用乙醚分2-4次萃取，每次15-30ml，棄去乙醚液，取水層用水飽和正丁醇分2-4次萃取，每次15-30ml，合并正丁醇層用0.5～2％氫氧化鈉溶液分2-3次洗滌，每次10-20ml，棄去堿液，正丁醇用正丁醇飽和的水洗至中性，取正丁醇液，濃縮至干，殘?jiān)铀?ml使溶解，加于已處理好的D101大孔樹(shù)脂柱，分別用水40-60ml，30-50％乙醇20-40ml，60-80％乙醇40-60ml洗脫，收集60-80％乙醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)；吸取供試品溶液8μl，黃芪甲苷對(duì)照品4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以11-14∶6-9∶1-2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加熱5-8min，至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。b.取本品3g，加乙醇30ml，超聲提取20-40分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取蒼術(shù)對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液4μl，對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以60-90℃石油醚為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.取鑒別b項(xiàng)下供試品溶液作為供試品溶液，另取丹參對(duì)照藥材2g，加乙醇30ml，超聲提取20-40分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為對(duì)照藥材溶液。再取丹參酮IIA對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以16-19∶1-4苯—醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d.取本品2g，用甲醇20ml超聲20-40分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，再加鹽酸0.5～2ml，沸水浴回流1-2小時(shí)，回流液用氯仿分2-3次萃取，每次20ml。合并氯仿液，水浴蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取山藥對(duì)照藥材2g同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以5-10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加熱3-8min至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；e.取鑒別d項(xiàng)下供試品液作為供試品液，另取菝葜皂苷元對(duì)照品，加苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，100-110℃加熱5min至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；19-17∶79-82∶1-2甲醇—水—冰醋酸為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm；理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取葛根素對(duì)照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加20-40％乙醇至刻度，搖勻，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品顆粒研細(xì)，稱(chēng)取1.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱(chēng)定重量，超聲提取30-50分鐘，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少于0.85mg。
7.如權(quán)利要求6所述顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法為鑒別a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超聲提取30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，30ml，30ml，15ml，15ml用乙醚分四次萃取，棄去乙醚液，30ml，30ml，15ml取水層用水飽和正丁醇分三次萃取，合并正丁醇層用1％氫氧化鈉分兩次洗滌，每次15ml，棄去堿液，正丁醇用正丁醇飽和的水洗至中性，取正丁醇液，濃縮至干，殘?jiān)铀?ml使溶解，加于內(nèi)徑1.5cm，高10cm已處理好的D101大孔樹(shù)脂柱，分別用水50ml，40％乙醇30ml，70％乙醇50ml洗脫，收集70％乙醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)；吸取供試品溶液8μl，黃芪甲苷對(duì)照品4μl，分別點(diǎn)子同一硅膠G薄層板上，以13∶7∶2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5min，至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。b.取本品3g，加乙醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取蒼術(shù)對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液4μl，對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以60-90℃石油醚為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。c.取鑒別b項(xiàng)下供試品溶液作為供試品溶液，另取丹參對(duì)照藥材2g，加乙醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為對(duì)照藥材溶液。再取丹參酮IIA對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以19∶1苯—醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。d.取本品2g，用甲醇20ml超聲30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，再加鹽酸1ml，沸水浴回流1小時(shí)，回流液用氯仿分兩次萃取，每次20ml。合并氯仿液，水浴蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取山藥對(duì)照藥材2g同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5min至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。e.取鑒別d項(xiàng)下供試品液作為供試品液，另取菝葜皂苷元對(duì)照品，加苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，105℃加熱5min至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；19∶81∶1甲醇—水—冰醋酸為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取葛根素對(duì)照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加30％乙醇至刻度，搖勻，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品顆粒研細(xì)，稱(chēng)取1.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱(chēng)定重量，250w，50kHz超聲提取40分鐘，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少于0.85mg。
10.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療糖尿病的藥物組合物，該藥物組合物是由如下原料藥制成的黃芪400－800重量份，葛根300－500重量份，山藥300－500重量份，蒼術(shù)200－400重量份，知母200－400重量份，天花粉200－400重量份，地黃300－500重量份，馬齒莧200－400重量份，丹參200－400重量份，鬼箭羽200－400重量份，桑枝200－400重量份；該藥物組合物治療糖尿病有很好的療效。
文檔編號(hào)A61P3/10GK1511576SQ0215946
公開(kāi)日2004年7月14日 申請(qǐng)日期2002年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月31日
發(fā)明者張紅, 張 紅 申請(qǐng)人:中國(guó)中醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)交流中心