專利名稱：具有雄激素-孕激素混合活性的14(15)-不飽和的15-和/或16-取代的雄激素類的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有雄激素和孕激素混合活性的合成激素領(lǐng)域。
由于雄性和雌性激素代替療法(HRT)的時(shí)代需要，以及即將出現(xiàn)的雄性避孕問(wèn)題，人們對(duì)雄激素開始重新產(chǎn)生興趣。
與此相關(guān)，焦點(diǎn)集中于口服活性、高效或這兩者的改進(jìn)上，可以參見專利文獻(xiàn)例如WO 99/67271、WO 00/53619、WO 00/59920和EC2000-3572(出版前的PCT/EP00/06544)。
已知的有效雄激素是所謂的“Segaloff甾體化合物”，其為具有7α-甲基的19-去甲睪酮衍生物，其在C14和C15(Δ14)之間含有雙鍵。這種甾體化合物長(zhǎng)期以來(lái)被認(rèn)為是已知最有效的口服雄激素。參見例如Avery等，Steroids，55，59(1990)。該化合物及其7α-H類似物還被記載于GB 1,341,601中。與Segaloff相比，在PCT/EP00/06544中公開的化合物顯示的主要優(yōu)點(diǎn)在于其更適合臨床應(yīng)用，具體地說(shuō)其具有足夠的口服活性和代謝穩(wěn)定性。
本發(fā)明的焦點(diǎn)在于完全不同類型的雄激素，即具有雄激素和孕激素混合活性的雄激素類(即化合物在同一個(gè)分子中本身具有雙重活性，優(yōu)選地這兩種活性正常分配)。在HRT和雄性避孕應(yīng)用中需要這樣活性的化合物，因?yàn)檫@些化合物具有的優(yōu)點(diǎn)是它們不需要單獨(dú)給藥孕激素。
令人驚奇地，Δ14甾體化合物具有這樣的混合雄激素-孕激素甾體化合物(A/P甾體)活性。本發(fā)明的這些化合物的特征在于其具有下列通式(I)結(jié)構(gòu) 式I
其中R1為O、(H，H)、(H，OR)、NOR；R為氫、(C1-6)烷基或(C1-6)?；?；R2為氫、(C1-4)烷基或(C2-4)烯基；R3為氫、(C1-4)烷基或(C2-4)烯基；優(yōu)選氫或β-甲基；R4為(C1-2)烷基；R5為氫、(C1-4)烷基、(C2-4)烯基；R6和R7獨(dú)立地為氫、(C1-4)烷基或(C2-4)烯基；R8為氫，或(C1-15)酰基；和虛線表示任選的鍵，其中R5、R6和R7中至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫。
R3為氫或β-甲基的特別優(yōu)選化合物是R4為氫的化合物。通常來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的優(yōu)選化合物是R1為氧、R3為氫和R4為甲基、虛線表示Δ4雙鍵的化合物，其中優(yōu)選R5或R6為甲基的化合物，更優(yōu)選R6為甲基的化合物。對(duì)于后者(R6為甲基)，最好R2為甲基、乙基或乙烯基。更優(yōu)選的化合物中R2選自甲基、乙基和乙烯基，R5和R6中至少一個(gè)為甲基，R7為氫。特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物是(7α，17β)-17-羥基-7，15-二甲基雌-4，14-二烯-3-酮和(7α，16α，17β)-17-羥基-7，16-二甲基雌-4，14-二烯-3-酮。
在式I中所用的術(shù)語(yǔ)(C1-6)烷基表示具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基，乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基。類似地，術(shù)語(yǔ)(C1-4)烷基表示具有1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，術(shù)語(yǔ)(C1-2)烷基表示具有1-2個(gè)碳原子的烷基。
術(shù)語(yǔ)(C2-4)烯基表示具有至少一個(gè)雙鍵和2-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烯基，優(yōu)選具有2-3個(gè)碳原子的烯基，例如乙烯基和丙烯基。
術(shù)語(yǔ)(C2-4)炔基表示具有至少一個(gè)叁鍵和2-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈炔基，優(yōu)選具有2-3個(gè)碳原子的炔基，例如乙炔基和丙炔基。
術(shù)語(yǔ)(C1-4)亞烷基表示具有1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基。優(yōu)選具有1-2個(gè)碳原子的亞烷基，最優(yōu)選亞甲基。
術(shù)語(yǔ)(C2-4)亞烯基表示具有2-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烯基，優(yōu)選具有2-3個(gè)碳原子的亞烯基，例如亞乙烯基。
術(shù)語(yǔ)(C3-6)環(huán)烷基或(C3-6)環(huán)烷環(huán)表示具有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷環(huán)，例如環(huán)丙烷、環(huán)丁烷、環(huán)戊烷和環(huán)己烷。
術(shù)語(yǔ)(C5-6)環(huán)烯基或(C5-6)環(huán)烯環(huán)表示具有至少一個(gè)雙鍵和5或6個(gè)碳原子的環(huán)烯環(huán)。
術(shù)語(yǔ)(C1-6)?；硎居?-6個(gè)碳原子的羧酸衍生的酰基，例如甲?；?、乙酰基、丙酰基、丁?；?、2-甲基丙酰基、戊?；?、新戊酰基和己?；取ｎ愃频?，術(shù)語(yǔ)(C1-15)?；硎居?-15個(gè)碳原子的羧酸衍生的?；Ａ硗?，(C1-6)?；?C1-15)?；€包括有二元酸衍生的?；绨胩O果?；?、半琥珀?；桶胛於；?，優(yōu)選半琥珀?；?。
術(shù)語(yǔ)“鹵原子”表示氟、氯、溴或碘。當(dāng)鹵素是烷基取代基時(shí)，優(yōu)選Cl和F，其中最優(yōu)選F。
應(yīng)該理解本發(fā)明的15-取代和/或16-取代“Δ14-南諾龍(nandrolone)-衍生物具有天然的5α，8β，9α，10β，13β和17β的天然構(gòu)型。
本發(fā)明的15-取代和/或16-取代Δ14-南諾龍衍生物具有5α，8β，9α，10β，13β和17β天然構(gòu)型，其還可以另外含有一個(gè)或多個(gè)手性碳原子。因此，獲得的化合物可以是純非對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。獲得純對(duì)映異構(gòu)體的方法是本領(lǐng)域公知的，例如結(jié)晶和層析方法。
與前面已知的“Segaloff甾體化合物”和PCT/EP00/06544記載的化合物相比，本發(fā)明化合物的特點(diǎn)在于15-位和/或16-位存在取代基，因此具有混合的雄激素/孕激素活性。
因此，在上文中描述的本發(fā)明化合物通常具有出人意外的雄激素和孕激素混合活性。可以按照各種方式測(cè)定雄激素活性。因此，可以應(yīng)用人乳瘤細(xì)胞(MCF-7細(xì)胞系)的細(xì)胞質(zhì)雄激素受體在體外測(cè)定雄激素的活性；參見Bergink，E.W.等，“體外和體內(nèi)狀態(tài)下南諾龍和睪酮的受體結(jié)合活性比較”，J.Steroid Biochem.22，831-836(1985)。也可以應(yīng)用被人雄激素受體轉(zhuǎn)染的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞(4℃孵化16小時(shí))，將其與5α-二氫睪酮的親合力進(jìn)行比較[按照Bergink，E.W.等在J.Steroid Biochem.19，1563-1570(1983)中記載的方法]。例如，本發(fā)明化合物的反式激活雄激素活性可以如下測(cè)定例如在用人雄激素受體(hAR)轉(zhuǎn)染的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)中測(cè)定，與小鼠乳房腫瘤病毒(MMTV)聯(lián)合測(cè)定、蟲螢光素酶受體基因(37℃孵化16小時(shí))測(cè)定，然后與5α-雙氫睪酮活性比較[按照Schoonen記載的方法，W.G.E.J.等，Analyt.Biochem.261，222-224(1998)]。應(yīng)用經(jīng)典的Hershberger測(cè)試確定體內(nèi)雄激素活性。在此測(cè)試中，應(yīng)用未成熟的去生殖腺大鼠作為測(cè)試動(dòng)物，每天給藥，給藥7天后測(cè)試化合物的雄激素(前列腺重量增加)活性和代謝活性(肌提肌ani(MLA)增加)；參見Hershberger，L.G.等，用改良的levator ani muscle方法測(cè)定19-去甲睪酮及其它甾體化合物的肌營(yíng)養(yǎng)活性。Proceedings of the society for experimentalbiology and medicine83，175-180(1953)。另外，在雄性動(dòng)物生殖道中7α-甲基-19-去甲睪酮與睪酮一樣其生物活性不增加，Endocrinology130，3677-3683(1992)。
本發(fā)明化合物的反式激活孕激素活性可以如下測(cè)定例如在用人雄激素受體B(hPRB)轉(zhuǎn)染的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)中測(cè)定，與小鼠乳房腫瘤病毒(MMTV)聯(lián)合測(cè)定、蟲螢光素酶受體基因(37℃孵化16小時(shí))測(cè)定，然后與(16α)-16-乙基-21-羥基-19-去甲孕-4-烯-3，20-二酮活性比較[按照Schoonen記載的方法，W.G.E.J.等，Analyt.Biochem.261，222-224(1998)]。
作為混合雄激素/孕激素，本發(fā)明的Δ14甾體化合物特別可以用于例如雄性避孕和雄性HRT(激素替代療法)。因此，雄性避孕通常被描述為包括激素給藥方案，其中孕激素具有避孕活性，雄激素補(bǔ)充降低的睪酮水平。雖然，本發(fā)明化合物可以用作孕激素和雄激素，其也可以具有其它活性的另一種化合物補(bǔ)充。本發(fā)明的Δ14甾體化合物開拓了一項(xiàng)新技術(shù)即基于單個(gè)化合物通過(guò)孕激素-雄激素系統(tǒng)使雄性避孕達(dá)到可能。
本發(fā)明的A/P化合物還可以用于部分雄激素缺陷的老年患者的雄激素補(bǔ)充。孕激素活性導(dǎo)致本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)在于其抑制了內(nèi)源性睪丸素的產(chǎn)生。從而本發(fā)明通過(guò)給藥選擇的外源性雄激素(其比睪酮更安全)補(bǔ)充激素成為可能。5α-還原酶把睪酮轉(zhuǎn)變成活性更強(qiáng)的5α-二氫-睪酮。在5α-還原酶濃度相對(duì)高的部位存在公知的有害作用即前列腺問(wèn)題、痤瘡和脫發(fā)。另外，盡管5α-還原酶的存在，外源性睪酮本身對(duì)前列腺比內(nèi)源性睪酮更安全，這是因?yàn)榍傲邢僦袧舛容^低。因此，本發(fā)明的A/P化合物可以有利地降低內(nèi)源性睪酮內(nèi)在的有害作用，并且給藥一種5α-位不還原的雄激素，例如MENT或WO99/67271、WO 00/53619、WO 00/59920和EC 2000-3572公開的雄激素。
除了能夠用于雄性動(dòng)物外，本發(fā)明化合物還可以用于雌性動(dòng)物，例如在經(jīng)絕后婦女中作為雄激素/孕激素替代治療。本發(fā)明的甾體化合物具有孕激素成分的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)子宮內(nèi)膜具有陽(yáng)性作用(抑制雌激素誘導(dǎo)的增生)本發(fā)明還涉及含有本發(fā)明甾體化合物和可藥用輔料的甾體化合物，其中所述可藥用輔料記載于標(biāo)準(zhǔn)參考書中，例如Gennaro等，Remmington’s Pharmaceutical Sciences(第18版，MackPublishing Company，1990，特別參見Part 8PharmaceuticalPreparations and Their Manufacture)?？梢园驯景l(fā)明甾體化合物和可藥用輔料的混合物可以壓縮成固體劑型，例如丸劑、片劑或栓劑。通過(guò)可藥用液體，所述化合物還可以用作注射用溶液、混懸劑、乳劑或噴霧劑，例如鼻用噴霧劑。為了制備劑型，例如制備片劑，可以考慮藥用常規(guī)添加劑例如填充劑、著色劑和高分子粘合劑等。通常來(lái)說(shuō)，可以應(yīng)用不影響活性化合物功能的所有可藥用添加劑。本發(fā)明甾體化合物還可以包含在植入物、陰道環(huán)、萜片、凝膠和任意其它緩釋制劑中。
與本發(fā)明組合物一起給藥的合適甾體包括合適量的乳糖、淀粉和纖維素衍生物等，以及它們的混合物。
另外，本發(fā)明涉及本發(fā)明甾體化合物的應(yīng)用，用于制備雄激素缺乏、孕激素缺乏和特別是雄激素/孕激素缺乏的藥物，例如所述藥物用于雄性或雌性HRT(激素替代治療)。因此，本發(fā)明還涉及雄性或雌性HRT領(lǐng)域的治療方法，包括把上述化合物(以合適的藥物劑型)給藥至患有任意上述缺陷的雄性或雌性患者。從上可以看出，本發(fā)明雄激素的孕激素成分在雄性HRT中也非常具有優(yōu)勢(shì)。
另外，本發(fā)明涉及本發(fā)明甾體化合物在制備避孕活性的藥物(在本領(lǐng)域也應(yīng)用“避孕藥”)中的應(yīng)用。因此，本發(fā)明還涉及避孕適應(yīng)癥，即避孕的方法，包括把上述化合物(以合適的藥物劑型)優(yōu)選作為單個(gè)活性試劑給藥至雄性患者，優(yōu)選給藥至男人。
本發(fā)明的A/P化合物還可用作雄性避孕試劑盒。雖然，除了用于給藥本發(fā)明Δ14A/P甾體化合物的工具外，該試劑盒還含有用于給藥雄激素的工具和/或用于給藥孕激素的工具，優(yōu)選地本發(fā)明Δ14A/P甾體化合物以單個(gè)活性試劑給藥。用于給藥任意化合物的工具被稱為包括相關(guān)化合物和可藥用甾體的藥物制劑。
本發(fā)明還涉及一種治療方法，包括對(duì)于需要雄激素補(bǔ)充、孕激素補(bǔ)充或(特別是)雄激素-孕激素補(bǔ)充的雄性或雌性動(dòng)物，給藥有效量的15-取代、16-取代或15和16取代的Δ14甾體化合物。作為雄性動(dòng)物避孕的結(jié)果，包括給藥另外的避孕劑例如單獨(dú)的孕激素，其是否需要雄激素補(bǔ)充與上述治療方法是沒有關(guān)系的。
另外，本發(fā)明涉及避孕的方法，包括把上述15-取代、16-取代或15和16取代Δ14甾體化合物給藥至能生育的雄性動(dòng)物，尤其是男人，其給藥劑量和給藥方案足以使所述化合物能夠有效地避孕，同時(shí)使接受此避孕方法的雄性動(dòng)物維持有效量的雄激素水平?；蛘撸景l(fā)明提供的避孕方法包括把避孕有效量的避孕劑組合物(例如上述孕激素和Δ14甾體化合物)給藥至能生育的雄性動(dòng)物，例如男人?；蛘撸景l(fā)明的方法涉及給藥作為(孕激素)避孕劑的化合物，其中Δ14甾體化合物的雄激素成分活性和另外補(bǔ)充添加的雄激素共同維持足夠的雄激素含量。
本發(fā)明的化合物通?？梢酝ㄟ^(guò)有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域特別是甾體化學(xué)領(lǐng)域已知的各種方法制備本發(fā)明的化合物(參見，例如Fried，J.等，Organic Reactions in Steroid Chemistry，第I和II卷，VanNostrand Reinhold Company，紐約，1972年)。制備15-取代和/或16取代的式I化合物(其中R1為氧，R2、R4、R5、R6和R7具有上述意義，R3為氫或(C1-4)烷基，R8為氫，虛線表示Δ4雙鍵)的常規(guī)起始原料為例如通式II的3-甲氧基gona-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮衍生物和式III的3-甲氧基-gona-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮衍生物(其中R2和R4具有上述意義，R3為氫或(C1-4)烷基)，其合成方法記載于現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)中，或者可以用標(biāo)準(zhǔn)方法制備(參見例如WO 00/53619)。 式II 式III本發(fā)明的15-取代化合物的可能合成途徑如下把式R5M的(有機(jī)金屬)化合物(其中R5具有上述意義，M為L(zhǎng)i、MgX、ZnX、CeX2、SiR3或SnR3)與式II化合物共軛加成(Cu-催化)，得到15β-取代的3-甲氧基gona-1，3，5(10)-三烯-17-酮衍生物。Δ15雙鍵的引入，例如轉(zhuǎn)變成烯醇甲硅烷基醚，然后與Pd(II)鹽反應(yīng)[Bull，J.R.等，J.Chem.Soc.，Perkin Tr.I，1269(1996)]和酸催化異構(gòu)化反應(yīng)[Ponsold，K.等，J.Prakt.Chem.323，819(1981)]制備得到15-取代的3-甲氧基gona-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮衍生物。然后將該產(chǎn)物還原成相應(yīng)的17β-羥基化合物，然后經(jīng)芳環(huán)的Birch還原[Caine，D.在Org.Reactions23，第1頁(yè)，Wiley，紐約，1976]，再把產(chǎn)物15-取代的(17β)-3-甲氧基gona-2，5(10)，14-三烯-17-醇水解，得到本發(fā)明的15-取代的(17β)-17-羥基gona-4，14-二烯-3-酮衍生物。
本發(fā)明的16-取代化合物的可能合成途徑如下把式III化合物烷基化得到16α-取代和/或16β-取代的3-甲氧基gona-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮衍生物。任選地，這些化合物可以用作起始原料，又進(jìn)行烷基化獲得16，16-二烷基化3-甲氧基gona-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮衍生物。把C-17位羰基還原，經(jīng)Birch還原和水解獲得本發(fā)明的16-取代或16，16-二取代的(17β)-17-羥基gona-4，14-二烯-3-酮化合物。
通過(guò)把上述15-取代的3-甲氧基gona-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮衍生物在C-16位進(jìn)行烷基化得到C-15和C-16位取代的本發(fā)明化合物。
應(yīng)用本領(lǐng)域已知的方法，從R1為氧的式I化合物獲得R1為(H，H)、(H，OR)、NOR和R為氫、(C1-6)烷基、(C1-6)?；谋景l(fā)明化合物。例如，可以從(11β)-11-(羥甲基)-3-甲氧基雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)1，2-乙二基乙縮醛[van den Broek，A.J.等，Steroids30，481(1977)]、3-甲氧基雌-1，3，5(10)-三烯-11，17-二酮環(huán)17-(1，2-乙二基乙縮醛)[van den Broek，A.J.等，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas94，35(1975)]或(7α)-7-甲基雌-4-烯-3，11，17-三酮環(huán)3-(1，2-乙二基二硫乙縮醛)(WO 94/18224)制備獲得本發(fā)明中R3不為氫和(C1-4)烷基的化合物。例如，R4為乙基的化合物可以從13-乙基gon-4-烯-3，17-二酮[Brito，M.等，Synth.Comm.26，623(1996)]或從(7α，17β)-13-乙基-3-甲氧基-7-甲基gona-1，3，5(10)-三烯-17-醇[FRAD 87961(1966)]制備得到。可以從R8為氫的式I化合物制備得到R8為(C1-15)?；谋景l(fā)明化合物。Δ5(10)雙鍵的本發(fā)明化合物可以從獲得的Δ2，5(10)二烯經(jīng)Birch還原后制備得到，或者可以從Δ4衍生物經(jīng)異構(gòu)化反應(yīng)制備得到。本發(fā)明的5α-還原的化合物從Δ4衍生物制備得到。具有Δ11雙鍵的化合物可以從雌-4，11-二烯-3，17-二酮制備得到[Broess，A.I.A.等，Steroids57，514(1992)]。
下面從下列實(shí)施例進(jìn)一步解釋本發(fā)明。
實(shí)施例1(7α，17β)-17-羥基-7，15-二甲基雌-4，14-二烯-3-酮i)-把含有醋酸銅(II)(3.38g)的(7α)-3-甲氧基-7-甲基雌-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮[Rasmusson，G.H.等，Steroids22，107(1973)；10.0g]的無(wú)水四氫呋喃(493.2ml)溶液冷卻至-20℃。滴加氯化甲基鎂(在四氫呋喃中的3M溶液，83.1ml)，把反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。然后將其傾入到飽和氯化銨水溶液中，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。合并有機(jī)相，先后用飽和的氯化銨水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α，15β)-3-甲氧基-7，15-二甲基雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮(10.77g)。該產(chǎn)物在用于下列步驟時(shí)不需進(jìn)一步純化。
ii)-把二異丙胺(6.27ml)的無(wú)水四氫呋喃(37ml)溶液冷卻至-30℃。滴加n-BuLi(1.6M的己烷溶液，25.3ml)，在-10℃下持續(xù)攪拌10分鐘。把反應(yīng)混合物冷卻至-75℃，然后滴加上面步驟所獲產(chǎn)物(3.85g)的無(wú)水四氫呋喃(58ml)溶液。持續(xù)攪拌1小時(shí)。添加三甲基氯甲硅烷(4.7ml)，把反應(yīng)溫度升至室溫。攪拌混合物20分鐘，重新冷卻至0℃，添加飽和氯化銨水溶液(123ml)終止反應(yīng)。用乙酸乙酯提取產(chǎn)物，有機(jī)相合并后用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α，15β)-3-甲氧基-7，15-二甲基-17-[(三甲硅烷基)氧]雌-1，3，5(10)，16-四烯(5.45g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
iii)-把含有醋酸鈀(II)的上面步驟所獲產(chǎn)物(5.11g)的乙腈(128ml)溶液加熱回流15分鐘。冷卻反應(yīng)混合物，過(guò)濾后減壓濃縮，得到(7α)-3-甲氧基-7，15-二甲基雌-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮(5.56g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
iv)-把含有對(duì)甲苯磺酸吡啶鹽(2.1g)的上面步驟所獲產(chǎn)物(3.74g)的無(wú)水甲苯(143ml)溶液加熱回流15分鐘。冷卻后把反應(yīng)混合物傾入到飽和碳酸氫鈉水溶液中，產(chǎn)物用乙酸乙酯提取。有機(jī)相合并后用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥后減壓濃縮。柱層析后獲得(7α)-3-甲氧基-7，15-二甲基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(1.80g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
v)-把上面步驟所所獲產(chǎn)物(0.60g)的無(wú)水四氫呋喃(17ml)溶液滴加到氫化鋁鋰(0.291g)的四氫呋喃(17ml)懸浮液中，冷卻至0℃。把混合物攪拌1小時(shí)后，添加飽和硫酸鈉水溶液終止反應(yīng)。在dicalite上過(guò)濾反應(yīng)混合物，減壓濃縮得到(7α，17β)-3-甲氧基-7，15-二甲基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(0.61g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
vi)-在回流狀態(tài)下，把前面步驟所獲的醇(0.61g)的無(wú)水四氫呋喃(22ml)溶液添加到鋰(1.4g)的液氨(155ml)溶液中。經(jīng)2小時(shí)攪拌后，加入叔丁醇(12ml)，繼續(xù)攪拌30分鐘。加入乙醇，讓氨蒸發(fā)。加入水，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。合并有機(jī)相，依次用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α，17β)-3-甲氧基-7，15-二甲基雌-2，5(10)，14-三烯-17-醇(0.73g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
vii)-把前面步驟所獲產(chǎn)物(0.73g)在丙酮(41ml)中的溶液用鹽酸(12M，2.07ml)處理，室溫下攪拌1小時(shí)，把反應(yīng)混合物傾入到水中，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。合并有機(jī)相，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥后減壓濃縮，柱層析得到(7α，17β)-17-羥基-7，15-二甲基雌-4，14-二烯-3-酮(0.32g)，熔點(diǎn)164-167℃，1HNMR(CDCl3)δ5.85(bs，1H)，3.86(m，1H)，1.73(bs，3H)，0.97(s，3H)，0.87(d，3H，J＝7.1Hz)。
ii)-把鋰(18.9g)和無(wú)水乙醚(1175ml)的混合物冷卻至-30℃，以1小時(shí)的時(shí)間添加溴乙烷(101.7ml)的無(wú)水乙醚(200ml)溶液(T＜-20℃)，在-25℃下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)。在另一個(gè)燒瓶中，把碘化銅(I)(115.5g)的無(wú)水四氫呋喃(1763ml)懸浮液冷卻至-40℃。添加無(wú)水溴化鋰(160.7g)，攪拌該混合物5分鐘。以1小時(shí)的時(shí)間滴加乙基鋰溶液(-40℃＜T＜-30℃)，將得到的銅酸鹽溶液在-30℃下攪拌30分鐘。往其中滴加上面步驟所獲產(chǎn)物(114.8g)的無(wú)水四氫呋喃(1763ml)溶液(-30℃＜T＜-25℃)。維持該溫度攪拌1小時(shí)，添加三甲基氯甲硅烷(113ml)(T＜-10℃)，繼續(xù)攪拌30分鐘。把反應(yīng)混合物傾入到飽和氯化銨水溶液中，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物，合并有機(jī)相后用飽和氯化銨水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α，17α)-7-乙基-3，17-雙[(三甲硅烷基)氧]-19-去甲孕-3，5二烯-20-炔(158.6g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
iii)-把上面步驟所獲產(chǎn)物(158.6g)的丙酮(2414ml)溶液用鹽酸(7M，120ml)處理。室溫下攪拌2小時(shí)，用飽和碳酸氫鈉水溶液(965ml)中和反應(yīng)混合物。減壓除去丙酮，加入水，然后用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。合并有機(jī)相后用依次用飽和氯化銨水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α，17α)-7-乙基-17-羥基-19-去甲孕-4-烯-20-炔-3-酮(107.6g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
iv)-把鹽酸(6M，240ml)滴加到dicalite(240g)的甲醇(1200ml)懸浮液中。經(jīng)20分鐘后，在室溫下攪拌，過(guò)濾收集所述dicalite，用水洗滌至中性。然后將其懸浮于水(960ml)中，劇烈攪拌下添加硝酸銅(II)三水合物(145g)，然后小心地添加碳酸鈉(72.2g)的水(360ml)溶液。經(jīng)30分鐘攪拌后，過(guò)濾收集產(chǎn)物，用水洗滌至中性。在80℃和減壓狀態(tài)下，干燥產(chǎn)物得到dicalite(310g)表面的碳酸銅(II)。把上面步驟iii)所獲產(chǎn)物(251.7g)和dicalite(827g)表面的碳酸銅(II)在甲苯(4470ml)中的混合物加熱回流14小時(shí)，用Dean-Stark汽水閥除去水。過(guò)濾反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯(4.5升)充分洗滌殘余物，減壓濃縮濾液得到(7α)-7-乙基雌-4-烯-3，17-二酮(254.4g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
v)-把上面步驟所獲產(chǎn)物(254.4g)、原甲酸三甲酯(271.6ml)、溴化銅(II)(241.2g)和甲醇(5406ml)的混合物加熱回流7小時(shí)。冷卻后過(guò)濾反應(yīng)混合物。減壓濃縮濾液，把殘余物溶解于乙酸乙酯中。依次用飽和氯化銨水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌獲得的溶液，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮(208g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
vi)-把對(duì)甲苯磺酸(9.4g)添加至上面步驟所獲產(chǎn)物(208g)的乙二醇(317ml)和原甲酸三乙酯(553ml)混合溶劑的溶液中。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過(guò)夜。然后將其傾入到冰水(7885ml)中，持續(xù)攪拌2小時(shí)。加入吡啶(80ml)，攪拌混合物過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀，將其溶解于二氯甲烷中。將所獲溶液用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)1，2-乙二基乙縮醛(224.2g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
vii)-把上面步驟所獲產(chǎn)物(224.2g)和乙二醇(380ml)的無(wú)水二甲氧基乙烷(3229ml)溶液用三溴化吡啶鹽(241.0g)處理。經(jīng)4小時(shí)后，加入硫代硫酸鈉(423.3g)的水(2510ml)溶液，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。把有機(jī)相合并后用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α，16α)-16-溴-7-乙基-3-甲氧基雌-1，3，5(10)-三烯-17-酮環(huán)1，2乙二基乙縮醛(303.7g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
viii)-把上面步驟所獲產(chǎn)物(303.7g)的無(wú)水二甲亞砜(2773ml)溶液加入到叔丁氧基鉀(343.5g)在同一溶劑(938ml)的溶液中，室溫下攪拌反應(yīng)混合物2.5小時(shí)。加入水(1.5升)，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。有機(jī)相合并后用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮環(huán)1，2-乙二基乙縮醛(195.5g)。該產(chǎn)物在用于下面步驟時(shí)不需要進(jìn)一步純化。
ix)-用對(duì)甲苯磺酸(1.18g)處理上面步驟所獲產(chǎn)物(25.0g)在丙酮(412ml)和水(35ml)混合溶劑中的溶液，室溫下攪拌反應(yīng)混合物1.5小時(shí)。加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。有機(jī)相合并后用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥后減壓濃縮。經(jīng)柱層析得到(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮(13.0g)。
x)-按照類似于實(shí)施例1中步驟i-vi，把上面步驟所獲產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成(7α，17β)-7-乙基-3-甲氧基-15-甲基雌-2，5(10)，14-三烯-17-醇。
xi)-按照類似于實(shí)施例的步驟vii，把上面步驟所獲產(chǎn)物(0.55g)轉(zhuǎn)變成(7α，17β)-7-乙基-17-羥基-15-甲基雌-4，14-二烯-3-酮(0.35g)，1HNMR(CDCl3)δ5.85(bs，1H)，3.86(m，1H)，1.69(bs，3H)，0.97(s，3H)，0.90(t，3H，J＝7.9Hz)。
ii)-按照類似于實(shí)施例1步驟ii)記載的方法，把上面步驟所獲產(chǎn)物(2.9g)轉(zhuǎn)變成(7α)-13-乙基-3-甲氧基-7-甲基-17-[(三甲硅烷基)氧]gona-1，3，5(10)，16-四烯(3.7g)。
iii)-按照類似于實(shí)施例1步驟iii)記載的方法，把上面步驟所獲產(chǎn)物(3.7g)轉(zhuǎn)變成(7α)-13-乙基-3-甲氧基-7-甲基gona-1，3，5(10)，15-四烯-17-酮(2.5g)。
iv)-按照類似于實(shí)施例1步驟i)-vii)記載的方法，把上面步驟所獲產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成(7α，17β)-13-乙基-17-羥基-7，15-二甲基gona-4，14-二烯-3-酮，1HNMR(CDCl3)δ5.85(bs，1H)，3.96(m，1H)，2.75(m，1H)，1.77(bs，3H)，0.89(t，3H，J＝7.6Hz)。
實(shí)施例6(16α，17β)-17-羥基-16-甲基雌-4，14-二烯-3-酮(a)和(16β，17β)-17-羥基-16-甲基雌-4，14-二烯-3-酮(b)i)-把雙(三甲硅烷基)酰胺鋰(1M四氫呋喃溶液，7.80ml)滴加到3-甲氧基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮[Johnson，W.S.等，J.Am.Chem.Soc.79，2005(1957)；2.0g]在無(wú)水四氫呋喃(9.2ml)和碘甲烷(4.4ml)混合溶劑的溶液中，冷卻至-70℃。攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，然后用另一部分雙(三甲硅烷基)酰胺鋰(1M的四氫呋喃溶液，1.0ml)處理。經(jīng)30分鐘后，把混合物傾入到飽和氯化銨水溶液中，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。合并有機(jī)相，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥后減壓濃縮。用柱色譜層析得到(16α)-3-甲氧基-16-甲基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮和(16β)-3-甲氧基-16-甲基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(0.985g；比例1∶1)，其用于下面步驟不需進(jìn)一步純化。
ii)-按照類似于實(shí)施例1步驟v記載的方法，用氫化鋁鋰處理上面步驟獲得的混合物(0.84g)，層析后得到(16α，17β)-3-甲氧基-16-甲基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(0.082g)和(16β，17β)-3-甲氧基-16-甲基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(0.13g)。
iiia)-按照類似于實(shí)施例1步驟v i記載的方法，把(16α，17β)-3-甲氧基-16-甲基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(0.067g)轉(zhuǎn)變成(16α，17β)-3-甲氧基-16-甲基雌-2，5(10)，14-三烯-17-醇(0.076g)。
iiib)-按照類似于實(shí)施例1步驟vi記載的方法，把(16β，17β)-3-甲氧基-16-甲基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-醇(0.093g)轉(zhuǎn)變成(16β，17β)-3-甲氧基-16-甲基雌-2，5(10)，14-三烯-17-醇(0.110g)。
iva)-按照類似于實(shí)施例1步驟vii記載的方法，把上述iiia獲得的產(chǎn)物(0.076g)轉(zhuǎn)變成(16α，17β)-17-羥基-16-甲基雌-4，14-二烯-3-酮(0.041g)，1HNMR(CDCl3)δ5.85(t，1H，J＝1.6Hz)，5.01(t，1H，J＝1.6Hz)，3.41(d，1H，J＝7.5Hz)，1.13(d，3H，J＝7.1Hz)，1.04(s，3H)。
ivb)-按照類似于實(shí)施例1步驟vii記載的方法，把上述iiib獲得的產(chǎn)物(0.11g)轉(zhuǎn)變成(16β，17β)-17-羥基-16-甲基雌-4，14-二烯-3-酮(0.039g)，1HNMR(CDCl3)δ5.86(bs，1H)，5.23(t，1H，J＝2.8Hz)，4.02(t，1H，J＝7.9Hz)，1.10(s，3H)，1.00(d，3H，J＝7.1Hz)。
b)-從(7α)-3-甲氧基-7-乙基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(WO01 05806)制備得到(7α，16α，17β)-17-羥基-7-乙基-16-甲基雌-4，14-二烯-3-酮，1HNMR(CDCl3)δ5.87(bs，1H)，4.93(t，1H，J＝2.0Hz)，3.38(dd，1H，J＝8.3和7.1Hz)，1.15(d，3H，J＝7.1Hz)，1.03(s，3H)，0.90(m，3H)。
c)-從(7α)-3-甲氧基-7-乙烯基雌-1，3，5(10)，14-四烯-17-酮(WO 0105806)制備得到(7α，16α，17β)-17-羥基-16-甲基-7-乙烯基雌-4，14-二烯-3-酮1HNMR(CDCl3)δ5.85(s，1H)，5.78(m，1H)，5.14-5.05(m，3H)，3.38(d，1H，J＝8.3Hz)，2.93(bs，1H)，1.13(d，3H，J＝7.1Hz)，1.03(s，3H)。
實(shí)施例8(7α，17β)-7-乙基-17-羥基-15-甲基雌-5(10)，14-二烯-3-酮(a)，(3α，7α，17β)-7-乙基-15-甲基雌-5(10)，14-二烯-3，17-二醇(b)，和(3β，7α，17β)-7-乙基-15-甲基雌-5(10)，14-二烯-3，17-二醇(c)i)-將(7α，17β)-7-乙基-3-甲氧基-15-甲基雌-2，5(10)，14-三烯-17-醇(實(shí)施例3，步驟x；0.10g)在甲醇(0.92ml)和四氫呋喃(0.65ml)混合溶劑中的溶液用草酸(0.32g)的水(0.54ml)溶液處理。室溫下攪拌1小時(shí)后，把反應(yīng)混合物傾入到水中，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物。合并有機(jī)相，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、水和鹽水處理，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到(7α，17β)-7-乙基-17-羥基-15-甲基雌-5(10)，14-二烯-3-酮(0.090g)，1HNMR(CDCl3)δ3.89(m，1H)，2.76(bs，2H)，1.71(bs，3H)，0.95(t，3H，J＝7.5Hz)，0.94(s，3H)。
ii)-往上述步驟所獲產(chǎn)物在四氫呋喃(1.45ml)和甲醇(1.45ml)混合溶劑中的溶液中添加硼氫化鈉(0.009g)。攪拌該反應(yīng)混合物3.5小時(shí)，然后加入丙酮終止反應(yīng)。把混合物傾入到水中，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物，合并有機(jī)相，依次用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經(jīng)柱層析后獲得(3α，7α，17β)-7-乙基-15-甲基雌-5(10)，14-二烯-3，17-二醇(0.035g)，1HNMR(CDCl3)δ3.88(dd，1H，J＝9.1和8.3Hz)，3.82(m，1H)，1.70(s，3H)，1.25(s，3H)，0.92(t，3H，J＝7.1Hz)；和(3β，7α，17β)-7-乙基-15-甲基雌-5(10)，14-二烯-3，17-二醇(0.016g)，1HNMR(CDCl3)δ4.11(m，1H)，3.88(dd，1H，J＝8.3和7.9Hz)，1.70(s，3H)，1.25(s，3H)，0.92(t，3H，J＝7.9Hz)。
權(quán)利要求
1.下列通式I的化合物， 式I其中R1為O、(H，H)、(H，OR)、NOR；R為氫、(C1-6)烷基或(C1-6)?；籖2為氫、(C1-4)烷基或(C2-4)烯基；R3為氫、(C1-4)烷基或(C2-4)烯基；R4為(C1-2)烷基；R5為氫、(C1-4)烷基、(C2-4)烯基；R6和R7獨(dú)立地為氫、(C1-4)烷基或(C2-4)烯基；R8為氫，或(C1-15)?；?；虛線表示任選的鍵，其中R5、R6和R7至少有一個(gè)基團(tuán)不為氫。
2.權(quán)利要求1的化合物，其特征在于R3為氫或β-甲基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其特征在于R4為甲基。
4.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物，其中R1為氧，R3為氫，R4為甲基或乙基，虛線為Δ4雙鍵。
5.權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)的化合物，其特征在于R2選自甲基、乙基和乙烯基，R5和R6至少有一個(gè)基團(tuán)為甲基，R7為氫。
6.權(quán)利要求4或5的化合物，其特征在于R5或R6為甲基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其特征在于R6為甲基。
8.權(quán)利要求7的化合物，其特征在于R2為甲基、乙基或乙烯基。
9.化合物(7α，17β)-17-羥基-7，15-二甲基雌-4，14-二烯-3-酮或(7α，16α，17β)-17-羥基-7，16-二甲基雌-4，14-二烯-3-酮。
10.用作藥物的上述任意一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物。
11.藥物組合物，含有可藥用載體和作為藥用活性成分的說(shuō)明書記載的通式I甾體化合物。
12.權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物的應(yīng)用，用于制備激素不足治療的藥物，所述激素不足選自雄激素缺乏、孕激素缺乏和混合的雄激素-孕激素缺乏。
13.權(quán)利要求12的應(yīng)用，其特征在于所述治療包括聯(lián)合給藥權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)的化合物和5α位不能還原的雄激素例如7α-甲基南諾龍。
14.藥物組合物，包括可藥用載體和作為藥用活性成分的權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)的化合物。
15.一種用于雄性避孕的試劑盒，包括給藥孕激素的工具和給藥雄激素的工具，其特征在于這兩種工具中至少有一種工具為權(quán)利要求11的藥物組合物。
16.權(quán)利要求15的試劑盒，其特征在于其包括給藥權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)的化合物和雄激素的工具。
17.權(quán)利要求15的試劑盒，其特征在于其包括給藥權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)的化合物和孕激素的工具。
全文摘要
本發(fā)明公開了了與雄激素有關(guān)的甾體化合物，其具有Δ
文檔編號(hào)A61P43/00GK1481388SQ01820580
公開日2004年3月10日 申請(qǐng)日期2001年12月10日 優(yōu)先權(quán)日2000年12月15日
發(fā)明者J·范德勞, D·萊森, M·E·德古耶, J 范德勞, 德古耶 申請(qǐng)人:阿克佐諾貝爾公司