專利名稱：松乳菇母種培養(yǎng)基及松乳菇人工栽培方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及松乳菇母種培養(yǎng)基和松乳菇的人工栽培方法。
松乳菇(Lactarius deliciosus)是非常行銷的食用菌，但目前沒有成功的人工栽培方法。所見報(bào)道有方平夷對松乳菇人工栽培的嘗試(《食用菌》1994.3)。其采用的方法是1.采用MS基本培養(yǎng)基，除去植物生長素和細(xì)胞分裂素，補(bǔ)充3g/l蛋白胨，2g/l酵母浸膏，瓊脂2％作為分裂菌絲，母種培養(yǎng)和保藏培養(yǎng)基；2.原種培養(yǎng)基采用小麥或牛糞粉與大米的混合物；3.子實(shí)體形成培養(yǎng)基為棉子殼，腐爛茅草和蔗糖；4.分離培養(yǎng)方法是先取菌柄或菌柄著生處的部分菌蓋于斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待菌絲出現(xiàn)后，挑選菌絲轉(zhuǎn)接培養(yǎng)成母種，再擴(kuò)繁原種，最后進(jìn)行子實(shí)體培養(yǎng)。其實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是人工栽培條件下可以形成子實(shí)體，但不易形成，就是形成了也不易長大。目前人們沒有找到一種適合的松乳菇菌種母種培養(yǎng)基，和一種好的人工栽培方法，因此也就無法產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)松乳菇。
本發(fā)明的目的是提供一種松乳菇母種培養(yǎng)基和有效的，可產(chǎn)業(yè)化的松乳菇人工栽培方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是母種培養(yǎng)基主要由下列成份組成酵母2-10g，尼克酸1-10mg，葉酸2--7mg，生物素1-8mg，MnSO40.5g， FeCl30.5g，ZnSO40.5gCuSO45mg，KH2PO40.5g鹽酸硫胺素30mg，8g松針葉與水浸煮后的過濾液1000g，并且PH值為5.1。
上述培養(yǎng)基各成份成份中優(yōu)選酵母5g，尼克酸5mg，葉酸3mg，生物素5mg，其它成份不變。
用上述母種培養(yǎng)基進(jìn)行松乳菇人工栽培的方法是A.菌種培養(yǎng)將采集的新鮮子實(shí)體，經(jīng)消毒后，取菌柄與菌蓋連接處菌肉0.7×0.7×0.4cm大小，轉(zhuǎn)入盛前述母種培養(yǎng)基的滅菌試管內(nèi)，于22℃溫度下培養(yǎng)20-25天；B.菌根合成選新鮮馬尾松飽滿種子在20-25℃水中浸泡15-20小時(shí)，瀝干后經(jīng)消毒處理，將種子置于21-23℃，照度為5000Lux的條件下培養(yǎng)7-10天，種子發(fā)芽，胚根長2-3cm；取A步中所得的菌種豆粒大小移入裝有蛭石20-50％，顆粒碳40-70％，上述母種培養(yǎng)基10％(重量)的菌根合成培養(yǎng)基的試管中；置于種子培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)7天后，移入已發(fā)芽的馬尾松幼胚，繼續(xù)在種子培養(yǎng)條件下培養(yǎng)35-40天，然后將幼苗移入滅菌土壤中，培養(yǎng)5-8個(gè)月即可得到菌根合成苗；C.將B步中得到的菌根合成苗繼續(xù)原地栽培或移植到普通土壤培養(yǎng)2-3年，即可出菇。
上述人工栽培方法中優(yōu)選菌根合成培養(yǎng)基為蛭石30％，顆粒碳60％，菌種分離用培養(yǎng)基10％(重量)。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的母種培養(yǎng)基，以及用該母種培養(yǎng)基人工培養(yǎng)子實(shí)體的方法絕然不同。在子實(shí)體的培養(yǎng)方法中采用了有生命的馬尾松幼胚，得到菌根合成苗，并通過菌根合成苗實(shí)現(xiàn)人工栽培的目的。本發(fā)明提供的人工栽培方法，可以達(dá)到產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的目的。生產(chǎn)得到的松乳菇與天然松乳菇的形態(tài)特征一致。
實(shí)施例1-10表1列出了在不同培養(yǎng)基配比，及不同基質(zhì)配比條件下菌根合成情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用本發(fā)明提供母種培養(yǎng)基，并在本發(fā)明的培養(yǎng)條件下均能得到好的菌根合成苗。
表1菌根合成用培養(yǎng)基培養(yǎng)效果表
實(shí)施例A1995年10月7日，采集野外菌蓋直徑1.7cm的松乳菇子實(shí)體，去污，并用70％的酒精對表面消毒，取菌蓋與菌柄相連處的菌肉組織0.6-0.7cm見方，置入母種培養(yǎng)基試管中，共25管。其中母種培養(yǎng)基為酵母5g，尼克酸5mg，葉酸3mg，生物素5mg，葡萄糖20g，瓊脂15g，MnSO40.5g，F(xiàn)eCl30.5，ZnOSO40.5gCuSO45mg，KH2PO40.5g，鹽酸硫胺素30mg，8g松針葉與水浸煮后的過濾液1000g，調(diào)整PH為5.1；菌根合成培養(yǎng)基為蛭石3％，顆粒碳60％，母種培養(yǎng)基10％(重量)；第4天即有菌絲發(fā)生，第7天已很明顯，第10天時(shí)已見菌絲呈白色放射狀擴(kuò)展。第18天時(shí)，平均生長量有0.9cm。第25天時(shí)已長滿斜面。然后將菌種轉(zhuǎn)管至盛有前述菌根合成培養(yǎng)基的試管中培養(yǎng)，共得二級種管50支。該試管管徑為2.8cm，加入的菌根合成培養(yǎng)基高度為5cm。
取150粒飽滿馬尾松種子，用20-25℃水浸種15-20小時(shí)，瀝干后用30％過氧化氫殺菌處理10分鐘，隨后用無菌水清洗3次，將種子放置于墊有清潔濾紙的培養(yǎng)皿中，加無菌水浸潤濾紙，連同培養(yǎng)皿置于21-23℃，照度5000Lux的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。第5天即見種皮破裂，10天后45％的種子發(fā)芽。胚根長達(dá)2厘米以上。個(gè)別種殼脫落，子葉開散。
將發(fā)芽種子移入前述二級種管中，每管2粒，并加水2ml后，繼續(xù)在前述光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，25天時(shí)即發(fā)現(xiàn)有菌根聯(lián)合體形成。第41天時(shí)，移入滅菌營養(yǎng)土缽中，培養(yǎng)5個(gè)月后，移入一般土壤，管理方法同一般馬尾松苗。
1997年10月5目即發(fā)現(xiàn)有松乳菇子實(shí)體從松樹根中長出。松乳菇鮮重150--250g/m2。所得松乳菇子實(shí)體形態(tài)特征菌蓋2-9厘米，邊緣內(nèi)卷，后期平展，有的中部凹陷呈淺漏斗狀，表面和背面均為肉紅色，濕時(shí)粘，多有同心環(huán)紋。菌肉淡白色，較厚，質(zhì)脆。受傷后很快變綠色。菌柄呈圓柱形，有時(shí)有下陷斑點(diǎn)。上述形態(tài)特征與野生松乳菇一致。子實(shí)體根狀菌絲與樹根聯(lián)結(jié)緊密，說明培養(yǎng)成功。
權(quán)利要求
1.松乳菇母種培養(yǎng)基，主要由下列成份組成酵母2-10g，尼克酸1-10mg，葉酸2-8mg，生物素1-8mg，MnSO40.5g，F(xiàn)eCl30.5g，ZnSO40.5g，CuSO45mg，KH2PO40.5g，鹽酸硫胺素30mg，8g松針葉與水浸煮后的過濾液1000g，并且PH值為5.1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的松乳菇母種培養(yǎng)基，其特征在于酵母5g，尼克酸5mg，葉酸3mg，生物素5mg，其它成份不變。
3.松乳菇人工栽培方法，其特征在于A.菌種培養(yǎng)將采集的新鮮子實(shí)體，經(jīng)消毒后，取菌柄與菌蓋連接處菌肉0.7×0.7×0.4cm大小，轉(zhuǎn)入盛權(quán)利要求1或2所述的母種培養(yǎng)基的滅菌試管內(nèi)，于22℃溫度下培養(yǎng)15-17天；B.菌根合成選新鮮馬尾松飽滿種子在20-25℃水中浸泡15-20小時(shí)，瀝干后經(jīng)消毒處理，將種子置于21-23℃，照度為5000Lux的條件下培養(yǎng)7-10天，種子發(fā)芽，胚根長2-3cm；取A步中所得的菌種豆粒大小移入裝有蛭石20-50％，顆粒碳40-70％，權(quán)利要求1或2所述母種培養(yǎng)基10％(重量)的菌根合成培養(yǎng)基的試管中，置于種子培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)7天后，移入已發(fā)芽的馬尾松幼胚，繼續(xù)在種子培養(yǎng)條件下培養(yǎng)35-40天，然后將幼苗移入滅菌土壤中，培養(yǎng)5-8個(gè)月即可得到菌根合成苗；C.將B步中得到的菌根合成苗繼續(xù)原地栽培或移植到普通土壤中培養(yǎng)2-3年，即可出菇。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的松乳菇人工栽培方法，其特征在于菌根合成步驟中蛭石為30％，顆粒碳為60％，母種培養(yǎng)基為10％(重量)。
全文摘要
本發(fā)明涉及松乳菇的母種培養(yǎng)基和它的人工栽培方法。培養(yǎng)基主要由酵母2—10g,尼克酸1—10mg,葉酸2—8mg,生物素1—8mg等組成。用該培養(yǎng)基進(jìn)行菌種培養(yǎng),選用馬尾松種子與菌種培養(yǎng)成菌根合成苗,將該菌根合成苗在常規(guī)條件下種植2—3年即可出菇。利用本發(fā)明提供的母種培養(yǎng)基和人工栽培方法可實(shí)現(xiàn)松乳菇的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C12N1/14GK1240572SQ9811252
公開日2000年1月12日 申請日期1998年6月25日 優(yōu)先權(quán)日1998年6月25日
發(fā)明者譚著明 申請人:譚著明