一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的制備過程如下：稱取3.0g新鮮麩皮，加1000mL蒸餾水，微火煮沸1小時(shí)后，補(bǔ)水至1000mL，使麩皮液濃度為3g／L，然后用6層紗布過濾，濾液置4℃冰箱沉淀，虹吸上清液作為原液分別配制麩皮含量分別為0.1g／L，0.3g／L，0.6g／L麩皮瓊脂培養(yǎng)基，瓊脂含量均為2％；隨后在氣壓103kPa下滅菌20分鐘，傾注到平板或斜面上即得。本發(fā)明中所敘述的麩皮瓊脂培養(yǎng)基，易于儲(chǔ)存；實(shí)際應(yīng)用中較馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(PDA)具有更高的透明度，易于觀察，較之玉米粉瓊脂培養(yǎng)基(CMA)，真菌生長(zhǎng)發(fā)育良好，縮短菌株培養(yǎng)時(shí)間，也易于形成孢子便于觀察和鑒定以及捕食結(jié)構(gòu)的觀察，而且適合于菌種的保存。
【專利說明】一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]目前用于食線蟲真菌初次分離的培養(yǎng)基主要有水瓊脂和0.4g / L的玉米粉瓊脂，純化培養(yǎng)基有馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基和0.4g / L的玉米粉瓊脂，而水瓊脂培養(yǎng)基在分離時(shí)要多次加入多量的線蟲又不能用于純化培養(yǎng)，0.4g / L的玉米粉瓊脂菌絲生長(zhǎng)很細(xì)，馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基雖然菌絲生長(zhǎng)粗但由于雜質(zhì)較多不易觀察，兩者對(duì)于真菌的捕食結(jié)構(gòu)觀察較難，且形成分生孢子的時(shí)間較長(zhǎng)，如果要保存菌種于4°C則保持時(shí)間不長(zhǎng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是找到一種能夠更適合用于食線蟲真菌分離、純化和保存的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基的配方、制作和用途(技術(shù)方案)是:稱取3.0g新鮮麩皮，加1000mL蒸餾水，微火煮沸Ih后，補(bǔ)水至1000mL,使麩皮液濃度為3g / L，6層紗布過濾，濾液置4°C冰箱沉淀，虹吸上清液作為原液分別配制麩皮含量分別為0.1g / L，0.3g / L，0.6g / L麩皮瓊脂培養(yǎng)基，瓊脂含量均為2%。103kPa滅菌20min，傾注平板或斜面。0.1g / L和0.3g / L麩皮瓊脂平板，分別用于初次分離、純化食線蟲性真菌，將純化菌種接種于0.3g / L斜面上加膠塞密封，4°C冰箱保存I年后仍存活，0.6g / L麩皮瓊脂平板和斜面用于少數(shù)生長(zhǎng)緩慢或極緩慢的捕食線蟲性真菌的純化和保存。以上為制作1000mL培養(yǎng)基的技術(shù)方案，如果少量制作或大量制作，則按以上比例縮小或擴(kuò)大即可。
[0004]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:麩皮是面粉廠生產(chǎn)面粉后的副產(chǎn)品，來源廣泛，易獲得，價(jià)格低廉。本發(fā)明中所敘述的麩皮瓊脂培養(yǎng)基，經(jīng)試驗(yàn)培養(yǎng)捕食線蟲性真菌有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，較之下列培養(yǎng)基制作更方便，不用切碎或粉碎過篩，且麩皮比馬鈴薯易于儲(chǔ)存；實(shí)際應(yīng)用中較馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(PDA)具有更高的透明度，易于觀察，較之玉米粉瓊脂培養(yǎng)基(CMA)，真菌生長(zhǎng)發(fā)育良好，縮短菌株培養(yǎng)時(shí)間，也易于形成孢子便于觀察和鑒定以及捕食結(jié)構(gòu)的觀察，而且適合于菌種的保存。
【具體實(shí)施方式】
[0005]在下文中，現(xiàn)在將更充分地描述本發(fā)明，示出了各種實(shí)施例。然而，本發(fā)明可以以許多不同的形式來實(shí)施，且不應(yīng)該解釋為局限于在此闡述的實(shí)施例。相反，提供這些實(shí)施例使得本公開將是徹底和完全的，并將本發(fā)明的范圍充分地傳達(dá)給本領(lǐng)域技術(shù)人員。
[0006]在下文中，將更詳細(xì)地描述本發(fā)明的示例性實(shí)施例。
[0007]本發(fā)明的目的是找到一種能夠更適合用于食線蟲真菌分離、純化和保存的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基的配方、制作和用途(技術(shù)方案)是:稱取3.0g新鮮麩皮，加1000mL蒸餾水，微火煮沸Ih后，補(bǔ)水至1000mL,使麩皮液濃度為3g / L，6層紗布過濾，濾液置4°C冰箱沉淀，虹吸上清液作為原液分別配制麩皮含量分別為0.1g / L，0.3g / L，0.6g / L麩皮瓊脂培養(yǎng)基，瓊脂含量均為2%。103kPa滅菌20min，傾注平板或斜面。0.1g / L和0.3g / L麩皮瓊脂平板，分別用于初次分離與純化食線蟲性真菌，將純化菌種接種于0.3g / L斜面上加膠塞密封，4°C冰箱保存I年后仍存活，0.6g / L麩皮瓊脂平板和斜面用于少數(shù)生長(zhǎng)緩慢或極緩慢的捕食線蟲性真菌的純化和保存。。以上為制作1000mL培養(yǎng)基的技術(shù)方案，如果少量制作或大量制作，則按以上比例縮小或擴(kuò)大即可。
[0008]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:麩皮是面粉廠生產(chǎn)面粉后的副產(chǎn)品，來源廣泛，易獲得，價(jià)格低廉。本發(fā)明中所敘述的麩皮瓊脂培養(yǎng)基，經(jīng)試驗(yàn)培養(yǎng)捕食線蟲性真菌有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，較之下列培養(yǎng)基制作更方便，不用切碎或粉碎過篩，且麩皮比馬鈴薯易于儲(chǔ)存；實(shí)際應(yīng)用中較馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(PDA)具有更高的透明度，易于觀察，較之玉米粉瓊脂培養(yǎng)基(CMA)，真菌生長(zhǎng)發(fā)育良好，縮短菌株培養(yǎng)時(shí)間，也易于形成孢子便于觀察和鑒定以及捕食結(jié)構(gòu)的觀察，而且適合于菌種的保存。
[0009]以上所述僅為本發(fā)明的實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明。本發(fā)明可以有各種合適的更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保 護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養(yǎng)基，其特征在于: 該培養(yǎng)基的制備過程如下:稱取3.0g新鮮麩皮,加1000mL蒸懼水,微火煮沸I小時(shí)后，補(bǔ)水至1000mL,使麩皮液濃度為3g / L，然后用6層紗布過濾，濾液置4°C冰箱沉淀，虹吸上清液作為原液分別配制麩皮含量分別為0.1g / L，0.3g / L，0.6g / L麩皮瓊脂培養(yǎng)基，瓊脂含量均為2% ;隨后在氣壓103kPa下滅菌20分鐘，傾注到平板或斜面上即得。
2.如權(quán)利要求1所述的一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養(yǎng)基，其特征在于: 所述的0.1g / L和0.3g / L麩皮瓊脂平板，分別用于初次分離與純化食線蟲性真菌，將純化菌種接種于0.3g / L斜面上加膠塞密封，并在4°C冰箱保存； 。 0.6g / L麩皮瓊脂平板和斜面用于少數(shù)生長(zhǎng)緩慢或極緩慢的捕食線蟲性真菌的純化和保存。
【文檔編號(hào)】C12N1/14GK103952319SQ201410150385
【公開日】2014年7月30日 申請(qǐng)日期:2014年4月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月15日
【發(fā)明者】蔡葵蒸, 劉翊中, 王波波, 徐春蘭, 王康英, 劉偉, 李禤, 徐強(qiáng), 易林鑫, 王慧, 秦鴿鴿, 王冬梅 申請(qǐng)人:西北民族大學(xué)