專利名稱：一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法。
背景技術(shù)：
農(nóng)藥甲氰菊酯在土壤中大量蓄積會影響農(nóng)作物、牲畜和人等生物鏈，會導致土質(zhì)和產(chǎn)量的下降并影響相應的經(jīng)濟收入。以微生物為主體的生物修復技術(shù)可用于降解各種有機污染物，具有高效、安全、無二次污染、費用低等優(yōu)點，甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌可用于降解、去除農(nóng)藥甲氰菊酯殘留，能夠達到降低去除毒害和提高產(chǎn)量的目的，起到保障食品安全增加社會效益的效果。但是目前的降解菌篩選方法主要是通過采集樣本，富集培養(yǎng)，分離純化，梯度馴化培養(yǎng)，確定降解率等一系列手段得到甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌，花費的時間長，工作量大，成本高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，提供一種方法簡便、耗時短、篩選工作量小的甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法、能克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。本發(fā)明采用的技術(shù)方案
一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，采用以下步驟
(1)采集樣本；
(2)富集培養(yǎng)；
(3)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)；
(4)分離純化；
(5)得到降解菌株，保藏。所述的一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，采集樣本取采自農(nóng)藥廠廢水排放口附近的活性污泥。所述的一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，富集培養(yǎng)置于100 mL基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基中，基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基配方甲氰菊酯:100 mg L' NaCl :1. 0 g/L，NH4NO3 :1. 0 g/L，K2HPO4 I. 5 g/L, , KH2PO4 0. 5 g/L，MgSO4 7H20 :0. I g/L，Ph=7.0，于 37 °C, 130 r mirT1 搖床培養(yǎng)ld，以5 mL的接種量轉(zhuǎn)接到基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基中，共轉(zhuǎn)接3次。所述的一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)取富集液ImL添加到選擇培養(yǎng)基中，選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)配方甲氰菊酯600 mg L' NaCl :1. 0 g/L, NH4NO3 I. 0 g/L, K2HPO4 1. 5 g/L, , KH2PO4 :0. 5 g/L, MgSO4 7H20 0. I g/L，Ph=7.0，于 30 °C, 130r mirT1振蕩培養(yǎng)3d。所述的一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，分離純化吸取0. 2mL培養(yǎng)液涂布于加有100 mg L—1甲氰菊酯的基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基平板，在30°C培養(yǎng)2d，挑取在農(nóng)藥培養(yǎng)基中生長快、菌落規(guī)則、傳代穩(wěn)定的單菌落，劃線培養(yǎng)3次后轉(zhuǎn)入斜面保存。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明通過采用選擇培養(yǎng)基篩選，避免使用傳統(tǒng)的梯度馴化培養(yǎng)，大大節(jié)省了篩選的時間和工作量，相應地減少了篩選的成本，大大提高了篩選的效率。采用傳統(tǒng)傳統(tǒng)篩選方案的流程，需要耗時14飛6天，工作量大，成本也相應增高。而采用本發(fā)明的篩選方案，僅耗時12天，工作量較小，成本也較低。


圖I:為本發(fā)明采用的技術(shù)方案的流程圖。圖2 :為現(xiàn)有傳統(tǒng)篩選方案的流程圖。
具體實施例方式實施例I :
一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，采用以下步驟(I)采集樣本；(2)富集培養(yǎng)； (3)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)；(4)分離純化；(5)得到降解菌株，保藏。篩選方法具體步驟為，取采自農(nóng)藥廠廢水排放口附近的活性污泥，置于100 mL的基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基中，基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基配方甲氰菊酯:100 mg L-1，NaCl :1. 0 g/L, NH4NO3 I. 0 g/L, K2HPO4 1. 5 g/L,，KH2PO4 :0. 5 g/L, MgSO4 7H20 :0. I g/L, Ph=7. 0，于 37 °C,130 r mirT1搖床培養(yǎng)ld，以5 mL的接種量轉(zhuǎn)接到相同的培養(yǎng)基中，共轉(zhuǎn)接3次，取富集液ImL添加到選擇培養(yǎng)基中，選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)配方甲氰菊酯600 mg L_\ NaCl :1. 0 g/L, NH4NO3 1. 0 g/L, K2HPO4 :1. 5 g/L,，KH2PO4 :0. 5 g/L, MgSO4 7H20 :0. I g/L, Ph=7. 0，于30 °C, 130 r mirT1振蕩培養(yǎng)3d，吸取0. 2mL培養(yǎng)液涂布于加有100 mg L—1甲氰菊酯的基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基平板，在30°C培養(yǎng)2d，挑取在農(nóng)藥培養(yǎng)基中生長快、菌落規(guī)則、傳代穩(wěn)定的單菌落，劃線培養(yǎng)3次后轉(zhuǎn)入斜面保存；將得到降解菌株保藏。
權(quán)利要求
1.一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，其特征在于采用以下步驟 采集樣本； 富集培養(yǎng)； 選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)； 分離純化； 得到降解菌株，保藏。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，其特征在于采集樣本取采自農(nóng)藥廠廢水排放ロ附近的活性污泥。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，其特征在于富集培養(yǎng)置于100 mL基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基中，基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基配方甲氰菊酯100 mg ·じ1, NaCl :1.0g/L, NH4NO3 1. O g/L，K2HPO4 :1. 5 g/L,，KH2PO4 :0. 5 g/L，MgSO4 · 7H20 :0. I g/L，Ph=7.0，于37 °C, 130 r · mirT1搖床培養(yǎng)ld，以5 mL的接種量轉(zhuǎn)接到基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基中，共轉(zhuǎn)接3次。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，其特征在于選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)取富集液ImL添加到選擇培養(yǎng)基中，選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)配方甲氰菊酯600mg ·じ1，NaCl :1. O g/L, NH4NO3 :1. O g/L, K2HPO4 :1. 5 g/L,，KH2PO4 :0. 5 g/L, MgSO4 · 7H20 0.I g/L, Ph=7. 0，于 30 °C, 130 r · mirT1 振蕩培養(yǎng) 3d。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，其特征在于分離純化吸取O. 2mL培養(yǎng)液涂布于加有100 mg·じ1甲氰菊酯的基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基平板，在30°C培養(yǎng)2d，挑取在農(nóng)藥培養(yǎng)基中生長快、菌落規(guī)則、傳代穩(wěn)定的單菌落，劃線培養(yǎng)3次后轉(zhuǎn)入斜面保存。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法，采用以下步驟:采集樣本；富集培養(yǎng)；選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)；分離純化；得到降解菌株，保藏。本方法克服了傳統(tǒng)甲氰菊酯農(nóng)藥降解菌的篩選方法耗時、工作量大、成本高的不足，提供了一種簡便的方法，縮短了篩選時間，也減少了篩選工作量。
文檔編號C12N1/00GK102757897SQ20121026104
公開日2012年10月31日 申請日期2012年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月26日
發(fā)明者余磊, 武思齊, 趙杰 申請人:貴陽學院