專利名稱：枯草芽孢桿菌在拮抗幽門螺桿菌中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種枯草芽孢桿菌的應(yīng)用，尤其涉及一種枯草芽孢桿菌在拮抗幽門螺 桿菌中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
。1983年Marshall和Warren等首次成功分離得到幽門螺桿菌，許多研究都證實 它是引起慢性胃炎和十二指腸潰瘍的主要病因，是導(dǎo)致胃癌發(fā)生的潛在因素。目前，普遍采用國際標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)療法(standard triple therapy)對幽門螺桿菌感 染進(jìn)行治療。即將鉍、甲硝唑與四環(huán)素或氨芐青霉素聯(lián)用，幽門螺桿菌根除率為50-90%。該 療法副作用大，同時可能導(dǎo)致幽門螺桿菌耐藥株的產(chǎn)生，從而進(jìn)一步增加治療難度。另外， 幽門螺桿菌在抗生素和體內(nèi)不利因素的誘導(dǎo)下可形成細(xì)胞壁缺陷的L型，這也是臨床上幽 門螺桿菌感染治愈后易復(fù)發(fā)的主要因素之一。近年來，人們在研究替代抗生素治療幽門螺 桿菌感染方面做了大量的工作，發(fā)現(xiàn)多種拮抗幽門螺桿菌生長的方法，尤其是通過益生菌 來預(yù)防和治療幽門螺桿菌所引起的感染，更是目前研究的熱點。益生菌通過黏附、競爭、排斥、占位及產(chǎn)生抑制物等機制，抑制胃腸道內(nèi)的致病菌， 保持原籍菌群的優(yōu)勢，從而促進(jìn)人體和動物體的健康。目前，國外對拮抗幽門螺桿菌的益生 菌的研究主要集中在乳酸菌方面，多種乳桿菌分泌的乳酸及多種蛋白混合物都具有拮抗幽 門螺桿菌的作用。動物實驗證明，乳酸菌活菌制劑能有效防止幽門螺桿菌感染，并顯著減輕 動物體內(nèi)幽門螺桿菌感染引發(fā)的炎癥，降低幽門螺桿菌在胃內(nèi)的定植密度。枯草芽孢桿菌是一類好氧性革蘭氏陽性細(xì)菌，其所需營養(yǎng)簡單，可以產(chǎn)生多種抗 菌物質(zhì)，抑制多種致病菌的生長。抗菌物質(zhì)中大部分是多肽，主要抑制革蘭氏陽性菌；有些 多肽還能抑制革蘭氏陰性菌、霉菌和酵母。其中有一些高分子量蛋白類的抗菌物質(zhì)和低分 子量的抗菌肽已被應(yīng)用于治療人類、動物和植物的疾病，同時也可作為生物表面活性劑、食 品防腐劑、飼料添加劑和分子生物學(xué)的研究工具。由于芽孢桿菌其能產(chǎn)生耐熱抗逆的芽孢，而這一功能對菌劑的生產(chǎn)、劑型加工 及其在環(huán)境中的存活、定殖與繁殖都十分有利，因此國內(nèi)出現(xiàn)了多種微生態(tài)制劑，如“整腸 生”、“促菌生” “白天鵝”等。目前國內(nèi)外在開展枯草芽孢桿菌預(yù)防和治療幽門螺桿菌感染 方面還未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供了 一種枯草芽孢桿菌在拮抗幽門螺桿菌中的應(yīng)用，該枯草 芽孢桿菌菌株具有較強的抑制幽門螺桿菌生長能力，使用安全、無殘留、不產(chǎn)生抗藥性。本發(fā)明是這樣來實現(xiàn)的，一種枯草芽孢桿菌在拮抗幽門螺桿菌中的應(yīng)用，枯草芽 孢桿菌在營養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中37°C、180 rpm搖床培養(yǎng)9小時，可產(chǎn)生抑制幽門螺桿菌生 長的物質(zhì)，有效抑制幽門螺桿菌生長；18小時抑菌能力達(dá)到最大，經(jīng)純化獲得抑菌蛋白，制 成治療胃腸道疾病的制劑。
將枯草芽孢桿菌在營養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中37°C、180 rpm搖床培養(yǎng)12-16小時，過 濾菌體并制成拮抗幽門螺桿菌的活菌口服制劑。本發(fā)明應(yīng)用如下
1、枯草芽孢桿菌上清液的抑菌作用
采用打孔擴(kuò)散法對33株益生菌(包括芽孢桿菌、腸球菌，乳桿菌和雙歧桿菌)發(fā)酵上清 液及菌體破碎液進(jìn)行體外拮抗幽門螺桿菌實驗(見表1)。發(fā)現(xiàn)一株枯草芽孢桿菌的上清液 對幽門螺桿菌具有顯著抑制作用。通過對三株不同來源的幽門螺桿菌菌株(菌株編號分別 為NCTC11637、SSI、SS2000)抑制效果的比較發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌對NCTC11637具有最強 的抑制作用，抑菌圈直徑達(dá)到22 士0. 4 mm，對另兩株則分別達(dá)到15 士0. 23 mm和18 士0. 24 mm。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，此枯草芽孢桿菌對對單核增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單 胞菌也具有拮抗作用。表1為益生菌細(xì)胞組分對幽門螺桿菌的抑制結(jié)果。
權(quán)利要求
1.一種枯草芽孢桿菌在拮抗幽門螺桿菌中的應(yīng)用，其特征是枯草芽孢桿菌在營養(yǎng)肉 湯液體培養(yǎng)基中37°C、180 rpm搖床培養(yǎng)9小時，可產(chǎn)生抑制幽門螺桿菌生長的物質(zhì)，有效 抑制幽門螺桿菌生長；18小時抑菌能力達(dá)到最大，經(jīng)純化獲得抑菌蛋白，制成治療胃腸道 疾病的制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種枯草芽孢桿菌在拮抗幽門螺桿菌中的應(yīng)用，其特征是將 枯草芽孢桿菌在營養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中37°C、180 rpm搖床培養(yǎng)12-16小時，過濾菌體并制 成拮抗幽門螺桿菌的活菌口服制劑。
全文摘要
一種枯草芽孢桿菌在拮抗幽門螺桿菌中的應(yīng)用，枯草芽孢桿菌在營養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中37℃、180rpm搖床培養(yǎng)9小時，可產(chǎn)生抑制幽門螺桿菌生長的物質(zhì)，有效抑制幽門螺桿菌生長；18小時抑菌能力達(dá)到最大，經(jīng)純化獲得抑菌蛋白，制成治療胃腸道疾病的制劑。本發(fā)明的技術(shù)效果是來源于微生態(tài)制劑的枯草芽孢桿菌除了具有維持腸道微生態(tài)平衡的作用外，其培養(yǎng)物還對幽門螺桿菌有較強的拮抗作用，和常規(guī)治療幽門螺桿菌所采用的抗生素療法相比，它的使用可以克服前者副作用大和治療后易復(fù)發(fā)等缺點。
文檔編號C12N1/20GK102133238SQ20111007396
公開日2011年7月27日 申請日期2011年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月25日
發(fā)明者喻剛, 徐鋒, 曾明, 程波財, 許恒毅, 魏華 申請人:南昌大學(xué)