專利名稱：提取栝樓籽油的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提取栝樓籽油的方法，屬于植物油領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
栝樓(Trichasanthes kirilowii Maxim)，葫戸科栝樓屬，是一種多年生攀援藤本 植物，又名瓜蔞、吊瓜等。分布于東亞及澳大利亞北部，我國(guó)主要分布于山東、河南、河北、北 京、浙江、安徽等省。栝樓作為中草藥在我國(guó)種植歷史悠久，其果實(shí)、種子和根均可入藥?！侗?草綱目》記載栝樓有健胃、潤(rùn)肺、化痰、散結(jié)、滑腸作用，主治痰熱咳嗽、肺痰咳血、胸悶、便
秘等癥?，F(xiàn)代科學(xué)研究表明栝樓籽具有消炎、抗癌功能，對(duì)肺癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌等具
有一定的療效。 除藥用價(jià)值外，栝樓籽還有較高的食用價(jià)值。栝樓產(chǎn)籽量多，籽粒飽滿，風(fēng)味獨(dú)特， 含有豐富的脂肪酸、蛋白質(zhì)、多種必需氨基酸及礦質(zhì)元素，是一種綠色的保健食品。近年來(lái)， 以栝樓籽為原料炒制而成的"吊瓜子"以其獨(dú)特的風(fēng)味和營(yíng)養(yǎng)成為高檔炒制品，價(jià)格居高不 下，激發(fā)了農(nóng)民種植的積極性，籽用栝樓的栽培面積逐年擴(kuò)大，產(chǎn)量迅速增長(zhǎng)。目前，雖然栝 樓籽加工廠家較多，但仍停留在簡(jiǎn)單的炒制食品階段，對(duì)栝樓籽的綜合利用和深度開(kāi)發(fā)還 未開(kāi)展。據(jù)報(bào)道，栝樓籽含油量可達(dá)35%以上，且還有大量的不飽和脂肪酸，占脂肪酸總量 的89%以上。研究表明，栝樓籽中的不飽和脂肪酸具有降血脂、抗血栓、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等重 要生理功能，具有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)成保健食用植物油的潛力。 現(xiàn)有的植物油脂提取方法多采用壓榨法、溶劑浸出法和超臨界C02萃取法。傳統(tǒng) 的壓榨法需對(duì)油料進(jìn)行高溫處理，不僅能耗大且影響油品質(zhì)量，同時(shí)壓榨后餅粕中蛋白變 性程度較大，利用程度有限，造成資源浪費(fèi)，如果采用低熱處理則提油率下降；溶劑浸出法 雖提取率較高，但脫溶過(guò)程復(fù)雜，投資大，設(shè)備多，溶劑殘留問(wèn)題難以控制，其存在安全生產(chǎn) 和環(huán)境污染方面的隱患；而超臨界提取法由于處理成本高，設(shè)備生產(chǎn)能力較低，工業(yè)化程度 較為困難。 酶法提油具有高效、能耗低、無(wú)污染、工藝簡(jiǎn)便、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)，且油料蛋白質(zhì) 的性能得到較好的保持，可以達(dá)到同時(shí)利用油脂和蛋白質(zhì)的目的。目前，采用酶法提取栝樓 籽油尚未有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種簡(jiǎn)易、快速、提油率高、生產(chǎn)成本低的栝樓籽 油的提取方法。 為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種提取栝樓籽油的方法，依次包括以下步 驟 1)、將栝樓籽粉碎后，加入pH6. 0 7. 0的磷酸氫二鈉_磷酸二氫鈉緩沖液，栝樓 籽與磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液的重量/體積比為lg : 3 5mL;然后加入中性蛋白 酶和纖維素酶，中性蛋白酶為栝樓籽重量的2 4%，纖維素酶為栝樓籽重量的1 3%;置于水浴中于45 55t:酶解3 5小時(shí)，得酶解液； 2)、將步驟1)所得酶解液經(jīng)離心后，分別收集上層游離清油和乳油，棄去水解液 和殘?jiān)辉撋蠈佑坞x清油為一級(jí)游離清油； 3)、將步驟2)所得乳油經(jīng)離心破乳后，收集上層游離清油，棄去下層殘?jiān)?；該上?游離清油為二級(jí)游離清油；將上述一級(jí)游離清油與二級(jí)游離清油合并，得栝樓籽油。
作為本發(fā)明的提取栝樓籽油的方法的改進(jìn)步驟1)中的中性蛋白酶的酶活力為 > 100000U/g，纖維素酶的酶活力為^ 160000U/g。該中性蛋白酶和纖維素酶均為食品級(jí) 酶。 作為本發(fā)明的提取栝樓籽油的方法的進(jìn)一步改進(jìn)步驟2)中于2500 3500rpm 離心20 30min，步驟3)中于5500 6500rpm離心15 25min。 作為本發(fā)明的提取栝樓籽油的方法的優(yōu)選方案步驟1)中加入pH7.0的磷酸氫 二鈉_磷酸二氫鈉緩沖液，栝樓籽與磷酸氫二鈉_磷酸二氫鈉緩沖液的重量/體積比為 lg : 5mL;中性蛋白酶為栝樓籽重量的3X，纖維素酶為栝樓籽重量的1%，置于水浴中于 45t:酶解5小時(shí)，得酶解液。 在本發(fā)明中，中性蛋白酶例如可選用湖州禮來(lái)生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的食品級(jí)中 性蛋白酶，其酶活力為^ 100000U/g，纖維素酶例如可選用湖州禮來(lái)生物技術(shù)有限公司生產(chǎn) 的食品級(jí)纖維素酶，其酶活力為^ 160000U/g。 本發(fā)明的步驟2)，經(jīng)離心后，從上至下分成4層，分別是上層游離清油、乳油、水解 液和殘?jiān)?；本發(fā)明的步驟3)，經(jīng)離心后，從上至下分成2層，分別是上層游離清油和下層殘 渣。 本發(fā)明采用中性蛋白酶與纖維素酶共同酶解栝樓籽，與單用中性蛋白酶或纖維素
酶相比，提油率有很大的提高。在機(jī)械破碎的基礎(chǔ)上，纖維素酶水解脂多糖等復(fù)合體，進(jìn)一
步破壞細(xì)胞壁，使中性蛋白酶充分滲透到油料細(xì)胞中水解脂蛋白等復(fù)合體，兩種酶協(xié)同作
用，更有利于油脂的充分釋放，從而提高出油率；采用本發(fā)明方法出油率能高達(dá)68. 40%。
栝樓籽油得率=[提取脂肪質(zhì)量/(栝樓籽脂肪含量X栝樓籽質(zhì)量)]X100X。 本發(fā)明提取的栝樓籽油經(jīng)GC分析表明，不飽和脂肪酸總量達(dá)82.72X，其中油酸
29. 10%，亞油酸28. 59%，栝樓酸25. 03%。大量的研究表明不飽和脂肪酸是許多生理活性
脂質(zhì)的前提，在體內(nèi)具有廣泛的生理功能油酸能夠降低膽固醇，促進(jìn)脂質(zhì)代謝，而亞油酸
是人體重要的必需脂肪酸，在防治心血管疾病、抑制腫瘤生長(zhǎng)等方面具有一定的功效。栝樓
酸是葫蘆科植物的特征酸，是亞麻酸的同分異構(gòu)體，含有三個(gè)不飽和鍵。研究表明，多不飽
和脂肪酸的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值隨著不飽和鍵的增加而升高。因此，本發(fā)明提取的栝樓籽油具有較高
的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和潛在保健功能。 表1栝樓籽油主要脂肪酸組成及其含量
不飽和脂肪酸飽和脂肪酸名稱油酸亞油酸 栝樓酸棕櫚酸(軟脂酸)硬脂酸
含量29.10% 28.59% 25.03%8.81%3.28% 本發(fā)明較傳統(tǒng)提油工藝具有以下優(yōu)點(diǎn) 1)、油料無(wú)需經(jīng)過(guò)高溫處理，油脂在溫和的條件下得以釋放，不僅大大節(jié)省了能 耗，且具有較好的品質(zhì)；
2)、采用水相酶解提取油脂，取代了傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑浸出，消除了有機(jī)溶劑殘留、 污染環(huán)境及易燃、易爆等安全隱患； 3)、使用產(chǎn)量大、價(jià)格低的酶類，大幅度縮減了生產(chǎn)成本，效率顯著提高； 4)、工藝簡(jiǎn)便，操作環(huán)節(jié)少，縮短了提油時(shí)間，提高了生產(chǎn)設(shè)備的利用率。 綜上所述，本發(fā)明較以往的提取方法更適用于工業(yè)化生產(chǎn)，適于在生產(chǎn)上大規(guī)模
推廣，能產(chǎn)生良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、一種栝樓籽油的提取方法，依次進(jìn)行以下步驟 1)、稱取栝樓籽5g，將其粉碎后，加入15mL p朋.0的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩 沖液；然后再加入0. lg中性蛋白酶(酶活力為100000U/g)和0. 15g纖維素酶(酶活力為 160000U/g)，置于5(TC水浴中酶解3小時(shí)后，得酶解液； 2)、將步驟1)所得酶解液經(jīng)3500rpm離心20min后，分別收集位于上層的一級(jí)游 離清油和乳油，棄去水解液和殘?jiān)?3)、將步驟2)所得乳油經(jīng)5500rpm離心25min破乳后，收集位于上層的二級(jí)游離
清油，棄去下層殘?jiān)?；將上述二?jí)游離清油與一級(jí)游離清油合并，得栝樓籽油。 經(jīng)上述步驟的栝樓籽油提取率為60. 77% 。 實(shí)施例2、一種栝樓籽油的提取方法，依次進(jìn)行以下步驟 1)、稱取栝樓籽10g，將其粉碎后，加入40mLpH6. 5的磷酸氫二鈉_磷酸二氫鈉緩 沖液；然后再加入0. 4g中性蛋白酶(酶活力為100000U/g)和0. 2g纖維素酶(酶活力為 160000U/g)，置于55t:水浴中酶解4小時(shí)后，得酶解液； 2)、將步驟1)所得酶解液經(jīng)2500rpm離心25min后，分別收集位于上層的一級(jí)游 離清油和乳油，棄去水解液和殘?jiān)?3)、將步驟2)所得乳油經(jīng)6500rpm離心15min破乳后，收集位于上層的二級(jí)游離
清油，棄去下層殘?jiān)?；將上述二?jí)游離清油與一級(jí)游離清油合并，得栝樓籽油。 經(jīng)上述步驟的栝樓籽油提取率為55. 86% 。 實(shí)施例3、一種栝樓籽油的提取方法，依次進(jìn)行以下步驟 1)、稱取栝樓籽20g，將其粉碎后，加入100mL pH7. 0的磷酸氫二鈉_磷酸二氫鈉 緩沖液；然后再加入0. 6g中性蛋白酶(酶活力為100000U/g)和0. 2g纖維素酶(酶活力為 160000U/g)，置于45t:水浴中酶解5小時(shí)后，得酶解液； 2)、將步驟1)所得酶解液經(jīng)3000rpm離心30min后，分別收集位于上層的一級(jí)游 離清油和乳油，棄去水解液和殘?jiān)?3)、將步驟2)所得乳油經(jīng)6000rpm離心20min破乳后，收集位于上層的二級(jí)游離 清油，棄去下層殘?jiān)粚⑸鲜龆?jí)游離清油與一級(jí)游離清油合并，得栝樓籽油。
經(jīng)上述步驟的栝樓籽油提取率為68. 40% 。 對(duì)比試驗(yàn)1、在實(shí)施例3的步驟1)中取消纖維素酶的使用，其余內(nèi)容同實(shí)施例3 ; 所得栝樓籽油的提取率為40. 17%。 對(duì)比試驗(yàn)2、在實(shí)施例3的步驟l)中取消中性蛋白酶的使用，其余內(nèi)容同實(shí)施例 3 ;所得栝樓籽油的提取率為30. 45%。
最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個(gè)具體實(shí)施例。顯然，本發(fā) 明還可以有許多變形。通過(guò)改變料水比、酶解時(shí)間、溫度、pH、酶的種類及用量、離心速度與 時(shí)間等，均可獲得栝樓籽油。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開(kāi)的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián) 想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
一種提取栝樓籽油的方法，其特征是依次包括以下步驟1)、將栝樓籽粉碎后，加入pH6.0～7.0的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液，栝樓籽與磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液的重量/體積比為1g∶3～5mL；然后加入中性蛋白酶和纖維素酶，中性蛋白酶為栝樓籽重量的2～4％，纖維素酶為栝樓籽重量的1～3％，置于水浴中于45～55℃酶解3～5小時(shí)，得酶解液；2)、將步驟1)所得酶解液經(jīng)離心后，分別收集上層游離清油和乳油，該上層游離清油為一級(jí)游離清油；3)、將步驟2)所得乳油經(jīng)離心破乳后，收集上層游離清油，該上層游離清油為二級(jí)游離清油；將上述一級(jí)游離清油與二級(jí)游離清油合并，得栝樓籽油。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取栝樓籽油的方法，其特征在于所述步驟1)中的中性蛋 白酶的酶活力為^ 100000U/g，纖維素酶的酶活力為^ 160000U/g。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取栝樓籽油的方法，其特征在于所述步驟1)中的中 性蛋白酶和纖維素酶均為食品級(jí)酶。
4. 根據(jù)權(quán)利3所述的提取栝樓籽油的方法，其特征在于所述步驟2)中于2500 3500rpm離心20 30min。
5. 根據(jù)權(quán)利4所述的提取栝樓籽油的方法，其特征在于所述步驟3)中于5500 6500rpm離心15 25min。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的提取栝樓籽油的方法，其特征在于所述步驟1)中加入 pH7. 0的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液，栝樓籽與磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液的重量 /體積比為lg : 5mL;中性蛋白酶為栝樓籽重量的3^，纖維素酶為栝樓籽重量的l^，置于 水浴中于45t:酶解5小時(shí)，得酶解液。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種提取栝樓籽油的方法，包括以下步驟1)將栝樓籽粉碎后，加入pH6.0～7.0的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液，然后加入中性蛋白酶和纖維素酶，置于水浴中于45～55℃酶解3～5小時(shí)，得酶解液；2)將步驟1)所得酶解液經(jīng)離心后，分別收集上層游離清油和乳油，該上層游離清油為一級(jí)游離清油；3)將步驟2)所得乳油經(jīng)離心破乳后，收集上層游離清油，該上層游離清油為二級(jí)游離清油；將上述一級(jí)游離清油與二級(jí)游離清油合并，得栝樓籽油。采用本發(fā)明的方法提取栝樓籽油具有簡(jiǎn)易、快速、提油率高、生產(chǎn)成本低的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)C12P7/64GK101717799SQ20091015429
公開(kāi)日2010年6月2日 申請(qǐng)日期2009年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月19日
發(fā)明者于海寧, 林秋生, 沈生榮 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)