專利名稱：適用于豬品種分類的豬微衛(wèi)星dna標(biāo)記的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于豬的分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及豬的微衛(wèi)星DNA標(biāo)記技術(shù)領(lǐng)域。
微衛(wèi)星DNA是一類以1-6個(gè)堿基為核心順序構(gòu)成的串聯(lián)重復(fù)順序。其中尤以二核苷酸重復(fù)單位構(gòu)成的為最多。微衛(wèi)星DNA的主要特點(diǎn)是(1)數(shù)目多。據(jù)估計(jì)在真核生物基因組中每6Kb就會(huì)有1個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)(Beckmann等，《Gennomics》，1992，12卷，281-288頁(yè))，豬基因組中僅ACTG重復(fù)的微衛(wèi)星就有65000-100000個(gè)；(2)分布廣且均勻。微衛(wèi)星DNA在基因組中是均勻分布的。Winter等(1992)的研究表明，除著絲粒及端粒的少數(shù)區(qū)域外，染色體的其他區(qū)域均廣泛分布有微衛(wèi)星位點(diǎn)；(3)多態(tài)信息含量豐富。即各位點(diǎn)等位基因一般較多；(4)易于進(jìn)行自動(dòng)化和半自動(dòng)化檢測(cè)。因此，微衛(wèi)星DNA標(biāo)記是目前用于畜禽QTL定位，遺傳多樣性評(píng)估的首選分子標(biāo)記。如豬的遺傳圖譜的絕大多數(shù)標(biāo)記為微衛(wèi)星標(biāo)記，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和國(guó)際動(dòng)物遺傳研究會(huì)推薦的用于國(guó)際上豬遺傳多樣性評(píng)估的27個(gè)標(biāo)記是微衛(wèi)星標(biāo)記，第一個(gè)用于家禽育種的分子標(biāo)記專利也是微衛(wèi)星標(biāo)記(柳松，《國(guó)外畜牧獸醫(yī)科技》1996，2期，24頁(yè))。
豬的微衛(wèi)星DNA研究起步于90年代初期，但進(jìn)展十分迅速。至今在豬基因組中已找到的近2000個(gè)標(biāo)記中，絕大多數(shù)為微衛(wèi)星標(biāo)記，與此同時(shí)，豬微衛(wèi)星DNA在QTL定位和遺傳多樣性評(píng)估中的應(yīng)用研究也迅速鋪開(kāi)，有關(guān)豬微衛(wèi)星標(biāo)記的專利爭(zhēng)奪正逐步展開(kāi)。但是，我國(guó)豬微衛(wèi)星的研究仍十分有限，僅極少數(shù)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始了有關(guān)工作，且研究工作很不系統(tǒng)。鑒于豬微衛(wèi)星數(shù)目多，還有大量的未被發(fā)現(xiàn)，且它們具有重要的理論和應(yīng)用價(jià)值，特別是我國(guó)大量的優(yōu)良地方豬種中還可能存在特有的微衛(wèi)星位點(diǎn)和大量的微衛(wèi)星等位基因。因此，在我國(guó)開(kāi)展豬的微衛(wèi)星的分離克隆、鑒定和應(yīng)用研究，開(kāi)發(fā)具有我國(guó)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的微衛(wèi)星標(biāo)記顯得十分迫切和必要。
本發(fā)明的目的在于分離、鑒定新的適用于豬品種分類的豬的微衛(wèi)星標(biāo)記，建立豬的微衛(wèi)星DNA的分離、鑒定及篩選適用于豬品種分類的分子標(biāo)記的方法。
本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種適用于豬品種分類的豬的微衛(wèi)星標(biāo)記方法，其步驟包括，構(gòu)建豬的基因組文庫(kù)，豬微衛(wèi)星文庫(kù)篩選，微衛(wèi)星順序測(cè)定，微衛(wèi)星克隆和豬的品種分類，其特征在于，所述的三個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記的編號(hào)分別為HUA01，HUA02，HUA03，其DNA的順序分別是HUA01TAATGTGGAGGAGTCAGTCTCTGAAAATTTCTTCCAGTGCATAACTATAAGTACCTGGGACTTGTAGTATGCTTCATAAATGAACAGGCTTACCTCGATTTCATATTATTTTAAATGAATGTCCGTCTGCATGAGTCATACTCTGTGTATGTGTGTGTATGTGTGTGTGGTGGGTTTCTGTTCAGTTGTTAAGTGCAGGATATTTAGTCGGTGGAAAAGTTGCTGGTAATGGTCAAAAGGGTACCCGAGCTCGAATTCGTAATCATGGGTCATAGCTGTTCCTGTGTGAAATTGTTATCGCTCACAATTCACACAACATACGAGCCCGGAGATAAAGTGTAAAGCCTGGGTGCCTAATGGGTAGCTAACTCACATTAATTGCGTGCGTTCACTGCCCGTTTCCAGTCGGGAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCACGTGCGGGGAGAGGCGGTTTCGTATTGGCGCCATGGTGGTTTTCTTTTACCATTTGCGGGCACACTGATTTCCTTACCGCTGGCCTTGGTGTTCAGAAGTGTCCCGTGGTTTCCCACAGTTGAATCCTTTTTTGGGTCCGAACGGAHAU02GAGGATCCCCCTGGTGATACCCAGGTACCCCTGGTTCCTCAGGTCTGTGGGGTACAGGAAGTTGCTGGGGCTCTGGAGAGTAGAGGGGGCACAACCCAGAACTGGACTGATTTCTGCGAGAATTATGTCCTAGACAATTCATAAGAACAGAGAACCCCAATGGCAGTTGCTTCTCCATTTACGTGCCCCCACCTTCCTAGCATATCAGTTGCTATTGTGTATGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATTTTCCCTTGTCTCTCTGGACCTGTAATATATTTCTAGCGCAGGATTCTTACTCAGGTHAU03AGCTTGCATGCCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCCCCTGGTGATGCCCAGGTCCCCCTGGATCCCCAGGACTGTGGGGTACAGGAAGTGGCTGGGGCTCTGGAGAGTAGAGGGGGCACAACCCAGAAGCTGGACTGATTTCTGCGAGAATTATGTCCTAGACAATTCATAAGAACAGACAACCCCAATGGCAGTTGCTTCTCCATTTACGTGCCCCCACCTTCCTAGCCTATCAGTGGCTATGGTGTAGTTGTGTGTGTGTGTTGTTGTGTAATTTCCCCTGGTCTCCCTGGAACCTGTTATATATTCCTACGCCAGAATCCTACTCCAGGTTAATTTGTTCTTGAATAAATTTTGGGCCACCCCTTGAATCCTTCAAAATTATGTTCCCTTAGGGGTT根據(jù)上述的三個(gè)豬微衛(wèi)星標(biāo)記HUA01，HUA02，HUA03設(shè)計(jì)了三個(gè)位點(diǎn)的引物，該引物的順序?yàn)镻L-015’-GAATGTCCGTCTGCATGAGTC-3’PR-015’-TCACACAGGAACAGCTATGACC-3’PL-025’-CCACCTTCCTAGCATATCAGTTG-3’PR-025’-CCTGAGTAAGAATCCTGCGCTAG-3’PL-035’-CCTATCAGTGGCTATGGTGTAGTT-3’PR-035’-GGAGTAGGATTCTGGCGTAGGAAT-3’本發(fā)明的具體步驟是(1)豬基因組文庫(kù)的構(gòu)建實(shí)驗(yàn)所用血樣均采自江蘇國(guó)營(yíng)常熟畜禽良種場(chǎng)的二花臉豬(太湖豬的一個(gè)類群)，先后構(gòu)建了兩個(gè)適用于微衛(wèi)星篩選的豬部分基因組文庫(kù)。即豬基因組部分小插入片段M13mp18文庫(kù)和pBluescriptKS+文庫(kù)。
(2)(2)豬微衛(wèi)星的文庫(kù)篩選將鋪有重組噬菌體的轉(zhuǎn)染平板真空轉(zhuǎn)膜至尼龍膜上(M13mp18文庫(kù)篩選)或重組菌在尼龍膜上原位裂解(pBluscriptKS+文庫(kù)篩選)，采用[r-32p]ATP標(biāo)記寡聚核苷酸探針(TG)10的5’末端，與制備好的尼龍膜在50℃雜交過(guò)夜。放射自顯影后，X光片燈上觀察記錄結(jié)果。
(3)豬微衛(wèi)星的順序測(cè)定克隆的微衛(wèi)星的順序測(cè)定，確定了編號(hào)為HUA01，HUA02，HUA03豬微衛(wèi)星標(biāo)記，其DNA順序如上所述。
(4)新克隆微衛(wèi)星的特性分析1)根據(jù)順序測(cè)定結(jié)果設(shè)計(jì)引物，引物順序如上所論述。2)利用本室構(gòu)建的豬參考家系信息，通過(guò)PCR擴(kuò)增檢測(cè)豬上下代個(gè)體的基因型，判斷等位基因的遺傳方式。3)用染色體上的熒光原位雜交技術(shù)(FISH)和雜種細(xì)胞克隆板對(duì)新克隆的位點(diǎn)進(jìn)行染色體定位。(1)將新克隆的微衛(wèi)星用于豬的品種分類1)血樣采集。采集了六個(gè)豬品種的共85個(gè)不相關(guān)個(gè)體的血樣，血樣分別采自湖北省的黃陂外貿(mào)種豬場(chǎng)(杜洛克)，湖北省農(nóng)科院綜合試驗(yàn)場(chǎng)種豬場(chǎng)(大白)，湖北省農(nóng)科院畜牧所豬場(chǎng)(湖北白、大白)，湖北省通城畜禽良種場(chǎng)(通城)，河南省汝南外貿(mào)種豬場(chǎng)(長(zhǎng)白、大白、杜洛克)，河南省唐河外貿(mào)種豬場(chǎng)(杜洛克)，河南省農(nóng)科院豬場(chǎng)(長(zhǎng)白)，江蘇省國(guó)營(yíng)常熟畜禽良種場(chǎng)(二花臉、長(zhǎng)白，江蘇省無(wú)錫市錫山種豬場(chǎng)(二花臉)，宜興種豬場(chǎng)(二花臉)，江陰畜禽良種場(chǎng)(二花臉)及南京農(nóng)大江浦畜牧實(shí)驗(yàn)站豬場(chǎng)(二花臉)。(2)基因頻率統(tǒng)計(jì)及多態(tài)信息含量(PIC)計(jì)算。(3)遺傳距離計(jì)算和類平均法聚類分析UPGMA。
實(shí)施例1鑒定了3個(gè)適用于豬品種分類的新微衛(wèi)星標(biāo)記HAU01、HAU02、HAU03，構(gòu)建了適用于微衛(wèi)星篩選的豬部分基因組文庫(kù)。即豬基因組部分小插入片段，采用[r-32p]ATP標(biāo)記寡聚核苷酸探針(TG)10，采用放射自顯影從中篩選豬的微衛(wèi)星DNA。并通過(guò)順序測(cè)定，基因數(shù)據(jù)庫(kù)中比較，結(jié)合在家系中遺傳規(guī)律研究和基因定位對(duì)其進(jìn)行鑒定。這三個(gè)微衛(wèi)星的DNA順序分別為HAU01TAATGTGGAGGAGTCAGTCTCTGAAAATTTCTTCCAGTGCATAACTATAAGTACCTGGGACTTGTAGTATGCTTCATAAATGAACAGGCTTACCTCGATTTCATATTATTTTAAATGAATGTCCGTCTGCATGAGTCATACTCTGTGTATGTGTGTGTATGTGTGTGTGGTGGGTTTCTGTTCAGTTGTTAAGTGCAGGATATTTAGTCGGTGGAAAAGTTGCTGGTAATGGTCAAAAGGGTACCCGAGCTCGAATTCGTAATCATGGGTCATAGCTGTTCCTGTGTGAAATTGTTATCGCTCACAATTCACACAACATACGAGCCCGGAGATAAAGTGTAAAGCCTGGGTGCCTAATGGGTAGCTAACTCACATTAATTGCGTGCGTTCACTGCCCGTTTCCAGTCGGGAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCACGTGCGGGGAGAGGCGGTTTCGTATTGGCGCCATGGTGGTTTTCTTTTACCATTTGCGGGCACACTGATTTCCTTACCGCTGGCCTTGGTGTTCAGAAGTGTCCCGTGGTTTCCCACAGTTGAATCCTTTTTTGGGTCCGAACGGAHAU02GAGGATCCCCCTGGTGATACCCAGGTACCCCTGGTTCCTCAGGTCTGTGGGGTACAGGAAGTTGCTGGGGCTCTGGAGAGTAGAGGGGGCACAACCCAGAACTGGACTGATTTCTGCGAGAATTATGTCCTAGACAATTCATAAGAACAGAGAACCCCAATGGCAGTTGCTTCTCCATTTACGTGCCCCCACCTTCCTAGCATATCAGTTGCTATTGTGTATGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATTTTCCCTTGTCTCTCTGGACCTGTAATATATTTCTAGCGCAGGATTCTTACTCAGGTHAU03AGCTTGCATGCCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCCCCTGGTGATGCCCAGGTCCCCCTGGATCCCCAGGACTGTGGGGTACAGGAAGTGGCTGGGGCTCTGGAGAGTAGAGGGGGCACAACCCAGAAGCTGGACTGATTTCTGCGAGAATTATGTCCTAGACAATTCATAAGAACAGACAACCCCAATGGCAGTTGCTTCTCCATTTACGTGCCCCCACCTTCCTAGCCTATCAGTGGCTATGGTGTAGTTGTGTGTGTGTGTTGTTGTGTAATTTCCCCTGGTCTCCCTGGAACCTGTTATATATTCCTACGCCAGAATCCTACTCCAGGTTAATTTGTTCTTGAATAAATTTTGGGCCACCCCTTGAATCCTTCAAAATTATGTTCCCTTAGGGGTT在家系中遺傳規(guī)律研實(shí)施例2建立了一套切實(shí)可行的從豬基因組中克隆微衛(wèi)星標(biāo)記的方法。采用兩種便于直接分離模板測(cè)序的載體M13mp18噬菌體和pBluescriptKS+噬菌體作為載體構(gòu)建了兩種適用于微衛(wèi)星篩選的豬基因組部分小插入片段(250-600bp)文庫(kù)，通過(guò)篩選，共得到了23個(gè)含(TG)n微衛(wèi)星的陽(yáng)性克隆。
實(shí)施例3將上述微衛(wèi)星標(biāo)記用于六個(gè)豬品種(其中包括中國(guó)地方豬種、歐美商用豬種和雜交育成豬種)的品種分類，確定了3個(gè)適用豬品種分類的微衛(wèi)星標(biāo)記HAU01、HAU02、HAU03。六個(gè)豬品種85個(gè)血統(tǒng)不相關(guān)個(gè)體的群體中三個(gè)新克隆位點(diǎn)HAU01、HAU02、HAU03的基因頻率、多態(tài)信息含量及相互間的遺傳距離和聚類分析結(jié)果顯示，研究克隆的這三個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記能很好地用于豬遺傳關(guān)系和遺傳多樣性評(píng)估。
本發(fā)明的積極效果(1)分離克隆并鑒定了三個(gè)豬的微衛(wèi)星標(biāo)記，經(jīng)在國(guó)際基因數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索，證明為新的微衛(wèi)星DNA標(biāo)記。
(2)經(jīng)將上述微衛(wèi)星標(biāo)記用于豬品種的群體遺傳變異檢測(cè)，證明這三個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記適用于豬的品種分類和遺傳多樣性評(píng)估，在六個(gè)豬品種85個(gè)血統(tǒng)不相關(guān)個(gè)體的群體中三個(gè)新克隆位點(diǎn)的基因頻率、多態(tài)信息含量及相互間的遺傳距離和聚類分析結(jié)果如表1，表2，表3和表4所示。
(3)實(shí)驗(yàn)方法有重要的改進(jìn)一是采用了一種特殊的平端連接方式，利用限制酶阻止載體自連，使平端連接時(shí)重組率低的問(wèn)題得到改善，外源片段與載體間的重組率達(dá)60％左右，明顯高于對(duì)載體作去磷酸化處理及不處理載體進(jìn)行的連接(分別為36.96％和10.1％)，且操作簡(jiǎn)便，成本低；二是在重組載體轉(zhuǎn)染其宿主菌的條件確定時(shí)引入試驗(yàn)設(shè)計(jì)的思想，通過(guò)正交設(shè)計(jì)較快、較準(zhǔn)確的得到了較高轉(zhuǎn)染效率的轉(zhuǎn)染因子組合；c)嘗試使用了多重PCR檢測(cè)豬的微衛(wèi)星，提高了檢測(cè)效率，降低了檢測(cè)成本。
本發(fā)明的實(shí)施效果參見(jiàn)表1-表4和


圖1所示表1.HAU01位點(diǎn)的等位基因頻率及多態(tài)信息含量品種 個(gè)體 等位基因大小(bp)PIC數(shù) 167171173長(zhǎng)白 12 0.417 0.500 0.083 0.476大白 14 0.536 0.393 0.071 0.460杜洛克16 0.344 0.438 0.219 0.567湖北白80.313 0.625 0.063 0.427二花臉19 0.316 0.105 0.579 0.477通城 16 0.375 0.125 0.500 0.511表2.HAU02位點(diǎn)的等位基因頻率及多態(tài)信息含量品種個(gè)體 等位基因大小(bp) PIC數(shù) 106108112114長(zhǎng)白 12 0.125 0.667 0.167 0.042 0.469大白 14 0.107 0.429 0.357 0.107 0.604杜洛克 16 0.250 0.250 0.406 0.094 0.647湖北白 8 0.063 0.500 0.313 0.125 0.570二花臉 19 0.000 0.500 0.395 0.105 0.496通城 16 0.000 0.625 0.250 0.125 0.468表3.HAU03位點(diǎn)的等位基因頻率及多態(tài)信息含量品種個(gè)體等位基因大小(bp)PIC數(shù) 101 103長(zhǎng)白 12 0.417 0.583 0.368大白 14 0.321 0.679 0.341杜洛克 16 0.438 0.563 0.370湖北白 8 0.375 0.625 0.359二花臉 19 0.684 0.316 0.339通城 16 0.719 0.281 0.363表4六品種豬相之間的遺傳距離測(cè)定
附圖及其說(shuō)明
圖1，是本發(fā)明涉及的六品種豬的UPGMA聚類圖由上述附圖及表1-4可以看出，由本發(fā)明的三個(gè)微衛(wèi)星信息所得到的遺傳距離和聚類分析結(jié)果均能很好地反映這六品種豬的實(shí)際狀況。這六個(gè)豬品種中，長(zhǎng)白豬和大白豬為歐洲豬種，湖北白豬為我國(guó)自主育成的新品種，其中含有長(zhǎng)白豬的血緣。杜洛克豬為美國(guó)豬種，二花臉豬和通城豬為中國(guó)地方豬種。由
圖1可見(jiàn)，長(zhǎng)白豬與湖北白豬首先聚在一起，再與大白豬聚在一起，然后與杜洛克豬相聚。而二花臉豬與通城豬首先聚在一起，再與上述四品種豬相聚，形成明顯的二個(gè)分枝。由此可見(jiàn)，本發(fā)明克隆的這三個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記能很好地用于豬的品種分類。
權(quán)利要求
1.一種適用于豬品種分類的豬微衛(wèi)星標(biāo)記方法，其步驟包括，構(gòu)建豬的基因組文庫(kù)，豬微衛(wèi)星文庫(kù)篩選，微衛(wèi)星順序測(cè)定，微衛(wèi)星克隆和豬的品種分類，其特征在于，所述的三個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記的編號(hào)分別為HUA01，HUA02，HUA03，其DNA的順序分別是HUA01TAATGTGGAGGAGTCAGTCTCTGAAAATTTCTTCCAGTGCATAACTATAAGTACCTGGGACTTGTAGTATGCTTCATAAATGAACAGGCTTACCTCGATTTCATATTATTTTAAATGAATGTCCGTCTGCATGAGTCATACTCTGTGTATGTGTGTGTATGTGTGTGTGGTGGGTTTCTGTTCAGTTGTTAAGTGCAGGATATTTAGTCGGTGGAAAAGTTGCTGGTAATGGTCAAAAGGGTACCCGAGCTCGAATTCGTAATCATGGGTCATAGCTGTTCCTGTGTGAAATTGTTATCGCTCACAATTCACACAACATACGAGCCCGGAGATAAAGTGTAAAGCCTGGGTGCCTAATGGGTAGCTAACTCACATTAATTGCGTGCGTTCACTGCCCGTTTCCAGTCGGGAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCACGTGCGGGGAGAGGCGGTTTCGTATTGGCGCCATGGTGGTTTTCTTTTACCATTTGCGGGCACACTGATTTCCTTACCGCTGGCCTTGGTGTTCAGAAGTGTCCCGTGGTTTCCCACAGTTGAATCCTTTTTTGGGTCCGAACGGAHAU02GAGGATCCCCCTGGTGATACCCAGGTACCCCTGGTTCCTCAGGTCTGTGGGGTACAGGAAGTTGCTGGGGCTCTGGAGAGTAGAGGGGGCACAACCCAGAACTGGACTGATTTCTGCGAGAATTATGTCCTAGACAATTCATAAGAACAGAGAACCCCAATGGCAGTTGCTTCTCCATTTACGTGCCCCCACCTTCCTAGCATATCAGTTGCTATTGTGTATGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATTTTCCCTTGTCTCTCTGGACCTGTAATATATTTCTAGCGCAGGATTCTTACTCAGGTHAU03AGCTTGCATGCCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCCCCTGGTGATGCCCAGGTCCCCCTGGATCCCCAGGACTGTGGGGTACAGGAAGTGGCTGGGGCTCTGGAGAGTAGAGGGGGCACAACCCAGAAGCTGGACTGATTTCTGCGAGAATTATGTCCTAGACAATTCATAAGAACAGACAACCCCAATGGCAGTTGCTTCTCCATTTACGTGCCCCCACCTTCCTAGCCTATCAGTGGCTATGGTGTAGTTGTGTGTGTGTGTTGTTGTGTAATTTCCCCTGGTCTCCCTGGAACCTGTTATATATTCCTACGCCAGAATCCTACTCCAGGTTAATTTGTTCTTGAATAAATTTTGGGCCACCCCTTGAATCCTTCAAAATTATGTTCCCTTAGGGGTT
2.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種適用于豬品種分類的豬微衛(wèi)星標(biāo)記方法，其特征在于HUA01，HUA02，HUA03三個(gè)位點(diǎn)的引物順序?yàn)镻L-015’-GAATGTCCGTCTGCATGAGTC-3’PR-015’-TCACACAGGAACAGCTATGACC-3’PL-025’-CCACCTTCCTAGCATATCAGTTG-3 ’PR-025’-CCTGAGTAAGAATCCTGCGCTAG-3 ’PL-035’-CCTATCAGTGGCTATGGTGTAGTT-3 ’PR-035’-GGAGTAGGATTCTGGCGTAGGAAT-全文摘要
本發(fā)明屬于家畜分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及豬的微衛(wèi)星DNA標(biāo)記技術(shù)。一種適用于豬品種分類的豬微衛(wèi)星標(biāo)記方法,其步驟包括,構(gòu)建豬的基因組文庫(kù),微衛(wèi)星文庫(kù)篩選,微衛(wèi)星順序測(cè)定,微衛(wèi)星克隆和豬的品種分類。本發(fā)明的特征是,構(gòu)建部分小插入片段基因組文庫(kù),分離鑒定豬新微衛(wèi)星標(biāo)記,篩選其中適用于豬品種分類的豬微衛(wèi)星標(biāo)記HAU01、HAU02、HAU03,確定了該三個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記DNA順序,設(shè)計(jì)了三個(gè)位點(diǎn)的引物。本發(fā)明為豬的品種分類、親緣鑒定和標(biāo)記輔助育種提供新的分子標(biāo)記。
文檔編號(hào)C12N15/12GK1370834SQ0110647
公開(kāi)日2002年9月25日 申請(qǐng)日期2001年2月15日 優(yōu)先權(quán)日2001年2月15日
發(fā)明者李奎, 彭中鎮(zhèn), 龔炎長(zhǎng), 趙書(shū)紅, 劉榜, 余梅, 熊統(tǒng)安 申請(qǐng)人:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)