紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，包括外植體選擇與消毒、從生芽誘導(dǎo)、叢生芽增殖、生根培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)和苗床培養(yǎng)等步驟。與紫莖傳統(tǒng)育苗方法相比，本發(fā)明的方法不受紫莖種子數(shù)量和種子發(fā)芽率的限制，利用紫莖當(dāng)年生新梢進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得紫莖幼苗，并將幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)獲得紫莖移栽苗，該繁育方法可有效提高紫莖的繁育系數(shù)，保留紫莖的優(yōu)良遺傳特性，幼苗成活率高達(dá)95％，移栽苗野外移栽成活率高達(dá)80％，可實(shí)現(xiàn)紫莖苗木的規(guī)?；a(chǎn)和野外大面積育林生長(zhǎng)，并為紫莖這一珍稀瀕危植物的有效保護(hù)提供技術(shù)支持。
【專利說明】
紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于植物繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 紫莖(拉丁學(xué)名：Stewartia sinensis Rehd.et Wils·)屬山茶科紫莖屬多年生木 本植物。由于植被不斷被破壞，天然更新力差，紫莖植株已日益減少，在中國(guó)紅皮書被列為 "漸危種"。紫莖為中國(guó)特有的殘遺植物，對(duì)研究東亞-北美植物區(qū)系有科學(xué)意義，其樹皮片 狀脫裂，內(nèi)皮棕黃光潔，斑駁奇麗，花白瓣黃蕊，清秀淡雅，常用于裝飾庭院;材質(zhì)堅(jiān)重，經(jīng)久 耐用色美麗，為制造家具有優(yōu)良用材;根皮、莖皮、果可入藥;種子油可食用或制肥皂及潤(rùn)滑 油，故紫莖具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，尤其是隨著人們生活水平的提升，對(duì)物質(zhì)的追求也不斷的 提升，用紫莖裝飾庭院，以紫莖這一優(yōu)質(zhì)而又美觀的木材制作的家具，也會(huì)得到越來越多的 人士的青睞，其市場(chǎng)前景廣闊。
[0003] 紫莖在自然狀況下以種子進(jìn)行繁殖，由于受到種子數(shù)量和種子發(fā)芽率的限制，不 能實(shí)現(xiàn)苗木規(guī)模化生產(chǎn)，且采用種子培育的實(shí)生苗木性狀差異大，不適合大面積育林生長(zhǎng)。 組織培養(yǎng)是一種植株快速繁殖技術(shù)，其所需植株原材料少，不受生長(zhǎng)季節(jié)限制，培養(yǎng)周期 短，變異低，可保持母本的優(yōu)良遺傳特性，可用于拯救瀕危珍稀植物，解決其無法短時(shí)大量 繁殖的難題，實(shí)現(xiàn)模化生產(chǎn)。但目前關(guān)于紫莖的組織培養(yǎng)研究還未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問題和/或缺陷，并提供至少后面將說明的優(yōu) 點(diǎn)。
[0005] 本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，利用紫莖當(dāng)年生新 梢進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得紫莖幼苗，并將幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)獲得紫莖移栽苗，該繁育 方法不受紫莖種子數(shù)量和種子發(fā)芽率的限制，可有效提高紫莖的繁育系數(shù)，保留紫莖的優(yōu) 良遺傳特性，幼苗成活率高達(dá)95 %，移栽苗野外移栽成活率高達(dá)80%，可實(shí)現(xiàn)紫莖苗木的規(guī) ?；a(chǎn)和野外大面積育林生長(zhǎng)，有利于紫莖這一珍稀瀕危植物的有效保護(hù)。
[0006] 本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，包括以下步驟：
[0007] A、選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端5-lOcm的枝條， 將所述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來水沖洗15-2〇min，再放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無菌水沖洗3-5次并用消毒濾紙 除去其表面水分，得外植體，其中，
[0008] 所述天然消毒液的制備方法為:將10-12重量份代代、7-9重量份白千層、7-9重量 份藍(lán)按、6_8重量份大蒜、5_7重量份梓樣草和4_6重量份丁香粉碎至50-100目，加入500重量 份的水室溫下浸泡lh，再于60°C下真空回流提取2-4h，過濾，所得濾液即為所述天然消毒 液；
[0009] B、將步驟A中得到的所述外植體用無菌解剖刀切割成0.5-0.8cm的小段并轉(zhuǎn)接到 叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于22-26°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28-30 天，得第一叢生芽，其中，
[0010] 所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/41^培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.511^/12丁 (玉米素），1 · 0-1 · 5mg/L 6-KT(激動(dòng)素），1 · 0-1 · 5mg/L 2 · 4 · 5-T (2 · 4 · 5-三氯苯氧乙酸），15-20g/L蛋黃液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8;
[00?1 ] 第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為2000-22001ux，光照時(shí)間為14_16h/天；
[0012] 所述蛋黃液是取新鮮蛋黃，經(jīng)充分?jǐn)嚢韬螅?0目濾布過濾制得；
[0013] C、將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無菌解剖刀切割成帶有1-2個(gè)芽的小塊并 分別轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于22-26Γ，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng) 28_30天，得第二叢生芽，其中，
[0014] 所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.511^/121'，1.5-2 · Omg/L 6-KT，1 · 2-1 · 5mg/L ΝΑΑ(α-萘乙酸），15-20g/L蛋黃液，4-6g/L大豆肽，30g/L鹿糖 和8g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8;
[0015] D、將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于22-26Γ，黑暗條件下 培養(yǎng)6天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)18-20天，得完整植株，其中，
[0016] 所述生根培養(yǎng)基是以1/21^培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.2-1.511^/1祖4,0.8-1 · Omg/L IBA(吲噪丁酸），0 · 8-1 · Omg/L多效挫，l-3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值 為5.5-5.8;
[0017] 第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200-24001ux，光照時(shí)間為14-16h/天；
[0018] E、向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株 取出，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)28-30天，得幼苗，其中，
[0019] 所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.511^/1^184，1.5-1 · 8mg/L ZT，0 · 8-1 · Omg/L 6-BA(6-芐氨基嘌呤），0 · 8-1 · Omg/L多效唑，20-25g/L蛋黃液，3-5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8;
[0020] 第三光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200-24001UX，光照時(shí)間為14-16h/天，光照時(shí) 培養(yǎng)溫度為22-26°C，非光照時(shí)培養(yǎng)溫度為16-20°C ;
[0021] F、將步驟E中得到的所述幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)5-6個(gè)月，得紫莖移栽苗，最 后將所述紫莖移栽苗進(jìn)行野外移栽。
[0022] 優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，苗床中培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)溫度為16-20 °C、濕度為70-80 %、陰蔽度為20-30 %。
[0023]優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述苗床由床體和基質(zhì)組成，其 中，所述床體，其包括：
[0024]床架，其為上表面開口的中空長(zhǎng)方體，其長(zhǎng)為3-9m、寬為1-1.8m、高為20-25cm;所 述床架的平行于長(zhǎng)度方向的右側(cè)面和與其相鄰的前側(cè)面、后側(cè)面及底面可拆卸連接;所述 右側(cè)面的下方設(shè)有與豎直方向呈30-60°的向下傾斜的滑槽，所述滑槽與所述底面邊緣固定 連接；
[0025] 噴霧裝置，其包括間隔設(shè)置在所述床架的內(nèi)部上方并與所述床架的長(zhǎng)度方向平行 的多個(gè)進(jìn)水管和間隔設(shè)置在所述進(jìn)水管上的多個(gè)旋轉(zhuǎn)噴頭；
[0026] 溫控裝置，其為設(shè)置在所述床架的內(nèi)部下方的呈波浪形排列的熱交換管；
[0027]自動(dòng)控制系統(tǒng)，其包括設(shè)置在所述床架的內(nèi)部的多個(gè)溫濕度傳感器和設(shè)置在所述 前側(cè)面的外表面上的控制面板。
[0028]優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述基質(zhì)，其包括：
[0029] 第一基質(zhì)層，其由15-20重量份稻殼、15-20重量份珍珠巖和10-12重量份鋸末經(jīng)高 溫滅菌制得，其厚度為6-8cm;
[0030]第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由20-30重量份廄肥、15-20重量份廢 蜜液、15-20份蛋殼、10-15重量份豆渣、10-15重量份秸桿和0.8-1份酵素菌經(jīng)發(fā)酵后再加入 40-50重量份黃壤土混合制得，其厚度為13-15cm;
[0031 ]第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為l-2cm的表層腐殖土。
[0032]優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中ZT濃度 為2 · 2mg/L，6-KT濃度為1 · 2mg/L，2 · 4 · 5-T濃度為1 · 2mg/L，蛋黃液濃度為18g/L，大豆肽濃度 為58/1，？!1值為5.8。
[0033]優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述增殖培養(yǎng)基中ZT濃度為 2 · 2mg/L，6-KT濃度為1 · 8mg/L，NAA濃度為1 · 3mg/L，蛋黃液濃度為18g/L，大豆肽濃度為5/L， pH值為5.8〇
[0034]優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述生根培養(yǎng)基中NAA濃度為 1 · 3mg/L，IBA濃度為0 · 9mg/L，多效唑濃度為0 · 9mg/L，大豆肽濃度為2/L，pH值為5 · 8。
[0035]優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述壯苗培養(yǎng)基中IBA濃度為 2 · 2mg/L，ZT濃度為1 · 7mg/L，6-BA濃度為0 · 9mg/L，多效唑濃度為0 · 9mg/L，蛋黃液濃度為 23g/L，活性炭濃度為4g/L，pH值為5.8。
[0036]本發(fā)明至少包括以下有益效果：
[0037] 第一、與紫莖傳統(tǒng)育苗方法相比，本發(fā)明的方法不受紫莖種子數(shù)量和種子發(fā)芽率 的限制，利用紫莖當(dāng)年生新梢進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得紫莖幼苗，并將幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培 養(yǎng)獲得紫莖移栽苗，該繁育方法可有效提高紫莖的繁育系數(shù)，保留紫莖的優(yōu)良遺傳特性，幼 苗成活率高達(dá)95%，移栽苗野外移栽成活率高達(dá)80%，可實(shí)現(xiàn)紫莖苗木的規(guī)?；a(chǎn)和野 外大面積育林生長(zhǎng)，并為紫莖這一珍稀瀕危植物的有效保護(hù)提供技術(shù)支持；
[0038] 第二、將具有一定消毒殺菌作用的中草藥代代、白千層、藍(lán)桉、大蒜、檸檬草和丁香 進(jìn)行配伍，通過真空回流提取其有效成分，制備成天然消毒液并對(duì)紫莖新梢進(jìn)行消毒處理， 可避免傳統(tǒng)的酒精和升汞消毒法對(duì)紫莖新梢的損害，降低組織培養(yǎng)過程中產(chǎn)生畸形苗的概 率；
[0039] 第三、通過將21'、6-〇、2.4.5-1'、蛋黃液和大豆肽以適宜比例加入3/413培養(yǎng)基中 制備叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，ZT、6-KT、2.4.5-T和蛋黃液組合，可刺激紫莖外植體內(nèi)酶的活性， 促進(jìn)紫莖細(xì)胞的增殖、分裂和分化，蛋黃液和大豆肽中的蛋白質(zhì)、小分子肽、游離氨基酸、糖 類、磷脂類和微量元素等成分進(jìn)一步促進(jìn)了紫莖細(xì)胞的生長(zhǎng)、繁殖，培養(yǎng)28-30天即可得到 健壯的第一叢生芽；
[0040] 第四、通過將21\6-10'、祖4、蛋黃液和大豆肽以適宜的比例加入3/413培養(yǎng)基中制 備增殖培養(yǎng)基，可顯著提高第一叢生芽的增殖效果，增殖系數(shù)高，平均增殖系數(shù)達(dá)5.0;
[0041 ] 第五、通過將NAA、IBA、多效唑和大豆肽以適宜的比例加入1/2MS培養(yǎng)基中制備生 根培養(yǎng)基，可消除第二叢生芽的頂端優(yōu)勢(shì)，刺激第二叢生芽基部的細(xì)胞分裂，誘導(dǎo)生根，生 根率高達(dá)98 %，且根系健壯發(fā)達(dá)；
[0042] 第六、通過將184、21\6-84、多效唑、蛋黃液和活性炭以適宜的比例加入1^培養(yǎng)基 中制備壯苗培養(yǎng)基，IBA、ZT、6-BA、多效唑和蛋黃液可有效促進(jìn)植株根系和莖葉的生長(zhǎng)或伸 展，活性炭的加入，可使生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑IBA、ZT、6-BA和多效唑在壯苗培養(yǎng)過程中緩慢釋放，使 植株在壯苗培養(yǎng)期內(nèi)均健壯生長(zhǎng)；
[0043] 第七、通過床體自動(dòng)控制系統(tǒng)將苗床的溫度和濕度控制在適宜范圍，可避免傳統(tǒng) 大棚培養(yǎng)中溫濕度控制不均的問題，提高幼苗的成活率；
[0044] 第八、根據(jù)紫莖幼苗的生長(zhǎng)特點(diǎn)和營(yíng)養(yǎng)需要配制專用的培養(yǎng)基質(zhì)，基質(zhì)中的第一 基質(zhì)層由稻殼、珍珠巖和鋸末經(jīng)殺菌制得，其疏松通氣，吸水保水且不含病原菌;第二基質(zhì) 層由廄肥、廢蜜液、蛋殼、豆渣、秸桿和酵素菌經(jīng)發(fā)酵后與黃壤土混合制得，其可為幼苗生長(zhǎng) 提供豐富的易于吸收的營(yíng)養(yǎng)，發(fā)酵還可使第二基質(zhì)層中產(chǎn)生大量的有益細(xì)菌，可增強(qiáng)幼苗 的抗病蟲害能力；第三基質(zhì)層為表層腐殖土，可為幼苗生長(zhǎng)提供一定營(yíng)養(yǎng)并減緩第二基質(zhì) 層中養(yǎng)分和水分的散失，確保幼苗在其上長(zhǎng)勢(shì)好，無病蟲害，所得移栽苗健壯，提高了移栽 苗野外移栽的成活率，且移栽后長(zhǎng)勢(shì)好。
[0045] 本發(fā)明的其他優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對(duì)本 發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
【附圖說明】
[0046] 圖1為本發(fā)明床體的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0047]其中，1、床架；11、右側(cè)面;12、前側(cè)面;13、后側(cè)面;14、底面;15、滑槽;2、進(jìn)水管;3、 旋轉(zhuǎn)噴頭;4、熱交換管;5、溫濕度傳感器;6、控制面板。
【具體實(shí)施方式】
[0048] 下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照 說明書文字能夠據(jù)以實(shí)施。
[0049] 需要說明的是，下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法，所述 試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得；在本發(fā)明的描述中，術(shù)語"橫向"、"縱 向"、"上"、"下"、"前"、"后"、"左"、"右"、"豎直"、"水平"、"頂"、"底"、"內(nèi)"、"外"等指示的方 位或位置關(guān)系為基于附圖所示的方位或位置關(guān)系，僅是為了便于描述本發(fā)明和簡(jiǎn)化描述， 并不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構(gòu)造和操作，因 此不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。
[0050] 實(shí)施例1:
[0051] -種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，包括以下步驟：
[0052] A、選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端5cm的枝條，將 所述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來水沖洗15min，再 放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無菌水沖洗3次并用消毒濾紙除去其表面 水分，得外植體，其中，
[0053]所述天然消毒液的制備方法為:將10重量份代代、7重量份白千層、7重量份藍(lán)桉、6 重量份大蒜、5重量份檸檬草和4重量份丁香粉碎至50目，加入500重量份的水室溫下浸泡 lh，再于60°C下真空回流提取2h，過濾，所得濾液即為所述天然消毒液；
[0054] B、將步驟A中得到的所述外植體用無菌解剖刀切割成0.5cm的小段并轉(zhuǎn)接到叢生 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于22°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28天，得第一叢 生芽，其中，
[0055] 所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0mg/LZT， 1 · Omg/L 6-KT，1 · Omg/L 2 · 4 · 5-T，15g/L蛋黃液，4g/L大豆肽，30g/L鹿糖和5g/L瓊脂，pH值 為 5.5;
[0056] 第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為20001UX，光照時(shí)間為14h/天；
[0057] C、將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無菌解剖刀切割成帶有1個(gè)芽的小塊并分 別轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于22°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28天，得 第二叢生芽，其中，
[0058] 所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.〇11^/121'，1.51^/16-KT，1.2mg/L NAA，15g/L蛋黃液，4g/L大豆肽，30g/L鹿糖和8g/L瓊脂，pH值為5.5;
[0059] D、將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于22°C，黑暗條件下培養(yǎng) 6天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)18天，得完整植株，其中，
[0060] 所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.2mg/L NAA，0.8mg/L IBA，0 · 8mg/L多效唑，lg/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5 · 5;
[0061 ] 第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度22001ux，光照時(shí)間為14h/天；
[0062] E、向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株 取出，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)28天，得幼苗，其中，
[0063] 所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0mg/L IBA，1.5mg/L ZT， 0 · 8mg/L 6-BA，0 · 8mg/L多效唑，20g/L蛋黃液，3g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L瓊脂，pH值為 5.5；
[0064] 第三光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度22001ux，光照時(shí)間為14h/天，光照時(shí)培養(yǎng)溫度 為22°C，非光照時(shí)培養(yǎng)溫度為16°C ;
[0065] F、將步驟E中得到的所述幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)5個(gè)月，得紫莖移栽苗，最后 將所述紫莖移栽苗進(jìn)行野外移栽。
[0066] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，苗床中培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)溫度為16 °C、濕度為 70%、陰蔽度為20 %。
[0067] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述苗床由床體和基質(zhì)組成，其中，所述床體 如圖1所示，其包括：
[0068]床架1，其為上表面開口的中空長(zhǎng)方體，其長(zhǎng)為3m、寬為lm、高為20cm;所述床架1的 平行于長(zhǎng)度方向的右側(cè)面11和與其相鄰的前側(cè)面12、后側(cè)面13及底面14可拆卸連接;所述 右側(cè)面11的下方設(shè)有與豎直方向呈60°的向下傾斜的滑槽15,所述滑槽15與所述底面14邊 緣固定連接;噴霧裝置，其包括間隔設(shè)置在所述床架的內(nèi)部上方并與所述床架的長(zhǎng)度方向 平行的多個(gè)進(jìn)水管2和間隔設(shè)置在所述進(jìn)水管上的多個(gè)旋轉(zhuǎn)噴頭3;溫控裝置，其為設(shè)置在 所述床架的內(nèi)部下方的呈波浪形排列的熱交換管4;自動(dòng)控制系統(tǒng)，其包括設(shè)置在所述床架 的內(nèi)部的多個(gè)溫濕度傳感器5和設(shè)置在所述前側(cè)面的外表面上的控制面板6。
[0069] 所述床架自動(dòng)控溫控濕的工作原理為，溫濕度傳感器將采集到的溫濕度信息傳遞 給控制面板，控制面板通過比對(duì)程序與設(shè)定值進(jìn)行對(duì)比，當(dāng)測(cè)定值與設(shè)定值不相等時(shí)，控制 面板則通過控制程序控制熱交換管和噴霧裝置工作，直至測(cè)定值與設(shè)定值相等時(shí)，控制面 板則通過控制程序控制熱交換管和噴霧裝置停止工作。
[0070] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述基質(zhì)，其包括：
[0071] 第一基質(zhì)層，其由15重量份稻殼、15重量份珍珠巖和10重量份鋸末經(jīng)高溫滅菌制 得，其厚度為6cm;
[0072] 第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由20重量份廄肥、15重量份廢蜜液、 15份蛋殼、10重量份豆渣、10重量份秸桿和0.8份酵素菌經(jīng)發(fā)酵后再加入40重量份黃壤土混 合制得，其厚度為13cm;
[0073] 第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為lcm的表層腐殖土。
[0074] 實(shí)施例2:
[0075] -種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，包括以下步驟：
[0076] A、選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端8cm的枝條，將 所述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來水沖洗18min，再 放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無菌水沖洗4次并用消毒濾紙除去其表面 水分，得外植體，其中，
[0077] 所述天然消毒液的制備方法為:將11重量份代代、8重量份白千層、8重量份藍(lán)桉、7 重量份大蒜、6重量份檸檬草和5重量份丁香粉碎至80目，加入500重量份的水室溫下浸泡 lh，再于60°C下真空回流提取3h，過濾，所得濾液即為所述天然消毒液；
[0078] B、將步驟A中得到的所述外植體用無菌解剖刀切割成0.6cm的小段并轉(zhuǎn)接到叢生 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于25°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)29天，得第一叢 生芽，其中，
[0079] 所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.2mg/L ZT， 1 · 2mg/L 6-KT，1 · 2mg/L 2 · 4 · 5-T，18g/L蛋黃液，5g//L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L瓊脂，pH值 為 5.8;
[0080] 第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為21001ux，光照時(shí)間為15h/天；
[0081] C、將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無菌解剖刀切割成帶有2個(gè)芽的小塊并分 別轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于25°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)29天，得 第二叢生芽，其中，
[0082] 所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.211^/121'，1.81^/16-KT，1.3mg/L NAA，18g/L蛋黃液，5g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5.8;
[0083] D、將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于25°C，黑暗條件下培養(yǎng) 6天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)19天，得完整植株，其中，
[0084] 所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.3mg/L NAA，0.9mg/L IBA，0 · 9mg/L多效唑，2g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5 · 8;
[0085] 第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度23001ux，光照時(shí)間為15h/天；
[0086] E、向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株 取出，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)29天，得幼苗，其中，
[0087] 所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.2mg/L IBA，1.7mg/L ZT， Ο · 9mg/L 6-BA，Ο · 9mg/L多效唑，23g/L蛋黃液，4g/L活性炭，30g/L蔗糖和lOg/L瓊脂，pH值為 5.8；
[0088] 第三光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度23001UX，光照時(shí)間為15h/天，光照時(shí)培養(yǎng)溫度 為25°C，非光照時(shí)培養(yǎng)溫度為18°C ;
[0089] F、將步驟E中得到的所述幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)5.5個(gè)月，得紫莖移栽苗，最 后將所述紫莖移栽苗進(jìn)行野外移栽。
[0090] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，苗床中培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)溫度為18 °C、濕度為 75%、陰蔽度為25%。
[0091] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述苗床由床體和基質(zhì)組成，其中，所述床體 如圖1所示，其包括：
[0092]床架1，其為上表面開口的中空長(zhǎng)方體，其長(zhǎng)為6m、寬為1.5m、高為22cm;所述床架1 的平行于長(zhǎng)度方向的右側(cè)面11和與其相鄰的前側(cè)面12、后側(cè)面13及底面14可拆卸連接;所 述右側(cè)面11的下方設(shè)有與豎直方向呈60°的向下傾斜的滑槽15,所述滑槽15與所述底面14 邊緣固定連接;噴霧裝置，其包括間隔設(shè)置在所述床架的內(nèi)部上方并與所述床架的長(zhǎng)度方 向平行的多個(gè)進(jìn)水管2和間隔設(shè)置在所述進(jìn)水管上的多個(gè)旋轉(zhuǎn)噴頭3;溫控裝置，其為設(shè)置 在所述床架的內(nèi)部下方的呈波浪形排列的熱交換管4;自動(dòng)控制系統(tǒng)，其包括設(shè)置在所述床 架的內(nèi)部的多個(gè)溫濕度傳感器5和設(shè)置在所述前側(cè)面的外表面上的控制面板6。
[0093] 所述床架自動(dòng)控溫控濕的工作原理為，溫濕度傳感器將采集到的溫濕度信息傳遞 給控制面板，控制面板通過比對(duì)程序與設(shè)定值進(jìn)行對(duì)比，當(dāng)測(cè)定值與設(shè)定值不相等時(shí)，控制 面板則通過控制程序控制熱交換管和噴霧裝置工作，直至測(cè)定值與設(shè)定值相等時(shí)，控制面 板則通過控制程序控制熱交換管和噴霧裝置停止工作。
[0094]所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述基質(zhì)，其包括：
[0095] 第一基質(zhì)層，其由18重量份稻殼、18重量份珍珠巖和11重量份鋸末經(jīng)高溫滅菌制 得，其厚度為7cm;
[0096] 第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由25重量份廄肥、18重量份廢蜜液、 18份蛋殼、12重量份豆渣、12重量份秸桿和0.9份酵素菌經(jīng)發(fā)酵后再加入45重量份黃壤土混 合制得，其厚度為14cm;
[0097] 第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為lcm的表層腐殖土。
[0098] 實(shí)施例3:
[0099] 一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，包括以下步驟：
[0100] A、選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端10cm的枝條，將 所述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2 %的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來水沖洗20min，再 放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無菌水沖洗5次并用消毒濾紙除去其表面 水分，得外植體，其中，
[0101] 所述天然消毒液的制備方法為:將12重量份代代、9重量份白千層、9重量份藍(lán)桉、8 重量份大蒜、7重量份檸檬草和6重量份丁香粉碎至100目，加入500重量份的水室溫下浸泡 lh，再于60°C下真空回流提取4h，過濾，所得濾液即為所述天然消毒液；
[0102] B、將步驟A中得到的所述外植體用無菌解剖刀切割成0.8cm的小段并轉(zhuǎn)接到叢生 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于26°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)30天，得第一叢 生芽，其中，
[0103] 所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.5mg/L ZT， 1 · 5mg/L 6-KT，1 · 5mg/L 2 · 4 · 5-T，20g/L蛋黃液，6g/L大豆肽，30g/L鹿糖和5g/L瓊脂，pH值 為 5.8;
[0104] 第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為22001ux，光照時(shí)間為16h/天；
[0105] C、將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無菌解剖刀切割成帶有2個(gè)芽的小塊并分 別轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于26°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)30天，得 第二叢生芽，其中，
[0106] 所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.511^/121'，2.〇1^/16-KT，1.5mg/L NAA，20g/L蛋黃液，6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5.8;
[0107] D、將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于26°C，黑暗條件下培養(yǎng) 6天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)20天，得完整植株，其中，
[0108] 所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.5mg/L NAA，1.0mg/L IBA，1 · Omg/L多效唑，3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5 · 8;
[0109] 第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度24001ux，光照時(shí)間為16h/天；
[0110] E、向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株 取出，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)30天，得幼苗，其中，
[0111] 所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.5mg/L IBA，1.8mg/L ZT， 1 · Omg/L 6-BA，1 · Omg/L多效唑，25g/L蛋黃液，5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L瓊脂，pH值為 5.8；
[0112] 第三光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度24001ux，光照時(shí)間為16h/天，光照時(shí)培養(yǎng)溫度 為26°C，非光照時(shí)培養(yǎng)溫度為20°C ;
[0113] F、將步驟E中得到的所述幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)6個(gè)月，得紫莖移栽苗，最后 將所述紫莖移栽苗進(jìn)行野外移栽。
[0114] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，苗床中培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)溫度為2 0 °C、濕度為 80%、陰蔽度為30 %。
[0115]所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述苗床由床體和基質(zhì)組成，其中，所述床體 如圖1所示，其包括：
[0116] 床架1，其為上表面開口的中空長(zhǎng)方體，其長(zhǎng)為9m、寬為1.8m、高為25cm;所述床架1 的平行于長(zhǎng)度方向的右側(cè)面11和與其相鄰的前側(cè)面12、后側(cè)面13及底面14可拆卸連接;所 述右側(cè)面11的下方設(shè)有與豎直方向呈60°的向下傾斜的滑槽15,所述滑槽15與所述底面14 邊緣固定連接;噴霧裝置，其包括間隔設(shè)置在所述床架的內(nèi)部上方并與所述床架的長(zhǎng)度方 向平行的多個(gè)進(jìn)水管2和間隔設(shè)置在所述進(jìn)水管上的多個(gè)旋轉(zhuǎn)噴頭3;溫控裝置，其為設(shè)置 在所述床架的內(nèi)部下方的呈波浪形排列的熱交換管4;自動(dòng)控制系統(tǒng)，其包括設(shè)置在所述床 架的內(nèi)部的多個(gè)溫濕度傳感器5和設(shè)置在所述前側(cè)面的外表面上的控制面板6。
[0117] 所述床架自動(dòng)控溫控濕的工作原理為，溫濕度傳感器將采集到的溫濕度信息傳遞 給控制面板，控制面板通過比對(duì)程序與設(shè)定值進(jìn)行對(duì)比，當(dāng)測(cè)定值與設(shè)定值不相等時(shí)，控制 面板則通過控制程序控制熱交換管和噴霧裝置工作，直至測(cè)定值與設(shè)定值相等時(shí)，控制面 板則通過控制程序控制熱交換管和噴霧裝置停止工作。
[0118]所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述基質(zhì)，其包括：
[0119] 第一基質(zhì)層，其由20重量份稻殼、20重量份珍珠巖和12重量份鋸末經(jīng)高溫滅菌制 得，其厚度為8cm;
[0120] 第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由30重量份廄肥、20重量份廢蜜液、 20份蛋殼、15重量份豆渣、15重量份秸桿和1份酵素菌經(jīng)發(fā)酵后再加入50重量份黃壤土混合 制得，其厚度為15cm;
[0121] 第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為2cm的表層腐殖土。
[0122] 實(shí)施例4:
[0123] -種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，包括以下步驟：
[0124] A、選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端5cm的枝條，將 所述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來水沖洗15min，再 放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無菌水沖洗5次并用消毒濾紙除去其表面 水分，得外植體，其中，
[0125] 所述天然消毒液的制備方法為:將12重量份代代、7重量份白千層、7重量份藍(lán)桉、8 重量份大蒜、7重量份檸檬草和6重量份丁香粉碎至100目，加入500重量份的水室溫下浸泡 lh，再于60°C下真空回流提取4h，過濾，所得濾液即為所述天然消毒液；
[0126] B、將步驟A中得到的所述外植體用無菌解剖刀切割成0.8cm的小段并轉(zhuǎn)接到叢生 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于25°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28天，得第一叢 生芽，其中，
[0127] 所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.5mg/L ZT， 1 · 5mg/L 6-KT，1 · Omg/L 2 · 4 · 5-T，20g/L蛋黃液，4g/L大豆肽，30g/L鹿糖和5g/L瓊脂，pH值 為 5.6;
[0128] 第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為22001ux，光照時(shí)間為14h/天；
[0129] C、將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無菌解剖刀切割成帶有1個(gè)芽的小塊并分 別轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于25°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28天，得 第二叢生芽，其中，
[0130] 所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.511^/121'，1.51^/16-KT，1.2mg/L NAA，15g/L蛋黃液，6g/L大豆肽，30g/L鹿糖和8g/L瓊脂，pH值為5.6;
[0131] D、將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于25°C，黑暗條件下培養(yǎng) 6天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)18天，得完整植株，其中，
[0132] 所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.5mg/L NAA，0.8mg/L IBA，0 · 8mg/L多效唑，lg/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5 · 6;
[0133] 第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度22001ux，光照時(shí)間為14h/天；
[0134] E、向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株 取出，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)28天，得幼苗，其中，
[0135] 所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0mg/L IBA，1.5mg/L ZT， 1 · Omg/L 6-BA，1 · Omg/L多效唑，25g/L蛋黃液，5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L瓊脂，pH值為 5.6；
[0136] 第三光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度22001ux，光照時(shí)間為14h/天，光照時(shí)培養(yǎng)溫度 為25°C，非光照時(shí)培養(yǎng)溫度為16°C ;
[0137] F、將步驟E中得到的所述幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)6個(gè)月，得紫莖移栽苗，最后 將所述紫莖移栽苗進(jìn)行野外移栽。
[0138] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，苗床中培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)溫度為18 °C、濕度為 80%、陰蔽度為20 %。
[0139] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述苗床由床體和基質(zhì)組成，其中，所述床體 如圖1所示，其包括：
[0140]床架1，其為上表面開口的中空長(zhǎng)方體，其長(zhǎng)為6m、寬為1.5m、高為25cm;所述床架1 的平行于長(zhǎng)度方向的右側(cè)面11和與其相鄰的前側(cè)面12、后側(cè)面13及底面14可拆卸連接;所 述右側(cè)面11的下方設(shè)有與豎直方向呈60°的向下傾斜的滑槽15,所述滑槽15與所述底面14 邊緣固定連接;噴霧裝置，其包括間隔設(shè)置在所述床架的內(nèi)部上方并與所述床架的長(zhǎng)度方 向平行的多個(gè)進(jìn)水管2和間隔設(shè)置在所述進(jìn)水管上的多個(gè)旋轉(zhuǎn)噴頭3;溫控裝置，其為設(shè)置 在所述床架的內(nèi)部下方的呈波浪形排列的熱交換管4;自動(dòng)控制系統(tǒng)，其包括設(shè)置在所述床 架的內(nèi)部的多個(gè)溫濕度傳感器5和設(shè)置在所述前側(cè)面的外表面上的控制面板6。
[0141] 所述床架自動(dòng)控溫控濕的工作原理為，溫濕度傳感器將采集到的溫濕度信息傳遞 給控制面板，控制面板通過比對(duì)程序與設(shè)定值進(jìn)行對(duì)比，當(dāng)測(cè)定值與設(shè)定值不相等時(shí)，控制 面板則通過控制程序控制熱交換管和噴霧裝置工作，直至測(cè)定值與設(shè)定值相等時(shí)，控制面 板則通過控制程序控制熱交換管和噴霧裝置停止工作。
[0142] 所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述基質(zhì)，其包括：
[0143] 第一基質(zhì)層，其由15重量份稻殼、20重量份珍珠巖和10重量份鋸末經(jīng)高溫滅菌制 得，其厚度為8cm;
[0144] 第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由30重量份廄肥、15重量份廢蜜液、 20份蛋殼、10重量份豆渣、10重量份秸桿和1份酵素菌經(jīng)發(fā)酵后再加入50重量份黃壤土混合 制得，其厚度為15cm;
[0145] 第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為2cm的表層腐殖土。
[0146] 對(duì)比例1:
[0147] 通過對(duì)比例1來進(jìn)一步說明本發(fā)明天然消毒液的有益效果。其中，對(duì)照組的外植體 消毒采用傳統(tǒng)酒精和升汞消毒法，對(duì)照組的其余操作條件同實(shí)施例2,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。
[0148] 表1不同消毒方法對(duì)紫莖幼苗的影響
[0149]
[0150]由表1可知，消毒方法對(duì)紫莖幼苗的增殖系數(shù)影響不顯著，但對(duì)畸形苗率有顯著影 響，采用天然消毒液的紫莖幼苗畸形苗率僅為0.5%，而采用酒精和升汞消毒法的紫莖幼苗 畸形率高達(dá)7%，說明天然消毒液消毒可顯著降低紫莖幼苗的畸形苗率。
[0151]盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實(shí)施方式中所列 運(yùn)用。它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域。對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地 實(shí)現(xiàn)另外的修改。因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限 于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的實(shí)例。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，包括以下步驟： A、 選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端5-lOcm的枝條，將所 述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來水沖洗15-20min，再 放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無菌水沖洗3-5次并用消毒濾紙除去其表 面水分，得外植體，其中， 所述天然消毒液的制備方法為:將10-12重量份代代、7-9重量份白千層、7-9重量份藍(lán) 桉、6_8重量份大蒜、5_7重量份梓檬草和4_6重量份丁香粉碎至50-100目，加入500重量份的 水室溫下浸泡lh，再于60°C下真空回流提取2-4h，過濾，所得濾液即為所述天然消毒液； B、 將步驟A中得到的所述外植體用無菌解剖刀切割成0.5-0.8cm的小段并轉(zhuǎn)接到叢生 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于22-26°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28-30天，得 第一叢生芽，其中， 所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L ZT，1.0-? · 5mg/L 6-KT ， 1 · 0-1 · 5mg/L 2 · 4 · 5-T ， 15-20g/L 蛋黃液， 4-6g//L 大豆肽， 30g/L 蔗糖和 5g/L 瓊脂，pH值為5.5-5.8; 第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為2000-220011?，光照時(shí)間為14-1611/天； C、 將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無菌解剖刀切割成帶有1-2個(gè)芽的小塊并分別 轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于22-26°C，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28-30 天，得第二叢生芽，其中， 所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L ZT，1.5-2. Omg/ L 6-KT，1.2-1.5mg/L NAA，15-20g/L蛋黃液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為 5.5~5.8； D、 將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于22-26Γ，黑暗條件下培養(yǎng)6 天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)18-20天，得完整植株，其中， 所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.2-1.511^/1^財(cái)4,0.8-1 · Omg/L IBA，0 · 8-1 · Omg/L多效唑，l-3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5 · 5-5 · 8; 第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200-24001ux，光照時(shí)間為14-16h/天； E、 向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株取出， 轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)28-30天，得幼苗，其中， 所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L IBA，1.5-1.8mg/L ZT，0 · 8-1 · Omg/L 6-BA，0 · 8-1 · Omg/L多效唑，20-25g//L蛋黃液，3-5g/L活性炭，30g/L蔗糖和 l〇g/L 瓊脂，pH 值為 5·5-5·8; 第三光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200-24001ux，光照時(shí)間為14-16h/天，光照時(shí)培養(yǎng) 溫度為22-26°C，非光照時(shí)培養(yǎng)溫度為16-20°C ; F、 將步驟E中得到的所述幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)5-6個(gè)月，得紫莖移栽苗，最后將 所述紫莖移栽苗進(jìn)行野外移栽。2. 如權(quán)利要求1所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，苗床中培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng) 溫度為16_20°C、濕度為70-80%、陰蔽度為20-30%。3. 如權(quán)利要求2所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，所述苗床由床體和基 質(zhì)組成，其中，所述床體，其包括： 床架，其為上表面開口的中空長(zhǎng)方體，其長(zhǎng)為3-9m、寬為1-1.8111、高為20-25(^;所述床 架的平行于長(zhǎng)度方向的右側(cè)面和與其相鄰的前側(cè)面、后側(cè)面及底面可拆卸連接;所述右側(cè) 面的下方設(shè)有與豎直方向呈30-60°的向下傾斜的滑槽，所述滑槽與所述底面邊緣固定連 接； 噴霧裝置，其包括間隔設(shè)置在所述床架的內(nèi)部上方并與所述床架的長(zhǎng)度方向平行的多 個(gè)進(jìn)水管和間隔設(shè)置在所述進(jìn)水管上的多個(gè)旋轉(zhuǎn)噴頭； 溫控裝置，其為設(shè)置在所述床架的內(nèi)部下方的呈波浪形排列的熱交換管； 自動(dòng)控制系統(tǒng)，其包括設(shè)置在所述床架的內(nèi)部的多個(gè)溫濕度傳感器和設(shè)置在所述前側(cè) 面的外表面上的控制面板。4. 如權(quán)利要求3所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，所述基質(zhì)，其包括： 第一基質(zhì)層，其由15-20重量份稻殼、15-20重量份珍珠巖和10-12重量份鋸末經(jīng)高溫滅 菌制得，其厚度為6-8cm; 第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由20-30重量份廄肥、15-20重量份廢蜜 液、15-20份蛋殼、10-15重量份豆渣、10-15重量份秸桿和0.8-1份酵素菌經(jīng)發(fā)酵后再加入 40-50重量份黃壤土混合制得，其厚度為13-15cm; 第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為l_2cm的表層腐殖土。5. 如權(quán)利要求1所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng) 基中ZT濃度為2 · 2mg/L，6-KT濃度為1 · 2mg/L，2 · 4 · 5-T濃度為1 · 2mg/L，蛋黃液濃度為18g/L， 大豆肽濃度為5g/L，pH值為5.8。6. 如權(quán)利要求1所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基中ZT 濃度為2.2mg/L，6-KT濃度為1.8mg/L，NAA濃度為1.3mg/L，蛋黃液濃度為18g/L，大豆肽濃度 為5/1，?!1值為5.8。7. 如權(quán)利要求1所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基中 NAA濃度為1.3mg/L，IBA濃度為0.9mg/L，多效唑濃度為0.9mg/L，大豆肽濃度為2/L，pH值為 5.8〇8. 如權(quán)利要求1所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，所述壯苗培養(yǎng)基中 IBA濃度為2.2mg/L，ZT濃度為1.7mg/L，6-BA濃度為0.9mg/L，多效唑濃度為0.9mg/L，蛋黃液 濃度為23g/L，活性炭濃度為4g/L，pH值為5.8。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK105993951SQ201610362924
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年5月27日
【發(fā)明人】陳思
【申請(qǐng)人】陳思