一種柞蛹蟲草中藥材的人工培育方法、炮制、檢測及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬中藥材技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種柞蛹蟲草中藥材的人工培育方法、炮制、 特征成分的檢測及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 蛹蟲草Cordyceps militaris (Linn. et. Fr.) Link為麥角菌科蟲草屬，又名北冬蟲 夏草、北蟲草、蛹草、東北蟲草等，天然野生蛹蟲草始載于《新華本草綱要》，后收載于《中華 本草》、《中藥辭海》、《全國中草藥匯編》、《中國藥用孢子植物》、《中華藥?！返戎兴幍浼?。 蛹蟲草作為冬蟲夏草的模式種，可作為冬蟲夏草入藥。此外，人工培育蛹蟲草已獲得成功， 中國專利申請87106987. 3、中國專利申請00130381. 3、中國專利申請201210376581. X公 開了蛹蟲草的人工培育方法。蛹蟲草菌已收載在國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準 WS3-286(Z-039)-2005(Z) "蛹蟲草菌粉"藥品標準中。上述公開的文獻并未考慮不同光源 交替照射對于蛹蟲草培育的作用以及蛹蟲草作為中藥材全草入藥的炮制、特征成分的檢測 及其新的用途。
[0003] 目前蛹蟲草人工培養(yǎng)品基本上作為高檔食用菌類烹調(diào)用，其食用部位為人工培育 的蛹蟲草子實體，即真菌部分，而沒有蛹體。衛(wèi)生部2009年根據(jù)《中華人民共和國食品衛(wèi)生 法》和《新資源食品管理辦法》的規(guī)定，批準蛹蟲草為新資源食品，其用于食品生產(chǎn)加工。其 公告規(guī)定：蛹蟲草：即人工培養(yǎng)的蛹蟲草子實體。種屬：子囊菌亞綱、麥角菌科、蟲草屬。生 產(chǎn)工藝簡述：接種蛹蟲草菌種到培養(yǎng)基上進行人工培養(yǎng)，采收蛹蟲草子實體，經(jīng)烘干等步驟 而制成。食用量<2克/天。使用范圍：直接食用、酒類、罐頭、調(diào)味品、飲料。國家藥品標 準中蛹蟲草菌粉亦指是菌粉?？诜?，每日3次，每次lg。而相關(guān)中藥典籍明確指明蛹蟲草必 須全草入藥，即連蛹（蠶蛹部分）帶草（真菌部分）一起入藥。冬蟲夏草也是連蟲帶草一 起入藥（實際上是以蟲為主）。再有，人工培育的蛹蟲草成分復雜，而其作為中藥材用于臨 床治療必須保證每批產(chǎn)品特征成分的檢測、炮制工藝符合規(guī)定，并具有確切的治療效果。因 此，對于蛹蟲草人工培養(yǎng)品成分的檢測及控制、炮制工藝的確定，對其質(zhì)量控制、提高療效 及保證安全性非常重要。本發(fā)明提供了一種用活柞蠶人工培養(yǎng)的柞蛹蟲草中藥材、炮制方 法、特征檢測方法及用途，與市場上的各種食用級的蛹蟲草子實體或蛹蟲草菌粉不同，本發(fā) 明是將柞蛹蟲草全草作為中藥材及中藥飲片使用并具有明確的治療效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種人工培育的柞蛹蟲草中藥材的培育及炮制方法。采用 活的、健康的柞蠶蠶蛹，人工接種蛹蟲草菌在溫度15~25°C，培育時間45~60天，采用藍 光（60-100勒克斯）及白光（350-400勒克斯）每日交替照射各8-10小時的條件下培育出 有效成份穩(wěn)定可控的作蛹蟲草中藥材。同時，作蛹蟲草中藥材（連蛹帶草）的炮制在溫度 不超過60°C的條件下進行炮制，工藝為烘干及粉碎，最大限度的保證柞蛹蟲草中藥材有效 成份的活性。
[0005] 本發(fā)明的另一個目的是提供所述人工培育的柞蛹蟲草中藥材的特征檢測方法：采 用高效液相、高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用檢測系統(tǒng)及對照品對柞蛹蟲草中藥材成分進行定性檢測 及成分指認，并采用指紋特征圖譜進行指紋檢測，5個特征色譜峰相對保留時間在±5%之 內(nèi)。經(jīng)過鑒定，各指紋成分分別為：峰1為：尿苷，峰2為：酪氨酸，峰3為：腺苷，峰4為：蟲 草素，峰5為：N-(2)羥基腺苷。
[0006] 本發(fā)明的另一個目的是保證所述人工培育的柞蛹蟲草中藥材其相關(guān)成分在各批 次中的穩(wěn)定性。
[0007] 本發(fā)明還有一個目的是提供所述人工培育的柞蛹蟲草中藥材在臨床治療的新用 途。
[0008] 以下通過【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步的詳細描述，但并不限制本發(fā)明，本領(lǐng) 域技術(shù)人員可以根據(jù)發(fā)明做出各種改變和變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應屬于本發(fā) 明所附權(quán)利要求的范圍。
[0009] 本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)：
[0010] A -種柞蛹蟲草中藥材的人工培育方法及炮制方法
[0011] -種作蛹蟲草中藥材，為麥角菌科蟲草屬蛹蟲草Cordyceps militaris(Linn. et. Fr.) Link的人工培養(yǎng)品。本品系蛹蟲草菌接種在天蠶蛾科昆蟲作蠶（Antheraea pernyi Geurin-Meneville)的活蛹上，在溫度為15~25°C條件下，經(jīng)過45~60天培育，采用藍光 (60-100勒克斯）及白光（350-400勒克斯）每日交替照射各8-10小時，培養(yǎng)出的子座和蛹 體的復合體：由蛹體與從蛹體長出的多個子座相連而成，二者結(jié)合緊密。蛹體呈長橢圓形， 長2~4. 5cm，直徑1~2. 5cm ;表面覆蓋黃白色至黃色菌膜，剝落后呈黑褐色至黑色，蛹體 腹部有環(huán)紋10~25個；質(zhì)較脆，易折斷，斷面略平坦，灰棕色。子座4~20個，細長扁圓柱 形，長2~8cm，直徑0. 15~0. 25cm ;表面橙黃色至橙紅色，少有分枝，頂端偶有膨大；質(zhì)柔 韌，斷面黃白色。氣微腥，味微咸。
[0012] B柞蛹蟲草中藥材的特征檢測方法
[0013] 采用高效液相、高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用檢測系統(tǒng)及對照品對本發(fā)明的柞蛹蟲草中藥 材成分進行定性檢測及成分指認，并采用指紋特征圖譜進行指紋檢測（圖2、圖3)。本發(fā)明 實施例1-1、1-2、1-3、1-4、1-5、1-6共6批樣品中均呈現(xiàn)5個特征色譜峰，以蟲草素（峰4) 為參照，相對保留時間分別為：〇. 32 (峰1)、0. 55 (峰2)、0. 87 (峰3)、1 (峰4)、1. 17 (峰5)。 且5個特征色譜峰相對保留時間在±5%之內(nèi)。經(jīng)過鑒定，各指紋成分分別為：峰1為：尿 苷，峰2為：酪氨酸，峰3為：腺苷，峰4為：蟲草素，峰5為：N-⑵羥基腺苷。
[0014] C柞蛹蟲草中藥材相關(guān)成分的檢測
[0015] 包括：水分、重金屬、砷鹽、熾灼殘渣、含量。
[0016] D本發(fā)明柞蛹蟲草中藥材臨床上用于感冒的治療 [0017] 其特點是：療程短、見效快且無毒副作用。
【附圖說明】
[0018] 圖1是本發(fā)明實施例1-2培育的柞蛹蟲草中藥材圖片。
[0019] 圖2是本發(fā)明實施例1-2培育的柞蛹蟲草中藥材的特征圖譜。
[0020] 圖3是本發(fā)明實施例1-2培育的柞蛹蟲草中藥材的LC-MS-MS (液相色譜-串聯(lián)質(zhì) 譜）色譜圖總離子圖。
[0021] 具體實施方法
[0022] 下面實施例用于進一步說明但不限于本發(fā)明。
[0023] 實施例1 :本發(fā)明柞蛹蟲草中藥材的培育與炮制
[0024] 1-1取無雜菌污染的蛹蟲草菌液1200毫升（吉林省蠶業(yè)科學研究院），健康的活 柞蠶蛹1000枚（河北省承德醫(yī)學院蠶業(yè)研究所），在百級空氣潔凈接種室人工接種。每枚 活柞蠶蛹接種1. 2毫升蛹蟲草菌液。培育條件：溫度15°C，時間45天，采用藍光（100勒克 斯）及白光（400勒克斯）每日交替照射各10小時，即藍光（C0B光源，深圳市永恒晟光電 有限公司）照射10小時，白光（白熾燈，南通三星電瓷照明有限公司）照射10小時，培養(yǎng) 出的子座和蛹體的復合體。本品由蛹體與從蛹體長出的多個子座相連而成，二者結(jié)合緊密。 蛹體呈長橢圓形，長2~4. lcm，直徑1~2. 2cm ;表面覆蓋黃白色至黃色菌膜，剝落后呈黑 褐色至黑色，蛹體腹部有環(huán)紋10~22個；質(zhì)較脆，易折斷，斷面略平坦，灰棕色。子座4~ 18個，細長扁圓柱形，長2~6cm，直徑0. 15~0. 18cm ;表面橙黃色至橙紅色，少有分枝，頂 端偶有膨大；質(zhì)柔韌，斷面黃白色。氣微腥，味微咸。炮制方法：在溫度為60°C以下的條件 將培育的柞蛹蟲草進行紅外干燥，并在溫度為60°C以下的條件下研末為細粉。即按中國藥 典規(guī)定：指能全部通過五號篩，并含能通過六號篩不少于95%的粉末。
[0025] 1-2取無雜菌污染的蛹蟲草菌液1200毫升（吉林省蠶業(yè)科學研究院），健康的活 柞蠶蛹1000枚（河北省承德醫(yī)學院蠶業(yè)研究所），在百級空氣潔凈接種室人工接種。每枚 活柞蠶蛹接種1. 2毫升蛹蟲草菌液。培育條件：溫度18°C，時間60天，采用藍光（100勒克 斯）及白光（350勒克斯）每日交替照射各9小時，即藍光（C0B光源，深圳市永恒晟光電有 限公司）照射9小時，白光（白熾燈，南通三星電瓷照明有限公司）照射9小時，培養(yǎng)出的子 座和蛹體的復合體。本品由蛹體與從蛹體長出的多個子座相連而成，二者結(jié)合緊密。蛹體 呈長橢圓形，長2. 5~4. 5cm，直徑1. 5~2. 5cm ;表面覆蓋黃白色至黃色菌膜，剝落后呈黑 褐色至黑色，蛹體腹部有環(huán)紋16~25個；質(zhì)較脆，易折斷，斷面略平坦，灰棕色。子座5~ 20個，細長扁圓柱形，長3~8cm，直徑0. 18~0. 25cm ;表面橙黃色至橙紅色，少有分枝，頂 端偶有膨大；質(zhì)柔韌，斷面黃白色。氣微腥，味微咸。炮制方法：在溫度為60°C以下的條件 將培育的柞蛹蟲草進行微波干燥，并在溫度為60°C以下的條件下研末為細粉。即按中國藥 典規(guī)定：指能全部通過五號篩，并含能通過六號篩不少于95%的粉末。
[0026] 1-3取無雜菌污染的蛹蟲草菌液1300毫升（吉林省蠶業(yè)科學研究院），健康的活 柞蠶蛹1000枚（河北省承德醫(yī)學院蠶業(yè)研究所），在百級空