本發(fā)明涉及一種藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基及使用該培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法。
背景技術：
藍莓營養(yǎng)價值極高，富含多種維生素(例如VA、VB、VC、VE等)以及各種礦質元素(例如K、Fe、Zn、Ca等)、蛋白質、食用纖維、抗氧化劑、細菌生長抑制劑、鞣花酸、鞣花單寧、葉酸、花色素苷、類黃酮等化合物，具有提高免疫力、明目抗癌、改善循環(huán)、軟化血管、延緩神經(jīng)老化、緩解眼部疲勞、防衰抗突變等獨特功效，被譽為“21
世紀功能性保健漿果”和“水果皇后”，并被國際糧農(nóng)組織列為人類五大健康食品之一。伴隨著人們對其營養(yǎng)保健功效認識的不斷加深，藍莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，苗木需求量迅速擴大。組織培養(yǎng)具有高效和保存親本優(yōu)良性狀等優(yōu)點，適合藍莓優(yōu)良品種規(guī)模繁育，近年來藍莓組培育苗技術有了不少的進展，但現(xiàn)有報道文獻中，藍莓組培多采用瓶外生根法，不僅存在生根率較低，生根時間長等問題，也影響了育苗效率。
因此，對于目前藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法，有待于做進一步的改進。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術問題是針對現(xiàn)有技術的現(xiàn)狀，提供一種針對性強、適用性好的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基能有效提高藍莓的生根率、縮短生根時間。
本發(fā)明所要解決的另一個技術問題是針對現(xiàn)有技術的現(xiàn)狀，提供一種使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法，該方法生根時間短、生根率高。
本發(fā)明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基，其特征在于：包括營養(yǎng)液Ⅰ、支持物Ⅰ及激素，其中，所述的營養(yǎng)液Ⅰ采用蒸餾水配制，該營養(yǎng)液Ⅰ包含以下組分及含量：
(NH4)2SO4 375～385mg/L、K2SO4 445～455mg/L、KH2PO4 165～175mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 145～155mg/L、MgSO4.7H2O 175～185mg/L、FeSO4·7H2O 27～28mg/L、EDTA·Na2 37～38mg/L、ZnSO4·7H2O 4～4.5mg/L、MnSO4·H2O 8～9mg/L、CuSO4.5H2O 0.05～0.15mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.05～0.1mg/L、H3BO3 6～6.5mg/L、VB10.5～1.5mg/L、VB6 0.2～0.6mg/L、VC0.1～0.3mg/L、白糖18～22g/L；
所述的支持物Ⅰ為珍珠巖和瓊脂，所述珍珠巖在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為55～65g/L，所述瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為3～4g/L；
所述的激素為IBA，該激素在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為0.05～0.5mg/L。
在上述方案中，所述營養(yǎng)液Ⅰ的pH值為5.2～5.5。
作為優(yōu)選，所述營養(yǎng)液Ⅰ包含的組分及含量為(NH4)2SO4 380mg/L、K2SO4 450mg/L、KH2PO4 170mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 150mg/L、MgSO4.7H2O 180mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L、EDTA·Na2 37.3mg/L、ZnSO4·7H2O 4.3mg/L、MnSO4·H2O 8.5mg/L、CuSO4.5H2O 0.1mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.1mg/L、H3BO3 6.2mg/L、VB11.0mg/L、VB6 0.5mg/L、VC0.2mg/L、白糖20g/L。
優(yōu)選地，所述珍珠巖在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為60g/L，所述瓊脂在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為3.5g/L。
一種使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗；
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
按照營養(yǎng)液Ⅰ的組分配比配制營養(yǎng)液Ⅰ，向營養(yǎng)液Ⅰ中加入組分量的瓊脂及激素IBA，然后用NaOH或HCl溶液將營養(yǎng)液Ⅰ的pH值調(diào)節(jié)至5.2～5.5，每瓶培養(yǎng)基中加入1.8～2.2g珍珠巖，將營養(yǎng)液Ⅰ分瓶灌裝得到培養(yǎng)基，完畢后進行滅菌處理；
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，控制溫度為23～27℃，光照強度為2000～2500Lx，光照時間為12～14h/d。
在上述方案中，所述增殖培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅱ、支持物Ⅱ及激素，其中，所述的營養(yǎng)液Ⅱ采用蒸餾水配制，該營養(yǎng)液Ⅱ為WPM基本培養(yǎng)基，其中白糖30g/L；
所述的支持物Ⅱ為瓊脂，該瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為6～8g/L；
所述的激素為ZT，該激素在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為0.2～1.0mg/L。
優(yōu)選地，所述營養(yǎng)液Ⅱ中的白糖含量30g/L；所述瓊脂在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為7g/L；所述激素ZT在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為0.6mg/L。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于：本發(fā)明的培養(yǎng)基合理控制了氨態(tài)氮與硝態(tài)氮比例，有利于藍莓組培苗健壯生長，且該培養(yǎng)基中配制的低氮高磷和硼組合，尤為適合藍莓組培苗生根的要求，有利于藍莓的根系生長，而VC的添加可有效防褐化、促生根，從而提高了藍莓的生根率；另外，本發(fā)明采用瓊脂及珍珠巖作為培養(yǎng)基支持物，通透性好，進一步為藍莓組培苗生根提供了較好的條件；本發(fā)明的培養(yǎng)方法針對性強、適應性好，培植藍莓組培苗30d的生根率可達到90％以上，遠遠高于現(xiàn)有技術相同時間的生根率。
具體實施方式
以下結合實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。
實施例1：
本實施例的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅰ、支持物Ⅰ及激素，其中，營養(yǎng)液Ⅰ采用蒸餾水配制，該營養(yǎng)液Ⅰ包含以下組分及含量：
(NH4)2SO4 380mg/L、K2SO4 450mg/L、KH2PO4 170mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 150mg/L、MgSO4.7H2O 180mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L、EDTA·Na2 37.3mg/L、ZnSO4·7H2O 4.3mg/L、MnSO4·H2O 8.5mg/L、CuSO4.5H2O 0.1mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.1mg/L、H3BO3 6.2mg/L、VB11.0mg/L、VB6 0.5mg/L、VC0.2mg/L、白糖20g/L；該營養(yǎng)液Ⅰ的pH值為5.2；
支持物Ⅰ為珍珠巖和瓊脂，珍珠巖在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為60g/L，瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為3.5g/L；
激素為IBA，該激素在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為0.2mg/L。
本實施例中使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法包括以下步驟：
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗；該增殖培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅱ、支持物Ⅱ及激素，其中，營養(yǎng)液Ⅱ采用蒸餾水配制，該營養(yǎng)液Ⅱ為WPM基本培養(yǎng)基，其中白糖30g/L；支持物Ⅱ為瓊脂，該瓊脂在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為7g/L；激素為ZT，該激素在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為0.5mg/L；營養(yǎng)液Ⅱ為pH 5.2；培養(yǎng)條件為控制溫度為23～25℃，光照強度為2300～2500Lx，光照時間為12h/d；
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
按照營養(yǎng)液Ⅰ的組分配比配制營養(yǎng)液Ⅰ，向營養(yǎng)液Ⅰ中加入組分量的瓊脂及激素IBA，然后用NaOH或HCl溶液將營養(yǎng)液Ⅰ的pH值調(diào)節(jié)至5.2，每瓶培養(yǎng)基中加入2g珍珠巖，將營養(yǎng)液Ⅰ分瓶灌裝得到培養(yǎng)基，完畢后在壓力為1.05kg/cm2、溫度121℃下進行滅菌20分鐘處理；
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，控制溫度為24～26℃，光照強度為2000～2200Lx，光照時間為12h/d。
采用上述培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，培植藍莓組培苗30d的生根率為93％。
實施例2：
本實施例的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅰ、支持物Ⅰ及激素，其中，營養(yǎng)液Ⅰ采用蒸餾水配制，該營養(yǎng)液Ⅰ包含以下組分及含量：
(NH4)2SO4 375mg/L、K2SO4 445mg/L、KH2PO4 165mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 145mg/L、MgSO4.7H2O 175mg/L、FeSO4·7H2O 27mg/L、EDTA·Na2 37mg/L、ZnSO4·7H2O 4mg/L、MnSO4·H2O 8mg/L、CuSO4.5H2O 0.05mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.05mg/L、H3BO3 6mg/L、VB10.5mg/L、VB60.2mg/L、VC0.1mg/L、白糖20g/L；該營養(yǎng)液Ⅰ的pH值為5.3；
支持物Ⅰ為珍珠巖和瓊脂，珍珠巖在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為55g/L，瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為4g/L；
激素為IBA，該激素在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為0.05mg/L。
本實施例中使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法包括以下步驟：
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗；該增殖培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅱ、支持物Ⅱ及激素，其中，營養(yǎng)液Ⅱ采用蒸餾水配制，該營養(yǎng)液Ⅱ為WPM基本培養(yǎng)基；支持物Ⅱ為瓊脂，該瓊脂在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為6g/L；激素為ZT，該激素在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為0.2mg/L；pH 5.3。培養(yǎng)條件為控制溫度為22～25℃，光照強度為2000～2300Lx，光照時間為13h/d；
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
按照營養(yǎng)液Ⅰ的組分配比配制營養(yǎng)液Ⅰ，向營養(yǎng)液Ⅰ中加入組分量的瓊脂及激素IBA，然后用NaOH或HCl溶液將營養(yǎng)液Ⅰ的pH值調(diào)節(jié)至5.3，每瓶培養(yǎng)基中加入1.8g珍珠巖，將營養(yǎng)液Ⅰ分瓶灌裝得到培養(yǎng)基，完畢后在壓力為1.05kg/cm2、溫度121℃下進行滅菌20分鐘處理；
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，控制溫度為22～25℃，光照強度為2000～2200Lx，光照時間為12h/d。
采用上述培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，培植藍莓組培苗30d的生根率為90％。
實施例3：
本實施例的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅰ、支持物Ⅰ及激素，其中，營養(yǎng)液Ⅰ采用蒸餾水配制，該營養(yǎng)液Ⅰ包含以下組分及含量：
(NH4)2SO4 385mg/L、K2SO4 455mg/L、KH2PO4 175mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 155mg/L、MgSO4.7H2O185mg/L、FeSO4·7H2O28mg/L、EDTA·Na238mg/L、ZnSO4·7H2O 4.5mg/L、MnSO4·H2O9mg/L、CuSO4.5H2O 0.15mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.1mg/L、H3BO3 6.5mg/L、VB11.5mg/L、VB60.6mg/L、VC0.3mg/L、白糖22g/L；該營養(yǎng)液Ⅰ的pH值為5.5；
支持物Ⅰ為珍珠巖和瓊脂，珍珠巖在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為65g/L，瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為3g/L；
激素為IBA，該激素在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為0.5mg/L。
本實施例中使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法包括以下步驟：
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗；該增殖培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅱ、支持物Ⅱ及激素，其中，營養(yǎng)液Ⅱ采用蒸餾水配制，該營養(yǎng)液Ⅱ為WPM基本培養(yǎng)基，其中白糖含量30g/L；支持物Ⅱ為瓊脂，該瓊脂在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為8g/L；激素為ZT，該激素在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為1.0mg/L；pH 5.5；培養(yǎng)條件為控制溫度為25～27℃，光照強度為2000～2300Lx，光照時間為14h/d；
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
按照營養(yǎng)液Ⅰ的組分配比配制營養(yǎng)液Ⅰ，向營養(yǎng)液Ⅰ中加入組分量的瓊脂及激素IBA，然后用NaOH或HCl溶液將營養(yǎng)液Ⅰ的pH值調(diào)節(jié)至5.5，每瓶培養(yǎng)基中加入2.2g珍珠巖，將營養(yǎng)液Ⅰ分瓶灌裝得到培養(yǎng)基，完畢后在壓力為1.05kg/cm2、溫度121℃下進行滅菌20分鐘處理；
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，控制溫度為23～25℃，光照強度為2400～2500Lx，光照時間為13h/d；
采用上述培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，培植藍莓組培苗30d的生根率為91％。
對比例：
本對比例的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基包括1/2WPM基本培養(yǎng)基，其中白糖含量為20g/L、瓊脂7g/L、激素IBA0.2mg/L，pH 5.2。
本對比例中使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法包括以下步驟：
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗；該增殖培養(yǎng)基組分為WPM基本培養(yǎng)基，其中白糖30g/L、瓊脂7g/L，激素ZT 0.5mg/L，pH 5.2；培養(yǎng)條件為控制溫度為23～25℃，光照強度為2300～2500Lx，光照時間為12h/d；
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
培養(yǎng)基組分為1/2WPM基本培養(yǎng)基，其中白糖20g/L、瓊脂7g/L、激素IBA0.2mg/L；用NaOH或HCl溶液將培養(yǎng)基溶液的pH值調(diào)節(jié)至5.2，分瓶灌裝得到培養(yǎng)基，完畢后在壓力為1.05kg/cm2、溫度121℃下進行滅菌20分鐘處理；
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，控制溫度為24～26℃，光照強度為2000～2200Lx，光照時間為12h/d。
采用上述培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，培植藍莓組培苗30d的生根率為20％左右。
通過對比本發(fā)明實施例與對比例的培養(yǎng)結果可以看出，本實施例的培養(yǎng)基相較于現(xiàn)有技術而言，對藍莓組培苗生根的針對性強、適應性好，培植藍莓組培苗的生根率高。