本發(fā)明涉及一種藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基及使用該培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法。
背景技術:
藍莓營養(yǎng)價值極高,富含多種維生素(例如VA、VB、VC、VE等)以及各種礦質元素(例如K、Fe、Zn、Ca等)、蛋白質、食用纖維、抗氧化劑、細菌生長抑制劑、鞣花酸、鞣花單寧、葉酸、花色素苷、類黃酮等化合物,具有提高免疫力、明目抗癌、改善循環(huán)、軟化血管、延緩神經(jīng)老化、緩解眼部疲勞、防衰抗突變等獨特功效,被譽為“21
世紀功能性保健漿果”和“水果皇后”,并被國際糧農(nóng)組織列為人類五大健康食品之一。伴隨著人們對其營養(yǎng)保健功效認識的不斷加深,藍莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速,苗木需求量迅速擴大。組織培養(yǎng)具有高效和保存親本優(yōu)良性狀等優(yōu)點,適合藍莓優(yōu)良品種規(guī)模繁育,近年來藍莓組培育苗技術有了不少的進展,但現(xiàn)有報道文獻中,藍莓組培多采用瓶外生根法,不僅存在生根率較低,生根時間長等問題,也影響了育苗效率。
因此,對于目前藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法,有待于做進一步的改進。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明所要解決的技術問題是針對現(xiàn)有技術的現(xiàn)狀,提供一種針對性強、適用性好的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基能有效提高藍莓的生根率、縮短生根時間。
本發(fā)明所要解決的另一個技術問題是針對現(xiàn)有技術的現(xiàn)狀,提供一種使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法,該方法生根時間短、生根率高。
本發(fā)明解決上述技術問題所采用的技術方案為:一種藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基,其特征在于:包括營養(yǎng)液Ⅰ、支持物Ⅰ及激素,其中,所述的營養(yǎng)液Ⅰ采用蒸餾水配制,該營養(yǎng)液Ⅰ包含以下組分及含量:
(NH4)2SO4 375~385mg/L、K2SO4 445~455mg/L、KH2PO4 165~175mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 145~155mg/L、MgSO4.7H2O 175~185mg/L、FeSO4·7H2O 27~28mg/L、EDTA·Na2 37~38mg/L、ZnSO4·7H2O 4~4.5mg/L、MnSO4·H2O 8~9mg/L、CuSO4.5H2O 0.05~0.15mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.05~0.1mg/L、H3BO3 6~6.5mg/L、VB10.5~1.5mg/L、VB6 0.2~0.6mg/L、VC0.1~0.3mg/L、白糖18~22g/L;
所述的支持物Ⅰ為珍珠巖和瓊脂,所述珍珠巖在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為55~65g/L,所述瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為3~4g/L;
所述的激素為IBA,該激素在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為0.05~0.5mg/L。
在上述方案中,所述營養(yǎng)液Ⅰ的pH值為5.2~5.5。
作為優(yōu)選,所述營養(yǎng)液Ⅰ包含的組分及含量為(NH4)2SO4 380mg/L、K2SO4 450mg/L、KH2PO4 170mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 150mg/L、MgSO4.7H2O 180mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L、EDTA·Na2 37.3mg/L、ZnSO4·7H2O 4.3mg/L、MnSO4·H2O 8.5mg/L、CuSO4.5H2O 0.1mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.1mg/L、H3BO3 6.2mg/L、VB11.0mg/L、VB6 0.5mg/L、VC0.2mg/L、白糖20g/L。
優(yōu)選地,所述珍珠巖在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為60g/L,所述瓊脂在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為3.5g/L。
一種使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法,其特征在于包括以下步驟:
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗;
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
按照營養(yǎng)液Ⅰ的組分配比配制營養(yǎng)液Ⅰ,向營養(yǎng)液Ⅰ中加入組分量的瓊脂及激素IBA,然后用NaOH或HCl溶液將營養(yǎng)液Ⅰ的pH值調(diào)節(jié)至5.2~5.5,每瓶培養(yǎng)基中加入1.8~2.2g珍珠巖,將營養(yǎng)液Ⅰ分瓶灌裝得到培養(yǎng)基,完畢后進行滅菌處理;
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng),控制溫度為23~27℃,光照強度為2000~2500Lx,光照時間為12~14h/d。
在上述方案中,所述增殖培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅱ、支持物Ⅱ及激素,其中,所述的營養(yǎng)液Ⅱ采用蒸餾水配制,該營養(yǎng)液Ⅱ為WPM基本培養(yǎng)基,其中白糖30g/L;
所述的支持物Ⅱ為瓊脂,該瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為6~8g/L;
所述的激素為ZT,該激素在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為0.2~1.0mg/L。
優(yōu)選地,所述營養(yǎng)液Ⅱ中的白糖含量30g/L;所述瓊脂在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為7g/L;所述激素ZT在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為0.6mg/L。
與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明的優(yōu)點在于:本發(fā)明的培養(yǎng)基合理控制了氨態(tài)氮與硝態(tài)氮比例,有利于藍莓組培苗健壯生長,且該培養(yǎng)基中配制的低氮高磷和硼組合,尤為適合藍莓組培苗生根的要求,有利于藍莓的根系生長,而VC的添加可有效防褐化、促生根,從而提高了藍莓的生根率;另外,本發(fā)明采用瓊脂及珍珠巖作為培養(yǎng)基支持物,通透性好,進一步為藍莓組培苗生根提供了較好的條件;本發(fā)明的培養(yǎng)方法針對性強、適應性好,培植藍莓組培苗30d的生根率可達到90%以上,遠遠高于現(xiàn)有技術相同時間的生根率。
具體實施方式
以下結合實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。
實施例1:
本實施例的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅰ、支持物Ⅰ及激素,其中,營養(yǎng)液Ⅰ采用蒸餾水配制,該營養(yǎng)液Ⅰ包含以下組分及含量:
(NH4)2SO4 380mg/L、K2SO4 450mg/L、KH2PO4 170mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 150mg/L、MgSO4.7H2O 180mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L、EDTA·Na2 37.3mg/L、ZnSO4·7H2O 4.3mg/L、MnSO4·H2O 8.5mg/L、CuSO4.5H2O 0.1mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.1mg/L、H3BO3 6.2mg/L、VB11.0mg/L、VB6 0.5mg/L、VC0.2mg/L、白糖20g/L;該營養(yǎng)液Ⅰ的pH值為5.2;
支持物Ⅰ為珍珠巖和瓊脂,珍珠巖在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為60g/L,瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為3.5g/L;
激素為IBA,該激素在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為0.2mg/L。
本實施例中使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法包括以下步驟:
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗;該增殖培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅱ、支持物Ⅱ及激素,其中,營養(yǎng)液Ⅱ采用蒸餾水配制,該營養(yǎng)液Ⅱ為WPM基本培養(yǎng)基,其中白糖30g/L;支持物Ⅱ為瓊脂,該瓊脂在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為7g/L;激素為ZT,該激素在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為0.5mg/L;營養(yǎng)液Ⅱ為pH 5.2;培養(yǎng)條件為控制溫度為23~25℃,光照強度為2300~2500Lx,光照時間為12h/d;
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
按照營養(yǎng)液Ⅰ的組分配比配制營養(yǎng)液Ⅰ,向營養(yǎng)液Ⅰ中加入組分量的瓊脂及激素IBA,然后用NaOH或HCl溶液將營養(yǎng)液Ⅰ的pH值調(diào)節(jié)至5.2,每瓶培養(yǎng)基中加入2g珍珠巖,將營養(yǎng)液Ⅰ分瓶灌裝得到培養(yǎng)基,完畢后在壓力為1.05kg/cm2、溫度121℃下進行滅菌20分鐘處理;
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng),控制溫度為24~26℃,光照強度為2000~2200Lx,光照時間為12h/d。
采用上述培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法,培植藍莓組培苗30d的生根率為93%。
實施例2:
本實施例的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅰ、支持物Ⅰ及激素,其中,營養(yǎng)液Ⅰ采用蒸餾水配制,該營養(yǎng)液Ⅰ包含以下組分及含量:
(NH4)2SO4 375mg/L、K2SO4 445mg/L、KH2PO4 165mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 145mg/L、MgSO4.7H2O 175mg/L、FeSO4·7H2O 27mg/L、EDTA·Na2 37mg/L、ZnSO4·7H2O 4mg/L、MnSO4·H2O 8mg/L、CuSO4.5H2O 0.05mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.05mg/L、H3BO3 6mg/L、VB10.5mg/L、VB60.2mg/L、VC0.1mg/L、白糖20g/L;該營養(yǎng)液Ⅰ的pH值為5.3;
支持物Ⅰ為珍珠巖和瓊脂,珍珠巖在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為55g/L,瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為4g/L;
激素為IBA,該激素在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為0.05mg/L。
本實施例中使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法包括以下步驟:
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗;該增殖培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅱ、支持物Ⅱ及激素,其中,營養(yǎng)液Ⅱ采用蒸餾水配制,該營養(yǎng)液Ⅱ為WPM基本培養(yǎng)基;支持物Ⅱ為瓊脂,該瓊脂在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為6g/L;激素為ZT,該激素在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為0.2mg/L;pH 5.3。培養(yǎng)條件為控制溫度為22~25℃,光照強度為2000~2300Lx,光照時間為13h/d;
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
按照營養(yǎng)液Ⅰ的組分配比配制營養(yǎng)液Ⅰ,向營養(yǎng)液Ⅰ中加入組分量的瓊脂及激素IBA,然后用NaOH或HCl溶液將營養(yǎng)液Ⅰ的pH值調(diào)節(jié)至5.3,每瓶培養(yǎng)基中加入1.8g珍珠巖,將營養(yǎng)液Ⅰ分瓶灌裝得到培養(yǎng)基,完畢后在壓力為1.05kg/cm2、溫度121℃下進行滅菌20分鐘處理;
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng),控制溫度為22~25℃,光照強度為2000~2200Lx,光照時間為12h/d。
采用上述培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法,培植藍莓組培苗30d的生根率為90%。
實施例3:
本實施例的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅰ、支持物Ⅰ及激素,其中,營養(yǎng)液Ⅰ采用蒸餾水配制,該營養(yǎng)液Ⅰ包含以下組分及含量:
(NH4)2SO4 385mg/L、K2SO4 455mg/L、KH2PO4 175mg/L、Ca(NO3)2.4H2O 155mg/L、MgSO4.7H2O185mg/L、FeSO4·7H2O28mg/L、EDTA·Na238mg/L、ZnSO4·7H2O 4.5mg/L、MnSO4·H2O9mg/L、CuSO4.5H2O 0.15mg/L、Na2MoO4.2H2O 0.1mg/L、H3BO3 6.5mg/L、VB11.5mg/L、VB60.6mg/L、VC0.3mg/L、白糖22g/L;該營養(yǎng)液Ⅰ的pH值為5.5;
支持物Ⅰ為珍珠巖和瓊脂,珍珠巖在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為65g/L,瓊脂在上述營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為3g/L;
激素為IBA,該激素在營養(yǎng)液Ⅰ中的含量為0.5mg/L。
本實施例中使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法包括以下步驟:
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗;該增殖培養(yǎng)基包括營養(yǎng)液Ⅱ、支持物Ⅱ及激素,其中,營養(yǎng)液Ⅱ采用蒸餾水配制,該營養(yǎng)液Ⅱ為WPM基本培養(yǎng)基,其中白糖含量30g/L;支持物Ⅱ為瓊脂,該瓊脂在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為8g/L;激素為ZT,該激素在營養(yǎng)液Ⅱ中的含量為1.0mg/L;pH 5.5;培養(yǎng)條件為控制溫度為25~27℃,光照強度為2000~2300Lx,光照時間為14h/d;
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
按照營養(yǎng)液Ⅰ的組分配比配制營養(yǎng)液Ⅰ,向營養(yǎng)液Ⅰ中加入組分量的瓊脂及激素IBA,然后用NaOH或HCl溶液將營養(yǎng)液Ⅰ的pH值調(diào)節(jié)至5.5,每瓶培養(yǎng)基中加入2.2g珍珠巖,將營養(yǎng)液Ⅰ分瓶灌裝得到培養(yǎng)基,完畢后在壓力為1.05kg/cm2、溫度121℃下進行滅菌20分鐘處理;
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng),控制溫度為23~25℃,光照強度為2400~2500Lx,光照時間為13h/d;
采用上述培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法,培植藍莓組培苗30d的生根率為91%。
對比例:
本對比例的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)基包括1/2WPM基本培養(yǎng)基,其中白糖含量為20g/L、瓊脂7g/L、激素IBA0.2mg/L,pH 5.2。
本對比例中使用上述培養(yǎng)基的藍莓組培苗生根的培養(yǎng)方法包括以下步驟:
(1)組培苗的培植
在增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)藍莓組培苗;該增殖培養(yǎng)基組分為WPM基本培養(yǎng)基,其中白糖30g/L、瓊脂7g/L,激素ZT 0.5mg/L,pH 5.2;培養(yǎng)條件為控制溫度為23~25℃,光照強度為2300~2500Lx,光照時間為12h/d;
(2)生根培養(yǎng)基的配制及分瓶
培養(yǎng)基組分為1/2WPM基本培養(yǎng)基,其中白糖20g/L、瓊脂7g/L、激素IBA0.2mg/L;用NaOH或HCl溶液將培養(yǎng)基溶液的pH值調(diào)節(jié)至5.2,分瓶灌裝得到培養(yǎng)基,完畢后在壓力為1.05kg/cm2、溫度121℃下進行滅菌20分鐘處理;
(3)生根培養(yǎng)
將步驟(1)中增殖培養(yǎng)基中長度大于3cm的組培苗接種于步驟(2)滅菌處理后的培養(yǎng)基中培養(yǎng),控制溫度為24~26℃,光照強度為2000~2200Lx,光照時間為12h/d。
采用上述培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法,培植藍莓組培苗30d的生根率為20%左右。
通過對比本發(fā)明實施例與對比例的培養(yǎng)結果可以看出,本實施例的培養(yǎng)基相較于現(xiàn)有技術而言,對藍莓組培苗生根的針對性強、適應性好,培植藍莓組培苗的生根率高。