專利名稱：印楝素干粉工業(yè)大量提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種殺蟲劑中應(yīng)用的印楝素提取工藝，尤其是工業(yè)化大量提取印楝素干 粉的方法。
背景技術(shù)：
印楝(Azadirachta indica A. Juss)系楝科楝屬喬木，廣泛種植于熱帶、亞熱帶地 區(qū)。原產(chǎn)于緬甸和印度，在70多個(gè)國(guó)家有分布和種植，以印度等亞洲國(guó)家產(chǎn)量最大。 印楝的果實(shí)、種子、種核、枝條、樹(shù)葉、樹(shù)皮及樹(shù)液中都含有活性物質(zhì)，但以種子尤 甚。迄今，印楝中已發(fā)現(xiàn)了 IOO多種化合物，至少有70種化合物具有生物活性，它們 為二萜類、三萜類、戊三萜類和非萜類化合物。主要為印度苦楝子素、苦楝三醇和印 楝素等，這些提取物對(duì)昆蟲有拒食、干擾產(chǎn)卵、干擾昆蟲變異，使其無(wú)法蛻變?yōu)槌上x、 驅(qū)避幼蟲及抑制其生長(zhǎng)的作用而達(dá)到殺蟲目的。印楝素(Azadirachtin)是一類從印 楝中分離出來(lái)活性最強(qiáng)的化合物，它屬于四環(huán)三萜類。印楝素可以分為印楝素-A， -B， -C， -D， -E， -F， -G， -I共8種，其中，印楝素-A就是通常所指的印楝素。據(jù)文獻(xiàn)報(bào) 道，印楝種子中印楝素的含量是0.3% 0.4%,高的可達(dá)到0.6%。
研究表明，從印楝種子中提取的印楝素等成分是目前世界公認(rèn)的廣譜、高效、低 毒、易降解、無(wú)殘留的殺蟲劑且沒(méi)有抗藥性，對(duì)幾乎所有植物害蟲都具有驅(qū)殺效果。 試驗(yàn)證明，印楝對(duì)防治10目400多種農(nóng)林、倉(cāng)儲(chǔ)和衛(wèi)生害蟲，特別是對(duì)鱗翅目、鞘翅 目等害蟲有特效，而對(duì)人畜和周圍環(huán)境無(wú)任何污染。
印楝素提取按其工藝方法來(lái)分主要有如下三類 一、溶劑萃取；二、超臨界萃?。蝗?、 微波萃取。目前這幾種萃取方法以溶劑萃取研究的最多，也較為成熟，后兩種方法剛剛起溶劑法提取印楝素主要是用水與甲醇作為分液相，用乙酸乙酯作為萃取相，脫脂用石 油醚或正己垸，而且添加用量是萃取液的20倍左右， 一次性提取純度低于20%，收率 60-90%。這種工藝主要存在如下缺點(diǎn)
1、 用水和甲醇作為分液相，其中的氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸、多糖、醇類、醛類、生 物堿、有機(jī)酸等多種有機(jī)物質(zhì)難以得到分離，影響純度。不僅穩(wěn)定性差，成分復(fù)雜污 染環(huán)境，而且難以作成粉劑、干懸劑、片劑等先進(jìn)劑型。
2、 用層洗柱分離印楝素干粉，經(jīng)過(guò)正相柱和反相柱反復(fù)洗脫，可提高純度，但是， 由于沖洗溶劑不斷變換，工藝煩瑣復(fù)雜，分離速度十分緩慢，溶劑用量大。
3、 單一溶劑作為萃取相和反萃取相，溶劑用量過(guò)大，需要大量溶劑和巨型設(shè)備，在 溶劑回收上投資和能耗加大，成本上升！
4、 印楝素提取高含量樣品目前主要集中在試驗(yàn)室獲得，對(duì)真正應(yīng)用于生產(chǎn)進(jìn)行大規(guī) 模操作沒(méi)有成熟報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，該方法簡(jiǎn)單，收率和純度髙， 節(jié)省溶劑，設(shè)備要求不高，便于大規(guī)模生產(chǎn)。
本發(fā)明的技術(shù)方案是該印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，其步驟是
1) 、配制質(zhì)量百分比濃度為1-25%硫酸銨溶液01，調(diào)節(jié)pH值5.0-5.5，加入甲醇混合， 制成混合溶液M1，備用；其中，甲醇的加入量按體積比計(jì)，Dl:甲醇為l: 2~1: 9;
2) 、將印楝種籽去皮，種仁榨油，將去油后的餅粕粉碎至40-60篩目，加入質(zhì)量5倍 于餅粕的M1，攪拌，壓濾除去糟渣，濾液中加入3倍于濾液體積的萃取相M2，攪拌，靜 置；所述的萃取相M2由乙酸乙酯和二氯甲烷按體積比4: 1 9: 1配制；
3) 、待靜置完全分層后，去除下部雜質(zhì)部分，留上層油相溶液；
4) 、將收集的上層油相溶液，在40-55'C下減壓蒸發(fā)濃縮，當(dāng)濃縮液體積為所收集的 油相體積的1/5-1/10時(shí)，停止?jié)饪s；
5) 、在濃縮液中加入5倍于濃縮液體積的反萃取相M3，邊加邊攪拌；所述的反萃取相M3由正己垸和石油醚按體積比5: 1 9: l配制；
6) 、 M3加完后，出現(xiàn)絮狀沉淀，離心去除溶劑，收集沉淀物；
7) 、將沉淀物置于40-45。C真空干燥器中干燥，即可獲得印楝素干粉物質(zhì)。
本發(fā)明進(jìn)一步的方案是，該印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，步驟為
1) 、配制質(zhì)量百分比濃度為2(m硫酸銨溶液Dl，調(diào)節(jié)pH值5.0-5.5，加入甲醇混合，
制成混合溶液Ml,備用；其中，甲醇的加入量按體積比計(jì)，Dl:甲醇=1: 2;
2) 、將印楝種籽去皮，種仁榨油，將去油后的餅粕粉碎至40-60篩目，加入質(zhì)量5倍 于餅粕的Ml,攪拌2小時(shí)后，壓濾除去糟渣，濾液中加入3倍于濾液體積的萃取相M2，
攪拌45分鐘，靜置；所述的萃取相M2由乙酸乙酯和二氯甲烷按體積比9: l配制；
3) 、待靜置完全分層后，去除下部雜質(zhì)部分，留上層油相溶液；
4) 、將收集的上層油相溶液，在40-55'C下減壓蒸發(fā)濃縮，當(dāng)濃縮液體積為所收集的 油相體積的1/5-1/10時(shí)，停止?jié)饪s；
5) 、在濃縮液中加入5倍于濃縮液體積的反萃取相M3，邊加邊攪拌；所述的反萃取相 M3由正己烷和石油醚按體積比8: l配制；
6) 、 M3加完后，出現(xiàn)絮狀沉淀，離心去除溶劑，收集沉淀物；
7) 、將沉淀物置于40-45'C真空干燥器中干燥，即可獲得印楝素干粉物質(zhì)。 本發(fā)明的有益效果是本方法溶劑使用量?jī)H為文獻(xiàn)報(bào)道用量的1/4,節(jié)省溶劑； 一次
提取印楝素收率82%,重復(fù)1次提取，收率96%以上，純度達(dá)23-26%,工業(yè)化生產(chǎn)收率和 純度高，方法簡(jiǎn)單；而且氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸、多糖、醇類、醛類、生物堿、有機(jī)酸 等多種有機(jī)物質(zhì)得到有效分離，穩(wěn)定性提高，可作成粉劑、干懸劑、片劑等先進(jìn)劑型； 設(shè)備要求不高，便于大規(guī)模生產(chǎn)。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例一 印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，步驟是
1)、配制質(zhì)量百分比濃度為20%硫酸銨溶液01，調(diào)節(jié)pH值5.0，加入甲醇混合，制成混合溶液M1 (分液相)，備用；其中，甲醇的加入量按體積比計(jì)，Dl:甲醇=1: 2;
2) 、將印楝種籽去皮，種仁榨油，將去油后的餅粕粉碎至60篩目，加入質(zhì)量5倍于 餅粕的M1，攪拌2小時(shí)后，壓濾除去糟渣，濾液中加入3倍于濾液體積的萃取相M2，攪
拌45分鐘，靜置；所述的M2由乙酸乙酯和二氯甲垸按體積比9: l配制；
3) 、待靜置完全分層后，去除下部雜質(zhì)部分，留上層油相溶液；
4) 、將收集的上層油相溶液，在55r下減壓蒸發(fā)濃縮，當(dāng)濃縮液體積為所收集的油相
體積的1/10時(shí)，停止?jié)饪s；
5) 、在濃縮液中加入5倍于濃縮液體積的反萃取相M3，邊加邊攪拌；所述的反萃取相
M3由正己烷和石油醚按體積比8: 1配制；
6) 、 M3加完后，出現(xiàn)絮狀沉淀，離心去除溶劑，收集沉淀物；
7) 、將沉淀物置于45'C真空干燥器中干燥，即可獲得印楝素干粉物質(zhì)。
8) 、所得印楝素干粉物質(zhì)印楝素A、 B總含量大于2(m。印楝素A、 B均為已知成分。
9) 、根據(jù)需要可制成干懸劑或片劑等先進(jìn)劑型。
印楝素A: Azadirachtin A， CIPAC代號(hào):11141-17-6，相對(duì)分子量720.72; 印楝素B: Azadirachtin B， CIPAC代號(hào):95507-03-2，相對(duì)分子量662.69。 實(shí)施例二 印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，步驟是
1)、配制質(zhì)量百分比濃度為25M硫酸銨溶液D1，調(diào)節(jié)pH值5.5，加入甲醇混合，制成 混合溶液M1 (分液相)，備用；其中，甲醇的加入量按體積比計(jì)，Dl:甲醇=1: 9;
2) 、將印楝種籽去皮，種仁搾油，將去油后的餅粕粉碎至40篩目，加入質(zhì)量5倍于 餅粕的Ml，攪拌1. 5小時(shí)后，壓濾除去糟渣，濾液中加入3倍于濾液體積的萃取相M2，
攪拌50分鐘，靜置；所述的M2由乙酸乙酯和二氯甲垸按體積比4: l配制；
3) 、待靜置完全分層后，去除下部雜質(zhì)部分，留上層油相溶液；
4) 、將收集的上層油相溶液，在50'C下減壓蒸發(fā)濃縮，當(dāng)濃縮液體積為所收集的油相 體積的1/5時(shí)，停止?jié)饪s；5) 、在濃縮液中加入5倍于濃縮液體積的反萃取相M3，邊加邊攪拌；所述的反萃取相 M3由正己烷和石油醚按體積比5: 1配制；
6) 、 M3加完后，出現(xiàn)絮狀沉淀，離心去除溶劑，收集沉淀物；
7) 、將沉淀物置于4(TC真空干燥器中干燥，即可獲得印楝素干粉物質(zhì)。
8) 、所得印楝素干粉物質(zhì)印楝素A、 B總含量大于2(m。
9) 、根據(jù)需要可制成干懸劑或片劑等先進(jìn)劑型。 實(shí)施例三
印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，步驟是
1)、配制質(zhì)量百分比濃度為W硫酸銨溶液D1，調(diào)節(jié)pH值5.3，加入甲醇混合，制成混
合溶液M1 (分液相)，備用；其中，甲醇的加入量按體積比計(jì)，Dl:甲醇=1: 7;
2) 、將印楝種籽去皮，種仁榨油，將去油后的餅粕粉碎至40篩目，加入質(zhì)量5倍于 餅粕的M1，攪拌1小時(shí)后，壓濾除去糟渣，濾液中加入3倍于濾液體積的萃取相M2，攪
拌60分鐘，靜置；所述的M2由乙酸乙酯和二氯甲烷按體積比8: l配制；
3) 、待靜置完全分層后，去除下部雜質(zhì)部分，留上層油相溶液；
4) 、將收集的上層油相溶液，在4(TC下減壓蒸發(fā)濃縮，當(dāng)濃縮液體積為所收集的油相 體積的1/10時(shí)，停止?jié)饪s；
5) 、在濃縮液中加入5倍于濃縮液體積的反萃取相M3，邊加邊攪拌；所述的反萃取相
M3由正己烷和石油醚按體積比9: 1配制；
6) 、 M3加完后，出現(xiàn)絮狀沉淀，離心去除溶劑，收集沉淀物；
7) 、將沉淀物置于40'C真空干燥器中干燥，即可獲得印楝素干粉物質(zhì)。
8) 、所得印楝素干粉物質(zhì)印楝素A、 B總含量大于2(m。
9) 、根據(jù)需要可制成干懸劑或片劑等先進(jìn)劑型。 實(shí)施例四
該印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，其步驟是
1)、配制質(zhì)量百分比濃度為10%硫酸銨溶液01，調(diào)節(jié)pH值5. 1,加入甲醇混合，制成混合溶液M1，備用；其中，甲醇的加入量按體積比計(jì)，Dl:甲醇為l: 3;
2) 、將印楝種籽去皮，種仁榨油，將去油后的餅粕粉碎至50篩目，加入質(zhì)量5倍于
餅粕的M1，攪拌，壓濾除去糟渣，濾液中加入3倍于濾液體積的萃取相M2，攪拌，靜置；
所述的萃取相M2由乙酸乙酯和二氯甲烷按體積比6: 1配制；
3) 、待靜置完全分層后，去除下部雜質(zhì)部分，留上層油相溶液；
4) 、將收集的上層油相溶液，在55'C下減壓蒸發(fā)濃縮，當(dāng)濃縮液體積為所收集的油相 體積的1/7時(shí)，停止?jié)饪s；
5) 、在濃縮液中加入5倍于濃縮液體積的反萃取相M3，邊加邊攪拌；所述的反萃取相
M3由正己烷和石油醚按體積比7: 1配制；
6) 、 M3加完后，出現(xiàn)絮狀沉淀，離心去除溶劑，收集沉淀物；
7) 、將沉淀物置于45'C真空干燥器中干燥，即可獲得印楝素干粉物質(zhì)。
9
權(quán)利要求
1、印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，其步驟是1)、配制質(zhì)量百分比濃度為1-25％硫酸銨溶液D1，調(diào)節(jié)pH值5.0-5.5，加入甲醇混合，制成混合溶液M1，備用；其中，甲醇的加入量按體積比計(jì)，D1甲醇為1∶2～1∶9；2)、將印楝種籽去皮，種仁榨油，將去油后的餅粕粉碎至40-60篩目，加入質(zhì)量5倍于餅粕的M1，攪拌，壓濾除去糟渣，濾液中加入3倍于濾液體積的萃取相M2，攪拌，靜置；所述的萃取相M2由乙酸乙酯和二氯甲烷按體積比4∶1～9∶1配制；3)、待靜置完全分層后，去除下部雜質(zhì)部分，留上層油相溶液；4)、將收集的上層油相溶液，在40-55℃下減壓蒸發(fā)濃縮，當(dāng)濃縮液體積為所收集的油相體積的1/5-1/10時(shí)，停止?jié)饪s；5)、在濃縮液中加入5倍于濃縮液體積的反萃取相M3，邊加邊攪拌；所述的反萃取相M3由正己烷和石油醚按體積比5∶1～9∶1配制；6)、M3加完后，出現(xiàn)絮狀沉淀，離心去除溶劑，收集沉淀物；7)、將沉淀物置于40-45℃真空干燥器中干燥，即可獲得印楝素干粉物質(zhì)。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，其步驟是1) 、配制質(zhì)量百分比濃度為2(m硫酸銨溶液Dl，調(diào)節(jié)pH值5.0-5.5，加入甲醇混合，制成混合溶液M1，備用；其中，甲醇的加入量按體積比計(jì)，Dl:甲醇=1: 2;2) 、將印楝種籽去皮，種仁榨油，將去油后的餅粕粉碎至40-60篩目，加入質(zhì)量5倍 于餅粕的M1，攪拌2小時(shí)后，壓濾除去糟渣，濾液中加入3倍于濾液體積的萃取相M2， 攪拌45分鐘，靜置；所述的萃取相M2由乙酸乙酯和二氯甲烷按體積比9: l配制；3) 、待靜置完全分層后，去除下部雜質(zhì)部分，留上層油相溶液；4) 、將收集的上層油相溶液，在40-55'C下減壓蒸發(fā)濃縮，當(dāng)濃縮液體積為所收集的 油相體積的1/5-1/10時(shí)，停止?jié)饪s；5) 、在濃縮液中加入5倍于濃縮液體積的反萃取相M3，邊加邊攪拌；所述的反萃取相 M3由正己烷和石油醚按體積比8: 1配制；6) 、 M3加完后，出現(xiàn)絮狀沉淀，離心去除溶劑，收集沉淀物；7) 、將沉淀物置于40-45'C真空干燥器中干燥，即可獲得印楝素干粉物質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種印楝素干粉工業(yè)大量提取方法，用于解決作為殺蟲劑原料的印楝素干粉工業(yè)大量提取的問(wèn)題。它包括印楝甲醇粗提物；用硫酸銨溶液配制分相液、由乙酸乙酯和二氯甲烷配制萃取液；除去凝結(jié)油渣與下層分液相；油相收集；薄膜蒸發(fā)器冷凝器濃縮；由正己烷和石油醚反向萃取與脫脂；有機(jī)溶劑收集；目標(biāo)產(chǎn)物離心；干燥粉碎等步驟。本方法節(jié)省溶劑；一次提取印楝素收率82％，重復(fù)1次提取，收率96％以上，純度達(dá)23-26％，工業(yè)化生產(chǎn)收率和純度高，方法簡(jiǎn)單；而且氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸、多糖、醇類、醛類、生物堿、有機(jī)酸等多種有機(jī)物質(zhì)得到有效分離，穩(wěn)定性提高，可作成粉劑、干懸劑、片劑等先進(jìn)劑型；設(shè)備要求不高，便于大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A01N43/90GK101440099SQ20081024966
公開(kāi)日2009年5月27日 申請(qǐng)日期2008年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月31日
發(fā)明者劉幸紅, 張淑靜, 牛贍光, 王清海, 齊慶俊 申請(qǐng)人:牛贍光;齊慶俊