專利名稱::一種含γ-聚谷氨酸的肥料添加劑的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明涉及一種有機肥料添加劑的生產(chǎn)方法,具體地說,涉及一種以微生物對工農(nóng)業(yè)廢物料等廉價材料進行固體發(fā)酵生產(chǎn)含聚谷氨酸的肥料添加劑的方法。
背景技術(shù):
:味精發(fā)酵廢液、蘇氨酸等氨基酸發(fā)酵廢液是由味精廠、食品廠排出的生產(chǎn)廢液,這些廢液由于具有高COD、BOD、氨氮、有機物等,成為嚴重的環(huán)境污染源。利用這些廢液作為制備有機肥料是處理這些廢液的一個重要途徑。目前利用味精發(fā)酵廢液制備有機肥料的方法一般是將味精發(fā)酵廢液與一些適當?shù)呐淞现苯踊炫?、固化、造粒而成,如CN1442396公開的"味精副產(chǎn)物生產(chǎn)的氨基酸有機無機肥及其生產(chǎn)方法",該方法是將味精尾液與菌泥、化肥混合、脫水、造粒而制成有機無機肥料;CN101045657A公開的"利用味精廢液生產(chǎn)的無公害有機肥料及其制備方法",是將味精廢液與木質(zhì)素、風化煤、磷酸銨、氯化鉀和微量元素混配、固化、造粒而制成有機肥料。直接添加味精發(fā)酵廢液、蘇氨酸等氨基酸發(fā)酵廢液到相關(guān)配料中以制作有機肥,由于這些廢液中含有大量的銨鹽,因此可以也提高肥效,但如同直接使用尿素或硫酸鉸等氮肥一樣,氨基酸廢液中的銨鹽在施肥過程中約有80%的銨轉(zhuǎn)化為氣態(tài)氨釋放至U大氣中(Miflin,B.J,,andP.J.Lea.1982.Ammoniaassimilationandaminoacidmetabolism,p.5-64./"D.Boulter,andB.Parthier(ed.),Nucleicacidsandproteinsinplants,vol.1.Springer-Verlag,Berlin,Germany.),豐直物能夠直接吸收的氮素營養(yǎng)只有肥料中總含氮量的56%(w/w)(Syrett,P.J.1988.Uptakeandutilizationofnitrogencompounds,p.23-39.L.丄Rogers,and丄R.Gallon(ed.),Biochemistryofthealgaeandcyanobacteria.OxfordSciencePublicationsClarendonPress,Oxford,UnitedKingdom,),另夕卜,氮月巴!皮土i襄吸收后,由于土壤中微生物的作用,有部分銨離子被轉(zhuǎn)化成硝酸鹽,硝酸鹽能溶解于土壤的水中,其中約有40%(w/w)的硝酸鹽隨土壤的水流失到地下水系或其它水源中(Birrer,GA.,A.M.CromwickjandR.A.Gross.1994.Tf-Poly(glutamicacid)formationby5ad/,itf"c/)ew(/bnMhATCC9945a:physiologicalandbiochemicalstudies.Int.J.Biol.Macromol.16:265-275),從而造成月巴料中氮素營養(yǎng)的下降,使其應(yīng)用效果受到影響。
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明人在進行利用枯草芽孢桿菌(Ba"7/MPGA-7微生物菌株制備?聚谷氨酸的研究中,發(fā)現(xiàn)在味精發(fā)酵廢液、蘇氨酸發(fā)酵廢液等高濃度有機廢水及相關(guān)配料中加入枯草芽孢桿菌(5acz7/wPGA-7微生物菌株后,菌株能將上述發(fā)酵物中的銨離子等營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化成Y-聚谷氨酸,同時,Y-聚谷氨酸枯草芽孢桿菌的夾膜的一部分附著在菌體上,成為含有少量的Y-聚谷氨酸和其產(chǎn)生菌的物料,這些物料中的?聚谷氨酸可以通過土壤微生物的作用緩慢降解釋放碳、氮素營養(yǎng),就可以克服以上直接添加氨基酸廢液會造成氮素營養(yǎng)損失的缺點,同時產(chǎn)生的Y-聚谷氨酸由于是一種有網(wǎng)狀碳骨架結(jié)構(gòu)的高分子,還有一定的保水、吸水能力,因而可以作為肥料添加劑應(yīng)用在農(nóng)業(yè)上,從而作出本發(fā)明。因此,本發(fā)明的目的是提出一種利用枯草芽孢桿菌(fiflci""sPGA-7菌株對包括氨基酸有機廢水等工農(nóng)業(yè)廢料進行固體發(fā)酵以生產(chǎn)含Y-聚谷氨酸的肥料添加劑的方法。實現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案如下采用的微生物菌株是經(jīng)選育的Y-聚谷氨酸(Y-PGA)產(chǎn)生菌--枯草芽孢桿菌(5。a7/^rato'fe)PGA-7,該菌株于2006年9月30日保藏于屮國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC),編號為CCTCCM206102。該菌株以下簡稱枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102。中國典型培養(yǎng)物保藏中心的聯(lián)系資料如下電話027-87682319傳真(027)87883833E-mail:cctcc@whu.edu.cn地址武漢武漢大學郵編430072。該菌株的菌學特性和保藏情況均己記載于CN1932007之中。本發(fā)明所提供的含Y-聚谷氨酸的肥料添加劑的生產(chǎn)方法,其特點是用枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102做發(fā)酵菌株,以氨基酸發(fā)酵廢液、豆粕、花生餅粉、麩皮、稻草粉等為主要發(fā)酵基料進行固體發(fā)酵。具體工藝過程如下(1)斜面菌種活化將培養(yǎng)好的保藏斜面種(枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102)劃線于新配制的LB斜面上,LB斜面組成如下蛋白胨812g,酵母膏38g,NaCl9llg,瓊脂1522g,自來水1L,調(diào)pH值至6.87.4,33-38°C培養(yǎng)1224小時,再冷藏于4'C15天。(2)菌種的液休活化將上述斜面上約1on2面積的菌種刮下,接種于液體活化培養(yǎng)基中,液體活化培養(yǎng)基組成如下蛋白胨812g,酵母膏38g,NaCl911g,自來水1L,調(diào)pH值至6.87.4.。液體活化培養(yǎng)基裝于250ml三角瓶中,三角瓶裝量為20ml,于32-36'C往復(fù)式搖床振蕩培養(yǎng)1836小時,搖床轉(zhuǎn)速為80-110r/m,沖程為65-75mm。(3)固體發(fā)酵按0.5-1.5%接種量,取(2)中活化好的液體菌種,接入固體發(fā)酵培養(yǎng)基中,固體發(fā)酵培養(yǎng)基組成按每公斤固體發(fā)酵培養(yǎng)基所含克重g/kg計算為8(M20g氨基酸發(fā)酵廢液、70-110g豆粕、60-100g麩皮、300-400g稻草粉、20-40g葡萄糖或蔗糖,其余成分為水,將水均勻噴曬入上述物體中,攪拌均勻,117-12rC滅菌30分鐘,冷卻至32-4(TC,按三角錐形堆放于已滅菌的恒溫環(huán)境中,于32-40'C,培養(yǎng)120-168h,停止發(fā)酵,發(fā)酵完畢的固體物料即為含聚谷氨酸的肥料添加劑。發(fā)酵完畢的固體物料即含有Y-聚谷氨酸成分和枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102菌體,不必再進行任何提取等后工序,可以直接作為有機肥料的添加劑。通過此方法發(fā)酵完畢后所得的固體物料中,固體發(fā)酵培養(yǎng)基的Y-PGA含量為0.080.26g/kg固體料,枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102活菌體數(shù)為1.0X107cfu/g固體料-1.0X10scfu/g固體料。所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中的氨基酸發(fā)酵廢液可以是味精發(fā)酵廢液或蘇氨酸發(fā)酵廢液,其中,味精發(fā)酵廢液的主要化學成分如下味精發(fā)酵廢液(%,w/v):總氮7.02~7.81%,有效磷0.28~0.36%,總鉀0.34~0.40%,有機質(zhì)7.63~8.03%,水分36~40%,pH值5.56.0。蘇氨酸發(fā)酵廢液(%,w/v):總氮6.90~7.15°/。,有效磷0.17~0.21%,有機質(zhì)9.55~9.95%,水分4450%,pH值5.56.5。固體發(fā)酵培養(yǎng)基中的豆粕是大豆經(jīng)過提取豆油后得到的一種副產(chǎn)品,其主要化學成分如下(%,W/W):蛋白質(zhì)40%48%,賴氨酸2.5%3.0%,色氨酸O.6%0.7%,蛋氨酸O.5%0.7%。固體發(fā)酵培養(yǎng)基中的麩皮是小麥提取面粉后的副產(chǎn)品,麩皮為小麥的外皮,包含胚芽及胚乳兩部分,約占整粒小麥的12.5%。其主要化學成分如下(%,w/w):碳水化合物59.463.4%,粗蛋白質(zhì)13.517.0%,粗脂肪3.04.75%,粗纖維9.512.0%,粗灰分5.07.0%,鈣0.050.14%,磷l.101.50%,水分1115.0%。稻草粉是普通農(nóng)業(yè)上收割水稻后廢棄的稻草打碎后的廢渣粉,其主要化學成分如下(%,粗蛋白質(zhì)4.184.38%,粗脂肪2.172.37%,粗纖維36.5540.05%,粗灰分13,8014.20%,釣0.450.49%,磷O.180.20%,水分3541%。發(fā)酵完畢的固體物料可通過以下方法分析測試Y-PGA含量取發(fā)酵完畢的固體物料50g按l:1(w:w)比例加入清水50mL,充分攪拌均勻后,4000r/m離心30min,取離心后的上清液,先計算好總體積,再計算好測谷氨酸單體的含量;將上清液與6mol/L的鹽酸按l:l(體積比)加入玻璃水解管中,真空封口后于IIO。C水解24h,然后測定水解液中谷氨酸總量;2次測得的谷氨酸之差為離心后上清液的Y-PGA的含量,再折算成發(fā)酵完畢的固體物料的的Y-PGA的含量。上述對谷氨酸的分析方法可以采用氨基酸自動分析儀,或高效液相色譜儀(HPLC),或紙層析方法進行測定。紙層析方法如下取IOPI離心發(fā)酵上清液或它的水解液點樣,層析過夜,用0.5%茚三酮丙酮溶液顯色,65'C顯色10min,剪下斑點用lg/L硫酸銅洗脫液(CuS(X'5&0:75%乙醇=2:38)5mL浸泡20min以上至紙條無色,A隨x二570nm測其OD值,與谷氨酸標準曲線比較算出相應(yīng)含量,再計算發(fā)酵醪液含Y-PGA量。發(fā)酵完畢的固體物料中枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102活菌體數(shù)可按NY/T798-2004中5.3.2規(guī)定的方法進行測定,即中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準——復(fù)合微生物肥料(NY/T798-2004)中5.3.2(有效活菌數(shù)的測定)規(guī)定的方法進行測定。本發(fā)明在最佳固體發(fā)酵工藝條件下,產(chǎn)Y-PGA最高可達0.26g/L,枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102活菌體數(shù)最高含量為1.0X10Vfu/g固體料。同時,肥料添加劑還含有其它成分(%):有機質(zhì)42-46,全N1-7,全P0.2-2,總Ca1-5,總MgO.1-0.7,其余為水。本發(fā)明最大的特點在于用枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102做發(fā)酵菌株,以工農(nóng)業(yè)廢棄物包括味精發(fā)酵廢液、蘇氨酸發(fā)酵廢液、豆粕、花生餅粉、麩皮、稻草粉等為主要發(fā)酵基料進行固體發(fā)酵,將上述物料中的銨離子等營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化成Y-聚谷氨酸,發(fā)酵成本極低,工藝非常簡單,發(fā)酵產(chǎn)物不需再分離提取。發(fā)酵完畢的固體物料由于含有少量的Y-聚谷氨酸和其產(chǎn)生菌,既能提高肥料的氮素營養(yǎng)利用率,對所施用的植物又有一定的保水作用,能減少植物生長所需的用水量,特別適合作為肥料功能添加劑。本發(fā)明為味精發(fā)酵廢液、蘇氨酸發(fā)酵廢液、豆粕、花生餅粉、麩皮、稻草粉等工農(nóng)業(yè)廢料的綜合利用提供新的途徑,還為工農(nóng)業(yè)廢物料如味精發(fā)酵廢液、蘇氨酸發(fā)酵廢液等高濃度有機廢水的處理找出另一出路,起到變廢為寶、資源化利用的目的。具體實施例方式下面的實施例對本發(fā)明作詳細說明,但對本發(fā)明沒有限制。下面的實施例中用到的斜面種采用如下方法培養(yǎng)枯草芽孢桿菌(5fl"7/M仰to'fc)PGA-7CCTCCM206102劃線于新配制的LB斜面上,LB斜面組成如下蛋白胨10g,酵母膏5g,NaCl10g,瓊脂20g,自來水1L,調(diào)pH值至7.2.。337°C培養(yǎng)17小時,再冷藏于4'C冰箱備用。實施例一取4"C冰箱內(nèi)保藏1天的斜面種[保藏斜面培養(yǎng)基的組成蛋白胨10g,NaC110g,酵母膏5g,瓊脂18g,自來水1L,pH7.O],用接種針將上述斜面上約1cm2面積的菌種刮下,接種于液體活化培養(yǎng)基中,液體活化培養(yǎng)基組成如下蛋白胨8g,酵母膏3g,NaCl9g,自來水1L,調(diào)pH值至6.8.。液體活化培養(yǎng)基裝于250ml三角瓶中,三角瓶裝量為20mL,于32。C往復(fù)式搖床振蕩培養(yǎng)20小時,搖床轉(zhuǎn)速為80r/m,沖程為65mm,培養(yǎng)結(jié)束后,即為液體活化種。取5mL上述液體活化種,均勻噴曬接種于己滅菌的1000g固體發(fā)酵培養(yǎng)基上,固體發(fā)酵培養(yǎng)基的組成(g/kg)如下80g味精發(fā)酵廢液、70g豆粕、60g麩皮、300g稻草粉、20g葡萄糖,其余成分為水。冷卻至。固體發(fā)酵培養(yǎng)基呈三角錐形,放置于32'C的恒溫室中培養(yǎng)120h,發(fā)酵結(jié)朿,立即測定固體發(fā)酵成熟料的Y-PGA含量為0.08g/kg固體料,枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102活菌體數(shù)最高含量為1.8X107cfu/g固體料。實施例二取4'C冰箱內(nèi)保藏1天的斜面種[保藏斜面培養(yǎng)基的組成蛋白胨8g,NaCl10g,酵母膏6g,瓊脂20g,自來水1L,pH7.2],用接種針將上述斜面上約1cm2面積的菌種刮下,接種于液體活化培養(yǎng)基中,液體活化培養(yǎng)基組成如下蛋白胨10g,酵母膏8g,NaCl9g,自來水1L,調(diào)pH值至7.2.。液體活化培養(yǎng)基裝于250ml三角瓶中,三角瓶裝量為20mL,于34'C往復(fù)式搖床振蕩培養(yǎng)26小時,搖床轉(zhuǎn)速為90r/m,沖程為70mm,培養(yǎng)結(jié)束后,即為液體活化種。取8mL上述液體活化種,均勻噴曬接種于已滅菌的1000g固體發(fā)酵培養(yǎng)基上,固體發(fā)酵培養(yǎng)基的組成(g/kg)如下100g蘇氨酸發(fā)酵廢液、70g豆粕、卯g麩皮、350g稻草粉、30g蔗糖,其余成分為水。冷卻至。固體發(fā)酵培養(yǎng)基呈三角錐形,放置于36。C的恒溫室中培養(yǎng)MOh,發(fā)酵結(jié)束,立即測定固體發(fā)酵成熟料的Y-PGA含量為0.16g/kg固體料,枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102活菌體數(shù)最高含量為1.5X108cfu/g固體料。實施例三取4'C冰箱內(nèi)保藏1天的斜面種[保藏斜面培養(yǎng)基的組成蛋白胨8g,NaClllg,酵母膏8g,瓊脂22g,自來水1L,pH7.0。],用接種針將上述斜面上約lcm2面積的菌種刮下,接種于液體活化培養(yǎng)基中,液體活化培養(yǎng)基組成如下蛋白胨10g,酵母膏8g,NaC110g,自來水1L,調(diào)pH值至7.4.。液體活化培養(yǎng)基裝于250ml三角瓶中,三角瓶裝量為20mL,于32'C往復(fù)式搖床振蕩培養(yǎng)30小時,搖床轉(zhuǎn)速為100r/m,沖程為72mm,培養(yǎng)結(jié)束后,即為液體活化種。取12mL上述液體活化種,均勻噴曬接種于己滅菌的1000g固體發(fā)酵培養(yǎng)基上,固體發(fā)酵培養(yǎng)基的組成(g/kg)如下110g味精發(fā)酵廢液、100g豆粕、80g麩皮、350g稻草粉、30g葡萄糖,其余成分為水。冷卻至。固體發(fā)酵培養(yǎng)基呈三角錐形,放置于36。C的恒溫室中培養(yǎng)150h,發(fā)酵結(jié)束,立即測定固體發(fā)酵成熟料的Y-PGA含量為0.20g/kg固體料,枯草芽孢桿菌CCTCCM206102活菌體數(shù)最高含量為7.OX108Cfu/g固體料。實施例四取4'C冰箱內(nèi)保藏1天的斜面種[保藏斜面培養(yǎng)基的組成蛋白胨12g,NaClllg,酵母膏8g,瓊脂21g,自來水1L,pH7.0],用接種針將上述斜面上約1cm2面積的菌種刮下,接種于液體活化培養(yǎng)基中,液體活化培養(yǎng)基組成如下蛋白胨12g,酵母膏8g,NaClllg,自來水1L,調(diào)pH值至7.0.。液體活化培養(yǎng)基裝于250ml三角瓶中,三角瓶裝量為20mL,于36'C往復(fù)式搖床振蕩培養(yǎng)36小時,搖床轉(zhuǎn)速為110r/m,沖程為75mm,培養(yǎng)結(jié)束后,即為液體活化種。取15mL上述液體活化種,均勻噴曬接種于己滅菌的1000g固體發(fā)酵培養(yǎng)基上,固體發(fā)酵培養(yǎng)基的組成(g/kg)如下120g味精發(fā)酵廢液、110g豆粕、100g麩皮、400g稻草粉、40g葡萄糖,其余成分為水。冷卻至。固體發(fā)酵培養(yǎng)基呈三角錐形,放置于40。C的恒溫室中培養(yǎng)168h,發(fā)酵結(jié)束,立即測定固體發(fā)酵成熟料的Y-PGA含量為0.26g/kg固體料,枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102活菌體數(shù)最高含量為1.0X109cfu/g固體料。將上述制備完畢的肥料添加劑按5-10%(w/W)的添加量添加肥料廠的有機肥中,進行農(nóng)業(yè)施肥的實施效果試驗實施效果試驗設(shè)2個處理,每個處理3次重復(fù)。處理一將上述制備完畢的肥料添加劑按10%添加量添加到廣州某肥料廠的有機肥中,該有機肥的主要成分為(%w/w):全N,1.42,P205,2.02,K20,0.83,有機質(zhì),26.94,總Ca,4.43,總Mg0.63,其余為水。畝施100公斤上述加有肥料添加劑的有機肥作基肥,另100公斤作追肥;處理二畝施100公斤沒有加有肥料添加劑的有機肥作基肥,另100公斤作追肥,以此與處理一作比較。試驗品種為夏陽白菜,2007年8月30日播種,9月15日移植。10月28日收獲。施肥時間及施肥量處理一,9月15日畝施100公斤加有肥料添加劑的有機肥作機肥,9月23日畝100公斤加有肥料添加劑的有機肥作追肥;處理二、,9月15日畝施100公斤的沒有加有肥料添加劑的有機肥作機肥,9月23日畝100公斤沒有加有肥料添加劑的有機肥作追肥。另外處理-、二在9月20日,畝施回青肥尿素5公斤,鉀肥5公斤。施用加有本肥料添加劑的有機肥對白菜主要農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量的影響的結(jié)果如下表(表1)所示表l<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>結(jié)論A、白菜施用加有肥料添加劑的有機肥,能增加植株的高度,增大葉片的長度和寬度,結(jié)球堅實,提高品質(zhì),口感好,含糖量較高。B、白菜施用加有肥料添加劑的有機肥有較好的增產(chǎn)效果,比滅活的生物有機肥增產(chǎn)14.4%,增產(chǎn)達極顯著水平。權(quán)利要求1.一種含γ-聚谷氨酸的肥料添加劑的生產(chǎn)方法,其特征在于利用枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)PGA-7CCTCCM206102作為發(fā)酵菌株,在發(fā)酵培養(yǎng)基進行固體發(fā)酵,其工藝過程如下(1)斜面菌種活化將培養(yǎng)好的保藏斜面種(枯草芽孢桿菌PGA-7CCTCCM206102)劃線于新配制的LB斜面上,LB斜面組成如下蛋白胨8~12g,酵母膏3~8g,NaCl9~11g,瓊脂15~22g,自來水1L,調(diào)pH值至6.8~7.4.。33-38℃培養(yǎng)12~24小時,再冷藏于4℃1~5天;(2)菌種的液體活化將上述斜面上約1cm2面積的菌種刮下,接種于液體活化培養(yǎng)基中,液體活化培養(yǎng)基組成如下蛋白胨8~12g,酵母膏3~8g,NaCl9~11g,自來水1L,調(diào)pH值至6.8~7.4,液體活化培養(yǎng)基裝于250ml三角瓶中,三角瓶裝量為20ml,于32-36℃往復(fù)式搖床振蕩培養(yǎng)18~36小時,搖床轉(zhuǎn)速為80-110r/m,沖程為65-75mm;(3)固體發(fā)酵按0.5-1.5%接種量,取步驟(2)中活化好的液體菌種,接入固體發(fā)酵培養(yǎng)基中,固體發(fā)酵培養(yǎng)基組成按每公斤固體發(fā)酵培養(yǎng)基所含克重g/kg計算為80-120g氨基酸發(fā)酵廢液、70-110g豆粕、60-100g麩皮、300-400g稻草粉、20-40g葡萄糖或蔗糖,其余成分為水,將水均勻噴曬入上述物體中,攪拌均勻,117-121℃滅菌30分鐘,冷卻至32-40℃,按三角錐形堆放于已滅菌的恒溫環(huán)境中,于32-40℃,培養(yǎng)120-168h,停止發(fā)酵,發(fā)酵完畢的固體物料即為含聚谷氨酸的肥料添加劑。2.根據(jù)要得要求l所述的含Y-聚谷氨酸的肥料添加劑的生產(chǎn)方法,其特征在于所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中的氨基酸發(fā)酵廢液為味精發(fā)酵廢液或蘇氨酸發(fā)酵廢液。全文摘要本發(fā)明提供一種含γ-聚谷氨酸的肥料添加劑的生產(chǎn)方法。本方法用枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)PGA-7CCTCCM206102做發(fā)酵菌株,以氨基酸發(fā)酵廢液、豆粕、花生餅粉、麩皮、稻草粉等為主要發(fā)酵基料進行固體發(fā)酵。其工藝過程包括斜面菌種活化、菌種的液體活化和固體發(fā)酵。發(fā)酵完畢的固體物料含有少量的γ-聚谷氨酸和其產(chǎn)生菌,既能提高肥料的氮素營養(yǎng)利用率,對所施用的植物又有一定的保水作用,能減少植物生長所需的用水量,特別適合作為肥料功能添加劑。文檔編號C05F5/00GK101417894SQ200810027318公開日2009年4月29日申請日期2008年4月9日優(yōu)先權(quán)日2008年4月9日發(fā)明者靜馮,施慶珊,李誠斌,歐陽友生,疏秀林,謝小保,穗陳,陳儀本申請人:廣東省微生物研究所