一種3-氨基丁醇對映異構體的分離檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物分析技術領域，具體涉及一種3-氨基丁醇對映異構體的分離檢測 方法。
【背景技術】
[0002] (R)-3-氨基丁醇是合成度魯特韋的重要中間體。度魯特韋是英國制藥巨頭葛蘭素 史克(GSK)旗下抗艾滋病(HIV)新藥，2013年8月12日美國食品和藥物管理局(FDA)。臨床前 研究結果顯示度魯特韋具有較強的抗HIV-1病毒活性，安全性及耐受性良好。
[0003] 度魯特韋分子結構中有兩個手性中心，由手性源(R)-3-氨基丁醇引入，度魯特韋 兩個非對映異構體的相對含量只取決于產生它們過渡態(tài)的相對能量高低，由于生成(4R， 12aS)過渡態(tài)能量較(4R，12aR)異構體低，因此反應最后生成了以（4R，12aS)構型為主的產 物。低光學純的(R)-3_氨基丁醇中的另一個異構體，在反應中會生成四個手性化合物，降低 度魯特韋的手性純度，因此(R)-3-氨基丁醇的光學純度直接決定了度魯特韋的光學純度、 雜質多少和抗艾滋病作用。盡管這種新藥上市時間很短，但由于其高效的抗艾滋病作用引 發(fā)了對這種新藥的大量需求，從而導致對度魯特韋手性源(R)-3-氨基丁醇的大量需求。因 此制備高標準、高光學純度的(R)-3_氨基丁醇，對于合成新藥度魯特韋具有重要意義。
[0004] 吳生文等（CN201410488279.2)使用芐氧羰基氯與3-氨基丁醇衍生化生成N-Cbc-3-氨基丁醇，在210nm下進行液相檢測。色譜柱AD-H;流動相正己烷:異丙醇(9:1);保留時間 S-異構體11.1分鐘，R-異構體12.2分鐘，檢測使用了價格昂貴的正相柱。R. H. BUCK等 (Journal of chromatography)用鄰苯二甲醛-硫醇類衍生物對3-氨基丁醇進行衍生化，色 譜條件:Knauer Hypersil 0DS柱子，流動相0.05%磷酸鈉緩沖鹽溶液/甲醇（體積比35/ 65)，pH 7.0,熒光檢測。
[0005] 3-氨基丁醇化合物無紫外吸收、分子結構含一個伯胺和一個羥基，建立快捷的、準 確可靠的光學純度分析方法難度非常的大。通過與帶紫外吸收的手性試劑進行快速雙衍生 化，得到既有紫外吸收又有三個手性基團的衍生物，能夠直接在反相高效液相與紫外聯(lián)用 上進行異構體的分析。

【發(fā)明內容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種3-氨基丁醇對映異構體的分離 檢測方法，可以快捷準確的實現定性、定量和對映體過量率分析。
[0007] 為了實現上述目的，本發(fā)明采取的技術方案如下： 一種3-氨基丁醇對映異構體的分離檢測方法，具體包含如下步驟： 步驟一、衍生化 將3-氨基丁醇溶于有機溶劑中，在一定的溫度條件下，以(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯為 衍生化試劑，控制3-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的摩爾比，進行衍生化反應，得到 衍生化化后的3-氨基丁醇，反應式見式I;
式I 步驟二、分離檢測 采用反相高效液相色譜-紫外檢測器對衍生化后的3-氨基丁醇進行定性、定量和對映 體過量率測定。
[0008] 所述的有機溶劑選自石油醚、二氯甲烷、1，2_二氯乙烷、四氫呋喃、氯仿和四氯化 碳中的一種或兩種以上的組合。
[0009] 所述的有機溶劑與3-氨基丁醇的體積比為10~500:1，優(yōu)選的為10~50:1。
[0010] 所述的一定溫度是指從_l〇°C到回流溫度，優(yōu)選為15~35°C。
[0011] 本發(fā)明的回流溫度具體數值與有機溶劑的選擇有關，本領域技術人員可以根據溶 劑的選擇清楚的確定回流溫度的范圍。
[0012] 所述的3-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的摩爾比為1:2~20。
[0013] 所述的紫外檢測器的檢測波長為210~300nm，優(yōu)選220~260nm。
[0014] 所述的反相高效液相色譜使用的色譜柱是普通反相柱。優(yōu)選的色譜柱為反相C18 柱，最優(yōu)選的為迪馬反相C18柱(250X4.6mm，5ym，pH范圍2.0~8.0)。
[0015] 所述的反相高效液相色譜的流動相由水和有機溶劑組成，有機溶劑選自甲醇、乙 醇、異丙醇和乙腈中的一種或兩種;有機溶劑占流動相的體積比例范圍為50%~100%，優(yōu)選范 圍為60%~80%。
[0016] 所述的流動相的流速為0.2~3. OmL/min，優(yōu)選1. OmL/min。
[0017] 本發(fā)明中，反相高效液相色譜分析條件優(yōu)選為： 迪馬反相C18柱，流動相為乙腈-水（體積比80: 20)，紫外檢測波長為254nm，流速為 1. OmL/min，柱溫為30 °C，進樣量為20yL。
[0018] 與現有技術相比，本發(fā)明所取得的有益效果如下： 本發(fā)明給出了 3-氨基丁醇的衍生化方法，通過控制反應條件，快速生成(R)-( + )_l-苯 基乙磺酰氯和3-氨基丁醇的衍生物，并建立了對(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯衍生化后的3-氨 基丁醇的定性、定量和對映異構體測定的高效液相色譜分析方法。該方法操作簡單、重現性 好、靈敏度高、準確性強，便于標準化操作。通過對(R)-(+)_l-苯基乙磺酰氯衍生化后的3-氨基丁醇進行定性、定量和對映體過量率分析，從而實現對3-氨基丁醇的定性、定量和對映 體過量率(手性e. e.值)分析。
【附圖說明】
[0019] 圖l:(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與(R)-3-氨基丁醇衍生化后色譜圖； 圖2: (R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯-與(S)_3_氨基丁醇衍生化后色譜圖； 圖3: (R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯與(RS)_3_氨基丁醇衍生化后色譜圖； 在附圖中：1為00-(+)-1-苯基乙磺酰氯與(R)-3-氨基丁醇的衍生物;2為(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯和(S) -3-氨基丁醇的衍生物。
【具體實施方式】
[0020]以下結合附圖對本發(fā)明進行進一步詳細的敘述。
[0021 ]實施例1: (R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與3-氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 l-l:(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與(R)-3_氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 取(R)-3_氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于60mL二氯甲烷中，30°C下攪拌，緩慢加入(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯24.578(0.12111〇1)。11(：監(jiān)測反應，反應結束后蒸干得(R)-( + )-1-苯基 乙磺酰氯衍生化后的(R) -3-氨基丁醇。
[0022]將(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯衍生化后的（R)-3-氨基丁醇用流動相溶解后采用高 效液相色譜進行檢測分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動相為乙腈-水(體積比80: 20)，紫外檢測波長為254nm，流速為1.0mL/min，柱溫為30°C，進樣體積20yL，保留時間和手 性純度分析見表1，其圖譜見圖1。
[0023] 1-2: (R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯與(S)-3_氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 取（S)-3-氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于40mL氯仿中，在30°C下攪拌，緩慢加入(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯24.578(0.12111〇1)。11(：監(jiān)測反應，反應結束后蒸干得(R)-( + )-1-苯基 乙磺酰氯衍生化后的（S) -3-氨基丁醇。
[0024]將(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯衍生化后的（S)-3-氨基丁醇用流動相溶解后采用高 效液相色譜進行檢測分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動相為乙腈-水(體積比80: 20)，紫外檢測波長為254nm，流速為1.0mL/min，柱溫為30°C，進樣體積20yL。保留時間和手 性純度分析見表1，其圖譜見圖2。
[0025] l-3:(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯與(RS)-3_氨基丁醇的衍生物的液相色譜分析 稱取(RS)-3-氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于40mL四氯化碳中，在30°C下攪拌，緩慢滴 加(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯24.578(0.12111〇1)。11(：監(jiān)測反應，反應結束后蒸干得(R)-( + )_ 1-苯基乙磺酰氯與(RS )-3-氨基丁醇衍生物。
[0026]將(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯與(RS)-3-氨基丁醇衍生物用流動相溶解后采用高效 液相色譜進行檢測分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動相為乙腈-水(體積比80:20)， 紫外檢測波長為254nm，流速為1 .OmL/min，柱溫為30°C，進樣體積20yL。保留時間和手性純 度分析見表1，其圖譜見圖3。
[0027]表1 (R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯衍生化后的3-氨基丁醇保留時間和手性e.e.%值
實施例2:3_氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的摩爾比考察試驗 2_1:稱取(S)_3_氛基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于40mL氣仿中，在40°C下攬摔，緩慢加入 (R) _(+)_l_苯基乙橫酰氯12.28g(0.06mol) JLC監(jiān)測反應，反應結束后蒸干得(R)-(+)_l_ 苯基乙磺酰氯與（S) -3-氨基丁醇衍生物。
[0028]將(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯衍生化后的（S)-3-氨基丁醇用流動相溶解后采用高 效液相色譜進行檢測分析。液相色