圖像讀取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及存在多個發(fā)出不同熒光強(qiáng)度的區(qū)域的試樣的熒光圖像的讀取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 在使用熒光激光掃描儀、熒光顯微鏡等熒光測定裝置的熒光觀察中，有時根據(jù)所 觀察的試樣在觀察視野內(nèi)存在多個發(fā)出不同熒光強(qiáng)度的區(qū)域。
[0003] 已知作為如下試樣的生物芯片：固定有數(shù)十至數(shù)萬個不同種類的DNA、蛋白質(zhì)、抗 體等生物體相關(guān)物質(zhì)作為探針的試樣。從生物芯片檢測的熒光強(qiáng)度由弱至強(qiáng)在寬的范圍內(nèi) 存在。
[0004] 通常，在讀取熒光時，盡可能以受光量增多的條件拍攝會使信息量變多。
[0005] 然而，如果在檢測時，通過調(diào)整激發(fā)光的輸出強(qiáng)度、露出時間等曝光條件來使發(fā)出 強(qiáng)熒光的區(qū)域的熒光強(qiáng)度不飽和而拍攝，則發(fā)出弱熒光的區(qū)域的亮度會不充分，從而無法 檢測正確的熒光量。
[0006] 另一方面，如果通過調(diào)整激發(fā)光的輸出強(qiáng)度、露出時間等曝光條件來使發(fā)出弱熒 光的區(qū)域的亮度充分而拍攝，則會產(chǎn)生發(fā)出強(qiáng)熒光的區(qū)域的熒光強(qiáng)度飽和而無法檢測正確 的熒光量的現(xiàn)象。這是因?yàn)榕臄z對象所發(fā)出的熒光量的動態(tài)范圍大于檢測裝置所讀取的動 態(tài)范圍而產(chǎn)生的問題。
[0007] 為了解決這樣的問題，已知如下方法:在一邊使受光量變化一邊獲取多個圖像后， 將這些多個圖像彼此比較，選擇每個區(qū)域合適曝光條件的圖像，從而以大的動態(tài)范圍檢測 (參照專利文獻(xiàn)1)。
[0008] 現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0009] 專利文獻(xiàn)
[0010] 專利文獻(xiàn)1:日本特許第3834519號公報

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 發(fā)明所要解決的課題
[0012] 然而，對于上述專利文獻(xiàn)1中記載的方法，不論試樣的種類，均機(jī)械性地獲取多個 圖像，因此即使對于能夠在動態(tài)范圍內(nèi)捕捉到1張圖像的試樣，也需要在檢測中獲取完全不 必要的圖像。因而，檢測時間的高速化、檢測數(shù)據(jù)容量的減少是非常困難的。
[0013] 本發(fā)明是為了解決這樣的問題而完成的，其目的在于，提供如下方法：以預(yù)定的拍 攝條件拍攝熒光圖像，基于該拍攝的熒光圖像所含的各區(qū)域的熒光強(qiáng)度，進(jìn)行拍攝的結(jié)束 判定、進(jìn)一步拍攝的拍攝條件的設(shè)定，從而以涉及各區(qū)域的合適的條件實(shí)現(xiàn)拍攝，實(shí)現(xiàn)檢測 時間的高速化、檢測數(shù)據(jù)容量的減少。
[0014] 用于解決課題的方法
[0015] 本發(fā)明是從存在多個發(fā)出熒光的區(qū)域的試樣讀取熒光圖像的圖像讀取方法，其特 征在于，具有：
[0016] (a)設(shè)定第1拍攝條件的工序，
[0017] (b)以第1拍攝條件拍攝焚光圖像的工序，
[0018] (c)對于拍攝的熒光圖像所含的多個區(qū)域，算出各區(qū)域的熒光強(qiáng)度的工序，
[0019] (d)基于算出的各區(qū)域的熒光強(qiáng)度，判定是否結(jié)束拍攝的工序，
[0020] (e)當(dāng)在(d)工序中判斷為不結(jié)束拍攝時，基于(C)工序中算出的各區(qū)域的熒光強(qiáng) 度，設(shè)定接下來的拍攝條件的工序，
[0021] (f)以接下來的拍攝條件拍攝熒光圖像的工序，及
[0022] (g)重復(fù)(c)工序至(f)工序直至在(d)工序中判定為結(jié)束拍攝的工序。
[0023] 根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，基于以規(guī)定的拍攝條件拍攝的結(jié)果，進(jìn)行之后的拍攝，因 而能夠有效地進(jìn)行拍攝，從而能夠?qū)崿F(xiàn)檢測時間的高速化和檢測數(shù)據(jù)容量的減少。
[0024]本發(fā)明中優(yōu)選:（d)工序具有：
[0025] (d-Ι)對于(C)工序中算出的各區(qū)域的熒光強(qiáng)度，判定熒光強(qiáng)度是否有效的工序， 及
[0026] (d_2)對于判定為熒光強(qiáng)度有效的區(qū)域，將(C)工序中算出的熒光強(qiáng)度作為該區(qū)域 的熒光強(qiáng)度的讀取值而采用的工序；
[0027] (e)工序具有：
[0028] (e-Ι)當(dāng)存在判定為熒光強(qiáng)度無效的區(qū)域時，將相比(d)工序中作為判定對象的熒 光圖像的拍攝條件、受光量更少的拍攝條件設(shè)定為該區(qū)域的接下來的拍攝條件的工序。
[0029] 根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，算出拍攝的每個區(qū)域的熒光強(qiáng)度，隨時判斷是否需要接 下來的拍攝條件的圖像，從而能夠避免獲取檢測中不使用的圖像，同時實(shí)現(xiàn)檢測時間的高 速化和檢測數(shù)據(jù)容量的減少。
[0030] 本發(fā)明中優(yōu)選：（d)工序具有：
[0031] (d-3)在(d-Ι)工序中，對于上述熒光圖像所含的多個區(qū)域，判定為全部熒光強(qiáng)度 有效時，判定為結(jié)束拍攝的工序。
[0032] 根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，能夠避免獲取檢測中不使用的圖像，同時實(shí)現(xiàn)檢測時間 的高速化和檢測數(shù)據(jù)容量的減少。
[0033] 此外，本發(fā)明中優(yōu)選:在(d_2)工序中，關(guān)于采用了上述算出工序中算出的熒光強(qiáng) 度的區(qū)域，省略(g)工序中的(C)工序的應(yīng)用。
[0034] 根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，能夠?qū)崿F(xiàn)檢測時間的高速化和檢測數(shù)據(jù)容量的減少。
[0035] 此外，本發(fā)明中優(yōu)選:（d)工序具有：
[0036] (d-Ι)對于(C)工序中算出的各區(qū)域的熒光強(qiáng)度，判定熒光強(qiáng)度是否有效的工序；
[0037] (e)工序具有：
[0038] (e-2)對于判定為熒光強(qiáng)度有效的各個區(qū)域，抽取受光量比拍攝條件的受光量多 的、1個或2個以上拍攝條件的工序，
[0039] (e-3)通過下式，分別算出關(guān)于各抽取的拍攝條件的預(yù)測熒光強(qiáng)度的工序，
[0040] 式:預(yù)測熒光強(qiáng)度=(區(qū)域的熒光強(qiáng)度/基準(zhǔn)拍攝條件）X抽取的拍攝條件
[0041] (其中，基準(zhǔn)拍攝條件是(C)工序中算出了熒光強(qiáng)度的熒光圖像的拍攝條件）
[0042] (e-4)對各抽取的拍攝條件算出的預(yù)測熒光強(qiáng)度之中，將有效的預(yù)測熒光強(qiáng)度中 與最高預(yù)測熒光強(qiáng)度對應(yīng)的拍攝條件設(shè)為該區(qū)域的確定拍攝條件的工序，
[0043] (e-5)當(dāng)在上述(e-4)工序中，對抽取的各拍攝條件算出的預(yù)測熒光強(qiáng)度之中，不 存在有效預(yù)測熒光強(qiáng)度時，將相比（c)工序中算出了熒光強(qiáng)度的熒光圖像的拍攝條件、受光 量更少的拍攝條件設(shè)定為該區(qū)域的接下來的拍攝條件的工序，及
[0044] (e-6)對于判定為熒光強(qiáng)度無效的各個區(qū)域，將相比（c)工序中算出了熒光強(qiáng)度的 熒光圖像的拍攝條件、受光量更少的拍攝條件設(shè)定為該區(qū)域的接下來的拍攝條件的工序；
[0045] (f)工序進(jìn)一步具有：
[0046] (f-Ι)對于各區(qū)域，根據(jù)(e-4)工序中得到的確定拍攝條件，拍攝熒光圖像的工序；
[0047] (d)工序進(jìn)一步具有：
[0048] (d-4)對于各區(qū)域，將(f-Ι)工序中拍攝、（c)工序中算出的熒光強(qiáng)度作為各區(qū)域的 讀取值而采用，并且判定為結(jié)束拍攝的工序。
[0049]根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，從以基準(zhǔn)拍攝條件拍攝的熒光圖像算出每個區(qū)域適當(dāng)?shù)?到各區(qū)域的熒光強(qiáng)度的拍攝條件，并從以該拍攝條件拍攝的圖像讀取熒光強(qiáng)度，從而能夠 進(jìn)行有效并且動態(tài)范圍寬的數(shù)值化。進(jìn)一步，能夠避免獲取檢測中不使用的圖像，同時實(shí)現(xiàn) 檢測時間的高速化和檢測數(shù)據(jù)容量的減少。
[0050]此外，本發(fā)明中優(yōu)選:具有如下工序來代替(e-5)工序：
[0051 ] (e-5'）當(dāng)在(e-4)工序中，對抽取的各拍攝條件算出的預(yù)測熒光強(qiáng)度之中，不存在 有效的預(yù)測熒光強(qiáng)度時，將拍攝條件設(shè)為該區(qū)域的確定拍攝條件的工序。
[0052] 根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，能夠?qū)崿F(xiàn)檢測時間的高速化。
[0053] 此外，本發(fā)明中優(yōu)選:當(dāng)在(e-5'）工序中，拍攝條件被設(shè)為該區(qū)域的確定拍攝條件 時，對于該區(qū)域，將（c)工序中算出的熒光強(qiáng)度作為讀取值而采用，并且省略上述(f-Ι)工 序。
[0054] 根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，能夠?qū)崿F(xiàn)檢測時間的高速化。
[0055] 此外，本發(fā)明中優(yōu)選:關(guān)于拍攝條件，預(yù)先準(zhǔn)備3個以上拍攝條件，當(dāng)將該3個以上 拍攝條件以受光量順序排列時，將位于中央附近的拍攝條件作為第1拍攝條件而采用。
[0056] 根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，能夠?qū)崿F(xiàn)檢測時間的高速化。
[0057] 此外，本發(fā)明中優(yōu)選：當(dāng)將相比（c)工序中算出了熒光強(qiáng)度的熒光圖像的拍攝條 件，受光量更少的拍攝條件以受光量順序排列時，將位于中央附近的拍攝條件作為(e-5)工 序和(e-6)工序中的接下來的拍攝條件而采用。
[0058]根據(jù)如此構(gòu)成的本發(fā)明，能夠?qū)崿F(xiàn)檢測時間的高速化。