一種測(cè)定茶葉中氟氯氰菊酯農(nóng)藥殘留量的方法
【專利說(shuō)明】一種測(cè)定茶葉中氟氯氰菊酯農(nóng)藥殘留量的方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明屬于農(nóng)藥檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種測(cè)定茶葉中氟氯氰菊酯農(nóng)藥殘留量的方法。
【背景技術(shù)】
[0003]茶葉是我國(guó)出口創(chuàng)匯的一種傳統(tǒng)經(jīng)濟(jì)作物，近年來(lái)隨著綠色食品概念的廣泛傳播，其內(nèi)在品質(zhì)衛(wèi)生安全問(wèn)題日益引起人們關(guān)注，也成了國(guó)際貿(mào)易中的技術(shù)壁皇。特別是歐盟于2004年8月27日頒布了一批食品中農(nóng)藥最大殘留量(MRL)標(biāo)準(zhǔn)，其中包含了 168項(xiàng)茶葉農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)。茶葉檢測(cè)項(xiàng)目比以往增加不少，農(nóng)藥最大殘留量值大幅降低，限量標(biāo)準(zhǔn)日趨嚴(yán)格。
[0004]擬除蟲菊酯類殺蟲劑是一類廣譜性殺蟲劑，擬除蟲菊酯作為農(nóng)藥使用歷史較長(zhǎng)。1948年，美國(guó)農(nóng)業(yè)部實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行人工合成研究，1950年第一個(gè)擬除蟲菊酯殺蟲劑“丙稀菊酯”在美國(guó)碳素化學(xué)公司試產(chǎn)，現(xiàn)已開(kāi)發(fā)出七氟菊酯、聯(lián)苯菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等多種產(chǎn)品。擬除蟲菊酯類殺蟲劑用量大，效果好，并且有一定的毒性和殘留期，這些特點(diǎn)就決定了此類農(nóng)藥在茶葉種植過(guò)程中，在一定的條件下，使環(huán)境中的擬除蟲菊酯類殺蟲劑以不同的方式進(jìn)入茶葉中累積起來(lái)，造成對(duì)茶葉的污染，影響了茶葉產(chǎn)品的質(zhì)量。
[0005]目前，有關(guān)環(huán)境和食品中擬除蟲菊酯類殺蟲劑殘留量的測(cè)定方法報(bào)道比較多，而茶葉中擬除蟲菊酯類殺蟲劑殘留的測(cè)定報(bào)道較少。由于茶葉成分復(fù)雜，茶堿、茶色素、多酚類、脂類物質(zhì)干擾測(cè)定，因而國(guó)家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)不能完全滿足茶葉農(nóng)藥殘留的實(shí)際需求。國(guó)內(nèi)研究者對(duì)食品農(nóng)藥殘留的測(cè)定的模式很多，主要是針對(duì)食品中農(nóng)藥殘留種類、水含量以及脂肪含量設(shè)置的。有的模式主要針對(duì)于脂肪含量低、含水量低設(shè)置了檢測(cè)方法，這種方法茶葉農(nóng)藥殘留檢測(cè)同樣也可以作為參考。因?yàn)椴枞~中的脂肪含量低，含水量也不高，符合這種模式條件。本發(fā)明根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)蔬菜及食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的研究現(xiàn)狀，提出了針對(duì)茶葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明旨在提供一種簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的測(cè)定茶葉中氟氯氰菊酯殘留量的方法。
[0007]—種測(cè)定茶葉中氟氯氰菊酯農(nóng)藥殘留量的方法，包括如下步驟:
(1)樣品準(zhǔn)備:將茶葉烘干至水分4-6%，研磨，過(guò)l-3mm篩網(wǎng)；
(2)氟氯氰菊酯粗提取:將茶葉粉末l_3g置于離心管中，加入10mL去離子水充分浸潤(rùn)，靜置5-15min，加入8-12mL石油醚和1 mL混合內(nèi)標(biāo)工作液，震蕩混勻，加入4 g無(wú)水硫酸鎂，lg氯化鈉，1 g檸檬酸鈉，0.5 g檸檬酸氫二鈉和5mL甲苯，立即振蕩均勻，然后以3000-5000rpm 離心 5_15min;
(3)氟氯氰菊酯粗提取物純化:取步驟(2)中上清液5mL于離心管中，加入300-800mg無(wú)水硫酸鎂和100-200mg N-丙基乙二胺鍵合固相吸附劑，充分震蕩均勻，以5000-8000rpm離心l_5min;
(4)氟氯氰菊酯萃取:使用丙酮和甲苯依次預(yù)淋洗Florisil弗洛里硅土固相萃取小柱，然后加入lmL步驟(3)中上清液，即刻開(kāi)始收集流出組分，取3-5mL的甲苯一異辛烷混合溶液淋洗小柱，洗脫液合并收集，所有收集液濃縮至lmL，經(jīng)有機(jī)相濾膜過(guò)濾，得到提取檢測(cè)液；
(5)色譜檢測(cè):將上述提取檢測(cè)液置于氣相色譜儀中進(jìn)行檢測(cè)。
[0008]步驟(1)中，茶葉烘干條件為45-55°C，l_3h。
[0009]步驟(1)中，研磨溫度為20_50°C。
[0010]步驟(1)中，研磨后的樣品密閉遮光保存，溫度<-8°C。
[0011]步驟(2)中，茶葉粉末的質(zhì)量需精確至0.01go
[0012]步驟(2)中，內(nèi)標(biāo)為滅蟻靈。
[0013]步驟(2)、(3)中，震蕩時(shí)間為l-3min。
[0014]步驟(4)中，丙酮和甲苯的用量為5-10mL。
[0015]步驟(4)中，甲苯一異辛烷的體積比為1-2:1。
[0016]步驟(4)中，濃縮在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行，控制溫度<40°C。
[0017]步驟(5)中，色譜儀的溫度設(shè)置為:進(jìn)樣口溫度250°C，初始溫度70°C，保留時(shí)間為2min;在升溫程序中，以25°C/min速率由70°C升至150°C，然后以3°C /min速率由150°C升至200°C，再以8°C/min速率由200°C升至280°C，最后在280°C保持lOmin。
[0018]步驟(5)中，色譜儀的載氣速率設(shè)為1.2mL/min，尾吹氣速率設(shè)為30 mL/min。
[0019]步驟(5)中，進(jìn)樣量為2mL，采用不分流進(jìn)樣模式，進(jìn)樣后分流閥關(guān)閉lmin。
[0020]本發(fā)明方法首先提取茶葉中的氟氯氰菊酯，提取方法簡(jiǎn)單，效果好，更加使結(jié)果積分處理簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確。本方法的平均回收率為93.21%-103.75%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.28%_6.20%，符合要求，準(zhǔn)確可靠。
【具體實(shí)施方式】
[0021 ]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
[0022]實(shí)施例1
一種測(cè)定茶葉中氟氯氰菊酯農(nóng)藥殘留量的方法，包括如下步驟:
(1)樣品準(zhǔn)備:將茶葉放入烘箱，50°C下保持2h，烘干后水分5%;研磨樣品，過(guò)2mm篩網(wǎng)，注意研磨溫度不應(yīng)超過(guò)50°C。
[0023](2)氟氯氰菊酯粗提取:將茶葉粉末2g置于50mL離心管中，精確至0.01 g，加入10mL去離子水，振蕩直至樣品被水充分浸潤(rùn)，靜置lOmin，加入10mL石油醚和1 mL混合內(nèi)標(biāo)工作液(滅蟻靈)，劇烈振蕩1 min，加入4 g無(wú)水硫酸鎂，lg氯化鈉，1 g檸檬酸鈉，0.5 g檸檬酸氫二鈉和5mL甲苯，立即手持振蕩2min，然后以4000rpm離心lOmin;
(3)氟氯氰菊酯粗提取物純化:取步驟(2)中上清液5mL于離心管中，加入500mg無(wú)水硫酸鎂和150mg N-丙基乙二胺鍵合固相吸附劑，手持振蕩2 min，以6000rpm離心2min;
(4)氟氯氰菊酯萃取:使用6mL丙酮和6mL甲苯依次預(yù)淋洗Florisi1弗洛里娃土固相萃取小柱，然后加入lmL步驟(3)中上清液，即刻開(kāi)始收集流出組分，取3.5mL的甲苯一異辛烷(體積比1:1)混合溶液淋洗小柱，洗脫液合并收集，所有收集液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上小心濃縮至lmL，經(jīng)有機(jī)相濾膜過(guò)濾，得到提取檢測(cè)液；
(5)色譜檢測(cè):將上述提取檢測(cè)液置于氣相色譜儀中進(jìn)行檢測(cè)，色譜儀進(jìn)樣口溫度設(shè)置為25°C，初始溫度設(shè)為70V，保留時(shí)間為2 min;在升溫程序中，以25°C/min速率由70°C升至150°C，然后以3°C /min速率由150升至200°C，再以8°C/min速率由200°C升至280°C，最后在280°C保持lOmin。載氣(氮?dú)?速率設(shè)為1.2mL/min，尾吹氣(氮?dú)?速率設(shè)為30 mL/min。進(jìn)樣量為2mL，采用不分流進(jìn)樣模式，進(jìn)樣后分流閥關(guān)閉lmin。
[0024]經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制統(tǒng)計(jì)，該方法的回收率為98.23%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.65%，符合檢測(cè)要求，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
[0025]實(shí)施例2
一種測(cè)定茶葉中氟氯氰菊酯農(nóng)藥殘留量的方法，包括如下步驟:
(1)樣品準(zhǔn)備:將茶葉放入烘箱，45°C下保持3h，烘干后水分6%;研磨樣品，過(guò)1mm篩網(wǎng)，注意研磨溫度不應(yīng)超過(guò)50°C。
[0026](2)氟氯氰菊酯粗提取:將茶葉粉末3g置于50mL離心管中，精確至0.01 g，加入10mL去離子水，振蕩直至樣品被水充分浸潤(rùn)，靜置5min，加入12mL石油醚和1 m