一種用于微化學(xué)分析的小黃魚仔稚魚耳石矢狀面切片的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于耳石處理領(lǐng)域,特別涉及一種用于微化學(xué)分析的小黃魚仔稚魚耳石矢 狀面切片的制作方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 仔稚魚期是魚類早期生活史的重要階段,與棲息環(huán)境有著密切關(guān)系,仔稚魚的死 亡動態(tài)直接影響著漁業(yè)資源的補充。
[0003] 傳統(tǒng)的漁業(yè)資源調(diào)查方法和生物遙測法無法實施洄游性魚類全生活史中棲息環(huán) 境的連續(xù)監(jiān)測。耳石信息提供了魚類生活史中所經(jīng)歷的環(huán)境變化。從耳石核心到外緣區(qū)的 元素組成通常按時間序列記錄著魚類從出生到被捕獲時所經(jīng)歷的不同生境特征。近40多 年來,耳石作為生境"指紋"標(biāo)簽的獨特屬性在魚類時空動態(tài)的研究領(lǐng)域得以迅速發(fā)展并廣 泛應(yīng)用。
[0004] 成魚耳石微化學(xué)結(jié)果局限于對魚類早期生活史的框架式地反映,而仔稚魚的耳石 微化學(xué)與生長日齡相結(jié)合進行分析能精確地闡明魚類早期生長關(guān)鍵階段與棲息環(huán)境之間 的對應(yīng)關(guān)系。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種用于微化學(xué)分析的小黃魚仔稚魚耳石矢 狀面切片的制作方法,該方法確保了耳石微化學(xué)分析的最大矢狀面、提高耳石微化學(xué)分析 的準(zhǔn)確度。
[0006] 本發(fā)明的一種用于微化學(xué)分析的小黃魚仔稚魚耳石矢狀面切片的制作方法,包 括:
[0007] (1)摘?。涸诮馄淑R下用尖頭鑷子將仔稚魚平衡囊內(nèi)的矢耳石取出,然后放入盛 有去離子水的培養(yǎng)皿中進行清洗,室溫下晾干,放入離心管中,并標(biāo)上耳石編號;
[0008] (2)標(biāo)記:在解剖鏡下鑒別左耳石和右耳石后,分別置于離心管中,并在離心管上 標(biāo)記左或右以示左、右耳石,統(tǒng)一取左耳石或右耳石進行后續(xù)操作;
[0009] (3)點膠:將A膠和B膠按體積比1:0. 5~2涂在錫箱紙上,邊加熱邊攪拌30~ 40秒;取已編號的耳石包埋盒,沾取AB膠點在包埋盒盒底;將仔稚魚耳石放置在AB膠上, 并按壓耳石表面,記錄耳石的編號與對應(yīng)包埋盒的編號;
[0010] (4)包埋:按質(zhì)量比6~8:1將樹脂和固化劑攪拌混勾,往每個包埋盒注入混勻后 的樹脂3~4ml ;包埋后烘干,待硬化后取出樹脂塊;
[0011] (5)切磨:使用AB膠將耳石樹脂塊黏貼于標(biāo)有耳石編號的玻璃片上;待凝固后,采 用耳石切磨機(Discoplan-TS,斯特爾公司)切除多余樹脂,并使用金剛石磨盤對耳石進行 粗磨,至接近耳石核心暴露;再換用1200目水砂紙進行手工精磨,至耳石核心完全暴露;
[0012] (6)拋光:使用金剛石拋光液和MD拋光布手動拋光,確認(rèn)耳石表面無刮痕為止;
[0013] (7)切割:采用耳石切磨機(Discoplan-TS,斯特爾公司)切割耳石玻璃片的多余 部分,確保耳石切片大小能放入微化學(xué)分析儀的樣品臺;
[0014] (8)清洗:將仔稚魚耳石磨拋面朝上,使用去離子水沖洗,后置于超純水中超聲清 洗;超聲清洗后,對耳石磨拋面順序采用去離子水、超純水分別進行沖洗;
[0015] (9)烘干:最后將清洗后的樹脂塊烘干,用于耳石微化學(xué)分析。
[0016] 所述步驟(3)中的A膠和B膠為化學(xué)反應(yīng)粘合劑。
[0017] 所述步驟⑷中的樹脂為環(huán)氧樹脂,固化劑為IPTG。
[0018] 所述步驟⑷和(9)中的烘干溫度為38~40°C,烘干時間為12~15小時。
[0019] 所述步驟(8)中的超純水超聲清洗時間為2~3分鐘。
[0020] 有益效果
[0021] (1)本發(fā)明解決了因仔稚魚耳石輕和小而導(dǎo)致用樹脂包埋時移動甚至傾斜,用點 膠法將耳石固定后再進行包埋能有效避免這種問題;
[0022] (2)采用切磨方法避免了耳石純手工研磨過程導(dǎo)致耳石矢狀面磨成斜面的問題, 確保了耳石微化學(xué)分析的最大矢狀面;
[0023] (3)手工拋光的方法避免了因機器拋光時轉(zhuǎn)速快而導(dǎo)致仔稚魚薄且小的耳石磨片 破碎的問題;
[0024] (4)清洗的方法在保證耳石不丟失的同時,能有效去除耳石矢狀面的雜質(zhì),避免微 化學(xué)分析時的干擾;
[0025] (5)上述一系列步驟,確保了仔稚魚耳石微化學(xué)分析結(jié)果的可靠性。
【附圖說明】
[0026] 圖1為5月7日的小黃魚仔稚魚的耳石Sr/Ca比值變化圖;
[0027] 圖2為5月28日的小黃魚仔稚魚的耳石Sr/Ca比值變化圖;
[0028] 圖3為6月23日的小黃魚仔稚魚的耳石Sr/Ca比值變化圖。
【具體實施方式】
[0029] 下面結(jié)合具體實施例,進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解,這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解,在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后,本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對本發(fā)明作各種改動或修改,這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定 的范圍。
[0030] 實施例1
[0031] 1)摘?。涸诮馄淑R下用鑷子將小黃魚仔稚魚平衡囊內(nèi)的矢耳石取出,注意要輕鑷 輕放,以免損壞耳石;將仔稚魚的耳石取出后,放入盛超純水的培養(yǎng)皿中進行清洗,去掉耳 石表面有機質(zhì),室溫下晾干,放入離心管中作為分析材料待用,并標(biāo)上耳石編號;
[0032] 2)標(biāo)記:在解剖鏡下鑒別左耳石和右耳石后,分別置于離心管中,并在離心管上 標(biāo)記耳石的編號,在離心管蓋上標(biāo)記左(L)或右(R)以示左、右耳石。統(tǒng)一取左耳石進行后 續(xù)操作;
[0033] 3)點膠:將A膠和B膠擠出少量,按體積比1 :1的比例在錫箱紙上,在酒精燈上進 行加熱,邊加熱邊攪拌30秒;取已編號的耳石包埋圓盒,用牙簽沾取混合的AB膠點在包埋 盒盒底;迅速將仔稚魚耳石放置在AB膠上,并用鑷子按壓耳石表面,保證耳石矢狀面水平; 待冷卻凝固45分鐘;記錄耳石的編號與對應(yīng)包埋盒的編號;其中,使用的A膠和B膠,化學(xué) 名稱為化學(xué)反應(yīng)粘合劑(日本株式會社);
[0034] 4)包埋:按質(zhì)量比7:1將環(huán)氧樹脂和固化劑混合,往每個包埋盒注入調(diào)配好的樹 脂3ml,樹脂需要覆蓋仔稚魚耳石;包埋后在38°C烘箱中烘12小時;待硬化后取出樹脂塊, 并在樹脂塊上用解剖針刻好各耳石的編