一種用于微化學(xué)分析的小黃魚仔稚魚耳石矢狀面切片的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于耳石處理領(lǐng)域，特別涉及一種用于微化學(xué)分析的小黃魚仔稚魚耳石矢 狀面切片的制作方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 仔稚魚期是魚類早期生活史的重要階段，與棲息環(huán)境有著密切關(guān)系，仔稚魚的死 亡動態(tài)直接影響著漁業(yè)資源的補充。
[0003] 傳統(tǒng)的漁業(yè)資源調(diào)查方法和生物遙測法無法實施洄游性魚類全生活史中棲息環(huán) 境的連續(xù)監(jiān)測。耳石信息提供了魚類生活史中所經(jīng)歷的環(huán)境變化。從耳石核心到外緣區(qū)的 元素組成通常按時間序列記錄著魚類從出生到被捕獲時所經(jīng)歷的不同生境特征。近40多 年來，耳石作為生境"指紋"標(biāo)簽的獨特屬性在魚類時空動態(tài)的研究領(lǐng)域得以迅速發(fā)展并廣 泛應(yīng)用。
[0004] 成魚耳石微化學(xué)結(jié)果局限于對魚類早期生活史的框架式地反映，而仔稚魚的耳石 微化學(xué)與生長日齡相結(jié)合進行分析能精確地闡明魚類早期生長關(guān)鍵階段與棲息環(huán)境之間 的對應(yīng)關(guān)系。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種用于微化學(xué)分析的小黃魚仔稚魚耳石矢 狀面切片的制作方法，該方法確保了耳石微化學(xué)分析的最大矢狀面、提高耳石微化學(xué)分析 的準(zhǔn)確度。
[0006] 本發(fā)明的一種用于微化學(xué)分析的小黃魚仔稚魚耳石矢狀面切片的制作方法，包 括：
[0007] (1)摘?。涸诮馄淑R下用尖頭鑷子將仔稚魚平衡囊內(nèi)的矢耳石取出，然后放入盛 有去離子水的培養(yǎng)皿中進行清洗，室溫下晾干，放入離心管中，并標(biāo)上耳石編號；
[0008] (2)標(biāo)記：在解剖鏡下鑒別左耳石和右耳石后，分別置于離心管中，并在離心管上 標(biāo)記左或右以示左、右耳石，統(tǒng)一取左耳石或右耳石進行后續(xù)操作；
[0009] (3)點膠：將A膠和B膠按體積比1:0. 5~2涂在錫箱紙上，邊加熱邊攪拌30~ 40秒；取已編號的耳石包埋盒，沾取AB膠點在包埋盒盒底；將仔稚魚耳石放置在AB膠上， 并按壓耳石表面，記錄耳石的編號與對應(yīng)包埋盒的編號；
[0010] (4)包埋：按質(zhì)量比6~8:1將樹脂和固化劑攪拌混勾，往每個包埋盒注入混勻后 的樹脂3~4ml ;包埋后烘干，待硬化后取出樹脂塊；
[0011] (5)切磨：使用AB膠將耳石樹脂塊黏貼于標(biāo)有耳石編號的玻璃片上；待凝固后，采 用耳石切磨機（Discoplan-TS，斯特爾公司）切除多余樹脂，并使用金剛石磨盤對耳石進行 粗磨，至接近耳石核心暴露；再換用1200目水砂紙進行手工精磨，至耳石核心完全暴露；
[0012] (6)拋光：使用金剛石拋光液和MD拋光布手動拋光，確認(rèn)耳石表面無刮痕為止；
[0013] (7)切割：采用耳石切磨機（Discoplan-TS，斯特爾公司）切割耳石玻璃片的多余 部分，確保耳石切片大小能放入微化學(xué)分析儀的樣品臺；
[0014] (8)清洗：將仔稚魚耳石磨拋面朝上，使用去離子水沖洗，后置于超純水中超聲清 洗；超聲清洗后，對耳石磨拋面順序采用去離子水、超純水分別進行沖洗；
[0015] (9)烘干：最后將清洗后的樹脂塊烘干，用于耳石微化學(xué)分析。
[0016] 所述步驟（3)中的A膠和B膠為化學(xué)反應(yīng)粘合劑。
[0017] 所述步驟⑷中的樹脂為環(huán)氧樹脂，固化劑為IPTG。
[0018] 所述步驟⑷和（9)中的烘干溫度為38~40°C，烘干時間為12~15小時。
[0019] 所述步驟（8)中的超純水超聲清洗時間為2~3分鐘。
[0020] 有益效果
[0021] (1)本發(fā)明解決了因仔稚魚耳石輕和小而導(dǎo)致用樹脂包埋時移動甚至傾斜，用點 膠法將耳石固定后再進行包埋能有效避免這種問題；
[0022] (2)采用切磨方法避免了耳石純手工研磨過程導(dǎo)致耳石矢狀面磨成斜面的問題， 確保了耳石微化學(xué)分析的最大矢狀面；
[0023] (3)手工拋光的方法避免了因機器拋光時轉(zhuǎn)速快而導(dǎo)致仔稚魚薄且小的耳石磨片 破碎的問題；
[0024] (4)清洗的方法在保證耳石不丟失的同時，能有效去除耳石矢狀面的雜質(zhì)，避免微 化學(xué)分析時的干擾；
[0025] (5)上述一系列步驟，確保了仔稚魚耳石微化學(xué)分析結(jié)果的可靠性。
【附圖說明】
[0026] 圖1為5月7日的小黃魚仔稚魚的耳石Sr/Ca比值變化圖；
[0027] 圖2為5月28日的小黃魚仔稚魚的耳石Sr/Ca比值變化圖；
[0028] 圖3為6月23日的小黃魚仔稚魚的耳石Sr/Ca比值變化圖。
【具體實施方式】
[0029] 下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定 的范圍。
[0030] 實施例1
[0031] 1)摘?。涸诮馄淑R下用鑷子將小黃魚仔稚魚平衡囊內(nèi)的矢耳石取出，注意要輕鑷 輕放，以免損壞耳石；將仔稚魚的耳石取出后，放入盛超純水的培養(yǎng)皿中進行清洗，去掉耳 石表面有機質(zhì)，室溫下晾干，放入離心管中作為分析材料待用，并標(biāo)上耳石編號；
[0032] 2)標(biāo)記：在解剖鏡下鑒別左耳石和右耳石后，分別置于離心管中，并在離心管上 標(biāo)記耳石的編號，在離心管蓋上標(biāo)記左（L)或右（R)以示左、右耳石。統(tǒng)一取左耳石進行后 續(xù)操作；
[0033] 3)點膠：將A膠和B膠擠出少量，按體積比1 :1的比例在錫箱紙上，在酒精燈上進 行加熱，邊加熱邊攪拌30秒；取已編號的耳石包埋圓盒，用牙簽沾取混合的AB膠點在包埋 盒盒底；迅速將仔稚魚耳石放置在AB膠上，并用鑷子按壓耳石表面，保證耳石矢狀面水平； 待冷卻凝固45分鐘；記錄耳石的編號與對應(yīng)包埋盒的編號；其中，使用的A膠和B膠，化學(xué) 名稱為化學(xué)反應(yīng)粘合劑（日本株式會社）；
[0034] 4)包埋：按質(zhì)量比7:1將環(huán)氧樹脂和固化劑混合，往每個包埋盒注入調(diào)配好的樹 脂3ml，樹脂需要覆蓋仔稚魚耳石；包埋后在38°C烘箱中烘12小時；待硬化后取出樹脂塊， 并在樹脂塊上用解剖針刻好各耳石的編