一種磁微粒介導(dǎo)的層析檢測(cè)技術(shù)裝置及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種磁微粒介導(dǎo)的層析檢測(cè)技術(shù)裝置及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002]免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)是應(yīng)用免疫學(xué)原理設(shè)計(jì)的測(cè)定抗原、抗體、免疫細(xì)胞及化學(xué)成分等的實(shí)驗(yàn)手段，廣泛用于來源于人體和動(dòng)物體可進(jìn)行疾病診斷和健康檢測(cè)的樣品以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。常用的有免疫濁度技術(shù)、固相酶免疫測(cè)定技術(shù)、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)、免疫熒光標(biāo)記技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、膠體金技術(shù)等。
[0003]免疫濁度技術(shù)，也稱免疫濁度法是可溶性抗原、抗體在液相中特異結(jié)合，產(chǎn)生一定大小的復(fù)合物，形成光的折射或吸收，測(cè)定這種折射或吸收后的透射光或散射光作為計(jì)算單位，用于定量檢測(cè)，但檢測(cè)靈敏度低，不適合于微量檢測(cè)。固相酶免疫測(cè)定技術(shù)基于抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體保持其免疫學(xué)活性，抗原或抗體的酶結(jié)合物既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)，具有靈敏度高、線性響應(yīng)范圍寬和易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等顯著優(yōu)點(diǎn)。但檢測(cè)反應(yīng)時(shí)間長限制了其使用。免疫化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)是一種高靈敏的微量及痕量分析技術(shù)，具有操作方便、靈敏度高、線性響應(yīng)范圍寬和易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等顯著優(yōu)點(diǎn)，廣泛地應(yīng)用于環(huán)境、臨床、藥物分析、食品和工業(yè)分析中，也是基于抗原或抗體的固相分離手段及抗原或抗體的發(fā)光試劑標(biāo)記技術(shù)。但檢測(cè)反應(yīng)時(shí)間長及對(duì)檢測(cè)設(shè)備的要求高也影響其使用。免疫熒光標(biāo)記技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、膠體金技術(shù)也是常用的檢測(cè)技術(shù)被廣泛使用，但均有其相應(yīng)的不足。
[0004]高靈敏度、快速、便捷是目前臨床免疫檢測(cè)技術(shù)產(chǎn)品的發(fā)展方向之一，但現(xiàn)有的檢測(cè)技術(shù)都無法以含有被撿物的材料作為檢測(cè)指示劑直接進(jìn)行檢測(cè)。因此，開發(fā)一種能夠?qū)崿F(xiàn)既具有高靈敏度、快速等特點(diǎn)，同時(shí)又能夠直接以含有被撿物的材料作為檢測(cè)指示的檢測(cè)技術(shù)，不僅使用方便、減少浪費(fèi)，同時(shí)也可顯著提高工作效率，在檢測(cè)和分析、分離的諸多領(lǐng)域具有重要的實(shí)用意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種具有靈敏度高、檢測(cè)速度快的免疫檢測(cè)技術(shù)裝置，特別是以磁微粒作為捕獲相的免疫層析檢測(cè)技術(shù)裝置。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案。
[0007]—種以磁微粒介導(dǎo)的層析檢測(cè)技術(shù)裝置，所述的檢測(cè)技術(shù)裝置是以固定在固相支撐物平面上的磁微粒作為捕獲相的檢測(cè)技術(shù)，由磁微粒、固相支撐物、分散膜、顯色相和含有待檢物的液體待檢相組成，其中所述的磁微粒表面含有能夠與待檢物形成特異性結(jié)合的磁微粒標(biāo)記物并固定在固相支撐物上。所述的的磁微粒標(biāo)記物以能夠與待檢物形成特異性結(jié)合的抗體或抗原最為常用。
[0008]所述的固相支撐物具有如下特征:1)所述的固相支撐物為固相支撐板狀結(jié)構(gòu)時(shí)，其材料為含有能夠吸附磁微粒的磁性材料；2)所述的固相支撐物為膜狀結(jié)構(gòu)時(shí)，其材料為能夠與磁微粒結(jié)合并固定的膜性材料。磁性材料在固相支撐板狀結(jié)構(gòu)上的分布可以為均勻分布狀態(tài)，也可以是按照具體要求的局部特征性分布，如線條狀或斑點(diǎn)狀。膜性材料常用的有硝酸纖維膜。
[0009]所述的分散膜包括玻璃纖維膜、聚酯纖維膜、硝酸纖維膜、木質(zhì)纖維類膜結(jié)構(gòu)。木質(zhì)纖維類膜結(jié)構(gòu)包括各種類型的濾紙和紙質(zhì)濾膜。
[0010]所述的顯色相的顯色指示劑包括膠體金、熒光物質(zhì)、血細(xì)胞、體細(xì)胞和培養(yǎng)細(xì)胞。
[0011]所述的含有待檢物的液相包括來源于人體和動(dòng)物血液、體液和排泄物以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。
[0012]所述的檢測(cè)技術(shù)包括以下一種或多種特征:
I)本技術(shù)裝置還包含有用于標(biāo)記顯色指示劑的能夠與待檢物形成特異性結(jié)合的檢測(cè)物，所述的檢測(cè)物以能夠與待檢物形成特異性結(jié)合的抗體或抗原最為常用；2)用磁微粒標(biāo)記物標(biāo)記磁微粒，常用的磁微粒標(biāo)記物為抗體或抗原；3)用檢測(cè)物標(biāo)記顯色指示劑；4)以局部裝有磁性材料板狀結(jié)構(gòu)作為固相支撐物，通過磁性吸附固定所述的標(biāo)記磁微粒到固相支撐物上的所述的局部磁性材料位置，有線條狀、斑點(diǎn)狀；5)以均勻分布磁性材料板狀結(jié)構(gòu)作為固相支撐物，將標(biāo)記的磁微粒包被到固相支撐物的特定位置上，多采用劃線或噴涂等方式；6)通過生物素-親和素連接系統(tǒng)將標(biāo)記的磁微粒連接固定到所述的固相支撐模性材料上，通常采用將親和素或鏈親和素包被到硝酸纖維膜上，將磁微粒標(biāo)記物或磁微粒用生物素標(biāo)記，然后與親和素連接固定；7)本技術(shù)裝置還包含有支撐底片，通常是在支撐底片粘貼有固相支撐物和分散膜；8)從下而上依次粘貼吸附固定有標(biāo)記磁微粒的固相支撐物、分散膜；9)從下而上依次粘貼支撐底片、吸附固定有標(biāo)記磁微粒的固相支撐物、分散膜；10)從下而上依次粘貼支撐底片、連接固定有標(biāo)記磁微粒的固相支撐膜、分散膜；11)制備待檢物與顯色指示劑為一體并能夠通過磁微粒標(biāo)記物直接特異性結(jié)合磁微粒的液體顯色相，然后將液體顯色相置于分散膜上，通過層析擴(kuò)散流經(jīng)標(biāo)記磁微粒，直接特異性地通過磁微粒標(biāo)記物與磁微粒結(jié)合并顯色，這種情況通常用于檢測(cè)細(xì)胞表面抗原且同時(shí)以細(xì)胞作為顯色指示劑的檢測(cè)方法；12)用檢測(cè)物標(biāo)記顯色指示劑，將含有待檢物的液體與標(biāo)記的顯色指示劑混合，通過層析擴(kuò)散流經(jīng)標(biāo)記磁微粒，標(biāo)記顯色指示劑通過待檢物間接特異性地與磁微粒標(biāo)記物結(jié)合,進(jìn)而使磁微粒顯色；13)所述的磁微粒為通用的磁微粒及其衍生磁性微粒結(jié)構(gòu)；14)在固相支撐物的前端還粘貼有分散膜，將所述的待檢測(cè)液相滴加到前端分散膜上。
[0013]間接檢測(cè)通常以作為檢測(cè)物的能夠通過待檢物與磁微粒標(biāo)記物形成特異性結(jié)合的抗體或抗原，檢測(cè)對(duì)應(yīng)的抗原或抗體。
[0014]磁性微粒，即磁微粒，是指磁性納米粒子與無機(jī)或有機(jī)分子結(jié)合形成的可均勻分散于一定基液中具有高度穩(wěn)定性的膠態(tài)復(fù)合材料，是一種具有磁性和特殊結(jié)構(gòu)的一種新型高分子聚合材料。具有超順磁性、較高的比表面積、可修飾功能基團(tuán)等特性。磁微粒的核心組成是納米磁性粒子(包括鐵的氧化物、金屬鐵、鈷、鎳及正鐵酸鹽等)，也稱磁流體。將磁流體與其它性質(zhì)材料的基質(zhì)相互作用，便形成磁性復(fù)合微粒(簡稱磁性微粒、磁性微球、磁珠等)。磁微粒分類方法很多，按其結(jié)構(gòu)不同，可分為簡單結(jié)構(gòu)、核殼結(jié)構(gòu)、夾心結(jié)構(gòu)；磁性微粒的核心組成一磁流體為納米無機(jī)材料，按照與其復(fù)合的材料組成不同，可分為無機(jī)/有機(jī)磁性微粒和無機(jī)/無機(jī)磁性微粒。其無機(jī)/有機(jī)磁性微粒是通過生物或合成高分子物質(zhì)及其它有機(jī)試劑對(duì)磁流體進(jìn)行包覆或修飾而得到，如葡聚糖磁性微粒磁性脂質(zhì)體微粒等；而無機(jī)/無機(jī)磁性微粒則是通過磁流體與金、二氧化硅、量子點(diǎn)等無機(jī)物復(fù)合制得，如磁性二氧化硅微粒、金磁微粒、載有量子點(diǎn)的磁性微粒等。
[0015]所述的檢測(cè)技術(shù)裝置在多種檢測(cè)技術(shù)產(chǎn)品開發(fā)中的應(yīng)用。可用于目前常用的紙層析檢測(cè)產(chǎn)品的開發(fā)和大顆粒的如細(xì)胞類直接檢測(cè)產(chǎn)品的開發(fā)。
[0016]人群中最常見的血型有ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)。都是根據(jù)紅細(xì)胞表面有無特異性抗原(凝集原)來劃分的血液類型系統(tǒng)。ABO血型系統(tǒng)是根據(jù)凝集原A、B的分布把血液分為Α、Β、ΑΒ、0四型。紅細(xì)胞上只有凝集原A的為A型血，其血清中有抗B凝集素；紅細(xì)胞上只有凝集原B的為B型血，其血清中有抗A的凝集素；紅細(xì)胞上A、B兩種凝集原都有的為AB型血，其血清中無抗A、