一種中藥水蒸氣蒸餾液中揮發(fā)性物質(zhì)含量的快速檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥質(zhì)量控制和檢驗(yàn)分析領(lǐng)域，適用于中藥水蒸氣蒸饋操作的工藝過 程研究和現(xiàn)場檢測。
【背景技術(shù)】
[0002] 揮發(fā)性物質(zhì)在植物界分布極廣，作為中藥使用的植物就有數(shù)百種可提取揮發(fā)油， 尤其在菊科、蕓香科、傘形科、姜科等科屬中較為常見。絕大多數(shù)揮發(fā)性物質(zhì)難溶于水而易 溶于有機(jī)溶劑，化學(xué)結(jié)構(gòu)上主要包括芳香族化合物、祗締、倍半祗締及其含氧衍生物、脂肪 族化合物等等。大量的藥理實(shí)驗(yàn)證明，藥用植物中揮發(fā)性物質(zhì)的作用相當(dāng)廣泛，包括抗炎、 抗過敏、抗微生物、抗突變和抗癌、驅(qū)蟲作用、酶抑制作用、對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)W及 平滑肌的作用等。
[0003] 現(xiàn)代生產(chǎn)可供選用的揮發(fā)性物質(zhì)提取方法有水蒸氣蒸饋法、溶劑提取法、壓棒法 等。由于揮發(fā)性物質(zhì)沸點(diǎn)較低或能與水形成共沸物，而水蒸氣易得、無毒，因此水蒸氣蒸饋 法在中藥制劑生產(chǎn)中最為常用。若藥材所含揮發(fā)性物質(zhì)較多，且極性較低，則可在蒸饋液中 W油滴或油膜狀析出；若蒸饋液中揮發(fā)性物質(zhì)含量較低，或在水中溶解度較大，則不會(huì)出現(xiàn) 明顯的兩相分離，該種蒸饋液被稱為芳香水。多數(shù)揮發(fā)性物質(zhì)比重低于水，常溫下成油狀， 亦稱為精油；但也有部分揮發(fā)性物質(zhì)可生成比重大于水的結(jié)晶或不定形物，當(dāng)蒸饋液冷卻 或被濃縮時(shí)析出。
[0004] 實(shí)際生產(chǎn)中水蒸氣蒸饋法的裝置形式多樣，工藝過程也受到多方面因素的影響， 過程控制和終點(diǎn)判斷都需要對(duì)蒸饋液中揮發(fā)性物質(zhì)的含量進(jìn)行檢測。然而，目前揮發(fā)性物 質(zhì)的測定W《中國藥典》所載的蒸饋法最為常用，該方法利用揮發(fā)油測定儀器將揮發(fā)油成分 蒸饋出來，W體積比表示揮發(fā)油含量。該方法雖然簡便實(shí)用，但也存在取樣量大，蒸饋時(shí)間 長，定量不準(zhǔn)確，易受環(huán)境干擾等問題；另有氣相色譜法測定結(jié)果準(zhǔn)確，但檢驗(yàn)時(shí)間過長，儀 器價(jià)格昂貴，均不適于生產(chǎn)現(xiàn)場快速檢驗(yàn)的要求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明目的是提供一種中藥水蒸氣蒸饋液中揮發(fā)性物質(zhì)含量的快速檢測方法。
[0006] 本發(fā)明利用揮發(fā)性物質(zhì)難溶于水而易溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn)，利用萃取劑從中藥水 蒸氣蒸饋液中萃取所含的揮發(fā)性成分。揮發(fā)性物質(zhì)溶于萃取劑，導(dǎo)致萃取劑密度相應(yīng)變化， 通過準(zhǔn)確測定萃取劑密度，即可間接推算蒸饋液中揮發(fā)性物質(zhì)的含量。
[0007] 本發(fā)明采用的技術(shù)方案是；
[000引一種中藥水蒸氣蒸饋液中揮發(fā)性物質(zhì)含量的快速檢測方法，所述方法包括W下步 驟：
[0009] (1)精密稱取不同體積的已純化的中藥揮發(fā)性物質(zhì)樣品，加入具塞刻度試管中，力口 入純水定容至a體積，充分混合，配制成不同體積濃度的標(biāo)準(zhǔn)試樣；
[0010] (2)分別向a體積的標(biāo)準(zhǔn)試樣中加入b體積的萃取劑，a ;b = 10?100 ;1，所述萃 取劑為與水不互溶的有機(jī)溶劑，強(qiáng)力混合或均質(zhì)處理后，靜置或離屯、分層，取有機(jī)層，為澄 清的標(biāo)準(zhǔn)試樣萃取液，吸取標(biāo)準(zhǔn)試樣萃取液測量T溫度下萃取液的密度；W標(biāo)準(zhǔn)試樣萃取 液的密度為橫坐標(biāo)，W標(biāo)準(zhǔn)試樣中的中藥揮發(fā)性物質(zhì)的體積濃度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線， 建立回歸方程；
[0011] (3)取a體積的待測中藥水蒸氣蒸饋液試樣，按照步驟（2)的相同條件進(jìn)行萃取和 測量操作；加入b體積的萃取劑，強(qiáng)力混合或均質(zhì)處理后，靜置或離屯、分層，取有機(jī)層，為澄 清的待測試樣萃取液，吸取澄清的待測試樣萃取液測量T溫度下的密度；根據(jù)步驟（2)的回 歸方程和待測試樣萃取液的密度，計(jì)算得到待測中藥水蒸氣蒸饋液試樣中中藥揮發(fā)性物質(zhì) 的體積濃度。
[0012] 所述步驟（1)中，所述已純化的中藥揮發(fā)性物質(zhì)樣品是按照2010版《中國藥典》一 部附錄XD所載的揮發(fā)性物質(zhì)測定法，將中藥水蒸氣蒸饋液進(jìn)行蒸饋富集后、取揮發(fā)油層脫 水精制后得到的純揮發(fā)油性物質(zhì)。該是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的中藥揮發(fā)性物質(zhì)純品制備方 法。對(duì)于同一種中藥，揮發(fā)性物質(zhì)純品的成分、理化性質(zhì)都是穩(wěn)定的，幾乎不會(huì)發(fā)生變化。
[0013] 所述步驟（1)中，配制標(biāo)準(zhǔn)試樣時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)試樣中中藥揮發(fā)性物質(zhì)的體積濃度范圍 一般為0?5%，優(yōu)選0?0. 2%。
[0014] 所述步驟（2)中，通常采用與水不互溶的有機(jī)溶劑作為萃取劑，優(yōu)選正己燒、石油 離、己酸己醋、二氯甲燒或正了醇，事先應(yīng)根據(jù)待測揮發(fā)性物質(zhì)的性質(zhì)加W選擇，萃取劑的 選擇主要考慮待測揮發(fā)性物質(zhì)在水和萃取劑中的分配系數(shù)。兩相平衡時(shí)，待測揮發(fā)性物質(zhì) 在有機(jī)相的濃度應(yīng)至少達(dá)到水相濃度的100倍。
[00巧]所述步驟（2)中，a ;b = 10?100 ;1，優(yōu)選10?15 ;1。
[0016] a體積的取值范圍一般為10?4〇111以此范圍可根據(jù)待測液中實(shí)際含揮發(fā)性物質(zhì)的 多少，相應(yīng)調(diào)整待測液體積進(jìn)行萃取測定。一般待測液中含揮發(fā)性物質(zhì)少時(shí)相應(yīng)取較大體 積，揮發(fā)性物質(zhì)多時(shí)，取較小體積的待測液。
[0017] 所述步驟（2)和步驟（3)中，萃取時(shí)，為加快兩相分離，可向標(biāo)準(zhǔn)試樣或待測中藥 水蒸氣蒸饋液試樣中加入飽和食鹽水，所述飽和食鹽水的體積用量為標(biāo)準(zhǔn)試樣或待測中藥 水蒸氣蒸饋液試樣體積的1?20%，優(yōu)選10%。
[0018] 所述步驟（3)的萃取和測量操作與步驟（2)相同，即步驟（2)、（3)所用的萃取劑 相同，混合方式相同，分層方式相同，步驟（2)采用強(qiáng)力混合，則步驟（3)也采用強(qiáng)力混合 等，步驟（2)中加入飽和食鹽水，則步驟（3)也加入相同量的飽和食鹽水。該是為了保證萃 取條件的完全一致。
[0019] 步驟（2)和步驟（3)中，測量萃取液密度時(shí)，T溫度的范圍為5?30°C，且步驟（2)、 (3)中的T溫度保持相同。
[0020] 測量萃取液密度時(shí)，溫度控制精度應(yīng)在±0. rc之間，單次密度測量精度不低于 0.0005g/ml〇
[0021] 所述步驟（2)中，建立回歸方程時(shí)，通常可W采取線性回歸方式，在濃度范圍較大 時(shí)可采用二次回歸，應(yīng)確?；貧w系數(shù)R2〉0. 9。
[0022] 優(yōu)選本發(fā)明方法為：
[0023] (1)精密稱取不同體積的已純化的中藥揮發(fā)性物質(zhì)樣品，加入具塞刻度試管中，力口 入純水定容至40mU充分混合，配制成不同體積濃度的標(biāo)準(zhǔn)試樣，所述標(biāo)準(zhǔn)試樣為混懸液， 標(biāo)準(zhǔn)試樣中中藥揮發(fā)性物質(zhì)的體積濃度范圍為0?5% ;
[0024] (2)分別向40血的標(biāo)準(zhǔn)試樣中加入3ml的萃取劑、4ml飽和食鹽水，所述萃取劑為 與水不互溶的有機(jī)溶劑，強(qiáng)力混合或均質(zhì)處理后，靜置或離屯、分層，取有機(jī)層，為澄清的標(biāo) 準(zhǔn)試樣萃取液，吸取標(biāo)準(zhǔn)試樣萃取液測量T溫度下萃取液的密度；W標(biāo)準(zhǔn)試樣萃取液的密 度為橫坐標(biāo)，W標(biāo)準(zhǔn)試樣中的中藥揮發(fā)性物質(zhì)的體積濃度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立回 歸方程；
[0025] (3)取40mL的待測中藥水蒸氣蒸饋液試樣，按照步驟（2)的相同條件進(jìn)行萃取和 測量操作；加入3ml的萃取劑、4ml飽和食鹽水，強(qiáng)力混合或均質(zhì)處理后，靜置或離屯、分層， 取有機(jī)層，為澄清的待測試樣萃取液，吸取澄清的待測試樣萃取液測量T溫度下的密度；根 據(jù)步驟（2)的回歸方程和待測試樣萃取液的密度，計(jì)算得到待測中藥水蒸氣蒸饋液試樣中 中藥揮發(fā)性物質(zhì)的體積濃度。
[0026] 更進(jìn)一步，本發(fā)明所述的中藥揮發(fā)性物質(zhì)為五味子揮發(fā)油，待測中藥水蒸氣蒸饋 液試樣為五味子水蒸氣蒸饋液樣品，本發(fā)明方法優(yōu)選按W下步驟操作：
[0027] (1)精密稱取不同體積的已純化的五味子揮發(fā)油，加入具塞刻度試管中，加入純水 定容至40mU充分混合，配制成不同體積濃度的標(biāo)準(zhǔn)試樣，所述標(biāo)準(zhǔn)試樣中五味子揮發(fā)油的 體積濃度范圍為0?0.2% ;
[00測 似分別向40血的標(biāo)準(zhǔn)試樣中加入3ml的正己燒、4ml飽和食鹽水，強(qiáng)力混合后， 靜置分層，取有機(jī)層，為澄清的標(biāo)準(zhǔn)試樣萃取液，吸取標(biāo)準(zhǔn)試樣萃取液測量T溫度下萃取液 的密度；W標(biāo)準(zhǔn)試樣萃取液的密度為橫坐標(biāo)，W標(biāo)準(zhǔn)試樣中五味子揮發(fā)油的體積濃度為縱 坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立回歸方程；
[0029] (3)取40mL的五味子水蒸氣蒸饋液樣品，按照步驟（2)的相同條件進(jìn)行萃取和測 量操作：加入3ml的正己燒、4ml飽和食鹽水，強(qiáng)