一種快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法，該方法包括以下步驟：在酒醅中加入香茅醇和超純水浸泡60-150min后，超聲20-40min，離心得上清液，取上清液于試管中，加入氯化鈉直至溶液飽和；再加入有機(jī)溶劑，振蕩3-5min，靜置5-10min后離心，有機(jī)相與水相分層，留取有機(jī)相即得。本發(fā)明具有操作簡便快速、有機(jī)溶劑用量少、勞動強(qiáng)度小、定量準(zhǔn)確等特點，適用于酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的定性及定量分析。
【專利說明】一種快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于分析檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種針對固態(tài)發(fā)酵酒醅揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)快速簡便提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]中國白酒是世界上六大蒸餾酒之一，其采用的固態(tài)酒醅發(fā)酵和固態(tài)蒸餾操作方法。酒醅發(fā)酵過程中，各種物質(zhì)不斷地產(chǎn)生與消失，逐漸生成了醇、酸、酯、醛、酮等多種物質(zhì)成分。酒醅中的揮發(fā)性成分直接地構(gòu)成了白酒的風(fēng)味物質(zhì)，從而決定白酒的獨特風(fēng)味和品質(zhì)。
[0003]目前，對白酒酒醅的微量揮發(fā)性成分的研究主要有以下三種方法:a)利用頂空固相微萃取方法分析酒醅中的揮發(fā)性化合物的組成和含量，如專利號為201110427384.1、專利名稱為“一種快速測定曲或酒醅或發(fā)酵醪中氨基甲酸乙酯的方法”所用方法，該技術(shù)存在所需設(shè)備價格昂貴、操作程序復(fù)雜、萃取頭等耗材用量大、檢測樣品成本高等缺點山)采用大量有機(jī)溶劑的多次反復(fù)萃取、再將有機(jī)相收集起來除水、濃縮，然后進(jìn)樣分析，該方法操作復(fù)雜、萃取時間長，勞動強(qiáng)度大，所需有機(jī)溶劑量大，對實驗人員傷害大，因此不適合對大量樣品的萃取分析。同時由于步驟繁多，每步操作都會造成揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的損失，進(jìn)而不能對樣品微量物質(zhì)含量進(jìn)行定量等后續(xù)分析；c)直接利用水或乙醇水浸提后直接進(jìn)樣，如專利申請?zhí)枮?01110147621.9、專利名稱為“快速檢測糟醅香味成分的方法”所述，雖然該方法簡便快速，但是直接用乙醇溶液浸泡后進(jìn)樣對色譜柱損傷大，且提取風(fēng)味物質(zhì)成分少(僅分析出16種物質(zhì))，再由于沒有加入內(nèi)標(biāo)，定量效果差。
[0004]因此本領(lǐng)域需要一種新的快速簡便的方法來提取、定量及分析酒醅中的微量揮發(fā)性物質(zhì)成分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種快速簡便提取酒醅揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法，解決現(xiàn)有技術(shù)操作復(fù)雜、設(shè)備要求高、成本昂貴、檢測不穩(wěn)定或有機(jī)溶劑使用量大、勞動強(qiáng)度大、定量不準(zhǔn)確等問題。
[0006]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:
[0007]—種快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法，包括以下步驟:
[0008]a)浸泡與超聲提取:取5_15g酒醅，加入5-10 μ I香茅醇內(nèi)標(biāo)和35_45ml的超純水，浸泡60-150min后，超聲提取20_40min，離心得上清液；
[0009]b)有機(jī)溶劑萃取:取上述離心所得上清液15_25ml置于50ml帶塞磨口試管中，力口入氯化鈉直至溶液飽和；再加入2-6ml有機(jī)溶劑，蓋上瓶塞，振蕩3-5min，靜置5_10min后離心，有機(jī)相與水相分層，取l_3ml有機(jī)相檢測備用；
[0010]c)揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)測定:物質(zhì)定性采用NIST08Databas、AMDIS圖譜庫中標(biāo)準(zhǔn)離子碎片圖譜進(jìn)行比對，要求匹配度大于85% ;定量方法采用半定量方法，將待測物質(zhì)豐度與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)豐度相比，根據(jù)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)濃度計算各揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)成分含量。
[0011]上述步驟a)中，超純水需煮沸10_20min后冷卻使用。
[0012]上述步驟a)、b)中，離心條件為 5000-18000r/min，5-15min。
[0013]優(yōu)選地，上述離心條件為8000-10000r/min，8-12min。
[0014]上述步驟b)中，有機(jī)溶劑為乙醚、戊烷或兩者的混合液。
[0015]本發(fā)明有益效果如下:
[0016]1、操作快速簡便、勞動強(qiáng)度小、溶劑用量少、設(shè)備要求低，達(dá)到快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的要求，與采用有機(jī)溶劑反復(fù)萃取的方法相比，簡單有效。
[0017]2、本發(fā)明操作過程簡便，在超純水超聲提取的同時加入香茅醇，與樣品一同提取，可以較為準(zhǔn)確定量樣品中各物質(zhì)濃度，從而可以真實的反應(yīng)樣品中各揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的含量，同步操作即減少了程序步驟，更使揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)成分的損失大大減少。若萃取后加入，則定量的是提取得到溶液中各物質(zhì)濃度，從而要考察提取率，才能定量樣品中各物質(zhì)濃度。
[0018]3、采用本發(fā)明的提取方法，有利于對后續(xù)酒醅揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)成分的檢測，尤其適用于固態(tài)釀造酒醅揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)成分的定性與定量分析。從檢測結(jié)果來看，能有效分析出30種物質(zhì)，大大高于僅采用水或有機(jī)溶劑提取的方法，且標(biāo)準(zhǔn)偏差低于12%，說明本方法有效、可行。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0019]圖1是運用本發(fā)明提取的酒醅揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)總離子色譜圖。
【具體實施方式】
[0020]下述實例將有助于理解本發(fā)明，但不限制本發(fā)明的內(nèi)容。
[0021]本發(fā)明實施例中材料和設(shè)備的選用說明:
[0022]香茅醇購于美國Sigma公司；NaCl (分析純)、乙醚(色譜純)、戊烷(色譜純)購于上海國藥集團(tuán)。
[0023]氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀使用美國安捷倫科技有限公司的7890A-5975CGC-MS。
[0024]實施例1
[0025]a)浸泡與超聲提取:取IOg酒醅，加入8 μ I香茅醇內(nèi)標(biāo)和煮沸15min后冷卻的超純水40ml，浸泡120min后，超聲提取30min，然后在10000r/min條件下離心12min，得上清液；
[0026]b)有機(jī)溶劑萃取:取上述離心所得上清液20ml，置于50ml帶塞磨口試管中，加入氯化鈉使溶液達(dá)到飽和；再加入5ml乙醚，蓋上瓶塞，振蕩4min，靜置5min后離心，有機(jī)相與水相分層，取2ml有機(jī)相檢測備用；
[0027]c)揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)定性與定量:物質(zhì)定性米用NIST 08Databas (AgilentTechnologieslnc.)、AMDIS圖譜庫中標(biāo)準(zhǔn)離子碎片圖譜比對，要求匹配度大于85% ;出窖酒醅揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)總離子色譜圖見圖1 ;定量方法采用半定量方法，將待測物質(zhì)豐度與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)豐度相比，根據(jù)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)濃度計算各揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)成分含量，見表I。
[0028]為了驗證該方法的穩(wěn)定性，對出窖酒醅進(jìn)行重復(fù)提取(n=5)，結(jié)果見表I。從表中可以看出，各物質(zhì)的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于8%。
[0029]表1出窖酒醅風(fēng)味物質(zhì)的相對含量
[0030]
【權(quán)利要求】
1.一種快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法，其特征在于:包括以下步驟: a)浸泡與超聲提取:取5-15g酒醅，加入5-10μ I香茅醇內(nèi)標(biāo)和35_45ml的超純水，浸泡60-150min后，超聲提取20_40min，離心得上清液； b)有機(jī)溶劑萃取:取上述離心所得上清液15-25ml置于50ml帶塞磨口試管中，加入氯化鈉直至溶液飽和；再加入2-6ml有機(jī)溶劑，蓋上瓶塞，振蕩3-5min，靜置5_10min后離心，有機(jī)相與水相分層，取l_3ml有機(jī)相檢測備用； c)揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)測定:物質(zhì)定性采用NIST08Databas、AMDIS圖譜庫中標(biāo)準(zhǔn)離子碎片圖譜進(jìn)行比對，要求匹配度大于85% ;定量方法采用半定量方法，將待測物質(zhì)豐度與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)豐度相比，根據(jù)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)濃度計算各揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)成分含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法，其特征在于:所述步驟a)中，超純水需煮沸10-20min后冷卻使用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法，其特征在于:所述步驟a)、b)中，離心條件為5000-18000r/min, 5_15min。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法，其特征在于:所述步驟a)、b)中，離心條件為8000-10000r/min, 8_12min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速簡便提取酒醅中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的方法，其特征在于:所述步驟b)中有機(jī)溶劑為乙醚、戊烷或兩者的混合液。
【文檔編號】G01N30/06GK103852543SQ201410090158
【公開日】2014年6月11日 申請日期:2014年3月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月12日
【發(fā)明者】陳良強(qiáng), 林琳, 楊帆, 王和玉, 汪地強(qiáng), 王莉 申請人:貴州茅臺酒股份有限公司