一種近紅外在線監(jiān)控銀杏葉提取過(guò)程中總黃酮醇苷含量變化的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥分離純化的技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種近紅外在線監(jiān)控銀杏葉 提取過(guò)程中總黃酮醇苷含量變化的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 在中藥制藥過(guò)程中，提取過(guò)程作為中藥生產(chǎn)的特色環(huán)節(jié)之一，決定著中藥中不同 成分在成品中的比例，即決定著藥品療效。目前，我國(guó)中藥提取過(guò)程的質(zhì)量控制仍十分被 動(dòng)，只對(duì)終端產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)檢，很少考慮工藝過(guò)程中的成分變化，生產(chǎn)工藝很難得到精確控 制，從而導(dǎo)致中藥產(chǎn)品批次間質(zhì)量差異較大，這也是中藥難以現(xiàn)代化、國(guó)際化的主要原因之 一。因此，發(fā)展形成從中藥制藥源頭一一提取工藝過(guò)程解決產(chǎn)品穩(wěn)定性和可靠性問(wèn)題的快 速分析方法，對(duì)于中藥工業(yè)技術(shù)進(jìn)步和產(chǎn)品質(zhì)量升級(jí)具有重大現(xiàn)實(shí)意義。
[0003] 銀杏葉具有益心、活血止痛、斂肺平喘之功效，是一種常用中藥。總黃酮苷作為銀 杏葉中的主要成分，具有顯著的藥理、藥效作用，因此，在銀杏葉生產(chǎn)加工各工藝環(huán)節(jié)過(guò)程 中常被用來(lái)作為質(zhì)控指標(biāo)。傳統(tǒng)的分析方法，如高效液相色譜法、紫外分光光度法等，常需 對(duì)所取樣品進(jìn)行繁雜的預(yù)處理，耗費(fèi)大量的試劑，并且信息反饋滯后，無(wú)法滿足生產(chǎn)過(guò)程中 即時(shí)分析的需要。
[0004] 近紅外光譜（near-infraredspectroscopy,NIRS)分析技術(shù)是上世紀(jì)90年代發(fā) 展起來(lái)的一項(xiàng)現(xiàn)代分析技術(shù)。它綜合運(yùn)用了計(jì)算機(jī)技術(shù)、光譜技術(shù)和化學(xué)計(jì)量等多個(gè)學(xué)科 的最新研宄成果，以其獨(dú)特的高效、快速、成本低、環(huán)保等突出優(yōu)點(diǎn)，在農(nóng)業(yè)、食品、石油化工 和制藥工程等學(xué)科中得到了廣泛應(yīng)用。在化學(xué)制藥領(lǐng)域，NIRS已被運(yùn)用于原料藥質(zhì)量分 析、反應(yīng)過(guò)程、制粒過(guò)程、混合過(guò)程、微波真空干燥過(guò)程、壓片過(guò)程、包衣和包裝過(guò)程，作為一 種極有前途的過(guò)程分析技術(shù)，其在中藥生產(chǎn)領(lǐng)域也展現(xiàn)出了巨大的應(yīng)用潛力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種近紅外在線監(jiān)控銀杏葉提取過(guò)程中總黃 酮醇苷含量變化的方法。本發(fā)明方法可以對(duì)銀杏葉提取過(guò)程中的提取液進(jìn)行實(shí)時(shí)取樣，并 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)銀杏葉提取液中的總黃酮醇苷含量變化；結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
[0006] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：一種近紅外在線監(jiān)控銀杏葉提取 過(guò)程中總黃酮醇苷含量變化的方法，包括以下步驟：
[0007] (1)收集不同批次的銀杏葉提取過(guò)程液作為校正樣本集，對(duì)其進(jìn)行近紅外光譜掃 描，采集體現(xiàn)槲皮素、山奈素、異鼠李素特性的近紅外光譜信息；其中，光譜采集條件為：掃 描范圍12500?4000cm-l，分辨率8cm-l，掃描次數(shù)96次，每個(gè)樣品測(cè)定2次，取平均光譜 用于近紅外建模；
[0008] (2)運(yùn)用高效液相色譜法分別測(cè)定所述銀杏葉提取過(guò)程液中的槲皮素含量、山奈 素含量、異鼠李素含量；按下式換算成總黃酮醇苷的含量：
[0009] 總黃酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈素含量+異鼠李素含量）X2. 51 ;
[0010] (3)運(yùn)用偏最小二乘法將所述步驟（2)高效液相色譜法測(cè)定的槲皮素含量、山奈 素含量、異鼠李素含量數(shù)據(jù)與所述步驟（1)得到的近紅外光譜信息進(jìn)行關(guān)聯(lián)，建立起銀杏 葉提取過(guò)程中槲皮素含量、山奈素含量、異鼠李素含量的多元定量校正模型；其中，用于構(gòu) 建定量校正模型的近紅外光譜波段為兩個(gè)波段，包括12493. 2?7498. 2CHT1、以及6101? 5446. 2cmS
[0011] (4)利用所述步驟（3)建立的定量校正模型對(duì)未知銀杏葉提取過(guò)程中的槲皮素含 量、山奈素含量、異鼠李素含量進(jìn)行快速檢測(cè)；按下式換算成總黃酮醇苷的含量：
[0012] 總黃酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈素含量+異鼠李素含量）X2. 51。
[0013] 所述銀杏葉提取過(guò)程液包括銀杏葉提取液和銀杏葉解析液。
[0014] 所述步驟（2)中，所述高效液相色譜法分別測(cè)定所述銀杏葉提取過(guò)程液中的槲 皮素含量、山奈素含量、異鼠李素含量的色譜條件為：色譜柱：WelchUltimateXB-C18， 4. 6*250mm，5ym;以甲醇-0. 4%磷酸溶液（50:50)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm。
[0015] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)：
[0016] (1)本發(fā)明方法可以對(duì)銀杏葉提取過(guò)程中的提取液進(jìn)行實(shí)時(shí)取樣，并實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)銀 杏葉提取液中的總黃酮醇苷含量變化；結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
[0017] (2)本發(fā)明結(jié)果表明，近紅外光譜技術(shù)可以對(duì)銀杏葉提取過(guò)程中總黃酮醇苷含量 進(jìn)行有效檢測(cè)。本發(fā)明具有方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確性高等特點(diǎn)，相對(duì)于一般儀器檢測(cè)方法，可 有效解決提取過(guò)程中總黃酮醇苷含量變化的監(jiān)控問(wèn)題，具有較強(qiáng)的實(shí)用價(jià)值，可推廣運(yùn)用 于中藥生產(chǎn)過(guò)程。
[0018] (3)水分子所含的OH基，在近紅外譜區(qū)的6900CHT1和5180CHT1附近有很強(qiáng)的倍 頻與合頻吸收譜帶，而其它各種物質(zhì)分子的倍頻與合頻吸收相對(duì)較弱，因此水溶液物質(zhì)體 系中，水就成為近紅外光譜分析時(shí)的強(qiáng)干擾因素。所以本發(fā)明在建模過(guò)程中避開(kāi)水分的強(qiáng) 干擾吸收波段進(jìn)行建模，通過(guò)RMSECV和R2作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)對(duì)不同光譜區(qū)間進(jìn)行建模試 驗(yàn)，最終選定總黃酮苷的最佳建模波段為"12493. 2?7498.Zcm'eiOl?5446.2cm-1"，從 而避免了過(guò)多的冗余信息和干擾信息，改善模型性能，提高了計(jì)算速度。此時(shí)RMSECV最小， 相關(guān)系數(shù)R2接近1，總黃酮苷的吸收特性在近紅外光譜中得到了很好地體現(xiàn)。
【附圖說(shuō)明】
[0019] 圖1為12批銀杏提取液近紅外光譜圖。
[0020] 圖2為12批銀杏解析液近紅外光譜圖。
[0021] 圖3為12批銀杏下柱液中段近紅外光譜圖。
[0022] 圖4為12批銀杏下柱液后段近紅外光譜圖。
[0023] 圖5為混合對(duì)照品液相色譜圖。
[0024] 圖6為銀杏提取液液相色譜圖。
[0025] 圖7為銀杏下柱液中段液相色譜圖。
[0026] 圖8為銀杏下柱液后段液相色譜圖。
[0027] 圖9為銀杏解析液液相色譜圖。
[0028] 圖10為校正集樣本中槲皮素NIR預(yù)測(cè)值與HPLC測(cè)定值之間的相關(guān)圖。
[0029] 圖11為校正集樣本中山奈素NIR預(yù)測(cè)值與HPLC測(cè)定值之間的相關(guān)圖。
[0030] 圖12為校