本發(fā)明涉及一種變應(yīng)原制劑批間差異的方法，尤其涉及一種用于鑒定每品種變應(yīng)原制劑批間差異的方法。
背景技術(shù)：
1998年世界衛(wèi)生組織(WHO)發(fā)表規(guī)范文件正式肯定檢測(cè)致敏原并進(jìn)行特異性免疫治療為唯一可以影響過(guò)敏性疾病自然進(jìn)程的病因治療方法，并可防止新的過(guò)敏發(fā)生。同時(shí)發(fā)布指導(dǎo)文件，認(rèn)為變應(yīng)原提取物的質(zhì)量對(duì)臨床特異性診斷的準(zhǔn)確性和治療的有效性都是至關(guān)重要的。
目前世界上在變應(yīng)原的治療方面主要有德國(guó)默克集團(tuán)的阿羅格標(biāo)準(zhǔn)化變應(yīng)原注射液，及丹麥愛(ài)爾開(kāi)一阿貝優(yōu)公司的安脫達(dá)標(biāo)準(zhǔn)化變應(yīng)原制劑；國(guó)內(nèi)主要有北京協(xié)和醫(yī)院制作變應(yīng)原粗提液，但與WHO所認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)化變應(yīng)原相比仍有一定距離，不能滿足國(guó)內(nèi)廣大過(guò)敏性疾患的特異性診療需求。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的就在于為了解決上述問(wèn)題而提供一種用于鑒定每品種變應(yīng)原制劑批間差異的方法。
本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)上述目的：
本發(fā)明包括以下步驟：
a、進(jìn)行變應(yīng)原的標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)；
b、將其提煉制成變應(yīng)原粗提液；
c、進(jìn)行變應(yīng)原致敏蛋白成分的分離純化；
d、制備抗變應(yīng)原的McAb雜交瘤細(xì)胞株，獲得單克隆抗體；
e、用純化抗原篩選抗體；
f、通過(guò)McAb抗體對(duì)抗原進(jìn)行檢測(cè)方法篩選；
g、篩選并確定化學(xué)發(fā)光法(CLIA)用于鑒定每品種變應(yīng)原批間差異；
h、建立檢測(cè)變應(yīng)原的標(biāo)準(zhǔn)化方法。
本發(fā)明的有益效果在于：
本發(fā)明提供一種用于鑒定每品種變應(yīng)原制劑批間差異的方法，為自主研發(fā)并生產(chǎn)出WHO所認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)化特異性診斷及免疫治療過(guò)敏性疾病的變應(yīng)原體內(nèi)診斷及脫敏制劑，并用于產(chǎn)業(yè)化，滿足國(guó)內(nèi)廣大過(guò)敏性疾患的特異性診療需求。
具體實(shí)施方式
下面對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明：
本發(fā)明本發(fā)明包括以下步驟：
a、進(jìn)行變應(yīng)原的標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)；
b、將其提煉制成變應(yīng)原粗提液；
c、進(jìn)行變應(yīng)原致敏蛋白成分的分離純化；
d、制備抗變應(yīng)原的McAb雜交瘤細(xì)胞株，獲得單克隆抗體；
e、用純化抗原篩選抗體；
f、通過(guò)McAb抗體對(duì)抗原進(jìn)行檢測(cè)方法篩選；
g、篩選并確定化學(xué)發(fā)光法(CLIA)用于鑒定每品種變應(yīng)原批間差異；
h、建立檢測(cè)變應(yīng)原的標(biāo)準(zhǔn)化方法。
實(shí)施例一：
a、針對(duì)粉塵螨變應(yīng)原進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)；
b、將粉塵螨收集、粉碎和凈化，用CoCa’s液提取浸出其有效成份，制作出粉塵螨變應(yīng)原粗提液；
c、通過(guò)SDS-PAGE電泳技術(shù)，將粉塵螨變應(yīng)原粗提液進(jìn)行蛋白測(cè)定及蛋白分離純化；
d、將純化所得致敏蛋白進(jìn)行體外試驗(yàn)，確定Der f11，分子量81KD，為粉塵螨變應(yīng)原的致敏組分之一；
e、制備針對(duì)抗Der f11的McAb雜交瘤細(xì)胞株，獲得單克隆抗體；
f、將純化的粉塵螨Der f11致敏組分與獲得的單克隆抗體進(jìn)行反應(yīng)，篩選出針對(duì)Der f11的抗體；
g、通過(guò)免疫學(xué)檢測(cè)的不同標(biāo)記方法，將抗Der f11的單克隆抗體與Der f11抗原進(jìn)性反應(yīng)；
h、篩選并確定化學(xué)發(fā)光法(CLIA)用于定量檢測(cè)Der f11變應(yīng)原的批間差異。
本領(lǐng)域技術(shù)人員不脫離本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和精神，可以有多種變形方案實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，以上所述僅為本發(fā)明較佳可行的實(shí)施例而已，并非因此局限本發(fā)明的權(quán)利范圍，凡運(yùn)用本發(fā)明說(shuō)明書(shū)內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)變化，均包含于本發(fā)明的權(quán)利范圍之內(nèi)。