一種利用hplc法檢測單氰胺的定量方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，采用島津高效液相色譜儀SPD-20A，以Inertsil ODS-SP色譜柱為分離色譜柱，柱溫為30℃，采用可變波長紫外吸收檢測器，檢測波長為240nm，以甲醇+水(5+95)(V+V)(即5％甲醇水溶液)為流動相，流速為0.3ml/min，采用雙氰胺為內標物，用內標法繪制單氰胺和雙氰胺的濃度比-峰面積比標準曲線，得出標準曲線的回歸方程，通過該回歸方程計算得到單氰胺的含量。本發(fā)明能夠實現(xiàn)對樣品的直接檢測，無需對樣品進行任何的前處理，大大減少分析時間，而且方法簡單易行，方便可靠。
【專利說明】-種利用HPLC法檢測單氯胺的定量方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于分析【技術領域】，設及單氯胺的定量分析方法，具體設及利用HPLC法檢 測單氯胺的定量方法。

【背景技術】
[000引晶體單氯胺（切anamideiCNgHg)不穩(wěn)定，呈菱形，無色，易潮解，烙點為46°C。單氯 胺在水中有很高的溶解度且呈弱堿性，在43°C時與水完全互溶。單氯胺含有氯基和氨基，都 是活性基團，具有上述官能團的多重反應性能，易發(fā)生加成、取代、縮合等反應。
[0003] 國外單氯胺的工業(yè)化生產始于上世紀30年代末，由氯胺化巧與酸作用而得，W后 逐漸演變?yōu)槁劝坊?、C〇2、水原料工藝路線?，F(xiàn)代工業(yè)商品單氯胺均采用此原料工藝路線 生產，但是在生產過程中有副產物雙氯胺、尿素和硫脈等產生，所W需要對單氯胺進行定量 檢測。
[0004] 文獻報道，單氯胺類物質的檢測主要有化學分析法、電位滴定法、離子色譜法等。 其中化學分析法、電位滴定法雖然比較簡單，但是耗時較長，人為誤差較大。另外有文獻報 道的單氯胺的檢測方法有柱前衍生后利用巧光檢測器進行檢測，該方法比較費時，而且巧 光檢測器也比較稀少，價格也不菲。


【發(fā)明內容】

[0005] 針對現(xiàn)有技術的不足，我們通過優(yōu)化條件，例如色譜柱（耐水柱）、流動相、柱溫、 波長的選擇等，提供了一種利用HPLC法檢測單氯胺的定量方法，該方法精密度高，重現(xiàn)性 好，準確度高，重復性好，能夠實現(xiàn)對樣品的直接檢測，大大減少分析時間，而且方法簡單易 行，方便可靠。
[0006] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術方案為：
[0007] 一種利用HPLC法檢測單氯胺的定量方法，W單氯胺標準物質做標樣，W雙氯胺為 內標物，溶劑溶解樣品，采用高效液相色譜儀測試。
[000引一種利用HPLC法檢測單氯胺的定量方法，W單氯胺標準物質做標樣，W雙氯胺為 內標物，溶劑溶解樣品，采用高效液相色譜儀測試，具體步驟如下：
[0009] (1)配制單氯胺和雙氯胺標準儲備溶液；
[0010] (2)對步驟（1)配制的單氯胺標準儲備溶液進行稀釋，配制單氯胺標準溶液A、B、 C、D、E，然后分別向單氯胺標準溶液A、B、C、D、E中加入等量的步驟（1)配制的雙氯胺標準 儲備溶液，利用高效液相色譜儀進樣分析，并同時記錄單氯胺和雙氯胺的峰面積；采用內標 法繪制單氯胺和雙氯胺的濃度比-峰面積比標準曲線，得出標準曲線的回歸方程：
[0011] y = 0. 105X+0. 0052, R2= 0. 9998,式中y為單、雙氯胺的峰面積比，X為單、雙氯 胺的濃度比，R為線性相關系數(shù)；
[001引 做配制單氯胺樣品溶液，并加入一定量的雙氯胺標準儲備溶液作為內標物，利用 高效液相色譜儀進樣分析，并同時記錄峰面積，根據步驟（2)的標準曲線回歸方程計算得 出單氯胺的含量。
[0013] 因為工業(yè)生產中，需要同時檢測單氨胺和雙氨胺的含量，一般地先用外標法測出 雙氯胺的含量，再W雙氯胺該個已知的量為內標物，去檢測單氯胺的含量，但是由于該方法 只是介紹單氯胺，就把外標法測雙氯胺含量的步驟省去，直接寫成配置的濃度相當?shù)碾p氯 胺標準儲備液。
[0014] 一種利用HPLC法檢測單氯胺的定量方法，所述的高效液相色譜儀為島津高效液 相色譜儀SPD-20A;所述的分離色譜柱選自Hypersil抓S、Hypersil ODS、LiQi;roso;rb、 S陽MADZU VP-孤S、Inertsil 孤S-SP、Extend-C18、ZORBAX ODS、ZORBAX SB-C18、LiC虹osorb C18、Hypersil ODS中的一種，且柱長為150mm，柱內徑為加m。
[0015] 一種利用HPLC法檢測單氯胺的定量方法，所述的色譜條件為柱溫為20-30°C， 采用可變波長紫外吸收檢測器，檢測波長為240nm，W 5%甲醇水溶液為流動相，流速為 0. 3-0. 5ml/min，進樣的樣品體積為20 y L。
[0016] 優(yōu)選的分離色譜柱選自Inertsil 0DS-SP色譜柱，在其它條件完全相同的條件下 進樣，發(fā)現(xiàn)W Inertsil 0DS-SP為固定相的色譜柱對于單氯胺具有良好的選擇性，能夠將單 氯胺與其他雜質如雙氯胺、硫脈等完全分離。
[0017] 優(yōu)選的色譜條件為柱溫為30°C，若溫度過高（MOC )，單氯胺容易分解產生尿素， 所W優(yōu)選為30°C，在該樣的溫度范圍內，在其它條件完全相同的條件下進樣，對樣品的分離 度，峰形，對稱度等方面的影響較小，單氯胺樣品均能實現(xiàn)良好的分離。
[0018] 優(yōu)選的流動相的流速為0. 3ml/min，在該樣的流速范圍內，在其它條件完全相同的 條件下進樣，對樣品的分離度，峰形，對稱度等方面的影響較小，單氯胺樣品均能實現(xiàn)良好 的分離。
[0019] 所述的配制單氯胺、雙氯胺標準儲備液時所用的溶劑為甲醇與水的混合溶液，且 兩者的體積比為1:20。
[0020] 本發(fā)明的發(fā)明人從節(jié)約時間，節(jié)約溶劑，節(jié)約成本角度出發(fā)，給出了最優(yōu)的色譜條 件：色譜柱為Inertsil 0DS-SP，柱長為150mm，柱內徑為加m ;檢測器為可變波長紫外吸收 檢測器，檢測波長為240皿；柱溫為30°C ;流動相為5%甲醇水溶液；流速為0. 3ml/min ;在 該樣的色譜條件下對單氯胺進行檢測，成本最少，時間最省，分離效果最好。
[0021] 本發(fā)明單雙氯胺的濃度比-峰面積比標準曲線的繪制采用的是內標法，得出標準 曲線的回歸方程，進而計算得到單氯胺的含量，即單氯胺的質量分數(shù)。
[0022] 單氯胺分子極性很大，生產過程中有副產物雙氯胺、尿素和硫脈等產生，用液相不 易分離，我們的方法是通過優(yōu)化條件，例如色譜柱（耐水柱）、流動相、柱溫、波長的選擇等， 達到良好分離的目的。
[0023] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，利用高效液相色譜法對單氯胺檢測方法的建立，該方法 精密度高，重現(xiàn)性好，準確度高，重復性好，能夠實現(xiàn)對樣品的直接檢測，大大減少分析時 間，而且方法簡單易行，方便可靠。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0024] 圖1是實施例1中試液K1樣品的液相色譜圖；
[0025] 圖2是實施例2中試液K2樣品的液相色譜圖；
[0026] 圖3是實施例3中試液K3樣品的液相色譜圖；
[0027] 圖中橫坐標代表保留時間，縱坐標代表電壓值。

【具體實施方式】
[002引下面結合具體實施例對發(fā)明作進一步說明，但不作為對
【發(fā)明內容】
的限制。
[0029] 本發(fā)明所采用的高效液相色譜儀的型號為島津SPD-20A，為現(xiàn)有產品。
[0030] 實施例1
[0031] 現(xiàn)有一批一定濃度范圍內的的單氯胺水溶液100公斤，需要對單氯胺的濃度進行 檢測。
[0032] 所采用的高效液相色譜條件為：色譜柱為Inertsil ODS-SP，柱長為150mm，柱內 徑為加m ;檢測器為可變波長紫外吸收檢測器，檢測波長為240nm ;柱溫為30°C ;流動相為 5%甲醇水溶液；流速為0. 5ml/min。
[0033] 一種利用HPLC法檢測單氯胺的定量方法，采用高效液相色譜儀進行檢測、內標法 定量分析，具體步驟包括；
[0034] (1)配制單氯胺標準儲備溶液
[0035] 精密稱取lOOOmg單氯胺標準品（純度98% )于500ml容量瓶中，用5%甲醇水溶 液定容至刻度，配成1. 96mg/ml的單氯胺標準儲備溶液。
[0036] (2)配制雙氯胺標準儲備溶液
[0037] 精密稱取lOOOmg雙氯胺標準品（純度99% )于500ml容量瓶中，用5%甲醇水溶 液（體積比）定容至刻度，配成1. 98mg/ml的雙氯胺標準儲備溶液。
[003引 （3)配制單氯胺標準溶液
[0039] 分別精確移取10ml、20ml、30ml、40ml、50ml的單氯胺標準儲備溶液于50ml容量瓶 中，同時分別移取10ml雙氯胺標準儲備液于容量瓶中，用5 %甲醇水溶液（體積比）定容到 刻度，得到標準溶液A、B、C、D、E (其單氯胺濃度分別為0. 392mg/ml，0. 784mg/ml，1. 176mg/ ml, 1. 568mg/ml，1. 960mg/ml，雙氯胺濃度為 0. 396mg/ml)。
[0040] 做標準曲線繪制
[004U 將標準溶液A、B、C、D、E搖勻后，利用高效液相色譜儀上的20 uL定量環(huán)進樣分 析，并同時記錄峰面積比（分別是0. 7119、1. 4161、2. 8434、3. 6264、7. 1203);繪制單雙氯 胺的濃度比-峰面積比標準曲線，得出標準曲線的回歸方程為；y = 0. 105X+0. 0052, R2 = 0. 9998,式中y為單雙氯胺的峰面積比，X為單雙氯胺的濃度比，R為線性相關系數(shù)。
[0042] (4)配制單氯胺樣品溶液
[0043] 精密稱取80llmg(W)單氯胺水溶液樣品，5%甲醇水溶液定容至50ml (V2)容量瓶 得樣品單氯胺儲備溶液D1，分別精密移取四份10ml (V3)樣品單氯胺標準儲備溶液D1分于 50ml (Vi)容量瓶中，并分別移取10ml雙氯胺標準儲備液（Cl)于容量瓶（Vi)中，定容得樣品 試液1(1，1^，11，化；采用同樣的色譜條件在高效液相色譜儀上^20^1定量環(huán)進樣分析，并 同時記錄峰面積比（表1);
[0044] (5)計算單氯胺的含量
[0045]

【權利要求】
1. 一種利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，其特征在于：以單氰胺標準物質做標樣， 以雙氰胺為內標物，溶劑溶解樣品，采用高效液相色譜儀測試。
2. 如權利要求1所述的利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，其特征在于：以單氰胺標 準物質做標樣，以雙氰胺為內標物，溶劑溶解樣品，采用高效液相色譜儀測試，具體步驟如 下： (1) 配制單氰胺和雙氰胺標準儲備溶液； (2) 對步驟（1)配制的單氰胺標準儲備溶液進行稀釋，配制不同濃度的單氰胺標準溶 液A、B、C、D、E，然后分別向單氰胺標準溶液A、B、C、D、E中加入等量的步驟（1)配制的雙氰 胺標準儲備溶液，利用高效液相色譜儀進樣分析，并同時記錄單氰胺和雙氰胺的峰面積；采 用內標法繪制單氰胺和雙氰胺的濃度比-峰面積比標準曲線，得出標準曲線的回歸方程： y = 0. 105x+0. 0052, R2= 0. 9998,式中y為單、雙氰胺的峰面積比，x為單、雙氰胺的 濃度比，R為線性相關系數(shù)； (3) 配制單氰胺樣品溶液，并加入步驟（1)配制的雙氰胺標準儲備溶液作為內標物，利 用高效液相色譜儀進樣分析，并同時記錄峰面積，根據步驟（2)的標準曲線回歸方程計算 得出單氰胺的含量。
3. 如權利要求1所述的利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，其特征在于：所述的高 效液相色譜儀為島津高效液相色譜儀SPD-20A ;所述的分離色譜柱選自Hypersil BDS、 Hypersil ODS、LiChrosorb、SHIMADZU VP-〇DS、Inertsil ODS-SP、Extend-C18、ZORBAX ODS、 ZORBAX SB-C18、LiChrosorb C18、Hypersil ODS 中的一種，且柱長為 150mm，柱內徑為 5um。
4. 如權利要求1所述的利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，其特征在于：所述的色譜 條件為柱溫為20-30°C，采用可變波長紫外吸收檢測器，檢測波長為240nm，以5%甲醇水溶 液為流動相，流速為0. 3-0. 5ml/min，進樣的樣品體積為20 y L。
5. 如權利要求3所述的利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，其特征在于：所述的分離 色譜柱選自Inertsil 0DS-SP色譜柱。
6. 如權利要求4所述的利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，其特征在于：所述的色譜 條件為柱溫為30°C。
7. 如權利要求4所述的利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，其特征在于：流動相的流 速為 0? 3ml/min〇
8. 如權利要求2所述的利用HPLC法檢測單氰胺的定量方法，其特征在于：配制單氰 胺、雙氰胺標準儲備溶液時所用的溶劑為甲醇與水的混合溶液，且兩者的體積比為1 :20。
【文檔編號】G01N30/02GK104502473SQ201410753678
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月10日 優(yōu)先權日:2014年12月10日
【發(fā)明者】董昭蘋, 吳文雷, 姚剛, 徐萍萍, 張銳, 李曉紅, 呂印美 申請人:黃河三角洲京博化工研究院有限公司