一種化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法，包括如下步驟：（1）樣品的預(yù)處理：將樣品置于體積比為70:30的乙腈和甲醇的混合溶液中，混勻后超聲提取，離心，取上清液氮吹至近干，采用體積比為85:15的15mmol/L乙酸銨溶液和乙腈的混合溶液溶解殘?jiān)?，過0.22μm微孔濾膜，濾液備用；（2）對所述濾液進(jìn)行高效液相色譜分離，流動相采用梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫，外標(biāo)法定量；（3）檢出的陽性樣品采用高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法進(jìn)行確證，本發(fā)明所述方法同時完成呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃它酮和呋喃西林四種硝基呋喃類抗生素的檢測。本發(fā)明所述方法準(zhǔn)確、可靠且靈敏度高。
【專利說明】一種化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種抗生素的測定方法，特別是涉及一種化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]硝基呋喃類藥物是一種廣譜抗生素，因其殺菌能力強(qiáng)、抗菌譜廣、不易產(chǎn)生耐藥性、價格低廉及療效好，在臨床得到廣泛應(yīng)用。該類抗生素主要用于治療泌尿系統(tǒng)感染、腸道細(xì)菌感染、皮膚創(chuàng)傷感染以及作為食品添加劑預(yù)防家禽腸道傳染病。常見的硝基呋喃類抗生素主要包括四種:呋喃妥因(Furadantin, NFT)、呋喃唑酮(Furazolidone, FZD)、呋喃它酮(Furaltadone，F(xiàn)TD)及呋喃西林(Furacilin，NFZ)，它們都是人工合成的具有5-硝基呋喃基本結(jié)構(gòu)的抗菌藥物。據(jù)了解，硝基呋喃類藥物盡管不會產(chǎn)生急性、亞急性危害，但人體長期大量接觸或攝入硝基呋喃類化合物，存在致癌、致畸胎的可能性，而且長期接觸該類藥物會使使用者產(chǎn)生耐藥性，降低此類藥物的臨床治療效果，對人體的潛在危害不容忽視。
[0003]硝基呋喃類藥物進(jìn)入人體后迅速被吸收，其主要毒副作用主要表現(xiàn)為:(I)對人體有較強(qiáng)的毒性作用，長時間或大劑量接觸硝基呋喃類藥物均能對人體產(chǎn)生毒性作用，其中呋喃西林的毒性最大，呋喃唑酮的毒性相對較??；(2)致癌致畸致突變副作用:呋喃它酮為強(qiáng)致癌性藥物，呋喃唑酮為中等強(qiáng)度致癌藥物；(3)周圍神經(jīng)炎，表現(xiàn)為手足麻木，久之可致肌萎縮，往往遷延難愈；(4)過敏反應(yīng)(包括氣喘、胸悶、皮疹、藥物熱、嗜酸性粒細(xì)胞增多)；(5)胃腸道反應(yīng)和中毒性精神癥狀如幻聽、幻覺、煩躁等；(6)溶血性貧血、黃疸、肺部并發(fā)癥等。
[0004]鑒于硝基呋喃類藥物有可能作為祛痘化妝品添加劑使用，為了避免含有此類藥物的化妝品給消費(fèi)者帶來健康危害，歐盟化妝品法規(guī)(EC1223/2009)、我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》等法律法規(guī)中均明確規(guī)定硝基呋喃類抗生素在化妝品中為禁用物質(zhì)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種準(zhǔn)確、可靠且靈敏度高的化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法。
[0006]一種化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法，包括如下步驟:
[0007](I)樣品的預(yù)處理:將樣品置于體積比為70:30的乙腈和甲醇的混合溶液中，混勻后超聲提取，離心，取上清液氮吹至近干，采用體積比為85:15的15mmol/L乙酸銨溶液和乙腈的混合溶液溶解殘?jiān)?，過0.22 μ m微孔濾膜，濾液備用；
[0008](2)對所述濾液進(jìn)行高效液相色譜分離，流動相采用梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫，外標(biāo)法定量，色譜分離條件:色譜柱:Waters XTerra MS C18, 5 μ m, 4.6mmX 250mm ;流動相:乙酸銨和乙腈的混合溶液；柱溫:30°C ;進(jìn)樣量:10μ L ;檢測器:二極管陣列檢測器，檢測波長:365nm ；
[0009](3)經(jīng)過步驟(2)得到的檢出陽性樣品采用高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法進(jìn)行確證，所述高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法確證條件為:
[0010]色譜柱:WatersSunfire C18, 3.5 μ m, 2.1mmX 150mm ;流動相:乙臆和 0.1% 甲酸-水的混合溶液，梯度洗脫；柱溫:30°C ;流速:0.2mL/min ;進(jìn)樣量:5μ L ;毛細(xì)管電壓:
3.2kV ;脫溶劑氣溫度:400°C ;脫溶劑氣流速:800L/h ;錐孔氣體流速:50L/h ;離子源溫度:1500C ;萃取電壓:3.0OV ;射頻透鏡電壓:0.1OV ;碰撞氣體:氬氣；數(shù)據(jù)采集模式:多反應(yīng)監(jiān)測；
[0011]所述方法同時完成呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃它酮和呋喃西林四種硝基呋喃類抗生素的檢測。
[0012]本發(fā)明所述的化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法，其中，步驟(2)中所述乙酸銨溶液的濃度為15mmol/L，由1.1g乙酸銨溶于1000mL水中制備而成，所述梯度洗脫程序見表1，其中，A為乙酸銨溶液，B為乙腈；
[0013]表1.高效液相色譜梯度洗脫程序
[0014]
【權(quán)利要求】
1. 一種化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法，其特征在于:包括如下步驟: (1)樣品的預(yù)處理:將樣品置于體積比為70:30的乙腈和甲醇的混合溶液中，混勻后超聲提取，離心，取上清液氮吹至近干，采用體積比為85:15的15mmol/L乙酸銨溶液和乙腈的混合溶液溶解殘?jiān)?，過0.22 μ m微孔濾膜，濾液備用； (2)對所述濾液進(jìn)行高效液相色譜分離，流動相采用梯度洗脫程序進(jìn)行洗脫，外標(biāo)法定量，色譜分離條件:色譜柱:Waters XTerra MS C18, 5 μ m, 4.6mmX 250mm ;流動相:乙酸銨和乙腈的混合溶液；柱溫:30°C ;進(jìn)樣量:10μ L ;檢測器:二極管陣列檢測器，檢測波長:365nm ； (3)經(jīng)過步驟(2)得到的檢出陽性樣品采用高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法進(jìn)行確證，所述高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法確證條件為: 色譜柱:Waters Sunfire C18, 3.5 μ m, 2.1mmX 150mm ;流動相:乙腈和 0.1% 甲酸-水的混合溶液，梯度洗脫；柱溫:30°C ;流速:0.2mL/min ;進(jìn)樣量:5μ L ;毛細(xì)管電壓:3.2kV ;脫溶劑氣溫度:400°C ;脫溶劑氣流速:800L/h ;錐孔氣體流速:50L/h ;離子源溫度:150°C ;萃取電壓:3.0OV ;射頻透鏡電壓:0.1OV ;碰撞氣體:氬氣；數(shù)據(jù)采集模式:多反應(yīng)監(jiān)測； 所述方法同時完成呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃它酮和呋喃西林四種硝基呋喃類抗生素的測定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法，其特征在于:步驟(2)中所述乙酸銨溶液的濃度為15mmol/L，由1.1g乙酸銨溶于1000mL水中制備而成，所述梯度洗脫程序見表1，其中，A為乙酸銨溶液，B為乙腈； 表1.高效液相色譜梯度洗脫程序:
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法，其特征在于:步驟(3)中所述梯度洗脫程序見表2，其中，A為乙腈，B為0.1%甲酸水溶液，四種硝基呋喃類抗生素的質(zhì)譜分析參數(shù)見表3; 表2.高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜確證條件中高效液相色譜梯度洗脫程序
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法，其特征在于:步驟(I)具體包括如下步驟:稱取0.5g化妝品于25mL比色管中，加入體積比為70:30的乙腈和甲醇的混合溶液，定容至IOmL刻度，渦旋振蕩混勻，于超聲波水浴中超聲提取30min后，5000rpm高速離心10min,取2mL上清液氮吹至近干，加入ImL體積比為85:15的15mmol/L乙酸銨溶液和乙腈的混合溶液溶解殘?jiān)?，過0.22 μ m微孔濾膜，濾液供高效液相色譜分析測定及高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜確證。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中硝基呋喃類抗生素的測定方法，其特征在于:取樣.0.5g時,呋喃妥因、呋喃唑酮及呋喃西林的檢出限為2mg/kg,定量限為5mg/kg,呋喃它酮的檢出限為2.5mg/kg,定量限為7.5mg/kg。
【文檔編號】G01N30/02GK103926340SQ201410136445
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年4月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月4日
【發(fā)明者】馬強(qiáng), 孟憲雙, 白樺, 陳云霞, 李晶瑞, 馬會娟, 王元成 申請人:中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院