專(zhuān)利名稱(chēng)：用于診斷白血病的試劑盒和系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體而言涉及一種用于診斷白血病的試劑盒。
背景技術(shù)：
白血病是造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，又叫“血癌”，在兒科惡性腫瘤的發(fā)病率中居第一位，它的死亡率在導(dǎo)致兒童及35歲以下成年人死亡的惡性腫瘤中排首位，是威脅兒童和青壯年生命健康最常見(jiàn)的惡性腫瘤。目前我國(guó)白血病的發(fā)病率，在各種腫瘤發(fā)病率中位居6-8 位。白血病的病源是由于細(xì)胞內(nèi)DNA的變異形成的骨髓中造血組織的不正常工作。骨髓中的干細(xì)胞每天可以制造約5 40萬(wàn)個(gè)/I立方毫米的紅血球和7400個(gè)/I立方毫米白血球，而白血病病人過(guò)分生產(chǎn)白血球且多數(shù)的白細(xì)胞是不成熟的，為幼稚細(xì)胞，其存活期比正常情況下長(zhǎng)。盡管這種白細(xì)胞數(shù)量很大，然而卻不能像正常白細(xì)胞那樣抗感染。體內(nèi)這種白細(xì)胞的增多，會(huì)直接影響一些重要器官的功能，影響正常健康血細(xì)胞的產(chǎn)量。由于腫瘤細(xì)胞惡性增生，抑制紅細(xì)胞和血小板止血的產(chǎn)生，甚至沒(méi)有足夠的正常白細(xì)胞抗感染，很容易受擦傷、出血、感染。而且過(guò)多的白細(xì)胞也妨害骨髓的其他工作，這使得骨髓生產(chǎn)其它血細(xì)胞的功能降低。白血病可以擴(kuò)散到淋巴結(jié)、脾、肝、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和其它器官，產(chǎn)生不同癥狀。這些癥狀，主要跟骨髓內(nèi)造血功能的破壞有關(guān)，如持續(xù)發(fā)燒，感染經(jīng)久不愈，貧血，點(diǎn)狀出血等； 還有血癌細(xì)胞穿滲組織引起的癥狀，如淋巴結(jié)腫大，骨痛或關(guān)節(jié)痛，牙齦腫脹，肝脾腫大等。白血病的診斷非常困難，一般需要結(jié)合臨床表現(xiàn)、體格檢查和實(shí)驗(yàn)室化驗(yàn)三方面綜合判斷才能最終確診。白細(xì)胞計(jì)數(shù)可以在一定程度上反映骨髓造血功能異常的風(fēng)險(xiǎn)，但單單此項(xiàng)檢查遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能達(dá)到確診的需要。通常而言，要確診白血病，外周血檢和骨髓穿刺取樣檢測(cè)都是必須的。但是，由于骨髓穿刺并不易為常人所接受，因此目前臨床無(wú)法提供一種白血病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警的手段，同時(shí)也大大阻礙了白血病的早期發(fā)現(xiàn)及介入治療。當(dāng)病人察覺(jué)到時(shí)，往往已經(jīng)進(jìn)入了白血病發(fā)病的中后期。此外，血液中癌細(xì)胞的微小殘留是預(yù)后的一個(gè)重要指標(biāo)，對(duì)于微小殘留病的準(zhǔn)確檢測(cè)，對(duì)指導(dǎo)醫(yī)生的下一步治療有重要意義。然而目前臨床常用的分子生物學(xué)檢測(cè)方法(PCR)所能達(dá)到的靈敏度僅為每IO4個(gè)血細(xì)胞含有一個(gè)癌細(xì)胞，限制了對(duì)微小殘留病的檢測(cè)水平。菁染料是一種常用染料，具有獨(dú)特的光敏感性質(zhì)，幾個(gè)世紀(jì)以來(lái)，伴隨其獨(dú)特理化、光學(xué)性質(zhì)被發(fā)現(xiàn)，逐漸被用做顯影劑，光敏劑，非線性光學(xué)材料等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)方面提供一種用于診斷白血病的試劑盒。根據(jù)本發(fā)明的試劑盒包括試劑I和試劑II，其中試劑I為pH值為6 8的緩沖液，試劑II為菁染料，所述菁染料具體為下式I所示的化合物
權(quán)利要求
1.一種用于診斷白血病的試劑盒，包括試劑I、試劑II和試劑III，其中所述試劑I為pH值為6 8的緩沖液，所述試劑II為式I的化合物，所述試劑III為極性大于4. O的有機(jī)溶劑 其中=R1為C1-C6的烷基、苯基、烷基取代的苯基；R2、R3、R4和R5獨(dú)立地選自H或C1-C6的燒基，或者R2和R3與它們所連接的碳原子一起形成5元至7元的環(huán)結(jié)構(gòu),或者R4和R5與它們所連接的碳原子一起形成5元至7元的環(huán)結(jié)構(gòu)；R6和R7獨(dú)立地選自C1-C6的烷基；Y為鹵素；X1; X2獨(dú)立選自C、O、S、Se、Te。
2.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其中所述緩沖液為含有一價(jià)金屬離子的緩沖液。
3.如權(quán)利要求I或2所述的試劑盒，所述緩沖液選自磷酸鈉-磷酸氫鈉緩沖液、磷酸鉀-磷酸氫鉀緩沖液、巴比妥鈉-鹽酸緩沖液或檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。
4.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其中R1選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戍基、異戍基、正己基、異己基、苯基、甲基苯基或_■甲基苯基。
5.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其中R2、R3>R4和R5獨(dú)立地選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、正己基或異己基。
6.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其中在R2和R3與它們所連接的碳原子形成環(huán)結(jié)構(gòu)的情況下，所述環(huán)結(jié)構(gòu)為飽和環(huán)或不飽和環(huán)，含有或不含有N或S原子。
7.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其中在R4和R5與它們所連接的碳原子形成環(huán)結(jié)構(gòu)的情況下，所述環(huán)結(jié)構(gòu)為飽和環(huán)或不飽和環(huán)，含有或不含有N或S原子。
8.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其中Y為氟、氯、溴或碘。
9.如權(quán)利要求I所述的試劑盒，其中所述試劑III選自甲基異丁酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、異丙醇、氯仿、甲基乙基酮、二惡烷、吡唆、丙酮、硝基甲烷、乙腈、二甲基甲酰胺、甲醇、乙二醇、二甲亞砜或它們的混合物。
10.一種用于診斷白血病的系統(tǒng)，包括權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的試劑盒以及熒光光譜儀或紫外-可見(jiàn)光吸收光譜儀。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用于診斷白血病的試劑盒和系統(tǒng)，其以受試者的外周血為檢測(cè)對(duì)象，不需進(jìn)行骨髓穿刺即可得到準(zhǔn)確的診斷結(jié)果，不僅對(duì)患者創(chuàng)傷小，而且靈敏度高，特異性強(qiáng)，僅需一步染色、無(wú)洗滌，操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短，便于大規(guī)模篩查與追蹤治療。
文檔編號(hào)G01N21/64GK102706842SQ201210164310
公開(kāi)日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2012年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月24日
發(fā)明者向俊鋒, 唐亞林, 姜薇, 孫紅霞, 尚倩, 楊千帆, 蓋偉 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所