專(zhuān)利名稱(chēng)：用共振散射光譜測(cè)定吡哌酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及分析化學(xué)，具體是用共振散射光譜測(cè)定吡哌酸的方法。
背景技術(shù)：
卩比哌酸(Pipemidicacid)化學(xué)名稱(chēng)為8_こ基-5_氧代_5，8_ ニ氫_2 (I-哌嗪基)-(2，3-d)嘧啶-6-羧酸，簡(jiǎn)稱(chēng)PPA，是ー種吡啶酮酸類(lèi)抗菌藥，它具有抗菌譜廣、活性 強(qiáng)、毒性低等特點(diǎn)，是ー種治療腸道疾病的常用藥物。因此，監(jiān)控吡哌酸的質(zhì)量有著重要的意義。目前，測(cè)定吡哌酸的方法主要有分光光度法，伏安法，示波極譜法，滴定法，化學(xué)發(fā)光法，熒光光譜法，高效液相色譜法等。這些方法中大多數(shù)都具有很多明顯的缺點(diǎn)。如示波滴定法中所用的汞是ー種劇毒物，對(duì)操作者的健康很不利，而高效液相色譜法因儀器昂貴，操作過(guò)程較為煩瑣很難普及；分光光度法操作雖然簡(jiǎn)單，但靈敏度不高，干擾大。尋找ー種操作簡(jiǎn)便，價(jià)廉，靈敏的測(cè)定吡哌酸含量的方法很有必要。目前尚未見(jiàn)共振散射光譜法測(cè)定吡哌酸的報(bào)道。本發(fā)明基于吡哌酸與四苯硼鈉在PH 3.6的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中形成離子締合物微粒，該微粒在480 nm波長(zhǎng)處產(chǎn)生ー個(gè)共振散射光譜峰，且共振散射強(qiáng)度與吡哌酸的濃度呈線性關(guān)系，據(jù)此，建立了一個(gè)測(cè)定吡哌酸的共振散射光譜分析新方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種簡(jiǎn)單快速的用共振散射光譜測(cè)定吡哌酸的方法。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的原理是在pH 3. 6的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中，吡哌酸與四苯硼鈉反應(yīng)形成離子締合物微粒，該微粒在480 nm波長(zhǎng)處產(chǎn)生ー個(gè)共振散射光譜峰，且共振散射強(qiáng)度與吡哌酸的濃度呈線性關(guān)系，據(jù)此建立ー個(gè)用共振散射光譜測(cè)定吡哌酸的方法。用共振散射光譜測(cè)定吡哌酸的方法，包括如下步驟
(1)取5支5mL的刻度試管，依次移取100 800 μ L pH 3. O 4. 8的醋酸-醋酸鈉緩沖液，50 700 UL 2. O mmol/L的四苯硼鈉溶液，再加入10 950 μ L濃度為200 μ g/mL的吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，混勻，室溫放置20分鐘，用二次蒸餾水稀釋至2. O mL，混勻，作標(biāo)準(zhǔn)體系；
(2)另取I支5mL的刻度試管，用步驟(I)的方法，但不加吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)液制備空白對(duì)照體系溶液；
(3)分別取按步驟(I) (2)制備的吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液及空白對(duì)照體系溶液適量，置于比色皿中，于熒光分光光度計(jì)上，設(shè)置光電倍增管電壓，入射狹縫及激發(fā)狹縫儀器參數(shù)，在激發(fā)波長(zhǎng)等于發(fā)射波長(zhǎng)的條件下，同步掃描，得到體系的共振散射光譜，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)體系480 nm處的共振散射強(qiáng)度為/，測(cè)試空白對(duì)照體系的共振散射強(qiáng)度為h,并計(jì)算△ / = I-I0 ；
(4)以ΛJ對(duì)吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度關(guān)系做工作曲線；
(5)被測(cè)物樣品測(cè)定取含吡哌酸的原料藥，可以是研缽中研細(xì)的吡哌酸膠囊劑內(nèi)容物、吡哌酸片劑藥品，稱(chēng)取適量藥品置于器皿中，每100毫克吡哌酸加O. 01 mol/L NaOH溶液I. O mL,振搖，使吡哌酸完全溶解，再加二次蒸餾水制成含吡哌酸的濃度在I. O 95μ g/mL之間，將此溶液用濾紙過(guò)濾，取適量濾液，按步驟(I) (3)操作，但步驟(I)不加吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，而是加樣品液，測(cè)定樣品的共振散射強(qiáng)度為/#，空白的共振散射強(qiáng)度為ο，算出被測(cè)物的AI樣=I樣-ェ樣ο ;
(6)根據(jù)樣品測(cè)得的，查步驟(4)的工作曲線，計(jì)算出被測(cè)物藥品吡哌酸的含量。所述的吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法是每100毫克吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)品加O. 01 mol/LNaOH溶液I. O mL使溶解，再用二次蒸餾水稀釋至需要的濃度。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是與已有的方法相比，本測(cè)定方法的儀器簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，快速，試劑易得，靈敏度高。


圖I為本發(fā)明實(shí)施例測(cè)定吡哌酸的部分共振散射光譜圖。圖中曲線a至c表示a: pH 3.6醋酸-醋酸鈉緩沖液+O. 4 mmol/L四苯硼鈉溶液；b: pH 3. 6醋酸-醋酸鈉緩沖液+O. 4 mmol/L四苯硼鈉溶液+20 μ g/mL批哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液；c: pH 3.6醋酸-醋酸鈉緩沖液+O. 4 mmol/L四苯硼鈉溶液+40 μ g/mL批哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例
(1)取5支5mL的刻度試管，依次移取300 μ L pH 3.6的醋酸-醋酸鈉緩沖液，400μ L 2. O mmol/L 的四苯硼鈉溶液，再加入 10 μ L、50 μ L、200 μ L、400 μ L、950 μ L 濃度為200 μ g/mL的吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,混勻，室溫放置20分鐘,用二次蒸懼水稀釋至2. O mL,混勻；
(2)另取I支5mL的刻度試管，用步驟(I)的方法，但不加吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液制備空白對(duì)照體系溶液；
(3)分別取按步驟(I) (2)制備的吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液及空白對(duì)照體系溶液適量，置于Icm比色皿中，于Cary Eclipse型熒光分光光度計(jì)上，設(shè)置光電倍增管電壓為450v，入射狹縫、激發(fā)狹縫均為2. 5nm，激發(fā)波長(zhǎng)等于發(fā)射波長(zhǎng)的條件下，同步掃描，得到體系的共振散射光譜，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)體系480 nm處的共振散射強(qiáng)度為ム測(cè)試空白對(duì)照體系的共振散射強(qiáng)度為J0，計(jì)算 Δ J = I-I0 ；
(4)以ΛJ對(duì)吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度C做工作曲線，回歸方程為Λ J =8. 55C +52. 6，吡哌酸濃度C的單位為μ g/mL ；
(5)被測(cè)物樣品測(cè)定1)精密稱(chēng)取吡哌酸原料藥100mg 2份，分別置于100 mL容量瓶中。2)精密稱(chēng)取規(guī)格為0. 25g的吡哌酸片20片，稱(chēng)定重量為5. 730g，置于研缽中研細(xì)，稱(chēng)取115 mg 2份，分別置于100 mL容量瓶中。按每100毫克吡哌酸加0. 01 mol/L NaOH溶液1.0 mL，分別置于上述4個(gè)容量瓶中，振搖，使吡哌酸完全溶解后，用二次蒸餾水定容至100mL，搖勻，用濾紙過(guò)濾；取0. I mL濾液，按步驟(I) (3)操作，但不加吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定樣品的共振散射強(qiáng)度為/#，空白的共振散射強(qiáng)度為/#。。算出被測(cè)物吡哌酸的Λ/#= J
樣_1樣0 ;(6)根據(jù)樣品測(cè)得的，查步驟(4)的工作曲線，計(jì)算出被測(cè)物吡哌酸藥品的含量。本發(fā)明實(shí)施例測(cè)定吡哌酸原料藥2份，吡哌酸片2份，計(jì)算后吡哌酸原料藥含量分別為99. 96%,99. 85% ;吡哌酸片含量分別為100. 1%、100. 7%，均符合中國(guó)藥典的標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明實(shí)施例測(cè)定吡哌酸的線性范圍為1.0 95レ8/111し檢出限為0.05 Ug/ mL。
權(quán)利要求
1.用共振散射光譜測(cè)定吡哌酸的方法，其特征是測(cè)定方法包括步驟如下 (1)取5mL的刻度試管，依次移取100 800 μ L pH 3. O 4. 8的醋酸-醋酸鈉緩沖液，50 700 μ L 2. O mmol/L的四苯硼鈉溶液，再加入10 950 μ L濃度為200 μ g/mL的吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，混勻，室溫放置20分鐘，用二次蒸餾水稀釋至2. O mL，混勻； (2)另取5mL的刻度試管，用步驟(I)的方法，但不加吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)液制備空白對(duì)照體系溶液； (3)分別取按步驟(I) (2)制備的吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液及空白對(duì)照體系溶液適量，置于比色皿中，于熒光分光光度計(jì)上，設(shè)置光電倍增管電壓，入射狹縫、激發(fā)狹縫，激發(fā)波長(zhǎng)等于發(fā)射波長(zhǎng)的條件下，同步掃描，得到體系的共振散射光譜，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)體系480 nm處的共振散射強(qiáng)度為/，測(cè)試空白對(duì)照體系的共振散射強(qiáng)度為ム，計(jì)算Λ J = I-I0 ； (4)以ΛJ對(duì)吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度關(guān)系做工作曲線； (5)被測(cè)物樣品測(cè)定取吡哌酸原料藥，或置于研缽中研細(xì)的吡哌酸膠囊劑內(nèi)容物、批哌酸片劑藥品，稱(chēng)取適量藥品置于器皿中，每100毫克吡哌酸加O. 01 mo I/L NaOH溶液I. OmL,振搖，使吡哌酸完全溶解，再加二次蒸餾水制成含吡哌酸的濃度在I. O 95 μ g/mL之間，將此溶液用濾紙過(guò)濾，取適量濾液，按步驟(I) (3)操作，但步驟(I)不加吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，而加樣品液，測(cè)定樣品的共振散射強(qiáng)度為/#，空白的共振散射強(qiáng)度為/#(1，算出被測(cè)物的Δ J樣=J樣-J樣ο ; (6)根據(jù)樣品測(cè)得的，查步驟(4)的工作曲線，計(jì)算出被測(cè)物藥品吡哌酸的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征是所述的吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法是每100毫克吡哌酸標(biāo)準(zhǔn)品加O. 01 mol/L NaOH溶液I. O mL使溶解，再用二次蒸餾水稀釋至需要的濃度。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用共振散射光譜測(cè)定吡哌酸的方法，主要是利用吡哌酸與四苯硼鈉在pH3.6的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中形成離子締合物微粒，該微粒在480nm波長(zhǎng)處產(chǎn)生一個(gè)共振散射光譜峰，且共振散射強(qiáng)度與吡哌酸的濃度呈線性關(guān)系，據(jù)此，建立一個(gè)測(cè)定吡哌酸含量的共振散射光譜分析新方法。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是本測(cè)定方法與已有的方法相比，本測(cè)定方法的儀器簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，快速，試劑易得，靈敏度高。
文檔編號(hào)G01N21/63GK102645422SQ20121010820
公開(kāi)日2012年8月22日 申請(qǐng)日期2012年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月13日
發(fā)明者梁愛(ài)惠, 胡茂輝, 蔣治良 申請(qǐng)人:廣西師范大學(xué)