專利名稱：八味安寧制劑的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種中藥制劑的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
八味安寧丸是藏醫(yī)傳統(tǒng)驗(yàn)方，收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》藏藥分冊(cè)中，標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)為 WS3-BC-0234-95，處方由寒水石(制)、褐鐵礦(制)、白芥子、甘青青蘭、鐵棒錘、訶子、毛訶子、余甘子等藥材組成。消食，止血行瘀，用于經(jīng)血過(guò)多，崩漏，消化不良，胃脹滿，腰腎疼痛。八味安寧散為藏族驗(yàn)方，原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》 (95年版藏藥第一冊(cè))。拼音名BaweiAnning San書頁(yè)號(hào)Cl-237標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)WS3-BC-0234-9處方寒水石(制)400g、褐鐵礦(制)100g、白芥子350g、甘青青蘭10g、鐵棒錘 10g、訶子10g、毛訶子10g、余甘子IOgo制法以上八味，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，即得。性狀本品為棕紅色粉末，氣淡，味苦、辛。檢查應(yīng)符合散劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(附錄10頁(yè))。功能與主治消食，止血行瘀。用于經(jīng)血過(guò)多，崩漏，消化不良，胃脹滿，腰腎疼痛。用法與用量一次lg，一日2 3次。規(guī)格每袋裝10g。貯藏密閉，防潮。目前尚未有八味安寧制劑的檢測(cè)方法，也沒有對(duì)方中的毒性成分進(jìn)行含量檢測(cè)的方法。寒水石載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)藏藥第一冊(cè)，為硫酸鹽類礦物，主含硫酸鈣，稱北寒水石，或?yàn)樘妓猁}類礦物，主含碳酸鈣，稱南寒水石。褐鐵礦載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)藏藥第一冊(cè)，為表生礦物，由含鐵礦物，尤其是含鐵硫化物礦床地表部分，經(jīng)氧化和分解而成。白芥子收載于《中國(guó)藥典》2010年版一部,為十字花科植物白芥SinapisalbaL.或芥Brassicajuncea(L. ) Czern. et Coss.的干燥成熟種子。前者習(xí)稱“白芥子”，后者習(xí)稱
“黃芥子”。甘青青蘭收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)藏藥第一冊(cè)，為唇形科植物甘青青蘭 Dracocephalum tanguticum Maxim.的干燥地上部分。鐵棒錘，《中華本草》藏藥卷274頁(yè)中記載到鐵棒錘(榜阿那保)，異名熱毒那?！抖饶副静荨?，滿慶、孜巴、熱毒、巴保、贊毒、榜那《藍(lán)琉璃》，洛毒那?！毒е楸静荨?，畢嘎那保、堆孜落瑪、寨次瑪《甘露本草明鏡》。鐵棒錘收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)藏藥第一冊(cè)，為毛莨科植物伏毛鐵棒錘Aconitum flavum Hand. -Mazz.和鐵棒錘A. pendulum Busch.的干燥塊根。
訶子收載于《中國(guó)藥典》2010年版一部,為使君子科植物訶子Terminalia chebula Retz.或絨毛訶子 Terminalia chebula Retz. var. tomentella Kurt.的干燥成熟果實(shí)。毛訶子收載于《中國(guó)藥典》2010年版一部，系藏族習(xí)用藥材。為使君子科植物毗黎勒 Termz-naLia bellirica(Gaertn. )Roxb.的干燥成熟果實(shí)。余甘子收載于《中國(guó)藥典》2010年版一部，系藏族習(xí)用藥材。為大戟科植物余甘子 Phyllan-thus emblica L.的干燥成熟果實(shí)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種八味安寧制劑的檢測(cè)方法，所述檢測(cè)方法重現(xiàn)性好、 專屬性強(qiáng)，能夠有效地檢測(cè)八味安寧制劑的質(zhì)量，從而使八味安寧制劑的質(zhì)量穩(wěn)定、安全、 可控。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為一種八味安寧制劑的檢測(cè)方法，該制劑原料藥組成為寒水石(制)400重量份、褐鐵礦(制)100重量份、白芥子350重量份、甘青青蘭10重量份、鐵棒錘/榜那10重量份、 訶子/去核的訶子10重量份、毛訶子/去核的毛訶子10重量份、余甘子/去核的余甘子10
重量份；所述檢測(cè)方法包括下述鑒別和/或檢查方法的一種或兩種通過(guò)薄層層析對(duì)制劑中的白芥子進(jìn)行定性鑒別；以及檢查制劑中鐵棒錘/榜那所含烏頭堿的含量。具體地，白芥子的定性鑒別包括Ia)制備白芥子供試品溶液、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液、不含白芥子的陰性樣品溶液；2a)照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010版一部附錄VI B試驗(yàn)，分別吸取步驟Ia)所獲得的供試品溶液、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液，并點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上；3a)以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水為展開劑，將步驟2a)所獲得的薄層板放置在展開缸中飽和、展開、取出、晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。鐵棒錘/榜那所含烏頭堿含量檢查包括Ib)制備鐵棒錘/榜那供試品溶液、烏頭堿對(duì)照品溶液；2b)照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B試驗(yàn)，分別吸取步驟Ib)所獲得的供試品溶液、烏頭堿對(duì)照品溶液，并點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上；3b)以環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺為展開劑，將步驟2b)所獲得的薄層板放置在展開缸中飽和、展開、取出、晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。所述白芥子及鐵棒錘/榜那供試品溶液、芥子堿硫氰酸鹽及烏頭堿對(duì)照品溶液、 陰性樣品溶液的制備方法包括(I)白芥子供試品溶液、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液取所述八味安寧制劑，加甲醇，超聲處理，濾過(guò)，濾液濃縮，作為白芥子供試品溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品，同法制成芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液；按處方比例及制備工藝，配置不含白芥子的陰性樣品，并按所述供試品溶液的制備方法制成不含白芥子的陰性樣品溶液。(2)鐵棒錘/榜那供試品溶液、烏頭堿對(duì)照品溶液取所述八味安寧制劑，加氨試液，攪勻，放置，加乙醚，振搖，放置，濾過(guò)，濾液蒸干， 殘?jiān)訜o(wú)水乙醇使溶解，作為鐵棒錘/榜那供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成溶液，作為烏頭堿對(duì)照品溶液。優(yōu)選地，所述方法包括以下步驟a)白芥子的定性鑒別取所述八味安寧制劑I 5重量份，研細(xì)，加甲醇10 50體積份，超聲處理20 90分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮約O. 5 5體積份，作為白芥子供試品溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽適量，加甲醇制成每體積含O. 0005 O. 002重量份的芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液；按處方比例及制備工藝，配置不含白芥子的陰性樣品，并按所述供試品溶液的制備方法制成不含白芥子的陰性樣品溶液。照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各O. 001 O. 01體積份,分別點(diǎn)樣于同一娃膠G薄層板上，以體積比為3 5 : 4 8 O. 7 I. 4 O. 3 O. 7的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水為展開劑,薄層板置展開缸中飽和O 40分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。b)鐵棒錘/榜那所含烏頭堿含量檢查取所述八味安寧制劑3 8重量份,研細(xì)，加氨試液O. 5 2體積份,攪勻，放置 I 3小時(shí),加乙醚10 20體積份,振搖O. 5 2小時(shí),放置18 30小時(shí),濾過(guò),濾液蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇I 3體積份使溶解，作為鐵棒錘/榜那供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每體積份含O. 0005 O. 002重量份的溶液，作為烏頭堿對(duì)照品溶液。照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取供試品溶液O. 005 O. 02 體積份、烏頭堿對(duì)照品溶液O. 001 O. 01體積份，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以體積比為2 8 I 3 0.5 2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺為展開劑，薄層板置展開缸中飽和O 40分鐘，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。更優(yōu)選地，所述方法包括以下步驟a)白芥子的定性鑒別取所述八味安寧制劑3g，研細(xì)，加甲醇25ml，超聲處理I小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至約2ml，作為白芥子供試品溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含Img 的芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液；按處方比例及制備工藝，配置不含白芥子的陰性樣品，并按所述供試品溶液的制備方法制成不含白芥子的陰性樣品溶液。照薄層色譜法《中國(guó)藥典》 2010版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(3.5 5 I 0.5)為展開劑，薄層板置展開缸中飽和20分鐘， 展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。b)鐵棒錘/榜那所含烏頭堿含量檢查
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取所述八味安寧制劑5g，研細(xì)，加氨試液1ml，攪勻，放置2小時(shí)，加乙醚15ml，振搖I小時(shí)，放置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇2ml使溶解，作為鐵棒錘/榜那供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為烏頭堿對(duì)照品溶液。照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1， 烏頭堿對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以體積比為5 2 I的環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺為展開劑，薄層板置展開缸中飽和20分鐘，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。上述八味安寧制劑的劑型可以是片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑或散劑。制備方法為 取所述八味安寧制劑，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，加適量水制丸，陰干即得；或取所述八味安寧制劑，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，混勻，按藥劑學(xué)常規(guī)方法，加入常規(guī)輔料，制成臨床上接受的口服制劑。本發(fā)明針對(duì)八味安寧制劑的組成成分，對(duì)指標(biāo)性成分白芥子的存在進(jìn)行檢測(cè)，并檢測(cè)制劑中鐵棒錘/榜那所含毒性成分烏頭堿的含量，以達(dá)到對(duì)制劑的質(zhì)量進(jìn)行控制的目的。本發(fā)明的檢測(cè)方法根據(jù)實(shí)際檢測(cè)需要，對(duì)現(xiàn)有的檢測(cè)方法的檢測(cè)條件進(jìn)行了篩選，確定了較佳的八味安寧制劑的檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法具有靈敏、重現(xiàn)性好和專屬性強(qiáng)的特點(diǎn)。


圖I為八味安寧制劑中白芥子薄層層析檢測(cè)圖；其中，從左到右樣品順序?yàn)楣┰嚻啡芤篒、供試品溶液2、供試品溶液3、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液；其中，展開劑為乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(3.5 5 I 0.5)，置紫外光燈 (365nm)下檢視。圖2為八味安寧制劑中鐵棒錘/榜那所含烏頭堿含量檢測(cè)圖；其中，從左到右樣品順序?yàn)楣┰嚻啡芤篒、供試品溶液2、供試品溶液3、烏頭喊對(duì)照品溶液I、烏頭堿對(duì)照品溶液2、陰性樣品溶液；其中，展開劑為環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺(5 2 I)，顯色劑為稀碘化鉍試液； 日光下檢視。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。下述用于各成分檢測(cè)的制劑在各檢測(cè)方法下均簡(jiǎn)稱為“供試品”，應(yīng)理解為其指按照各檢測(cè)方法要求制備的供試品，例如在白芥子方法中所述的供試品為“白芥子的供試
口 ”
ΡΠ ο實(shí)施例I :白芥子的薄層鑒別(I)儀器電子秤、具塞錐形瓶、移液管、超聲波提取儀、漏斗、濾紙、蒸發(fā)皿、點(diǎn)樣器、硅膠G 板、層析缸。(2)對(duì)照品
芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品(批號(hào)111702-200501)，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。(3)試劑甲醇、乙醇、丙酮、甲酸、乙酸乙酯、水。(4)檢驗(yàn)方法提取溶劑的選擇分別采用甲醇和95%乙醇為提取溶劑；提取方法的選擇分別采用超聲處理和冷浸；展開劑的選擇分別以乙酸乙酯-甲醇-甲酸(5 5 I)、乙酸乙酯-丙酮-甲酸(3.5: 5 : I)、乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(3.5 5 I O. 5)為展開劑。(5)分別選擇以上不同提取溶劑、提取方法和展開劑進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果如下
取溶劑展開劑超聲提取冷浸甲醇95%乙醇甲醇95%乙醇乙酸乙酯-甲醇-甲酸 (5:5:1)Rf值偏大難于點(diǎn)樣，斑點(diǎn)顏色淺Rf值大，斑點(diǎn)顏色淺難于點(diǎn)樣，斑點(diǎn)顏色淺乙酸乙酯-丙酮-甲酸 (3.5:5:1)Rf值適中， 有拖尾難于點(diǎn)樣，斑點(diǎn)顏色淺，拖尾嚴(yán)重Rf值適中，斑點(diǎn)顏色淺，有拖尾難于點(diǎn)樣，斑點(diǎn)顏色淺，拖尾嚴(yán)重乙酸乙酯-丙酮-甲酸 -/K (3.5:5:1:0.5)Rf值適中， 斑點(diǎn)清晰， 分離度好Rf值適中，斑點(diǎn)不清晰，拖尾不明顯Rf值適中，斑不點(diǎn)清晰，拖尾不明顯Rf值適中，斑點(diǎn)不清晰，拖尾不明顯在以上條件下反復(fù)試驗(yàn)，最終確定了白芥子的專屬性薄層鑒別方法，具體如下取所述八味安寧制劑3g，研細(xì)，加甲醇25ml，超聲處理I小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至約 2ml，作為白芥子供試品溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含Img的對(duì)照品溶液；按處方比例及制備工藝，配置不含白芥子的陰性樣品，并按所述供試品溶液的制備方法制成不含白芥子的陰性樣品溶液。照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水 (3.5 5 I 0.5)為展開劑，薄層板置展開缸中飽和20分鐘展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，如圖I所示。該方法經(jīng)多人多次試驗(yàn)操作，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，可以作為八味安寧制劑中白芥子的專屬性薄層鑒別方法。實(shí)施例2 :鐵棒錘/榜那所含烏頭堿含量檢查(I)儀器電子秤、具塞錐形瓶、移液管、超聲波提取儀、漏斗、濾紙、蒸發(fā)皿、點(diǎn)樣器、硅膠G 薄層板、層析缸、噴霧瓶、電吹風(fēng)。
(2)對(duì)照品烏頭堿對(duì)照品(批號(hào)320756035164)，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。(3)試劑氨試液、乙醚、無(wú)水乙醇、環(huán)己烷、苯、乙酸乙酯、二乙胺、二氯甲烷、丙酮、甲醇、稀碘化鉍鉀、改良碘化鉍鉀試液。(4)提取方法展開劑的選擇分別以苯-乙酸乙酯-乙二胺(14 4 I)、環(huán)己烷-乙酸乙酯-乙二胺(14 4 I)、環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺(5 2 I)、二氯甲烷-丙酮-甲醇(6 : I : I)為展開劑；顯色劑的選擇分別以稀碘化鉍鉀試液和改良碘化鉍鉀試液為顯色。(5)分別選擇以上不同展開劑和顯色劑進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果如下
權(quán)利要求
1.一種八味安寧制劑的檢測(cè)方法，該制劑原料藥組成為寒水石(制)400重量份、褐鐵礦(制)100重量份、白芥子350重量份、甘青青蘭10重量份、鐵棒錘/榜那10重量份、 訶子/去核的訶子10重量份、毛訶子/去核的毛訶子10重量份、余甘子/去核的余甘子10重量份；所述檢測(cè)方法包括下述鑒別和/或檢查方法的一種或兩種通過(guò)薄層層析對(duì)制劑中的白芥子進(jìn)行定性鑒別；以及檢查制劑中鐵棒錘/榜那所含烏頭堿的含量。
2.如權(quán)利要求I所述的檢測(cè)方法，其中，所述白芥子的定性鑒別包括Ia)制備白芥子供試品溶液、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液、不含白芥子的陰性樣品溶液；2a)照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010版一部附錄VI B試驗(yàn)，分別吸取步驟Ia)所獲得的供試品溶液、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液，并點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上； 3a)以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水為展開劑，將步驟2a)所獲得的薄層板放置在展開缸中飽和、展開、取出、晾干，于365nm，紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；鐵棒錘/榜那所含烏頭堿含量檢查包括Ib)制備鐵棒錘/榜那供試品溶液、烏頭堿對(duì)照品溶液；2b)照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B試驗(yàn)，分別吸取步驟Ib)所獲得的供試品溶液、烏頭堿對(duì)照品溶液，并點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上；3b)以環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺為展開劑，將步驟2b)所獲得的薄層板放置在展開缸中飽和、展開、取出、晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
3.如權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，其中，所述白芥子及鐵棒錘/榜那供試品溶液、芥子堿硫氰酸鹽及烏頭堿對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液的制備方法包括(1)白芥子供試品溶液、芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液取所述八味安寧制劑，加甲醇，超聲處理，濾過(guò)，濾液濃縮，作為白芥子供試品溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品，同法制成芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液；按處方比例及制備工藝， 配置不含白芥子的陰性樣品，并按所述供試品溶液的制備方法制成不含白芥子的陰性樣品溶液；(2)鐵棒錘/榜那供試品溶液、烏頭堿對(duì)照品溶液取所述八味安寧制劑，加氨試液，攪勻，放置，加乙醚，振搖，放置，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇使溶解，作為鐵棒錘/榜那供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成溶液，作為烏頭堿對(duì)照品溶液。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，包括以下步驟a)白芥子的定性鑒別取所述八味安寧制劑I 5重量份，研細(xì)，加甲醇10 50體積份，超聲處理20 90 分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮約O. 5 5體積份，作為白芥子供試品溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽適量，加甲醇制成每體積含O. 0005 O. 002重量份的芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液；按處方比例及制備工藝，配置不含白芥子的陰性樣品，并按所述供試品溶液的制備方法制成不含白芥子的陰性樣品溶液；照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各O. 001 O. 01體積份,分別點(diǎn)樣于同一娃膠G薄層板上，以體積比為3 5 : 4 8 O. 7 I. 4 O. 3 O. 7的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水為展開劑,薄層板置展開缸中飽和O 40分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b)鐵棒錘/榜那所含烏頭堿含量檢查取所述八味安寧制劑3 8重量份,研細(xì),加氨試液O. 5 2體積份,攪勻,放置I 3 小時(shí)，加乙醚10 20體積份，振搖O. 5 2小時(shí)，放置18 30小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇I 3體積份使溶解，作為鐵棒錘/榜那供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品適量， 加無(wú)水乙醇制成每體積份含O. 0005 O. 002重量份的溶液，作為烏頭堿對(duì)照品溶液；照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取供試品溶液O. 005 O. 02體積份、烏頭堿對(duì)照品溶液O. 001 O. 01體積份，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以體積比為 2 8 : I 3 : 0.5 2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺為展開劑，薄層板置展開缸中飽和O 40分鐘，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
5.如權(quán)利要求4所述方法，包括以下步驟a)白芥子的定性鑒別取所述八味安寧制劑3g，研細(xì)，加甲醇25ml，超聲處理I小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至約2ml， 作為白芥子供試品溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含Img的芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品溶液；按處方比例及制備工藝，配置不含白芥子的陰性樣品，并按所述供試品溶液的制備方法制成不含白芥子的陰性樣品溶液；照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(3.5 5 I O. 5)為展開劑，薄層板置展開缸中飽和20分鐘，展開，取出， 晾干，于365nm，紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；b)鐵棒錘/榜那所含烏頭堿含量檢查取所述八味安寧制劑5g,研細(xì),加氨試液Iml,攪勻,放置2小時(shí),加乙醚15ml,振搖I小時(shí)，放置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇2ml使溶解，作為鐵棒錘/榜那供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為烏頭堿對(duì)照品溶液； 照薄層色譜法《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μ 1，烏頭堿對(duì)照品溶液5μ1，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以體積比為5 2 I的環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺為展開劑，薄層板置展開缸中飽和20分鐘，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
6.如權(quán)利要求I所述的檢測(cè)方法，其特征在于所述八味安寧制劑的劑型可以是片劑、 膠囊劑、顆粒劑、丸劑或散劑。
7.如權(quán)利要求I所述的檢測(cè)方法，其特征在于取所述八味安寧制劑，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，加適量水制丸，陰干即得；或取所述八味安寧制劑，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，混勻， 按藥劑學(xué)常規(guī)方法，加入常規(guī)輔料，制成臨床上接受的口服制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種八味安寧制劑的檢測(cè)方法，所述方法包括通過(guò)薄層層析對(duì)制劑中的白芥子進(jìn)行定性鑒別和/或檢查制劑中鐵棒錘/榜那所含烏頭堿的含量。所述檢測(cè)方法具有靈敏、重現(xiàn)性好和專屬性強(qiáng)的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N30/90GK102590434SQ20121005156
公開日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年3月1日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月1日
發(fā)明者張國(guó)霞, 李波, 陳麗娟 申請(qǐng)人:西藏奇正藏藥股份有限公司