苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，通過預(yù)處理得到待分離的樣品，將預(yù)處理后的橡苔或樹苔浸膏乙酸乙酯溶液，緩慢滴加到硅膠柱上表面，得到待分離的一級樣品溶液，二次分離后，洗脫液除去溶劑后即為目標(biāo)物致香成分柔扁枝衣酸乙酯；該方法以柱層析分離法分離天然苔清香原料中的重要致香成分柔扁枝衣酸乙酯，分離效果好、純度高，提取工藝較為簡單，采用兩級分離即可實(shí)現(xiàn)，避免了索氏提取裝置等復(fù)雜耗時(shí)的儀器設(shè)備，且產(chǎn)品收率高，適合于柔扁枝衣酸乙酯的工業(yè)化批量制備，為豐富天然香料的來源提供了技術(shù)途徑。
【專利說明】
苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及一種苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法。
【背景技術(shù)】
[0002]苔青香型香料主要包括樹苔和橡苔的浸膏、凈油制品，均由采用同屬于松蘿科扁枝衣屬的一種茶漬目地衣植物作為原料經(jīng)一定的加工工藝而制得。生產(chǎn)樹笞浸膏、凈油的原料為樹苔，橡苔浸膏、凈油的原料為橡苔，其中，生長于歐洲中南部和地中海沿岸的南斯拉夫、法國和意大利等國家的地衣原料制備的苔青香香型香料的品質(zhì)最為優(yōu)良。苔青香型香料由于具有獨(dú)特的苔類物質(zhì)的自然清香和濃郁的樹脂氣息，是重要的天然香料，在食品、化妝品、煙用香精等領(lǐng)域應(yīng)用極為廣泛。
[0003]但是，作為一種天然香料，浸膏和凈油中含有大量的色素和植物蠟等無效成分，導(dǎo)致香料的香氣質(zhì)量和純度欠佳，其次是在浸膏和凈油中還經(jīng)常含有一些導(dǎo)致人過敏的成分和相當(dāng)數(shù)量的重金屬，為食品行業(yè)和日化行業(yè)的產(chǎn)品質(zhì)量埋下了安全隱患。有報(bào)道表明橡苔、樹苔制品中的黑茶漬素、氯代黑茶漬素、地衣酸等成分可能是誘發(fā)人體過敏反應(yīng)的物質(zhì)。歐洲消費(fèi)品科學(xué)委員會(huì)(SCCP)報(bào)告(SCCP/0847/04)中指出化妝品中應(yīng)不含有阿蘭酚、氯代阿蘭酚等成分。橡苔制品應(yīng)用于化妝品時(shí)，阿蘭酚和氯代阿蘭酚的含量應(yīng)降至2ppm以下，樹苔制品與橡苔制品相似，其阿蘭酚和氯代阿蘭酚的含量及處理方式參照橡苔制品進(jìn)行約束。
[0004]有鑒于此，研究人員開始提取或者合成苔清香香料中的重要致香成分，以這些致香成分進(jìn)行香精的復(fù)配、重組，調(diào)配成具有苔清香風(fēng)格特色的替代香精加以使用。如中國專利CA103333A采用扁枝衣酸乙酯、赤星衣酸乙酯等成分復(fù)配了一種具有逼真的天然苔清香型香料香氣風(fēng)格的香精。中國科學(xué)院上海有機(jī)所的吳國生等在專利橡苔主香成分的化學(xué)合成中，公開了一種橡苔的主香成分一3，6_二甲基-β-雷瑣酸甲酯(S卩β-苔黑酚羧酸甲酯)的制備方法。
[0005]作為苔清香型香料的主要致香成分，柔扁枝衣酸乙酯含量較大，特別是中國產(chǎn)橡苔、樹苔制品，柔扁枝衣酸乙酯的含量近20%。專利CN102351706 A公開了柔扁枝衣酸乙酯的一種有機(jī)合成方法。但是，目前尚未見有采用柱層析分離苔清香型天然香料中柔扁枝衣酸乙酯的各種文獻(xiàn)和專利報(bào)道。因此，有必要開發(fā)一種快速有效、適合于工業(yè)化批量生產(chǎn)的分離方法，豐富香精配方領(lǐng)域的品種，為香精香料行業(yè)的調(diào)香人員開發(fā)出更好的香精配方提供必要的香原料。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，采用柱層析分離法提取苔清香天然香料中的重要致香成分柔扁枝衣酸乙酯，解決如何快速有效、適合于工業(yè)化批量生產(chǎn)的問題。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)解決方案是:
[0008]一種苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，包括:
[0009]步驟1、稱取樹苔浸膏或橡苔浸膏原料，向其中加入乙腈，劇烈攪拌后，靜置10?20min后分層，上層溶液使用布氏漏斗真空抽濾，除去沉淀，接收樹苔浸膏或者橡苔浸膏的乙腈溶液；
[0010]步驟2、將步驟I得到的樣品溶液通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的乙腈溶劑，得到待分離的樣品；
[0011 ] 步驟3、濕法裝柱:取100?300目硅膠于燒杯中，加入適量配置好的洗脫劑，充分?jǐn)嚢韬筮B續(xù)倒入娃膠柱中，采用柱長40?200cm，直徑4?50cm的娃膠柱；
[0012]步驟4、將步驟2得到的待分離的樣品用乙酸乙酯溶解，溶液緩慢滴加到硅膠柱上表面，打開調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中；
[0013]步驟5、從柱上口慢慢加入步驟3的洗脫劑，觀察色帶的變化，待樣品的前段黃色帶到達(dá)硅膠柱的底部后，用樣品瓶接收黃色部分色帶，層析結(jié)束后，按照步驟2的方法除去其中的溶劑，得到待分離的一級樣品溶液；
[0014]步驟6、取100?300目硅膠于燒杯中，加入適量配置好的洗脫劑，充分?jǐn)嚢韬筮B續(xù)倒入娃膠柱中，米用柱長40?200cm，直徑3?20cm的娃膠柱；
[0015]步驟7、將步驟5得到的樣品用步驟6中的洗脫劑溶解，溶液緩慢滴加到步驟6的硅膠柱上表面，打開調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中，然后加入步驟6的洗脫劑洗脫樣品；
[0016]步驟8、待樣品的色帶前沿到達(dá)柱子的底部后，用三角瓶接收流出液，用薄層硅膠板點(diǎn)樣法檢測層析液，在紫外燈下判斷目標(biāo)組分是否流出，待樣品有紫外吸收的組分流出時(shí)，換用樣品瓶接收洗脫液，直到有紫外吸收的所有組分全部洗脫出為止，洗脫液除去溶劑后即為目標(biāo)物致香成分柔扁枝衣酸乙酯。
[0017]進(jìn)一步地，所述的硅膠柱均配備四氟乙烯調(diào)節(jié)閥和砂芯。
[0018]進(jìn)一步地，步驟I中原料和乙腈的質(zhì)量比為1:2.5?5。
[0019]進(jìn)一步地，步驟3中，所述的洗脫劑為石油醚和乙酸乙酯混合溶劑，石油醚和乙酸乙酯的體積比為9?15:1。
[0020]進(jìn)一步地，步驟6中，所述的洗脫劑為石油醚和乙酸乙酯混合溶劑，石油醚和乙酸乙酯的體積比為18?25:1。
[0021]進(jìn)一步地，步驟4與步驟7中的柱層析所用的物料和硅膠的質(zhì)量比均為1:4?1:80。
[0022]本發(fā)明的有益效果是:該種苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，首次采用柱層析從天然苔清香香料中分離出了柔扁枝衣酸乙酯，分離過程沒有引入酸堿，采用的低沸點(diǎn)溶劑極容易揮發(fā)干凈，經(jīng)質(zhì)譜分析確認(rèn)，柔扁枝衣酸乙酯與香料中的其它化合物實(shí)現(xiàn)了完全分離;分離得到的柔扁枝衣酸乙酯直接來源于天然植物香料，整個(gè)過程未引入其它雜質(zhì)，不需要經(jīng)過安全評價(jià)等程序，可以直接用于食品、化妝品等高檔香精的配制；采用已經(jīng)預(yù)先對天然香料進(jìn)行處理，除去其中的不溶部分，減輕了柱層析分離時(shí)的阻力，縮短了分離時(shí)間；分離步驟簡便，采用兩級分離即可實(shí)現(xiàn)，避免了索氏提取裝置等復(fù)雜耗時(shí)的儀器設(shè)備，且產(chǎn)品收率高，適合于柔扁枝衣酸乙酯的工業(yè)化批量制備，為豐富天然香料的來源提供了技術(shù)途徑。
【附圖說明】
[0023]圖1為實(shí)施例1從樹苔浸膏中分離出的柔扁枝衣酸乙酯的結(jié)構(gòu)式。
【具體實(shí)施方式】
[0024]為了更清楚地說明本發(fā)明，下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例和附圖對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。下面所具體描述的內(nèi)容是說明性的而非限制性的，不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0025]實(shí)施例的苔清香原料中重要致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，包括溶解、過濾、濃縮和柱層析等步驟。實(shí)施例以柱層析分離法分離天然苔清香原料中的重要致香成分柔扁枝衣酸乙酯，分離效果好、純度高，提取工藝較為簡單，利于工業(yè)化批量生產(chǎn)，為進(jìn)一步豐富香原料的來源提供了技術(shù)途徑，應(yīng)用前景廣闊。
[0026]實(shí)施例1
[0027]預(yù)處理:稱取30g的樹苔浸膏，向其中加入75g的乙腈，充分?jǐn)嚢韬箪o置15min，用布氏漏斗除去其中的不溶部分，樹苔浸膏的溶解部分用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的乙腈溶劑，得到待分離的樣品，該樣品用乙酸乙酯溶解后備用。
[0028]裝柱:取120g硅膠于100ml燒杯中，向其中加入體積比9:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑，充分?jǐn)嚢韬筮B續(xù)倒入直徑為4cm、柱長為40cm的玻璃硅膠柱中，并不斷加入該混合溶劑作為洗脫劑，反復(fù)沖洗，使得硅膠得以達(dá)到沉降均勻的效果，同時(shí)保證洗脫劑的高度高于娃膠。
[0029]初分離:將預(yù)處理后的樹苔浸膏乙酸乙酯溶液，緩慢滴加到硅膠柱上表面，打開硅膠柱調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中，從柱上口慢慢加入采用體積比為石油醚:乙酸乙酯=9:1的洗脫劑，觀察色帶的變化，待樣品的前段黃色帶到達(dá)硅膠柱的底部后，用樣品瓶接收黃色部分色帶，層析結(jié)束后，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的溶劑，得到待分離的一級樣品溶液。
[0030]二次分離:稱取10g硅膠于100ml燒杯中，采用體積比為18:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶劑按照前述方法將硅膠裝于直徑為3cm、柱長為40cm的玻璃硅膠柱中；將一級分離樣品用體積比為石油醚:乙酸乙酯= 18:1的洗脫劑溶解后上樣，緩慢滴加硅膠柱上表面，打開調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中，然后加入步驟該洗脫劑洗脫樣品。
[0031]待樣品的色帶前沿到達(dá)柱子的底部后，用三角瓶接收流出液，用薄層硅膠板點(diǎn)樣法檢測層析液，在紫外燈下判斷目標(biāo)組分是否流出，待樣品有紫外吸收的組分流出時(shí)，換用樣品瓶接收洗脫液，直到有紫外吸收的所有組分全部洗脫出為止。目標(biāo)物鑒定:洗脫液濃縮后除去其中的溶劑部分，得到白色針狀固體物，經(jīng)熔點(diǎn)儀測定，該固體物的熔點(diǎn)為43?450C，經(jīng)Bruker_DRX500型核磁共振儀，Micromass GC-T0F高分辨質(zhì)譜用儀器、Bruker ALPHA紅外光譜儀確認(rèn)，分離得到的為柔扁枝衣酸乙酯，其結(jié)構(gòu)如圖1所示。經(jīng)Agilent 6890-5975GC-MS型氣相質(zhì)譜儀測定，分離得到的柔扁枝衣酸乙酯的純度為99%以上。
[0032]實(shí)施例2
[0033]預(yù)處理:稱取40g的橡苔浸膏，向其中加入160g的乙腈，充分?jǐn)嚢韬箪o置20min，用布氏漏斗除去其中的不溶部分，橡苔浸膏的溶解部分用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的乙腈溶劑，得到待分離的樣品，該樣品用乙酸乙酯溶解后備用。
[0034]裝柱:取160g硅膠于100ml燒杯中，向其中加入體積比15:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑，充分?jǐn)嚢韬筮B續(xù)倒入直徑為20cm、柱長為10cm的玻璃硅膠柱中，并不斷加入該混合溶劑作為洗脫劑，反復(fù)沖洗，使得硅膠得以達(dá)到沉降均勻的效果，同時(shí)保證洗脫劑的高度高于硅膠。
[0035]初分離:將預(yù)處理后的橡苔浸膏乙酸乙酯溶液，緩慢滴加到硅膠柱上表面，打開硅膠柱調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中，從柱上口慢慢加入體積比為石油醚:乙酸乙酯=15:1的洗脫劑，觀察色帶的變化，待樣品的前段黃色帶到達(dá)硅膠柱的底部后，用樣品瓶接收黃色部分色帶，層析結(jié)束后，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的溶劑，得到待分離的一級樣品溶液。
[0036]二次分離:稱取130g硅膠于100ml燒杯中，采用體積比為25:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶劑按照前述方法將硅膠裝于直徑為4cm、柱長為40cm的玻璃硅膠柱中；將一級分離樣品用體積比為石油醚:乙酸乙酯= 25:1的洗脫劑溶解后上樣，緩慢滴加硅膠柱上表面，打開調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中，然后加入步驟該洗脫劑洗脫樣品。
[0037]待樣品的色帶前沿到達(dá)柱子的底部后，用三角瓶接收流出液，用薄層硅膠板點(diǎn)樣法檢測層析液，在紫外燈下判斷目標(biāo)組分是否流出，待樣品有紫外吸收的組分流出時(shí)，換用樣品瓶接收洗脫液，直到有紫外吸收的所有組分全部洗脫出為止。目標(biāo)物鑒定:洗脫液濃縮后除去其中的溶劑部分，得到白色針狀固體物，經(jīng)熔點(diǎn)儀測定，該固體物的熔點(diǎn)為43?450C，經(jīng)Bruker_DRX500型核磁共振儀，Micromass GC-T0F高分辨質(zhì)譜用儀器、Bruker ALPHA紅外光譜儀確認(rèn)，分離得到的為柔扁枝衣酸乙酯，其結(jié)構(gòu)如圖1所示。經(jīng)Agilent 6890-5975GC-MS型氣相質(zhì)譜儀測定，分離得到的柔扁枝衣酸乙酯的純度為99%以上。
[0038]實(shí)施例3
[0039]預(yù)處理:稱取50g的橡苔浸膏，向其中加入250g的乙腈，充分?jǐn)嚢韬箪o置25min，用布氏漏斗除去其中的不溶部分，橡苔浸膏的溶解部分用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的乙腈溶劑，得到待分離的樣品，該樣品用乙酸乙酯溶解后備用。
[0040]裝柱:取200g硅膠于100ml燒杯中，向其中加入體積比10:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑，充分?jǐn)嚢韬筮B續(xù)倒入直徑為25cm、柱長為10cm的玻璃硅膠柱中，并不斷加入該混合溶劑作為洗脫劑，反復(fù)沖洗，使得硅膠得以達(dá)到沉降均勻的效果，同時(shí)保證洗脫劑的高度高于硅膠。
[0041]初分離:將預(yù)處理后的橡苔浸膏乙酸乙酯溶液，緩慢滴加到硅膠柱上表面，打開硅膠柱調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中，從柱上口慢慢加入體積比為石油醚:乙酸乙酯=20:1的洗脫劑，觀察色帶的變化，待樣品的前段黃色帶到達(dá)硅膠柱的底部后，用樣品瓶接收黃色部分色帶，層析結(jié)束后，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的溶劑，得到待分離的一級樣品溶液。
[0042]二次分離:稱取160g硅膠于100ml燒杯中，采用體積比為25:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑按照前述方法將硅膠裝于直徑為5cm、柱長為80cm的玻璃硅膠柱中；將一級分離樣品用體積比為石油醚:乙酸乙酯= 20:1的洗脫劑溶解后上樣，緩慢滴加硅膠柱上表面，打開調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中，然后加入步驟該洗脫劑洗脫樣品。
[0043]待樣品的色帶前沿到達(dá)柱子的底部后，用三角瓶接收流出液，用薄層硅膠板點(diǎn)樣法檢測層析液，在紫外燈下判斷目標(biāo)組分是否流出，待樣品有紫外吸收的組分流出時(shí)，換用樣品瓶接收洗脫液，直到有紫外吸收的所有組分全部洗脫出為止。目標(biāo)物鑒定:洗脫液濃縮后除去其中的溶劑部分，得到白色針狀固體物，經(jīng)熔點(diǎn)儀測定，該固體物的熔點(diǎn)為43?45°C，經(jīng)Bruker_DRX500型核磁共振儀，Micromass GC-T0F高分辨質(zhì)譜用儀器、Bruker ALPHA紅外光譜儀確認(rèn)，分離得到的為柔扁枝衣酸乙酯，其結(jié)構(gòu)如圖1所示。經(jīng)Agilent 6890-5975GC-MS型氣相質(zhì)譜儀測定，分離得到的柔扁枝衣酸乙酯的純度為99%以上。
[0044]顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對本發(fā)明的實(shí)施方式的限定。對于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無法對所有的實(shí)施方式予以窮舉。凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，其特征在于，包括: 步驟1、稱取樹苔浸膏或橡苔浸膏原料，向其中加入乙腈，劇烈攪拌后，靜置10?20min后分層，上層溶液使用布氏漏斗真空抽濾，除去沉淀，接收樹苔浸膏或者橡苔浸膏的乙腈溶液； 步驟2、將步驟I得到的樣品溶液通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的乙腈溶劑，得到待分離的樣品； 步驟3、濕法裝柱:取100?300目硅膠于燒杯中，加入適量配置好的洗脫劑，充分?jǐn)嚢韬筮B續(xù)倒入娃膠柱中，采用柱長40?200cm，直徑4?50cm的娃膠柱； 步驟4、將步驟2得到的待分離的樣品用乙酸乙酯溶解，溶液緩慢滴加到硅膠柱上表面，打開調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中； 步驟5、從柱上口慢慢加入步驟3的洗脫劑，觀察色帶的變化，待樣品的前段黃色帶到達(dá)硅膠柱的底部后，用樣品瓶接收黃色部分色帶，層析結(jié)束后，按照步驟2的方法除去其中的溶劑，得到待分離的一級樣品溶液； 步驟6、取100?300目硅膠于燒杯中，加入適量配置好的洗脫劑，充分?jǐn)嚢韬筮B續(xù)倒入娃膠柱中，米用柱長40?200cm，直徑3?20cm的娃膠柱； 步驟7、將步驟5得到的樣品用步驟6中的洗脫劑溶解，溶液緩慢滴加到步驟6的硅膠柱上表面，打開調(diào)節(jié)閥使樣品溶液全部進(jìn)入硅膠中，然后加入步驟6的洗脫劑洗脫樣品； 步驟8、待樣品的色帶前沿到達(dá)柱子的底部后，用三角瓶接收流出液，用薄層硅膠板點(diǎn)樣法檢測層析液，在紫外燈下判斷目標(biāo)組分是否流出，待樣品有紫外吸收的組分流出時(shí)，換用樣品瓶接收洗脫液，直到有紫外吸收的所有組分全部洗脫出為止，洗脫液除去溶劑后即為目標(biāo)物致香成分柔扁枝衣酸乙酯。2.如權(quán)利要求1所述的苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，其特征在于:所述的硅膠柱均配備四氟乙烯調(diào)節(jié)閥和砂芯。3.如權(quán)利要求1所述的苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，其特征在于:步驟I中原料和乙腈的質(zhì)量比為1:2.5?5。4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，其特征在于:步驟3中，所述的洗脫劑為石油醚和乙酸乙酯混合溶劑，石油醚和乙酸乙酯的體積比為9?15:1。5.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，其特征在于:步驟6中，所述的洗脫劑為石油醚和乙酸乙酯混合溶劑，石油醚和乙酸乙酯的體積比為18?25:1。6.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的苔清香型香料中致香成分柔扁枝衣酸乙酯的分離方法，其特征在于:步驟4與步驟7中的柱層析所用的物料和硅膠的質(zhì)量比均為1:4?1:80。
【文檔編號】C07C67/48GK105837442SQ201610279471
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年4月29日
【發(fā)明人】朱懷遠(yuǎn), 莊亞東, 朱龍杰, 張媛, 曹毅, 尤曉娟, 沈曉晨, 劉獻(xiàn)軍, 韓開冬, 何紅梅
【申請人】江蘇中煙工業(yè)有限責(zé)任公司