促進HMGCS2蛋白的活性或者功能，從而治療骨關(guān)節(jié)炎。
[0027] 本發(fā)明所述攜帶基因的載體是本領(lǐng)域已知的各種載體，如市售的載體、包括質(zhì)粒、 粘粒、噬菌體、病毒等。
[0028] 在本發(fā)明中，術(shù)語"宿主細胞"包括原核細胞和真核細胞。常用的原核宿主細胞的 例子包括大腸桿菌、枯草桿菌等。常用的真核宿主細胞包括酵母細胞、昆蟲細胞和哺乳動物 細胞。較佳地，該宿主細胞是真核細胞，如CH0細胞、C0S細胞等。
[0029] 本發(fā)明還提供了一種用于治療骨關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，所述藥物組合物包括上面 所述的HMGCS2基因和/或其表達產(chǎn)物的促進劑。
[0030] 進一步，本發(fā)明的藥物還包括藥學(xué)上可接受的載體，載體，這類載體包括（但并不 限于）：稀釋劑、賦形劑如水等、填充劑如淀粉、蔗糖等；粘合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、 明膠和聚乙烯吡咯烷酮；濕潤劑如甘油；崩解劑如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；吸收促進劑季 銨化合物；表面活性劑如十六烷醇；吸附載體如高嶺土和皂粘土 ；潤滑劑如滑石粉、硬脂酸 鈣和鎂、聚乙二醇等。
[0031] 本發(fā)明的藥物導(dǎo)入組織或者細胞的方式可以分為體外或者體內(nèi)的方式。體外方式 包括將含有HMGCS2基因的藥物或者含有HMGCS2蛋白質(zhì)的藥物導(dǎo)入細胞中，再將細胞移植 或回輸?shù)襟w內(nèi)。體內(nèi)方式包括直接將含有HMGCS2基因的藥物或者含有HMGCS2蛋白質(zhì)的藥 物注入體內(nèi)組織中。
[0032] 本發(fā)明的藥物還可與其他治療骨關(guān)節(jié)炎的藥物聯(lián)用，多種藥物聯(lián)合使用可以大大 提到治療的成功率。
[0033] 在本發(fā)明的上下文中，"HMGCS2基因"包括HMGCS2基因以及HMGCS2基因的任何 功能等同物的多核苷酸。HMGCS2基因包括與目前國際公共核酸序列數(shù)據(jù)庫GeneBank中 HMGCS2基因（NC_000001. 11)DNA序列具有70%以上同源性，且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA 序列；
[0034] 優(yōu)選地，HMGCS2基因的編碼序列包括以下任--種DNA分子：
[0035] (1)序列表中SEQ ID NO. 1所示的DNA序列；
[0036] (2)在嚴格條件下與1)限定的DNA序列雜交且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA序列；
[0037] (3)與（1)或⑵限定的DNA序列具有70%、優(yōu)選地，90%以上同源性，且編碼相 同功能蛋白質(zhì)的DNA分子。
[0038] 在本發(fā)明的具體實施方案中，所述HMGCS2基因的編碼序列是SEQIDNO. 1所示的 DNA序列。
[0039] 在本發(fā)明的上下文中，HMGCS2基因表達產(chǎn)物包括HMGCS2蛋白以及HMGCS2蛋白的 部分肽。所述HMGCS2蛋白的部分肽含有與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的功能域。
[0040] "HMGCS2蛋白"包括HMGCS2蛋白以及HMGCS2蛋白的任何功能等同物。所述功能等 同物包括HMGCS2蛋白保守性變異蛋白質(zhì)、或其活性片段，或其活性衍生物，等位變異體、 天然突變體、誘導(dǎo)突變體、在高或低的嚴緊條件下能與HMGCS2的DNA雜交的DNA所編碼的 蛋白質(zhì)。
[0041] 優(yōu)選地，HMGCS2蛋白是具有下列氣基酸序列的蛋白質(zhì)：
[0042] (1)由序列表中SEQIDN0. 2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；
[0043] (2)將SEQIDN0. 2所示的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或 缺失和/或添加且與SEQIDN0. 2所示的氨基酸序列具有相同功能的由SEQIDN0. 2所示 的氨基酸序列衍生的蛋白質(zhì)。取代、缺失或者添加的氨基酸的個數(shù)通常為1-50個，較佳地 1-30個，更佳地1-20個，最佳地1-10個。
[0044] (3)與SEQIDN0. 2所示的氨基酸序列具有至少80%同源性（又稱為序列同一 性），更優(yōu)選地，與SEQIDN0. 2所示的氨基酸序列至少約90%至95%的同源性，常為96%、 97 %、98 %、99 %同源性的氨基酸序列構(gòu)成的多肽。
[0045] 在本發(fā)明的具體實施方案中，所述HMGCS2蛋白是具有SEQIDN0.2所示的氨基酸 序列的蛋白質(zhì)。
[0046] 通常，已知的是，一個蛋白質(zhì)中一個或多個氨基酸的修飾不會影響蛋白質(zhì)的功能。 本領(lǐng)域技術(shù)人員會認可改變單個氨基酸或小百分比的氨基酸或?qū)Π被嵝蛄械膫€別添加、 缺失、插入、替換是保守修飾，其中蛋白質(zhì)的改變產(chǎn)生具有相似功能的蛋白質(zhì)。提供功能相 似的氨基酸的保守替換表是本領(lǐng)域公知的。
[0047] 通過添加一個氨基酸或多個氨基酸殘基修飾的蛋白質(zhì)的例子是HMGCS2蛋白的 融合蛋白。對于與HMGCS2蛋白融合的肽或者蛋白質(zhì)沒有限制，只要所得的融合蛋白保留 HMGCS2蛋白的生物學(xué)活性即可。
[0048] 本發(fā)明的HMGCS2蛋白也包括對SEQIDN0. 2所示的氨基酸序列的非保守修飾，只 要經(jīng)過修飾的蛋白質(zhì)仍然能夠保留HMGCS2蛋白的生物學(xué)活性即可。在此類修飾蛋白質(zhì)中 突變的氨基酸數(shù)目通常是10個或者更少，例如6個或者更少，例如3個或者更少。
[0049] 在本發(fā)明的上下文中，"診斷骨關(guān)節(jié)炎"既包括判斷受試者是否已經(jīng)患有骨關(guān)節(jié) 炎、也包括判斷受試者是否存在患有骨關(guān)節(jié)炎的風(fēng)險。
[0050] 在本發(fā)明的上下文中，"治療骨關(guān)節(jié)炎"從疾病的狀態(tài)變化來分，可以包括疾病的 緩解、疾病的完全治愈。
[0051] 本發(fā)明的優(yōu)點和有益效果：
[0052] 本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了HMGCS2基因表達與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)，通過檢測受試者滑膜組織 中HMGCS2的表達，可以判斷受試者是否患有骨關(guān)節(jié)炎、或者判斷受試者是否存在患有骨關(guān) 節(jié)炎的風(fēng)險，從而指導(dǎo)臨床醫(yī)師給受試者提供預(yù)防方案或者治療方案。
[0053] 本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了 一種新的分子標記物-HMGCS2基因，相比傳統(tǒng)的檢測手段，基因診 斷更及時、更特異、更靈敏，能夠?qū)崿F(xiàn)骨關(guān)節(jié)炎的早期診斷，從而降低骨關(guān)節(jié)炎的死亡率。
【附圖說明】
[0054] 圖1顯示利用基因芯片檢測HMGCS2基因在滑膜組織中的表達情況；
[0055] 圖2顯示利用Westernblot檢測HMGCS2蛋白在滑膜細胞中的表達情況；
[0056] 圖3顯示利用QPCR在轉(zhuǎn)錄水平上檢測HMGCS2基因的過表達情況；
[0057] 圖4顯示利用Westernbio檢測HMGCS2蛋白的過表達情況；
[0058] 具體的實施方式
[0059] 下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明。以下實施例僅用于說明本 發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條 件，例如Sambrook等人，分子克?。簩嶒炇沂謨裕∟ewYork:ColdSpringHarborLaboratory Press，1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。
[0060] 實施例1 0A滑膜組織和正?；そM織中HMGCS2基因的表達差異
[0061] 60例0A患者的滑膜組織來自于北京協(xié)和醫(yī)院骨科行膝關(guān)節(jié)置換或滑膜切除術(shù)的 0A病人。所用病例符合Altam提出的關(guān)于0A的診斷標準。40例正?；そM織來自于北京協(xié) 和醫(yī)院骨科，為外傷手術(shù)病人關(guān)節(jié)滑膜組織。0A患者滑膜液（SF)高速離心后取上清，-80°C 儲存待用。本研究中所用臨床樣本，均對患者進行知情告知并經(jīng)本院倫理委員會通過。
[0062] 1、組織RNA的提取
[0063] 1)在較少RNase干擾的清潔區(qū)，使用含適量液氮的研缽稱取離體滑膜組織樣本約 20mg，用件棒研磨至粉末狀；
[0064] 2)將樣本轉(zhuǎn)移到一個不含RNA酶的2mL的離心管中；
[0065] 3)加入300uLLysissolution，置于勾衆(zhòng)器內(nèi)，充分研磨l_5min;
[0066] 4) 12000g，4°C，離心10min，轉(zhuǎn)移上清至新的1. 5mL的離心管中；
[0067] 5)加入 600ulRNase-FreeWater，用游禍器混勾；
[0068] 6)加入20ul蛋白酶K，在55°