一類甲硝唑-酰胺衍生物尿素酶抑制劑及其合成和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一類甲硝挫-酷胺衍生物尿素酶抑制劑的制法W及它們在制備抗胃 炎、胃潰瘍藥物中的應(yīng)用。 技術(shù)背景
[0002] 幽口螺旋桿菌化elicobacterP^ori)會引發(fā)胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃萎 縮、腸上皮化生、胃癌、胃淋己瘤等多種疾病。1994年世界衛(wèi)生組織和國際癌癥研究中屯、將 H.pylori列為第一類致癌因子。據(jù)統(tǒng)計，世界人口大約有一半感染了H.P^ori,在發(fā)展中 國家中感染率高達(dá)80-90%。我國的感染率為60%左右。胃炎患者的H.pylori檢出率為 80-90 %，消化性潰瘍患者更高，達(dá)95 %W上。超過90 %的十二指腸潰瘍和80 %左右的胃 潰瘍是H.pylori所致。根除H.pylori是治療上述疾病W及防止復(fù)發(fā)的前提。目前根除 H.pylori最常用的是S聯(lián)法：一種質(zhì)子累抑制劑（奧美拉挫或蘭索拉挫）和兩種抗生素 (阿莫西林、氧氣沙星或甲硝挫）。但是，奧美拉挫有明顯的副作用：除會引起腹痛、嘔吐、脹 氣等副作用外，還會引起肝重量增大等；還有誘發(fā)胃類癌、引起腎衰等危險。此外H.pylori 對所用的抗生素容易產(chǎn)生耐藥性，因此，運一方法的有效率正逐年下降。
[0003] 眾所周知，胃內(nèi)是一個強酸環(huán)境，幽口螺旋桿菌能在胃內(nèi)存活的最主要原因是它 的尿素酶活性。尿素酶水解尿素釋放出來的氨能提高抑值，并且最新研究顯示，受體結(jié) 構(gòu)中尿素分子是幽口螺旋桿菌感知和避免胃酸環(huán)境的關(guān)鍵因素。因此尿素酶的作用為 H.pylori營造了一個適宜的微環(huán)境。其他一些病菌，如普通變形桿菌（Proteusvulgaris)、 奇異變形桿菌（Proteusmir油ilis)、解脈脈原體（Ureaplasmaureal}ft;ixum)等，當(dāng)它們感 染尿路系統(tǒng)后，因為尿素酶的作用引起尿的抑升高，導(dǎo)致憐酸錠儀等物質(zhì)的沉淀，進(jìn)而發(fā) 展成尿路結(jié)石。具有尿素酶活性的病原菌要么靠尿素酶水解尿素產(chǎn)生氨為自身的生命活動 提供氮源，要么利用氨的堿性為其生存提供一個適宜的微環(huán)境。故阻斷了尿素酶活性，就能 有效的殺滅運類病菌。因此，尿素酶抑制劑必將成為治療運類疾病的一線藥物。但現(xiàn)有的 尿素酶抑制劑存在一些不足，比如乙酷氧目虧酸由于活性低，用量大，導(dǎo)致了一些副作用，而 高活性的憐酸二酷胺類尿素酶抑制劑在酸性環(huán)境中不穩(wěn)定，阻礙了其在臨床上的應(yīng)用。因 此新型高效低毒尿素酶抑制劑的篩選是開發(fā)運類藥物的關(guān)鍵。
[0004] 利用計算機模擬技術(shù)，基于骨架遷越原理，設(shè)計并合成了具有I所示結(jié)構(gòu)的新型 尿素酶抑制劑。試驗表明，有些化合物對尿素酶表現(xiàn)出了優(yōu)良的抑制活性。
[0005]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于設(shè)計并合成一系列甲硝挫-酷胺衍生物（I)尿素酶抑制劑，在 深入研究構(gòu)效關(guān)系的基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)了活性更高、毒副作用更低的新型尿素酶抑制劑，并提供 甲硝挫-酷胺衍生物系列化合物的制法。
[0007] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0008] -類甲硝挫-酷胺衍生物系列化合物，它們具有如下結(jié)構(gòu)通式：
[0009]
[0010] 式I中X和Y的定義如下：
[0011] X = 0、畑、S、、邸2、0-邸2、畑-邸2、8-邸2、

[0012] 一種制備上述甲硝挫-酷胺衍生物（I)系列化合物的方法，其特征是它包括下列 步驟：
[001引步驟1.將甲硝挫-2'-XH(n)、K2CO3、漠乙酸乙醋置于反應(yīng)瓶中，物質(zhì)的量之比：II:K2C03:漠乙酸乙醋=1: (1. 5~如：（2~6)，反應(yīng)W丙酬為溶劑，平均每1克II加丙酬 IOmU在攬拌下升溫至60°C，反應(yīng)20h，蒸去溶劑，倒入與丙酬等體積的蒸饋水，AcOEt萃取， 無水MgS04干燥，蒸去溶劑，用硅膠柱層析純化，洗脫劑體積比：AcOEt:石油酸=1:5~2:1， 得到甲硝挫-2'-基-X-乙酸乙醋（III);
[001引步驟2.將甲硝挫-2'-基-X-乙酸乙醋（III)溶于無水甲醇，每1克III加無水甲 醇8~20血，加入HY(IV)后，回流反應(yīng)8~30h，物質(zhì)的量之比為III:IV:甲醇鋼=1: (2~ 7) : (0. 1~1)，蒸去甲醇，加蒸饋水，用AcOEt萃取，合并有機層，M拆04干燥，蒸去溶劑，用娃 膠柱層析純化，洗脫劑體積比：AcOEt:石油酸=1:4~3:1，得甲硝挫-酷胺衍生物（I); [0016]
[0017]其中所述X和Y的定義與上述I式中的定義相同。
[001引本發(fā)明所述的甲硝挫-酷胺衍生物系列化合物對尿素酶有較好的抑制活性，其中 有些比陽性對照乙酷氧目虧酸的活性更好。因此可W用于制備抗胃炎、胃潰瘍或抗尿路結(jié)石 的藥物。
【具體實施方式】
[0019] 通過W下實施例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明，但應(yīng)注意本發(fā)明的范圍并不受運些實施 例的任何限制。
[0020] 實施例1 :甲硝挫-2'-基氧乙酷氧目虧酸（1)的制備
[00川將34. 2g甲硝挫、28gK2C03、100血漠乙酸乙醋溶于200血無水丙酬于60°C反應(yīng)lOh，倒入600mL蒸饋水后用AcOEt萃取，無水MgS04干燥，蒸去溶劑，硅膠柱層析純化，洗 脫劑體積比：AcOEt:石油酸=1:6,得黃色油狀液體甲硝挫-2'-基氧乙酸乙醋17. 6mg， 將甲硝挫-2' -基氧乙酸乙醋15. 6g溶于5血無水甲醇，在攬拌下加入徑胺鹽酸鹽llg、甲 醇鋼22g，室溫攬拌26h，蒸去甲醇后加15血蒸饋水，AcOEt萃取，合并有機層，無水M拆04 干燥，蒸去溶劑，硅膠柱層析純化，洗脫劑體積比：AcOEt:石油酸=4:1，得白色固體甲硝 挫-2'-基氧乙酷氧朽酸（1)7. 18g，產(chǎn)率49. 9%，烙點：175~176°C ;EIMS m/z :243[M1 ; 電NMR (400MHz，DMSO，5) ;8. 10~7.92 (s，lH) ,7.81 (s，lH) ,4.26~4.33 (m，2H) ,4.27~ 4. 35 (m，2H)，3. 72~3. 98 (m，2H)，2. 51 (s，3H)，2. 04~I. 92 (s，IH)。
[002引實施例2:
[0023] 按實施例I相似的方法，用甲硝挫為原料，合成了表I所列的甲硝挫-酷胺衍生物 系列化合物1~36。
[0024] 表1通式I中甲硝挫-酷胺衍生物系列化合物的X、Y基團
[00巧]

[0027] 注：初始原料均購自于al化ich公司
[0028] 實施例3 :化合物的抑酶活性
[0029] 往96孔板中加入25 y LJack bean(刀豆）尿素酶（4U)和25 y L (ImM)被測化合物 的溶液，在37°C下培育2h，然后加入含有IOOmM尿素和IOOmM的憐酸緩沖液55 y L，在30°C 下培育15min，加入45 y L酪試劑（含苯酪1%與含硝普鋼0. 005%的混合溶液）和70 y L 堿試劑（含化0冊.5%與0. 1%活性氯的化OCl的混合溶液），在室溫下放置50min后，用酶 標(biāo)儀測定620nm下的OD值，百分抑制率按下式計算：
[0030]
[003。 所有的試驗都在抑為8. 2的溶液中進(jìn)行（0.OlM的馬冊04, ImM的邸TA,0.OlM的 LiCl)，活性的高低W半抑制率ICw來表示，ICW越小，此化合物的活性越高，結(jié)果見表2。
[0032] 結(jié)果表明：本發(fā)明所述的大部分甲硝挫-酷胺衍生物系列化合物對尿素酶有較好 的抑制活性，多數(shù)比陽性對照乙酷氧目虧酸的活性更高。
[003引表2甲硝挫-酷胺衍生物系列化合物刀豆尿素酶的抑制作用（ICJ

[0036]結(jié)果表明，化合物 1、4、9、12、13、15、16、19、22、25、26、27、30、32、36 對刀豆尿素酶 有顯著的抑制作用，且抑制作用較乙酷氧目虧酸更高，活性最好的達(dá)到乙酷氧目虧酸的340倍。
[0037] 本發(fā)明的上述實施例表明：在合成的甲硝挫-酷胺衍生物系列化合物中，一部分 的尿素酶抑制作用高于陽性對照物乙酷氧目虧酸，對大鼠的急毒實驗表明，化合物4、12、16、 19、22、25、26、32的劑量達(dá)到5g/kg(此劑量為藥典規(guī)定的無毒劑量）時，沒有發(fā)現(xiàn)大鼠有中 毒跡象，因此在正常劑量下，它們作為藥物應(yīng)用是安全的。
[003引化合物1~36的烙點、質(zhì)譜及氨譜數(shù)據(jù)：
[0039] 甲硝挫-2'-基氧乙酷氧朽酸（1):
[0040]Mp175 ~176°C;EIMSm/z:243[]T]巧NMR(400MHz，DMS0, 5);8. 10 ~7. 92(s， IH)，7. 81 (s，IH)，4. 26 ~4. 33 (m，2H)，4. 27 ~4. 35 (m，2H)，3. 72 ~3. 98 (m，2H)，2. 51 (s， 3H)，2. 04 ~1.92(s，lH)。
[00川 甲硝挫-2' -基氧乙酷氨基脈似：
[0042]Mp178 ~179°C;EIMSm/z:285[]T]巧NMR(400MHz，DMS0, 5);8. 10 ~7. 92(s， IH)，7. 81 (s，IH)，4. 26 ~4. 33 (m，2H)，4. 27 ~4. 35 (m，2H)，2. 51 (s，3H)。
[004引 甲硝挫-2'-基氧乙酷硫代氨基脈做：
[0044]Mp172 ~174°C;EIMSm/z:301[]T]巧NMR(400MHz，DMS0，5) ;8. 56(s，lH)， 8. 10 ~7. 92 (s，IH)，7. 81 (s，IH)，4. 26 ~4. 33 (m，2H)，4. 27 ~4. 35 (m，2H)，2. 51 (s，3H)， 2. 04 ~1.92(s，lH)。
[004引 甲硝挫-2'-基氧乙酷氨基脈（4):
[0046]Mp165 ~167°C;EIMSm/z:284[]T]巧NMR(400MHz，DMS0, 5);8. 10 ~7. 92(s， IH)，7. 81 (s，IH)，4. 26 ~4. 33