一種酶發(fā)酵合成l-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及酶發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及酶發(fā)酵合成L-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]維生素C (抗壞血酸)就是一種常用的美白原料。其可抑制色素的增加，使雀斑變淡，具有美白效果，可縮小毛孔，調(diào)整皮膚紋理。維生素C可抑制黑色素的生成，黑色素一旦產(chǎn)生，維生素C還可使其變淡，請多攝入維生素C，從防止產(chǎn)生祛斑開始保護皮膚，維生素C除具有美白作用外，還有增加膠原蛋白、調(diào)整皮膚紋理的作用。
[0003]維生素C (抗壞血酸)能夠用來使肌膚更明亮，更健康，更年輕的功效已廣為人們熟知?？茖W(xué)研究表明維生素C提亮美白肌膚的功效來自于其抑制黑色素形成及減少黑色素的能力。但將維生素C應(yīng)用于健康和美容配方面臨諸多挑戰(zhàn)，受熱，氧化，與金屬離子以及化妝品中其他常用成分的反應(yīng)，都能輕易使維生素C失去生物活性。這會導(dǎo)致其成分在化妝品配方中變色，并且使得其帶來的使肌膚更健康更年輕的功效大打折扣。為解決這個問題，目前市場上出現(xiàn)了一種特殊的穩(wěn)定的維生素C，叫做L-抗壞血酸2-葡萄糖苷。這種維生素C衍生物，商品名簡稱為AA-2G，具備卓越的配方穩(wěn)定性，能夠從本質(zhì)上抑制變色和降解，同時保留了全部生物活性，以達(dá)到提亮美白，抵御紫外線照射以及抗衰老的功效。
[0004]目前L-抗壞血酸-2-葡糖甙主要采用化學(xué)合成的方法，環(huán)境危害大，不環(huán)保，且產(chǎn)率較低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，提供一種酶發(fā)酵合成L-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法，該方法具有綠色環(huán)保，產(chǎn)率高的優(yōu)點。
[0006]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:一種酶發(fā)酵合成L-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法，其特征在于采用以下步驟:
A、向反應(yīng)釜中加入純凈水，再加入維生素C，開啟攪拌；
B、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫在37°C，用質(zhì)量百分比30%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至5.50±0.10 ；
C、向所述反應(yīng)釜中加入β-環(huán)糊精，然后再加入環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶，同時補加適量純凈水；
D、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫度在37±2°C，避光反應(yīng)10-12h；
E、加入糖化酶，控控制溫度在37±2°C，避光反應(yīng)10-14h;
F、向反應(yīng)釜中加入純凈水進行沖洗，沖洗后得混合液；將混合液進行離心分離，然后過濾，得濾液；
G、將所得濾液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)釜中，在溫度<50°C時減壓，真空度< -0.1MPa時濃縮，濃縮至L-抗壞血酸2-葡糖苷含量為60%以上；
H、控制釜溫至38-45°C，加入晶種，攪拌，然后靜置緩慢析晶，緩慢降溫5h，溫度降至5-10°C，開啟攪拌，然后5-10°C保溫析晶；
J、析晶完畢，放料離心，離心至無液滴流出后用冰水噴霧淋洗，繼續(xù)離心，離心至無液滴流出后繼續(xù)離心30min，出料得L-抗壞血酸2-葡糖苷濕品；在溫度< 50°C，真空度
<-0.1Mpa環(huán)境下干燥，干燥完畢后，得L-抗壞血酸2-葡糖苷成品。
[0007]本發(fā)明采用酶法制備L-抗壞血酸-2-葡糖甙，析出的L-抗壞血酸2-葡糖苷晶體晶型穩(wěn)定均勻，雜質(zhì)少，產(chǎn)品純度高，環(huán)保無污染。
【具體實施方式】
[0008]實施例1:
一種酶發(fā)酵合成L-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法，其特征在于采用以下步驟:
A、向反應(yīng)釜中加入純凈水，再加入維生素C，開啟攪拌；
B、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫在37°C，用質(zhì)量百分比30%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至5.50±0.10 ；
C、向所述反應(yīng)釜中加入β-環(huán)糊精，然后再加入環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶，同時補加適量純凈水；
D、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫度在35°C，避光反應(yīng)1h;
E、加入糖化酶，控控制溫度在35°C，避光反應(yīng)1h;
F、向反應(yīng)釜中加入純凈水進行沖洗，沖洗后得混合液；將混合液進行離心分離，然后過濾，得濾液；
G、將所得濾液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)釜中，在溫度<50°C時減壓，真空度< -0.1MPa時濃縮，濃縮至L-抗壞血酸2-葡糖苷含量為60%以上；
H、控制釜溫至38°C，加入晶種，攪拌，然后靜置緩慢析晶，緩慢降溫5h，溫度降至5°C，開啟攪拌，然后5°C保溫析晶；
J、析晶完畢，放料離心，離心至無液滴流出后用冰水噴霧淋洗，繼續(xù)離心，離心至無液滴流出后繼續(xù)離心30min，出料得L-抗壞血酸2-葡糖苷濕品；在溫度< 50°C，真空度
<-0.1Mpa環(huán)境下干燥，干燥完畢后，得L-抗壞血酸2-葡糖苷成品。
實施例2:
一種酶發(fā)酵合成L-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法，其特征在于采用以下步驟:
A、向反應(yīng)釜中加入純凈水，再加入維生素C，開啟攪拌；
B、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫在37°C，用質(zhì)量百分比30%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至5.50±0.10 ；
C、向所述反應(yīng)釜中加入β-環(huán)糊精，然后再加入環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶，同時補加適量純凈水；
D、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫度在39°C，避光反應(yīng)12h ;
E、加入糖化酶，控控制溫度在39°C，避光反應(yīng)14h;
F、向反應(yīng)釜中加入純凈水進行沖洗，沖洗后得混合液；將混合液進行離心分離，然后過濾，得濾液；
G、將所得濾液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)釜中，在溫度<50°C時減壓，真空度< -0.1MPa時濃縮，濃縮至L-抗壞血酸2-葡糖苷含量為60%以上；
H、控制釜溫至45°C，加入晶種，攪拌，然后靜置緩慢析晶，緩慢降溫5h，溫度降至10°C，開啟攪拌，然后10°C保溫析晶； J、析晶完畢，放料離心，離心至無液滴流出后用冰水噴霧淋洗，繼續(xù)離心，離心至無液滴流出后繼續(xù)離心30min，出料得L-抗壞血酸2-葡糖苷濕品；在溫度< 50°C，真空度
<-0.1Mpa環(huán)境下干燥，干燥完畢后，得L-抗壞血酸2-葡糖苷成品。
實施例3:
一種酶發(fā)酵合成L-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法，其特征在于采用以下步驟:
A、向反應(yīng)釜中加入純凈水，再加入維生素C，開啟攪拌；
B、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫在37°C，用質(zhì)量百分比30%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至5.50±0.10 ；
C、向所述反應(yīng)釜中加入β-環(huán)糊精，然后再加入環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶，同時補加適量純凈水；
D、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫度在37°C，避光反應(yīng)Ilh ;
E、加入糖化酶，控控制溫度在37°C，避光反應(yīng)Ilh;
F、向反應(yīng)釜中加入純凈水進行沖洗，沖洗后得混合液；將混合液進行離心分離，然后過濾，得濾液；
G、將所得濾液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)釜中，在溫度<50°C時減壓，真空度< -0.1MPa時濃縮，濃縮至L-抗壞血酸2-葡糖苷含量為60%以上；
H、控制釜溫至40°C，加入晶種，攪拌，然后靜置緩慢析晶，緩慢降溫5h，溫度降至8°C，開啟攪拌，然后8°C保溫析晶；
J、析晶完畢，放料離心，離心至無液滴流出后用冰水噴霧淋洗，繼續(xù)離心，離心至無液滴流出后繼續(xù)離心30min，出料得L-抗壞血酸2-葡糖苷濕品；在溫度< 50°C，真空度
<-0.1Mpa環(huán)境下干燥，干燥完畢后，得L-抗壞血酸2-葡糖苷成品。
【主權(quán)項】
1.一種酶發(fā)酵合成L-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法，其特征在于采用以下步驟: A、向反應(yīng)釜中加入純凈水，再加入維生素C，開啟攪拌；B、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫在37°C，用質(zhì)量百分比30%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至5.50±0.10 ； C、向所述反應(yīng)釜中加入β-環(huán)糊精，然后再加入環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶，同時補加適量純凈水； D、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫度在37±2°C，避光反應(yīng)10-12h； E、加入糖化酶，控控制溫度在37±2°C，避光反應(yīng)10-14h; F、向反應(yīng)釜中加入純凈水進行沖洗，沖洗后得混合液；將混合液進行離心分離，然后過濾，得濾液； G、將所得濾液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)釜中，在溫度<50°C時減壓，真空度< -0.1MPa時濃縮，濃縮至L-抗壞血酸2-葡糖苷含量為60%以上； H、控制釜溫至38-45°C，加入晶種，攪拌，然后靜置緩慢析晶，緩慢降溫5h，溫度降至5-10°C，開啟攪拌，然后5-10°C保溫析晶； J、析晶完畢，放料離心，離心至無液滴流出后用冰水噴霧淋洗，繼續(xù)離心，離心至無液滴流出后繼續(xù)離心30min，出料得L-抗壞血酸2-葡糖苷濕品；在溫度< 50°C，真空度<-0.1Mpa環(huán)境下干燥，干燥完畢后，得L-抗壞血酸2-葡糖苷成品。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種酶發(fā)酵合成L-抗壞血酸-2-葡糖甙的方法，其特征在于采用以下步驟：？A、向反應(yīng)釜中加入純凈水，再加入維生素C，開啟攪拌；B、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫在37℃，用質(zhì)量百分比30%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至5.50±0.10；C、向所述反應(yīng)釜中加入β-環(huán)糊精，然后再加入環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶，同時補加適量純凈水；D、控制反應(yīng)釜內(nèi)溫度在37±2℃，避光反應(yīng)10-12h；E、加入糖化酶，控制溫度在37±2℃，避光反應(yīng)10-14h；F、過濾；G、濃縮；H、析晶、干燥后得L-抗壞血酸2-葡糖苷成品。本發(fā)明所得L-抗壞血酸-2-葡糖甙晶型穩(wěn)定均勻，雜質(zhì)少，產(chǎn)品純度高，環(huán)保無污染。
【IPC分類】C12P19/60
【公開號】CN105002237
【申請?zhí)枴緾N201510425950
【發(fā)明人】畢永賢, 陳斌, 蔣麗剛
【申請人】珀萊雅化妝品股份有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年7月20日