發(fā)酵法制備葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一、技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于中藥化學(xué)里中藥有效成分提取分離技術(shù)領(lǐng)域。
二、【背景技術(shù)】
[0002]目前從葛根中提取分離葛根素和大豆甙元，首先都是把粉粹后的葛根直接用水或者不同濃度的酒精進(jìn)行提取，得到葛根總黃酮。該總黃酮里葛根素含量低，含量為10-15%之間。機(jī)械雜質(zhì)和相關(guān)物質(zhì)多。大豆甙元含量只有2%左右。增加了后期注射用葛根素單體的精制分離步驟，也降低了收率。相關(guān)文獻(xiàn)有:
[0003]中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)CN1726956A公開(kāi)的“葛根總黃酮提取物及其制備方法和應(yīng)用”，該方法包括如下步驟:取葛根藥材，加4?8倍體積30?90%的乙醇溶液提取2-5次，每次0.5-1.5小時(shí)，將提取液濃縮上大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫雜質(zhì)，再用10?70%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮后，加乙醇使醇濃度達(dá)70-80%，濾去沉淀物，濾液濃縮，加正丁醇萃取，回收正丁醇，濃縮、干燥。
[0004]中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)CN1080287A公開(kāi)的“葛根有效成分提取物及制備方法和用途”，該方法包括如下步驟:將葛根原料經(jīng)煎煮、過(guò)濾、濾液濃縮、酒沉、再次過(guò)濾、濾液回收乙醇得原漿，原漿經(jīng)稀釋或噴霧干燥制得葛根有效成分提取液(或粉)。
[0005]中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)CN103059008A公開(kāi)的“一種同時(shí)制備高純度葛根素和大豆苷元的方法”，該方法包括如下步驟:將粉碎的葛根與乙醇按料液比是1: 6-1: 10混合提取，將所得混合物過(guò)濾，濾液減壓濃縮至干，得到葛根提取物浸膏，將葛根提取物浸膏用適當(dāng)濃度的乙醇溶液復(fù)溶后，加入鹽酸溶液和氯仿回流水解萃取一定時(shí)間，靜置冷卻，分出氯仿，減壓濃縮，濃縮物采用乙醇溶液重結(jié)晶，得到大豆苷元結(jié)晶，酸水解液加水稀釋?zhuān)胖?8-72h可析出葛根素粗晶，將其用乙酸-甲醇重結(jié)晶，得葛根素產(chǎn)品。
三、
【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種發(fā)酵法制備葛根素粗品和大豆甙元粗品的方法。
[0007]本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題的基本思路是:依據(jù)生物體內(nèi)伴生的原理，利用葛根自身含有的纖維素酶和葡萄糖甙酶，通過(guò)人工激活培養(yǎng)發(fā)酵的方式，轉(zhuǎn)化羥基葛根素、7-木糖苷葛根素等衍生物為葛根素，從而可增加葛根素收率；轉(zhuǎn)化大豆甙為大豆甙元可增加大豆甙元收率。
[0008]本發(fā)明具體是這樣實(shí)現(xiàn)的:
[0009]一種發(fā)酵法制備葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:
[0010]將干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，噴干葛根原料重量2-2.5倍的水拌勾成濕料；
[0011]堆積濕料并用覆蓋物覆蓋保溫自然發(fā)酵24-48小時(shí)，發(fā)酵升溫至50-55攝氏度后，揭開(kāi)覆蓋物讓溫度自然下降到25-35攝氏度發(fā)酵完成，得發(fā)酵料；
[0012]將發(fā)酵料投入提取罐中回流提取三次，每次提取加干葛根原料重量5-10倍的濃度為90%以上的乙醇或甲醇，得三次提取液，合并三次提取液過(guò)濾得過(guò)濾液；
[0013]將過(guò)濾液泵入回收罐中蒸餾回收乙醇或甲醇至無(wú)酒精度的稀膏；
[0014]稀膏趁熱過(guò)濾得濾餅和濾液；
[0015]濾液再經(jīng)脫水得到葛根素含量為25%以上的葛根素粗品；
[0016]濾餅用清水清洗后，烘干得到大豆甙元含量為55%以上的大豆甙元粗品。
[0017]進(jìn)一步的方案是:在干葛根原料粉粹過(guò)程中就向粗粉噴水。
[0018]進(jìn)一步的方案是:所用水用酸度調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)PH值至4.5-5.5。
[0019]進(jìn)一步的方案是:所述的酸度調(diào)節(jié)劑是鹽酸或醋酸。
[0020]進(jìn)一步的方案是:采用噴霧干燥方法脫水。
[0021]本發(fā)明中:最好在原料粉粹時(shí)就加水，以便降塵；可以用行業(yè)常用酸度調(diào)節(jié)劑(如鹽酸、檸檬酸，乙酸、乳酸或醋酸等)調(diào)節(jié)水的PH值；為了轉(zhuǎn)運(yùn)方便，最好裝袋發(fā)酵，面上的覆蓋物可以是塑料薄膜；行業(yè)中一般回流提取三次提取液，采用不同提取方法，也可以適當(dāng)增減提取次數(shù)，只要有效成分提取率達(dá)到設(shè)定要求；濾液再經(jīng)常規(guī)脫水處理如采用噴霧干燥方法脫水就得到含量較高的葛根素粗品(含量為25%以上)；濾餅用少量水洗，烘干就得到含量為55%以上的大豆甙元粗品。
[0022]再采用常規(guī)精制方法精制葛根素粗品就可以得到注射用葛根素單體，精制大豆甙元粗品就可以得到大豆甙元單體。
[0023]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:同時(shí)提取分離葛根中葛根素和大豆甙元，提高了葛根自身的利用價(jià)值，充分利用了中藥材資源。節(jié)省操作工序和溶劑的使用量，生產(chǎn)成本低，得率高，葛根素含量從常規(guī)提取出來(lái)的10% -15%—下提升到25%以上，而且同時(shí)去掉了部分相關(guān)雜質(zhì)，利于下一步精制葛根素單體。同時(shí)通過(guò)本方法收到了大豆甙元含量為55%以上的大豆甙元副產(chǎn)物，而傳統(tǒng)方法只能得到含量為2 %左右的大豆甙元。
[0024]該方法生產(chǎn)的葛根提取物，對(duì)于進(jìn)一步精制注射用葛根素單體，起到了先期就除掉了大部分相關(guān)物質(zhì)的雜質(zhì)，而且成倍提升了葛根素粗品的含量，起到了對(duì)資源的最大化利用，提高了產(chǎn)品收率，降低了生產(chǎn)成本；對(duì)環(huán)境無(wú)污染。是一種行之有效的大規(guī)模工業(yè)化提取葛根素粗品的方法。
[0025]根據(jù)液相檢查結(jié)果表明:葛根素含量從14%提升到了 26% ;葛根素主峰前的羥基葛根素等衍生物全部轉(zhuǎn)化成了葛根素，大豆甙全部轉(zhuǎn)化成了大豆甙元。效果十分明顯。
四、【具體實(shí)施方式】
[0026]下面再結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明。但本發(fā)明的應(yīng)用范圍不限于下列實(shí)施例。
[0027]實(shí)施例1:
[0028]取100公斤干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，噴干葛根原料重量2倍的水拌勻成濕料，原料粉粹時(shí)加水，所用水用鹽酸調(diào)節(jié)PH值至4.5。濕料堆積保溫自然發(fā)酵24小時(shí)，面上用塑料薄膜覆蓋；發(fā)酵升溫至50攝氏度后揭開(kāi)塑料薄膜，待溫度自然下降到25攝氏度后，發(fā)酵完成得發(fā)酵料。將發(fā)酵料投入提取罐中，加原料重量的5倍的濃度為90%以上的乙醇，分別回流提取三次得提取液，合并三次提取液過(guò)濾得過(guò)濾液，過(guò)濾液泵入回收罐中蒸餾回收乙醇至無(wú)酒精度得稀膏；稀膏趁熱過(guò)濾得濾餅和濾液，濾液再經(jīng)噴霧干燥方法脫水得到含量較高的葛根素粗品(含量為25.8%);濾餅用少量水洗，烘干得到含量為55%的大豆甙元粗品。
[0029]實(shí)施例2:
[0030]取100公斤干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，噴干葛根原料重量2.2倍的水拌勻成濕料，原料粉粹時(shí)加水，所用水用醋酸調(diào)節(jié)PH值至5.5。濕料堆積保溫自然發(fā)酵48小時(shí)，面上用塑料薄膜覆蓋；發(fā)酵升溫至55攝氏度后揭開(kāi)塑料薄膜，待溫度自然下降到35攝氏度后，發(fā)酵完成得發(fā)酵料。將發(fā)酵料投入提取罐中，加原料重量的10倍的濃度為90%以上的甲醇，分別回流提取三次得提取液，合并三次提取液過(guò)濾得過(guò)濾液，過(guò)濾液泵入回收罐中蒸餾回收甲醇至無(wú)酒精度得稀膏；稀膏趁熱過(guò)濾得濾餅和濾液，濾液再經(jīng)減壓烘干脫水得到含量較高的葛根素粗品(含量為28.1%);濾餅用少量水洗，烘干得到含量為60%的大豆甙元粗品。
[0031]實(shí)施例3:
[0032]取100公斤干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，噴干葛根原料重量2.5倍的水拌勻成濕料，所用水用鹽酸調(diào)節(jié)PH值至5.0o濕料裝入編織袋中堆積保溫自然發(fā)酵36小時(shí)，面上用塑料薄膜覆蓋；發(fā)酵升溫至53攝氏度后揭開(kāi)塑料薄膜，待溫度自然下降到25攝氏度后，發(fā)酵完成得發(fā)酵料。將發(fā)酵料投入提取罐中，加原料重量的8倍的濃度為90%以上的乙醇，分別回流提取三次得提取液，合并三次提取液過(guò)濾得過(guò)濾液，過(guò)濾液泵入回收罐中蒸餾回收乙醇至無(wú)酒精度得稀膏；稀膏趁熱過(guò)濾得濾餅和濾液，濾液再經(jīng)噴霧干燥方法脫水得到含量較高的葛根素粗品(含量為26.5%);濾餅用少量水洗，烘干得到含量為58%的大豆甙元粗品。
[0033]實(shí)施例4:
[0034]取100公斤干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，噴干葛根原料重量2.3倍的水拌勻成濕料。濕料裝入編織袋中堆積保溫自然發(fā)酵30小時(shí)，面上用塑料薄膜覆蓋；發(fā)酵升溫至53攝氏度后揭開(kāi)塑料薄膜，待溫度自然下降到25攝氏度后，發(fā)酵完成得發(fā)酵料。將發(fā)酵料投入提取罐中，加原料重量的8倍的濃度為90%以上的乙醇，分別回流提取三次得提取液，合并三次提取液過(guò)濾得過(guò)濾液，過(guò)濾液泵入回收罐中蒸餾回收乙醇至無(wú)酒精度得稀膏；稀膏趁熱過(guò)濾得濾餅和濾液，濾液再經(jīng)噴霧干燥方法脫水得到含量較高的葛根素粗品(含量為25% );濾餅用少量水洗，烘干得到含量為55%的大豆式元粗品。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種發(fā)酵法制備葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是: 將干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，噴干葛根原料重量2-2.5倍的水拌勾成濕料； 堆積濕料并用覆蓋物覆蓋保溫自然發(fā)酵24-48小時(shí)，發(fā)酵升溫至50-55攝氏度后，揭開(kāi)覆蓋物讓溫度自然下降到25-35攝氏度發(fā)酵完成，得發(fā)酵料； 將發(fā)酵料投入提取罐中回流提取三次，每次提取加干葛根原料重量5-10倍的濃度為90 %以上的乙醇或甲醇，得三次提取液，合并三次提取液過(guò)濾得過(guò)濾液； 將過(guò)濾液泵入回收罐中蒸餾回收乙醇或甲醇至無(wú)酒精度的稀膏； 稀膏趁熱過(guò)濾得濾餅和濾液； 濾液再經(jīng)脫水得到葛根素含量為25%以上的葛根素粗品； 濾餅用清水清洗后，烘干得到大豆甙元含量為55%以上的大豆甙元粗品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵法制備葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:在干葛根原料粉粹過(guò)程中就向粗粉噴水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種發(fā)酵法制備葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:所用水用酸度調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)PH值至4.5-5.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種發(fā)酵法制備葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:所述的酸度調(diào)節(jié)劑是鹽酸或醋酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵法制備葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:采用噴霧干燥方法脫水。
【專(zhuān)利摘要】一種發(fā)酵法制備葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是將干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，噴原料重量2-2.5倍的水拌勻成濕料；堆積濕料覆蓋保溫自然發(fā)酵24-48小時(shí)，發(fā)酵升溫至50-55攝氏度后，讓溫度自然下降到25-35攝氏度發(fā)酵完成，得發(fā)酵料；將發(fā)酵料投入提取罐中回流提取三次，每次提取加干葛根原料重量5-10倍的濃度為90％以上的乙醇或甲醇，得三次提取液，合并三次提取液過(guò)濾得過(guò)濾液；將過(guò)濾液泵入回收罐中蒸餾回收乙醇或甲醇至無(wú)酒精度的稀膏；稀膏趁熱過(guò)濾得濾餅和濾液；濾液再經(jīng)脫水得到葛根素含量為25％以上的葛根素粗品；濾餅用清水清洗后，烘干得到大豆甙元含量為55％以上的大豆甙元粗品。本發(fā)明提取的葛根素含量可達(dá)25％，大豆甙元含量達(dá)55％。
【IPC分類(lèi)】C12P17-14, C12P17-16
【公開(kāi)號(hào)】CN104561176
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410849402
【發(fā)明人】吳憲君, 干文冬, 吳昱隆, 吳秀英
【申請(qǐng)人】綿陽(yáng)勁柏生物科技有限責(zé)任公司
【公開(kāi)日】2015年4月29日
【申請(qǐng)日】2014年12月30日