本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種以動(dòng)物腸粘膜為原料生產(chǎn)腸道微生物粉并聯(lián)產(chǎn)小分子肽、肝素鈉、堿性磷酸單酯酶的方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

20世紀(jì)初，諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)獎(jiǎng)獲得者俄國(guó)科學(xué)家梅契尼科夫?qū)θ鍌€(gè)國(guó)家的長(zhǎng)壽人口比例進(jìn)行了調(diào)查，發(fā)現(xiàn)保加利亞的長(zhǎng)壽人口比例最高。通過(guò)與周圍國(guó)家飲食習(xí)慣對(duì)比，發(fā)現(xiàn)與保加利亞人大量飲用含有乳酸菌的酸奶有關(guān)，他們?nèi)司刻旌纫磺Э怂崮獭?908年，梅契尼科夫?qū)⑺陌l(fā)現(xiàn)寫在《長(zhǎng)壽》一書中，指出胃腸道菌群與人類健康長(zhǎng)壽密切相關(guān)，并指出腸道有害菌的生長(zhǎng)是促使人衰老的主要原因。我國(guó)學(xué)者張箎教授在世界第五長(zhǎng)壽區(qū)—中國(guó)廣西巴馬地區(qū)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，百歲以上老人體內(nèi)的雙歧桿菌比普通老人體內(nèi)有益菌多的多。1974年，paker將益生菌定義為對(duì)腸道微生物平衡有利的菌物。

腸道益生菌被定義為臨床上對(duì)人體健康有效的活菌，而且不依賴于種屬。人腸道內(nèi)生存著500多種約100萬(wàn)億微生物群，加起來(lái)有足球大小，打個(gè)比喻，地球上有四十五億人口，人腸道的菌群有一百兆個(gè)數(shù)量，這個(gè)數(shù)量是45億2萬(wàn)倍以上。如果將人腸道細(xì)菌排成一列，可繞行地球兩圈多。所以說(shuō)人不僅是一個(gè)"人"，它還是與腸道微生物菌群組成共存的微環(huán)境。人與腸道微生物是共生，共存，共榮的關(guān)系，一方的健康狀態(tài)發(fā)生改變另一方隨之產(chǎn)生不良反應(yīng)。一旦腸道菌群平衡被打破，人體營(yíng)養(yǎng)成分的吸收，有害物質(zhì)的排泄，吐故納新，人體正常新陳代謝，生理、生化功能就發(fā)生改變，制病因子承機(jī)開(kāi)始猖狂；惡性腫瘤，心血管病，高血壓，糖尿病等等疾病相繼而生，破壞，損傷，減退人體各系統(tǒng)的生理功能，縮短人類本應(yīng)生存200年左右的壽命。人類在衰老過(guò)程中，腸道菌群的多樣生物功能逐著年齡的增長(zhǎng)不斷降低，對(duì)人有害的致病菌占優(yōu)勢(shì)。

當(dāng)今生物界對(duì)腸道微生物的研究非常勇躍，20l0年3月4日，世界權(quán)威科學(xué)期刊《自然》發(fā)表文章指出，在多國(guó)科學(xué)家的通力合作和艱苦努為下，人類已經(jīng)測(cè)定出人腸道微生物的基因目錄，對(duì)人類來(lái)說(shuō)不論是對(duì)微生物和疾病的認(rèn)識(shí)，還是對(duì)人體健康，特別是對(duì)提升人類生存質(zhì)量，延年益壽都具有里程碑劃時(shí)代的意義?！渡锕饶c道微生態(tài)與健康研討會(huì)》己舉辦兩界，2016年參會(huì)的學(xué)者與專家超過(guò)千人；2017年3月24-25日在上海就提高我國(guó)腸道微生態(tài)的整體水平，腸道菌群移植治療，腸道菌群與神經(jīng)，腫瘤，代謝，免疫疾病，以及提高老年人生存質(zhì)量，達(dá)到延年益壽等有關(guān)議題進(jìn)行了深入廣泛的探討合作交流。

近年來(lái)興起將健康人的糞便通過(guò)手術(shù)植入到病人腸道內(nèi)，以達(dá)到改善患者腸道微生態(tài)環(huán)境，使有益、有害、中間菌群重新組合起到平衡、維持、恢復(fù)到健康人的生理功能。華盛頓大學(xué)的生物學(xué)家kaeberlein幾十年一直致力于遺傳學(xué)研究，研究團(tuán)隊(duì)以老鼠，狗作為研究對(duì)象，用一種細(xì)菌產(chǎn)物作延長(zhǎng)壽命實(shí)驗(yàn)；狗的壽命為10年-13年，他們用24只狗實(shí)驗(yàn)，10周后，用超聲心動(dòng)圖檢查狗的心臟功能是否發(fā)生變化，結(jié)果顯示飼喂了細(xì)菌產(chǎn)物的狗功能得到了提高，未食用細(xì)菌產(chǎn)物的狗心臟沒(méi)有改變；他們希望這種細(xì)菌產(chǎn)物將來(lái)用到人類身上，延緩人類壽命。德國(guó)馬普所darlovalenzano教授為了證明這一結(jié)論的科學(xué)性。他用地球上最短壽命的脊椎動(dòng)物非洲青鱂小魚作為衰老的動(dòng)物模型，因?yàn)檫@種魚幾個(gè)月就走完一生。教授和他的研發(fā)團(tuán)隊(duì)決定做一個(gè)“糞便移植”實(shí)驗(yàn)，將9周半大的青鳉魚泡在含有抗生素的水中，殺死它們自身的腸道菌群。隨后，將這些中年魚挪到無(wú)菌水中，并在水里撒上6周大的小魚糞便。研究人員也作了幾組對(duì)照實(shí)驗(yàn)。一組9周半大的中年魚吞食同齡魚糞便，另一組9周半大的魚在滅菌后，沒(méi)有吞食任何糞便，研究人員還做了未經(jīng)任何處理的魚作為對(duì)照。十六周后比較了這些魚的壽命，結(jié)果令人吃驚，吞服了年輕小魚糞便的那些9周半的魚壽命顯著延長(zhǎng)，分別提高了21%-41%不等，運(yùn)動(dòng)能力競(jìng)?cè)槐憩F(xiàn)的和青年時(shí)期類似。

雖然大量實(shí)驗(yàn)證明“糞便移植”能夠延緩衰老，但糞便中的活性微生物來(lái)源主要有：〈1〉是腸黏膜沒(méi)有固定牢；〈2〉或是發(fā)育出現(xiàn)問(wèn)題；〈3〉甚至是有益和有害菌群在腸道微生態(tài)平衡中多余部分。糞便長(zhǎng)期在腸道存留叫便秘，便秘是對(duì)人有害的，微生物和糞便與大量人體代謝廢物在一起對(duì)它自身生長(zhǎng)，生存環(huán)境，營(yíng)養(yǎng)都是不利的。總而言之，糞便中的微生物是腸道菌群淘汰的產(chǎn)物，是和人體不需要的廢物一起排到體外的。而動(dòng)物的大小腸經(jīng)加工處理后，是人類的美食佳肴，對(duì)人體不產(chǎn)生有害的作用，所以從腸粘膜中分離提取腸道菌群，比從糞便中提取、移植，要安全，更有完整性，同時(shí)腸黏膜還可以生產(chǎn)小分子肽、肝素鈉、堿性磷酸單酯酶。移植哺乳動(dòng)物腸道菌群進(jìn)入老年人腸內(nèi)，既可補(bǔ)充有益菌，使有益菌與有害菌在腸道處于平衡，還恢復(fù)了腸道與微生物的微環(huán)境，讓老年人保持年輕人腸道生理機(jī)制，使老年人的腸道吸收、排泄恢復(fù)到健康水平，身體各系統(tǒng)，各部位營(yíng)養(yǎng)加強(qiáng)，不需要的老化物質(zhì)、材料進(jìn)行更新，老年人健康得到新生，減少疾病發(fā)生，提高老年人生存的質(zhì)量，達(dá)到延年益壽效果，是人類長(zhǎng)壽的最佳選擇。

腸道內(nèi)先天500多種約100萬(wàn)億不同功能的微生物群，要保持相對(duì)穩(wěn)定和平衡，只有從腸粘膜中移植，才能保證菌群的整體完美，發(fā)揮菌體協(xié)調(diào)、補(bǔ)充、制約的作用，使老年人恢復(fù)到年輕人腸道菌群工作的機(jī)能。本發(fā)明對(duì)實(shí)現(xiàn)人類的長(zhǎng)壽夢(mèng)，提高人生存質(zhì)量，減少大病、凝難病的發(fā)生，使人類少受或減輕疾病的痛苦和折磨有顯而易見(jiàn)的好處。本發(fā)明既利民又利國(guó)，還符合國(guó)家醫(yī)改方向“防重于治”。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種從動(dòng)物腸道移植菌群并聯(lián)產(chǎn)小分子肽、肝素鈉、堿性磷酸單酯酶的方法及其應(yīng)用。具體來(lái)說(shuō)本發(fā)明是以動(dòng)物腸粘膜為原料，應(yīng)用現(xiàn)代生物過(guò)程集成化技術(shù)，在同一生產(chǎn)工藝流程中，可生產(chǎn)出腸道微生物粉、小分子肽、肝素鈉、堿性磷酸單酯酶4種功能成份，可廣泛應(yīng)用于人類和動(dòng)物醫(yī)藥治療、預(yù)防保健業(yè)。腸道微生物粉可將哺乳動(dòng)物腸道菌群移植進(jìn)入人體腸內(nèi)，既可補(bǔ)充有益菌，使有益菌與有害菌在腸道處于平衡，還恢復(fù)了腸道與微生物的微環(huán)境，達(dá)到延年益壽效果。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：一種用動(dòng)物腸粘膜生產(chǎn)腸道微生物粉并聯(lián)產(chǎn)小分子肽、肝素鈉、堿性磷酸酶的方法，包括以下步驟：

（1）將動(dòng)物腸粘膜粉碎，打漿；

（2）加入2-3倍體積的0.9%生理鹽水溶解；

（3）用離心機(jī)3000-5000r/min離心10-15min，收集離心液，去除不溶物；

（4）將收集的離心液，依次過(guò)1.0μm、0.65μm、0.22μm的濾膜，收集過(guò)濾液和膜上未過(guò)濾物；用生理鹽水沖洗并合并膜上未過(guò)濾物，經(jīng)蒸發(fā)干燥即為腸道微生物粉；

（5）合并收集的膜過(guò)濾液，經(jīng)過(guò)截留分子量一萬(wàn)的超濾裝置，分別收集透過(guò)液和截留液，透過(guò)液即小分子肽液，濃縮后即為口服液原料；

（6）將步驟（5）中的截留液，加正丁醇沉淀；用高速離心機(jī)離心，分別收集離心液和固態(tài)離心物；

（7）將步驟（6）中收集的離心液，用等體積冷丙酮沉淀，出現(xiàn)沉淀物后，于速度3000-6000r/min離心5分鐘，收集沉淀物，此沉淀物離心后立即加熱到丙酮沸點(diǎn)，使丙酮渾發(fā)；

（8）將步驟（7）收集的沉淀物加入3-5倍量（w/v：g/ml）的0.05mol/l，tris—hc1緩沖液，該緩沖液ph7.5，含0.01mol/l氯化鎂，0.01mol/l氯化鈉，0.01mol/l氯化鋅；充分混合攪拌，得堿性磷酸單酯酶粗液；

（9）將步驟（6）高速離心機(jī)收得的固態(tài)物用于生產(chǎn)肝素鈉。

將上述步驟（8）中所得的堿性磷酸單酯酶粗液經(jīng)上柱、洗脫、收集、真空干燥得堿性磷酸單酯酶，具體過(guò)程如下：

a、上deal-separ0se4b柱，此柱用ph7.5、0.05mol/l的tris-hc1緩沖液平衡過(guò)；

b、用含有氯化鈉的ph7.5的0.05mol/l，tris-hc1緩沖液線性梯度洗脫；

c、用280nm檢測(cè)洗脫峰，收集峰高洗脫液；

d、用磷苯二鈉為底物檢測(cè)收集洗脫液酶活性，合并活性酶洗脫液；

e、將上述活性酶用旋轉(zhuǎn)薄板蒸發(fā)器在35℃下真空干燥得粉劑，即堿性磷酸單酯酶。

上述步驟（9）中生產(chǎn)肝素鈉的具體方法如下：

a、將固態(tài)物用三倍量（w/v：g/ml）的0.9%生理鹽水溶解；

b、用40%naoh溶液調(diào)ph至8.0-9.0，加熱攪拌到60℃保溫二小時(shí)；

c、按比例加入0.20-0.25%（w/v：g/ml）的固態(tài)胰蛋白酶，酶解三小時(shí)，溫度保持在37℃，ph在8.0-9.0之間；

d、趁熱過(guò)濾，收集過(guò)濾液，用10%hcl調(diào)節(jié)ph5.5-6.0，立即升溫至95℃，在攪拌下按比例5%（w/v：g/ml）加入的氯化鈉；

e、使蛋白質(zhì)與肝素鈉分離；

f、保溫，當(dāng)出現(xiàn)有沉淀物下降，立即過(guò)濾收濾渣，處理后作動(dòng)物蛋白飼料；濾液在用6000-10000r/min離心，收集離心液，將離心液冷卻到5-8℃；

g、緩慢過(guò)d-254樹(shù)脂柱，控制流速，使肝素鈉充分被樹(shù)脂吸附；該d-254樹(shù)脂裝柱事先要用酸、堿平衡好；

h、吸附罷的柱子，用3%的氯化鈉液洗滌，除去非肝素鈉物質(zhì)；

i、再用5%的氯化鈉液洗脫柱子，收集洗脫液；將收集的洗脫液加入乙醇，使溶液酒精終濃度達(dá)到43-45%，靜置6小時(shí)，收集沉淀物；

j、沉淀物用無(wú)水乙醇脫水，再用丙酮脫水,脫水的肝素鈉在50℃真空干燥即得粗品肝素鈉。

本發(fā)明產(chǎn)品中腸道微生物粉在醫(yī)生指導(dǎo)下食用后可使腸粘膜中分離提取的腸道菌群進(jìn)入老年人腸內(nèi)，既可補(bǔ)充有益菌，使有益菌與有害菌在腸道處于平衡，還恢復(fù)了腸道與微生物的微環(huán)境，讓老年人保持年輕人腸道生理機(jī)制，使老年人的腸道吸收、排泄恢復(fù)到健康水平，身體各系統(tǒng)，各部位營(yíng)養(yǎng)加強(qiáng)，不需要的老化物質(zhì)、材料進(jìn)行更新，老年人健康得到新生，減少疾病發(fā)生，提高老年人生存的質(zhì)量，達(dá)到延年益壽效果，是人類長(zhǎng)壽的最佳選擇。肝素鈉可治療各種疾病并發(fā)的播散性血管內(nèi)凝血早期、預(yù)防和治療動(dòng)、靜脈血栓和肺栓塞、不穩(wěn)定型心絞痛(減輕癥狀、預(yù)防心肌梗塞)，急性心肌梗塞(防止早期再梗塞和梗塞區(qū)延展，降低病死率)、在人工心肺、腹膜透析或血液透析時(shí)作為抗凝血藥物、用于輸血時(shí)預(yù)防血液凝固及血庫(kù)保存鮮血等體外抗凝劑。小分子肽可以輕而易舉地直接進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并且透過(guò)皮膚屏障、透過(guò)血腦屏障、透過(guò)胎盤屏障、透過(guò)腸胃粘膜屏障，高效、完全、徹底的被機(jī)體吸收、轉(zhuǎn)化和利用。小分子肽參與酶的合成，激發(fā)酶的活性，強(qiáng)化酶的功能，維持酶的穩(wěn)定；小分子肽改善中間代謝膜(腸胃粘膜、毛細(xì)血管壁、肺泡、腦脊膜、紅細(xì)胞壁、腎小球基底膜）的通透性，能夠有效的吸收營(yíng)養(yǎng)，排泄毒素，并能防御病原體的入侵。堿性磷酸單酯酶是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品最常用的標(biāo)記酶之一，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和酶免分析中。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)如下：

1、本發(fā)明另辟蹊徑，從腸粘膜中分離提取腸道菌群，比從糞便中提取、移植腸道菌群更安全，更有完整性，且制備的腸道微生物粉使用方便，和糞便移植比較不需要通過(guò)手術(shù)植入。

2、本發(fā)明制備的腸道微生物粉可使腸粘膜中分離提取的腸道菌群進(jìn)入老年人腸內(nèi)，既可補(bǔ)充有益菌，使有益菌與有害菌在腸道處于平衡，還恢復(fù)了腸道與微生物的微環(huán)境，使老年人的腸道吸收、排泄恢復(fù)到健康水平，提高老年人生存的質(zhì)量，達(dá)到延年益壽效果，是人類長(zhǎng)壽的最佳選擇。

3、本發(fā)明產(chǎn)品生產(chǎn)采用聯(lián)產(chǎn)工藝，應(yīng)用現(xiàn)代生物過(guò)程集成化技術(shù)，在同一生產(chǎn)工藝流程中，可生產(chǎn)出腸道微生物粉、小分子肽、肝素鈉、堿性磷酸單酯酶4種功能成份，該工藝采用傳統(tǒng)工藝與現(xiàn)代工藝相結(jié)合，簡(jiǎn)易設(shè)備與現(xiàn)代設(shè)備相結(jié)合，可操作性強(qiáng)，規(guī)模可大可小，生產(chǎn)成本低，經(jīng)濟(jì)效益顯著，便于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化規(guī)?；a(chǎn)。

4、本發(fā)明工藝主要是以腸道微生物粉為核心有效成分，并聯(lián)產(chǎn)小分子肽、肝素鈉、堿性磷酸單酯酶等3種有效成分，與2010年授權(quán)的《以豬小腸粘膜為原料聯(lián)產(chǎn)堿性磷酸酶和肝素鈉的工藝》相比，不僅在同一生產(chǎn)工藝中生產(chǎn)出了更多的功效成分，提高了動(dòng)物腸粘膜的資源利用率，還大大降低了肝素鈉和堿性磷酸單酯酶的自身的生產(chǎn)成本，使兩者生產(chǎn)成本與原工藝相比降低了63%，更加具有經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和市場(chǎng)效益。

5、本發(fā)明產(chǎn)品中肝素鈉、小分子肽、堿性磷酸單酯酶可廣泛應(yīng)用于人類和動(dòng)物醫(yī)藥治療、預(yù)防保健業(yè)，充分利用腸粘膜原料，創(chuàng)造出更多的價(jià)值。

6、本發(fā)明對(duì)實(shí)現(xiàn)人類的長(zhǎng)壽夢(mèng)，提高人生存質(zhì)量，減少大病、凝難病的發(fā)生，使人類少受或減輕疾病的痛苦和折磨有顯而易見(jiàn)的好處，具有巨大的市場(chǎng)需求潛力。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。

實(shí)施例1

腸道微生物粉、小分子肽、肝素鈉、堿性磷酸單酯酶4種功能成份聯(lián)產(chǎn)工藝包括以下步驟：

（1）將動(dòng)物腸粘膜粉碎，打漿；

（2）加入3倍體積的0.9%生理鹽水溶解；

（3）用離心機(jī)5000r/min離心15min，收集離心液，去除不溶物；

（4）將收集離心液，過(guò)1.0μm的濾膜，收集過(guò)濾液和膜上未過(guò)濾物。

a、將過(guò)1.0μm膜的過(guò)濾液再過(guò)0.65μm的濾膜，收集過(guò)濾液和膜上未過(guò)濾物。

b、將過(guò)0.65μm膜的過(guò)濾液再過(guò)0.22μm的濾膜，收集過(guò)濾液和膜上未過(guò)濾物。

c、合并過(guò)1.0μm膜，0.65μm，0.22μm膜的過(guò)濾液。為提取堿性磷酸單酯酶。

d、合并末過(guò)1.0μm，0.65μm，0.22μm膜的未過(guò)濾物，為生產(chǎn)腸道微生物準(zhǔn)備。

e、以上未過(guò)1.0μm，0.65μm，0.22μm膜的未過(guò)濾物，用生理鹽水收集。

f、將未過(guò)1.0μm，0.65μm，0.22μm膜用生理鹽水收集的混合物，用旋轉(zhuǎn)薄板蒸發(fā)器扵35℃以下真空干燥，即得腸道微生物粉。

h、將腸道微生物粉裝腸溶膠中。在醫(yī)生指導(dǎo)下食用。

（5）合并步驟（4）中收集的膜過(guò)濾液，生產(chǎn)小分子肽。

a、將上面的離心液經(jīng)過(guò)截留分子量一萬(wàn)的超濾裝置，用生理鹽水分別收集透過(guò)液和截留液，透過(guò)液即小分子肽液，濃縮后即為口服液原料。

b、小分子肽液加木糖醇，不同口味的香料即為食用保健飲料。

c、小分子肽能提高人的免疫功能，特別是感冒初期。

（6）將步驟（5）中的截留液，加正丁醇沉淀；用高速離心機(jī)離心，分別收集離心液和固態(tài)離心物；

（7）將步驟（6）中收集的離心液，用等體積冷丙酮沉淀，出現(xiàn)沉淀物后，于速度3000-6000r/min離心5分鐘，收集沉淀物，此沉淀物離心后立即加熱到丙酮沸點(diǎn)，使丙酮渾發(fā)；

（8）將步驟（7）收集的沉淀物，提取堿性磷酸單酯酶。

a、向以上收集沉淀物加入3倍量（w/v）的0.05mol/l，tris—hc1緩沖液，該緩沖液ph7.5，含0.01mol/l氯化鎂，0.01mol/l氯化鈉，0.01mol/l氯化鋅；

b、充分混合攪拌，得堿性磷酸單酯酶粗液；

c、上deal-separ0se4b柱，此柱用ph7.5、0.05mol/l的tris-hc1緩沖液平衡過(guò)；

d、用含有氯化鈉的ph7.5的0.05mol/l，tris-hc1緩沖液線性梯度洗脫；

e、用280nm檢測(cè)洗脫峰，收集峰高洗脫液；

f、用磷苯二鈉為底物檢測(cè)收集洗脫液酶活性，合并活性酶洗脫液；

g、將上述活性酶用旋轉(zhuǎn)薄板蒸發(fā)器在35℃下真空干燥得粉劑，即堿性磷酸單酯酶。

h、堿性磷酸單酯酶可作為化妝品原料。

（9）將步驟（6）高速離心機(jī)收得的固態(tài)物用于生產(chǎn)肝素鈉。

a、將固態(tài)物用3倍量（w/v）的0.9%生理鹽水溶解；

b、用40%naoh溶液調(diào)ph至8.5，加熱攪拌到60℃保溫二小時(shí)；

c、按比例加入0.25%（w/v）的固態(tài)胰蛋白酶，酶解三小時(shí)，溫度保持在37℃，ph在8.0-9.0之間；

d、趁熱過(guò)濾，收集過(guò)濾液，用10%hc1調(diào)節(jié)ph6.0，立即升溫至95℃，在攪拌下按比例5%（w/v）加入氯化鈉；

e、使蛋白質(zhì)與肝素鈉分離；

f、保溫，當(dāng)出現(xiàn)有沉淀物下降，立即過(guò)濾收濾渣，處理后作動(dòng)物蛋白飼料；濾液在用6000r/min離心，收集離心液，將離心液冷卻到5-8℃；

g、緩慢過(guò)d-254樹(shù)脂柱，控制流速，使肝素鈉充分被樹(shù)脂吸附；該d-254樹(shù)脂裝柱事先要用酸、堿平衡好；

h、吸附罷的柱子，用3%的氯化鈉液洗滌，除去非肝素鈉物質(zhì)；

i、再用5%的氯化鈉液洗脫柱子，收集洗脫液；將收集的洗脫液加入乙醇，使溶液酒精終濃度達(dá)到45%，靜置6小時(shí)，收集沉淀物；

j、沉淀物用無(wú)水乙醇脫水，再用丙酮脫水,脫水的肝素鈉在50℃真空干燥即得粗品肝素鈉。