本發(fā)明涉及一種槐胺總堿的提純方法，屬于化工提純技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

槐胺堿是從豆科槐屬植物苦豆子中提取的單體生物堿，槐胺堿的研究早在上個(gè)世紀(jì)30年代，即開(kāi)始采用丙酮等溶劑萃取，離子交換樹(shù)脂等提取方法，提取收率僅為25%，后出現(xiàn)超濾法，以大孔樹(shù)脂提取，收率雖達(dá)到60%，但增加膠質(zhì)和色素的浸出量，后處理困難，從而影響收率的產(chǎn)品質(zhì)量，而且提取分離工藝復(fù)雜，分離過(guò)程中槐胺堿損失較大，很難形成工業(yè)化生產(chǎn)。因此，目前國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有專門(mén)的槐胺堿提取生產(chǎn)線。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種方法簡(jiǎn)單、易于操作、適合工業(yè)化生產(chǎn)，且提純精度高的槐胺總堿的提純方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：

一種槐胺總堿的提純方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）提取槐胺總堿：首先以料液比為1g：4ml的乙醇溶劑對(duì)苦參粉末進(jìn)行第一次萃取，萃取時(shí)間為2h，過(guò)濾后得到萃取液和一次料渣，然后以料液比為1g：2ml的乙醇溶劑對(duì)一次料渣進(jìn)行第二次萃取，萃取時(shí)間為1.5h，過(guò)濾后得到萃取液和二次料渣，再次以料液比為1g：2ml的乙醇溶劑對(duì)二次料渣進(jìn)行第三次萃取，萃取時(shí)間為1h，過(guò)濾后得到萃取液和三次料渣，合并三次萃取液，減壓蒸餾回收乙醇溶劑，得到提取物槐胺總堿粗品；

（2）純化槐胺總堿粗品：向步驟（1）制備得到的槐胺總堿粗品中加入HCl溶解，HCl的加入體積與原料苦參粉末的質(zhì)量比為（24-32）ml: 1g，然后向溶液中加入氨水，調(diào)節(jié)溶液的pH值為9～10，再向溶液中加入二氯甲烷萃取5次，每次加入溶液體積1倍體積量的二氯甲烷，得萃取液，蒸發(fā)回收萃取劑，得到槐胺總堿純品。

進(jìn)一步，上述的原料苦參粉末為16-20目粗粉。

且步驟（1）中所述的乙醇溶劑的濃度為70-90%。優(yōu)選濃度為70%。

而步驟（2）中所述的HCl的濃度為1-2%。優(yōu)選濃度為2%。

此外，步驟（2）中所述的氨水的濃度為25%。

本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明所述提純方法步驟簡(jiǎn)單、易于操作、工藝穩(wěn)定，且提純精度高，提取率可達(dá)85%以上，非常適宜工業(yè)應(yīng)用。

附圖說(shuō)明

圖1為效應(yīng)曲線圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明。

、提取步驟中單因素考察：

1.1提取溶劑（乙醇溶劑）濃度的確定：

精密稱取苦參粉末25.00g，分別選擇濃度為50%、60%、70%（此處濃度為質(zhì)量百分含量，以下涉及到濃度的均至質(zhì)量百分含量）的乙醇溶劑，控制提取時(shí)間3h，料液比為1g:8ml，提取3次，將提取液定容至100ml。分別精密量取5ml，經(jīng)萃取純化處理，得萃取物，分別用0.01mol/LHCl溶解，定容至25ml，精密量取1ml定容至10ml，作為供試液，測(cè)A, 所得結(jié)果如表1所示。

表1 乙醇溶劑濃度的影響

由表1實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，隨著乙醇溶劑濃度的增加，槐胺總堿得提取量逐漸增加，濃度為70%乙醇溶劑提取的槐胺總堿含量最高，但乙醇溶劑濃度越高，提取量增加得越慢，逐漸趨緩，繼續(xù)考察70%以上的濃度對(duì)提取量的影響。

提取時(shí)間的確定：

精密稱取苦參粉末25.00g，分別用同一濃度的乙醇溶劑提取2h、3h、4h，料液比為1g:8ml，提取次數(shù)為3次，將提取液定容至100ml。分別取出5ml，經(jīng)萃取純化處理，得萃取物，分別用0.01mol/LHCl溶解，定容至25ml，精密量取1ml定容至10ml，作為供試液，測(cè)A, 所得結(jié)果如表2所示。

表2 提取時(shí)間的影響

由表2的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，隨著提取時(shí)間越長(zhǎng)，提取量逐漸增加，提取時(shí)間宜控制在4h以上，繼續(xù)考察提取時(shí)間3h、4h、5h對(duì)提取率的影響。

提取次數(shù)的確定：

精密稱取苦參粉末25.00g，分別用同一濃度的乙醇溶劑提取1、2、3次，控制提取時(shí)間為3小時(shí)，料液比為1g:8ml，將提取液定容至100ml。分別精密量取5ml，經(jīng)萃取純化處理，得萃取物，分別用0.01mol/LHCl溶解，定容至25ml，精密量取1ml定容至10ml，作為供試液，測(cè)A, 所得結(jié)果如表3所示。

表3 提取次數(shù)的影響

由表3實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，隨著苦參提取次數(shù)的增加，槐胺總堿的提取量逐漸增加，繼續(xù)考察提取次數(shù)3次以上。

1.4料液比的確定：

精密稱取苦參粉末25.00g，分別按照料液比為1g:4ml、1g:6ml、1g:8ml，加入適量的乙醇溶劑，控制提取時(shí)間為3h，提取次數(shù)為3次，將提取液定容至100ml。分別精密量取5ml，經(jīng)萃取純化處理，得萃取物，分別用0.01mol/LHCl溶解，定容至25ml，精密量取1ml定容至10ml，作為供試液，測(cè)A, 所得結(jié)果如表4所示。

表4 固-液率的影響

由表4實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，提取溶劑量越大，槐胺總堿的提取效果越好，提取量顯著增加。因此在實(shí)驗(yàn)中，繼續(xù)考察8倍以上的溶劑量。

2、正交設(shè)計(jì)優(yōu)化槐胺總堿提取步驟：

2.1 因素水平：

結(jié)合實(shí)際情況，考慮提取溶劑濃度、提取溶劑倍量、提取時(shí)間、提取次數(shù)四個(gè)因子，每個(gè)因子取三個(gè)水平，設(shè)計(jì)正交表如表5所示：

表5 因素與水平表

2.2 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果分析表

按L9（3⁴）正交表胺排實(shí)驗(yàn)：精密稱取苦參粉末（16目粗粉）25.00g，按如下表6分別進(jìn)行提取，將提取液定容至500ml。分別精密量取25ml，回收乙醇溶劑，用25ml濃度為2%HCl溶解，過(guò)濾，得濾液，再用20ml濃度為2%的HCl洗滌濾器三次，合并濾液，分別置分液漏斗中，用濃度為25%的氨水調(diào)pH為9-10，然后用氯仿萃取5次，合并氯仿萃取液，回收氯仿，得萃取物，分別用0.01mol/LHCl溶解，過(guò)濾，定容至25ml，精密量取1ml 定容至10ml，作為供試液，在246nm處測(cè)A。

根據(jù)外標(biāo)法，計(jì)算出總堿的量及在藥材中的含量，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見(jiàn)表6，表7

表6 直接分析表

表7 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的方差分析

如表7的方差分析表明，無(wú)顯著性差異，圖1為效應(yīng)曲線圖，根據(jù)圖1分析，乙醇濃度在70%-90%之間沒(méi)有顯著性差異，溶劑量、提取時(shí)間和提取次數(shù)均有峰值。由表6的直觀分析可知，影響因素的大小順序?yàn)锽>D>C>A，即乙醇溶劑的用量為最重要的因素，提取次數(shù)為次要因素，乙醇濃度在70%-90%之間沒(méi)有顯著性差異，從成本考慮，應(yīng)選用低濃度醇，此外，根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)中濃度為50%、60%、70%乙醇提取量可得出隨著濃度的增加，得率越高，所以選擇70%的乙醇為最優(yōu)，因此最佳水平為A1B2C2D2，即8倍量70%的乙醇分三次提取四小時(shí)，第一次用4倍量提取2h，第二次用2倍量提取1.5h，第三次用2倍量提取0.5h。

、槐胺總堿粗品的純化

3.1 溶解用酸濃度的選擇

精密稱取 25.00g 苦參藥材粉末，按最佳工藝提取，提取液定容至500ml。分別量取25ml，蒸干，用濃度分別為0.75%、1%、1.5%、2%的HCl溶液溶解，加氨水調(diào)pH值至pH=9~10，氯仿萃取，得槐胺總堿，用0.01mol/LHCl 溶解定容至25ml，精密量取1ml定容至10ml，分別測(cè)A246nm，用外標(biāo)法測(cè)定總堿含量，如表8。

表8 酸濃度的影響

由表8的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，HCl濃度為2%時(shí)純化得率最高，而一般生物堿用1~2%的酸溶解，大生產(chǎn)設(shè)備不能用濃度大的酸，對(duì)設(shè)備有較強(qiáng)的腐蝕性，所以最佳HCl濃度為2%。

3.2 酸用量的選擇

精密稱取 25.00g 苦參藥材粉末，按最佳工藝提取，提取液定容至500ml。分別量取25ml，蒸干，用濃度為2%的HCl 溶液10ml、20ml、30ml、40ml 溶解，加氨水調(diào)pH值至pH=9~10，用氯仿萃取，揮干，得槐胺總堿，用0.01mol/L的HCl 溶解定容至25ml，精密量取1ml定容至10ml，分別測(cè)A246nm ，用外標(biāo)法測(cè)定總堿含量，如表9。

表9 酸量的影響

由表9的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，用30ml和40ml濃度為2%的HCl溶解純化所得的槐胺總堿得含量較高，無(wú)顯著差異，節(jié)約原料所以選擇30ml。因此1g 藥材的提取液需要24 ml 濃度為2%的HCl溶解。

3.3萃取溶劑的選擇

3.3.1 實(shí)驗(yàn)方法

精密稱取50.00g苦參粉末，按最佳工藝提取，定容至500mL。精密量取2份提取液各25mL，分別蒸干，用濃度為2%的鹽酸30mL溶解，過(guò)濾，濾液分別置于分液漏斗，氨水堿化至pH=9～10，一份用氯仿萃取5次，蒸干，加入0.01mol/L鹽酸定容至25mL，精密量取1mL用0.01mol/L鹽酸稀釋至10mL，作為供試液。另一份用二氯甲烷萃取5次，蒸干，加入0.01mol/L鹽酸定容至25mL，精密量取1mL用0.01mol/L鹽酸稀釋至10mL，作為供試液。以0.01mol/L鹽酸為空白分別在246nm處測(cè)A。

3.3.2 結(jié)果處理

表10 萃取溶劑種類的影響

由表10的實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出，用二氯甲烷萃取效果優(yōu)于氯仿，且毒性較低，因此確定用二氯甲烷作為萃取溶劑。

具體實(shí)施例為：

（1）樣品溶液的制備：

精密稱取苦參粗粉500.00g各3份，首先以料液比為1g：4ml的乙醇溶劑對(duì)苦參粉末進(jìn)行第一次萃取，萃取時(shí)間為2h，過(guò)濾后得到萃取液和一次料渣，然后以料液比為1g：2ml的乙醇溶劑對(duì)一次料渣進(jìn)行第二次萃取，萃取時(shí)間為1.5h，過(guò)濾后得到萃取液和二次料渣，再次以料液比為1g：2ml的乙醇溶劑對(duì)二次料渣進(jìn)行第三次萃取，萃取時(shí)間為1h，過(guò)濾后得到萃取液和三次料渣，合并三次萃取液，減壓蒸餾回收乙醇溶劑，然后定容至1000ml。分別精密量取5ml，蒸干，用濃度為2%的HCl溶解，用25%氨水調(diào)pH至9～10，然后用二氯甲烷萃取，得萃取物，分別用0.01mol/LHCl溶解，過(guò)濾，定容至25ml，精密量取1ml定容至10ml，作為供試液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，測(cè)A。

（2）對(duì)照品制備：精密稱取2.00g苦參粉末，用25ml乙醇浸泡1h，回流提取5小時(shí)，取出，過(guò)濾，加25ml 回流4h，取出過(guò)濾，繼續(xù)加乙醇20ml，回流2h，合并濾液，濃縮經(jīng)酸溶堿沉氯仿萃取處理，用0.01mol/LHCl溶解，過(guò)濾，定容至25ml，取出1ml 定容至10ml，作為藥材總量樣品Ⅳ。以外標(biāo)法計(jì)算得總堿的含量及總堿轉(zhuǎn)移率，如表11所示。

結(jié)果分析

表11 總生物堿的含量和轉(zhuǎn)化率

由表11的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明所述的槐胺總堿的提純方法基本穩(wěn)定，提取率達(dá)到85%以上。

以上具體實(shí)施方式不以任何形式限制本發(fā)明，凡是以等同替換或等效變換的方式所獲得的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。