背景技術(shù)：

類視黃醇相關(guān)孤兒受體(Retinoid-related orphan receptors，ROR)是轉(zhuǎn)錄因子，其屬于類固醇激素核受體超家族(Jetten&Joo(2006)Adv.Dev.Biol.16:313-355)。所述ROR家族由三個成員組成，ROR alpha(RORα)、ROR beta(RORβ)和ROR gamma(RORγ)，其各自由單獨的基因(分別是RORA、RORB和RORC)編碼。ROR包含由大多數(shù)核受體所共享的四個主要結(jié)構(gòu)域：N-末端A/B結(jié)構(gòu)域、DNA-結(jié)合結(jié)構(gòu)域、鉸鏈結(jié)構(gòu)域和配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域。各ROR基因產(chǎn)生數(shù)種亞型，它們的區(qū)別僅在于其N-末端A/B結(jié)構(gòu)域。RORγ的兩種亞型已被鑒定：RORγ1和RORγt(也稱為RORγ2)。RORγ是用于描述RORγ1和/或RORγt的術(shù)語。

雖然RORγ1表達于多種組織中，包括胸腺、肌肉、腎和肝，但RORγt僅唯一地表達于免疫系統(tǒng)的細胞中。RORγt已經(jīng)被確定為Th17細胞分化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。Th17細胞是產(chǎn)生IL-17和其他促炎細胞因子的T輔助細胞的亞類。已經(jīng)顯示，Th17細胞在多種小鼠自身免疫疾病模型中(包括實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)和膠原誘發(fā)性關(guān)節(jié)炎(CIA))具有關(guān)鍵作用。此外，已經(jīng)顯示，Th17細胞或其產(chǎn)物與多種人類炎癥和自身免疫疾病(包括多發(fā)性硬化、類風濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、強直性脊柱炎、克羅恩病和哮喘)的病理學有關(guān)(Jetten(2009)Nucl.Recept.Signal.7:e003；Manel等人(2008)Nat.Immunol.9:641-649；Miossec&Kolls(2012)Nat.Rev.Drug.Discov.10:763-776)。慢性自身免疫疾病(包括多發(fā)性硬化和類風濕性關(guān)節(jié)炎)的發(fā)病機制起因于對自身抗原耐受性的破壞和自體侵襲性效應T細胞浸潤靶組織的發(fā)展。研究已顯示，Th17細胞是組織特異性自身免疫中炎癥過程的重要驅(qū)動因子之一(Steinman(2008)J.Exp.Med.205:1517-1522；Leung等人(2010)Cell.Mol.Immunol.7:182-189)。有證據(jù)表明，Th17細胞在疾病過程中被激活并負責募集其他炎癥細胞類型，特別是嗜中性粒細胞，以介導靶組織中的病理(Korn等人(2009)Annu.Rev.Immunol.27:485-517)。

RORγt在Th17細胞的致病響應中起著決定性作用(Ivanov等人(2006)Cell 126:1121-1133)。RORγt缺陷的小鼠顯示了非常少的Th17細胞。此外，RORγt缺陷導致EAE的改善。RORγt在自身免疫性或炎性疾病的發(fā)病中的作用的進一步證據(jù)可見于以下參考文獻：Jetten&Joo(2006)Adv.Dev.Biol.16:313-355；Meier等人(2007)Immunity 26:643-654；Aloisi&Pujol-Borrell(2006)Nat.Rev.Immunol.6:205-217；Jager等人(2009)J.Immunol.183:7169-7177；Serafini等人(2004)Brain Pathol.14:164-174；Magliozzi等人(2007)Brain 130:1089-1104；Barnes(2008)Nat.Rev.Immunol.8:183-192；Miossec&Kolls(2012)Nat.Rev.Drug.Discov.10:763-776。

考慮到RORγ在疾病的發(fā)病學中所起的作用，期望的是制備能夠調(diào)節(jié)RORγ活性的化合物，所述化合物可用于治療RORγ介導的疾病。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明涉及新的RORγ調(diào)節(jié)劑和它們在治療由RORγ介導的疾病中的用途。特別地，本發(fā)明涉及式I化合物及其藥學上可接受的鹽

其中R₁-R₇如下文所定義。

在另一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物在治療由RORγ介導的疾病中的用途。所述疾病的實例包括自身免疫性或炎性疾病，例如多發(fā)性硬化、類風濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病和強直性脊柱炎。還在另一方面，本發(fā)明涉及治療所述疾病的方法。

發(fā)明詳述

術(shù)語和定義

“烷基”是指具有特定成員原子數(shù)的一價飽和烴鏈。例如，C1-C6烷基是指具有1-6個成員原子的烷基。烷基可任選被一個或多個本申請所定義的取代基取代。烷基可為直鏈或支鏈的。代表性的支鏈烷基具有一個、兩個或三個支鏈。烷基的實例包括甲基、乙基、丙基(正丙基和異丙基)、丁基(正丁基、異丁基和叔丁基)、戊基(正戊基、異戊基和新戊基)和己基。

“環(huán)烷基”是指具有特定成員原子數(shù)的飽和烴環(huán)。環(huán)烷基是單環(huán)系統(tǒng)或是稠合或橋連的雙環(huán)系統(tǒng)。例如，C3-C7環(huán)烷基是指具有3-7個成員原子的環(huán)烷基。環(huán)烷基可任選被一個或多個本申請所定義的取代基取代。環(huán)烷基的實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。

“對映體過量”或“ee”是一種對映體相對于另一種過量，以百分比表示。因此，當兩種對映體以相等的量存在于外消旋混合物中時，所述對映體過量為零(0％ee)。但是，如果一種對映體富集使得其構(gòu)成該產(chǎn)物的95％，那么該對映體過量將為90％ee(富集的對映體的量，95％，減去另一對映體的量，5％)。

“對映體純”是指其對映體過量為99％ee或更大的產(chǎn)物。

“半衰期”是指一半量的物質(zhì)在體外或體內(nèi)轉(zhuǎn)化成另一化學上不同的種類所需要的時間。

“鹵代”是指鹵素基團氟、氯、溴和碘。

“雜芳基”是指在環(huán)中含有1-4個作為成員原子的雜原子的芳香環(huán)。含有一個以上雜原子的雜芳基可含有不同的雜原子。雜芳基可任選被一個或多個本申請所定義的取代基取代。雜芳基是單環(huán)系統(tǒng)，或是稠合或橋連的雙環(huán)系統(tǒng)。單環(huán)雜芳基環(huán)具有5-7個成員原子。雙環(huán)雜芳基環(huán)具有7-11個成員原子。雙環(huán)雜芳基環(huán)包括其中苯基與單環(huán)雜環(huán)烷基環(huán)連接形成稠合、螺環(huán)或橋連的雙環(huán)系統(tǒng)的那些環(huán)以及其中單環(huán)雜芳基環(huán)與單環(huán)環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烷基或雜芳基環(huán)連接形成稠合、螺環(huán)或橋連的雙環(huán)系統(tǒng)的那些環(huán)。雜芳基的實例包括吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、呋喃基、呋咱基、噻吩基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑基、吲哚基、異吲哚基、吲嗪基、吲唑基、嘌呤基、喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、蝶啶基、噌啉基、苯并咪唑基、呋喃并吡啶基和二氮雜萘基。

“雜原子”是指氮、硫或氧原子。

“雜環(huán)烷基”是指在環(huán)中含有1-4個作為成員原子的雜原子的飽和環(huán)。但是，雜環(huán)烷基環(huán)不是芳香性的。含有一個以上雜原子的雜環(huán)烷基可含有不同的雜原子。雜環(huán)烷基可任選被本申請所定義的一個或多個取代基取代。雜環(huán)烷基是單環(huán)系統(tǒng)或是稠合、螺環(huán)或橋連的雙環(huán)系統(tǒng)。單環(huán)雜環(huán)烷基環(huán)具有4-7個成員原子。雙環(huán)雜環(huán)烷基環(huán)具有7-11個成員原子。雜環(huán)烷基的實例包括吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、吡喃基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻吩基、吡唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、氮雜環(huán)庚烯基、1,3-二氧雜環(huán)戊烷基、1,3-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-氧硫雜環(huán)戊烷基、1,3-二噻烷基、氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛基和氧雜雙環(huán)[2.2.1]庚基。

“成員原子”是指形成鏈或環(huán)的一個或多個原子。當在鏈中或在環(huán)內(nèi)存在一個以上的成員原子時，各成員原子與該鏈或環(huán)中的相鄰成員原子共價結(jié)合。構(gòu)成鏈或環(huán)上取代基的原子不是該鏈或環(huán)的成員原子。

“任選取代的”是指基團，例如烷基、烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)烷基或雜芳基，可為未取代的，或所述基團可被一個或多個所定義的取代基取代。

“RORγ”是指由RORC基因編碼的所有亞型，其包括RORγ1和RORγt。

“RORγ調(diào)節(jié)劑”是指直接或間接抑制RORγ的活性的化合物。RORγ調(diào)節(jié)劑包括RORγ的拮抗劑和反激動劑。

“藥學上可接受的”是指在合理的醫(yī)學判斷范圍內(nèi)，適用于與人和動物的組織接觸而沒有過度的毒性、刺激性或其他問題或并發(fā)癥，且具有合理的利益/風險比的那些化合物、材料、組合物和劑型。

提及基團“取代的”時，表示與在基團中的成員原子相連的一個或多個氫原子被選自所定義的取代基的取代基替換。應當理解的是術(shù)語“取代的”包括隱含規(guī)定，即所述取代符合所取代的原子和取代基的允許的化合價，以及所述取代產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物(即，不會自發(fā)地通過諸如重排、環(huán)化或消除進行轉(zhuǎn)化，且足以穩(wěn)固以便經(jīng)得起從反應混合物中分離的化合物)。當陳述一個基團可含有一個或多個取代基時，所述基團中的一個或多個(適當時)成員原子可被取代。此外，基團中的單個的成員原子可取代有超過一個取代基，只要這樣的取代符合所述原子的允許的化合價。

化合物

本發(fā)明提供了式I化合物或其藥學上可接受的鹽.

其中：

R₁為：

-甲基，其被以下取代：i)C₄-C₆環(huán)烷基，其任選被a)1或2個F或b)OH取代；或ii)被C(O)CH₃取代的5或6元雜環(huán)烷基；

-被CF₃或-SO₂CH₃取代的C₂-C₃烷基；

-含有1或2個N原子的6元雜芳基，所述雜芳基任選被選自以下的1或2個取代基取代：C₁-C₃烷基、鹵素、CN和甲氧基；或

-被CN取代的苯基；

R₂為C₁-C₃烷基；

R₃為鹵素或CN；

R₄為H；

R₅為C₁-C₃烷基；

R₆為H或甲基；和

R₇選自：

-含有1個N原子的4-6元雜環(huán)烷基，其中所述雜環(huán)烷基任選被甲基取代；

-NRaRb，其中所述Ra為H或甲基，和所述Rb選自i)被C₃-C₄環(huán)烷基取代的甲基；ii)任選被甲基取代的C₄-C₅環(huán)烷基；和iii)C₃-C₄烷基；和

-ORc，其中所述Rc為i)C₄-C₅環(huán)烷基或ii)被C₃-C₄環(huán)烷基取代的甲基。

在一個實施方案中，本發(fā)明涉及式I化合物，其中R₁為含有1或2個N原子的6元雜芳基，其中所述雜芳基被1或2個C₁-C₃烷基取代。在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₁為被甲基取代的吡啶基。在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₁為被二甲基取代的吡啶基。

在一個實施方案中，本發(fā)明涉及式I化合物，其中R₁為被CN取代的苯基。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₂為C₁-C₃烷基。在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₂為甲基。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₃為鹵素。在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₃為Cl。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₃為CN。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₄為H。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₅為甲基。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₆為H。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₇為含有1個N原子的4-6元雜環(huán)烷基。在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₇為吡咯烷基。在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₇為哌啶基。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₇為ORc，其中Rc為環(huán)戊基。

在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₇為NHRb，和Rb為被環(huán)丙基取代的甲基。在一個實施方案中，本發(fā)明還涉及任意上述實施方案的化合物，其中R₇為NHRb，和Rb為環(huán)戊基。

在一個實施方案中，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R₁為被1或2個甲基取代的吡啶基，R₂為甲基，R₃為Cl，R₄為H，R₅為甲基，R₆為H，和R₇為NHRb，其中Rb為i)環(huán)戊基或ii)被環(huán)丙基取代的甲基。

在一個實施方案中，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R₁為被甲基取代的吡啶基，R₂為甲基，R₃為Cl，R₄為H，R₅為甲基，R₆為H，和R₇為哌啶基；

在另一實施方案中，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R₁為被CN取代的苯基，R₂為甲基，R₃為Cl，R₄為H，R₅為甲基，R₆為H，和R₇為i)吡咯烷基或ii)NHRb，其中Rb為被環(huán)丙基取代的甲基。

還在另一實施方案中，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R₁為被甲基取代的吡啶基，R₂為甲基，R₃為Cl，R₄為H，R₅為甲基，R₆為H，和R₇為ORc，其中Rc為環(huán)戊基。

在一個實施方案中，所述式I化合物選自：

(S)-4-(5-氯-3-(5,6-二甲基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(E1)；

(S)-4-(5-氯-3-(3-氰基苯甲酰氨基)-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺，三氟乙酸鹽(E24)；

(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-3-氰基苯甲酰胺(E25)；

(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-環(huán)戊基-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(E29)；

(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺(E30)；

(S)-4-(5-氰基-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)戊酯(E44)。

式I化合物可含有一個或多個不對稱中心(也稱為手性中心)，因此可以單獨的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或其它立體異構(gòu)體的形式或以其混合物的形式存在。手性中心諸如手性碳原子也可存在于取代基諸如烷基中。當存在于式I或本申請所說明的任何化學結(jié)構(gòu)中的手性中心的立體化學未指明時，該結(jié)構(gòu)意在包含所有單獨的立體異構(gòu)體及其所有的混合物。因此，含有一個或多個手性中心的式I化合物可以以外消旋混合物、對映異構(gòu)體富集混合物或?qū)τ钞悩?gòu)體純的單獨立體異構(gòu)體存在。

含有一個或多個不對稱中心的根據(jù)式I的化合物的單獨立體異構(gòu)體可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法拆分。例如，可如下進行所述拆分：(1)通過形成非對映異構(gòu)體鹽、復合物或其它衍生物；(2)通過與立體異構(gòu)體特異性試劑的選擇性反應，例如通過酶促氧化或還原；或(3)通過在手性環(huán)境中的氣-液色譜或液相色譜，所述手性環(huán)境例如在手性載體(例如連接有手性配體的硅膠)或在手性溶劑存在下。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，當將所需立體異構(gòu)體通過上述分離方法之一轉(zhuǎn)化成另一化學實體時，需要其它步驟來釋放所需形式?；蛘?，特異性立體異構(gòu)體可通過使用光學活性試劑、基質(zhì)、催化劑或溶劑的不對稱合成法來合成，或通過不對稱轉(zhuǎn)化將一種對映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成另一種異構(gòu)體。

式I的化合物也可含有雙鍵或其它幾何不對稱中心。當存在于式I或本申請所說明的任何化學結(jié)構(gòu)中的幾何不對稱中心的立體化學未指明時，所述結(jié)構(gòu)旨在涵蓋反式(E)幾何異構(gòu)體、順式(Z)幾何異構(gòu)體，以及其所有的混合物。同樣，所有互變異構(gòu)形式也包括在式I中，不論這樣的互變異構(gòu)體以平衡形式還是主要以一種形式存在。

在某些實施方案中，式I的化合物可含有酸性官能團。在某些其他實施方案中，式I的化合物可含有堿性官能團。由此，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，可制備式I化合物的藥學上可接受的鹽。實際上，在本發(fā)明的某些實施方案中，式I化合物的藥學上可接受的鹽相對于各自的游離堿或游離酸可能是優(yōu)選的，因為這樣的鹽可賦予所述分子更大的穩(wěn)定性或溶解性，由此促進配制為劑型。因此，本發(fā)明還涉及式I的化合物的藥學上可接受的鹽的用途。

本申請使用的術(shù)語"藥學上可接受的鹽"是指這樣的鹽，其保留主題化合物所需的生物活性并表現(xiàn)出最小的非期望的毒理學效應。這些藥學上可接受的鹽可以在化合物的最終分離和純化過程中原位制備，或通過分別使呈其游離酸或游離堿形式的純化的化合物分別與合適的堿或酸反應來制備。合適的藥學上可接受的鹽包括Berge、Bighley和Monkhouse，J.Pharm.Sci.(1977)66，第1-19頁中描述的那些。

含有堿性胺或其他堿性官能團的所公開化合物的鹽可通過本領(lǐng)域已知的任意合適方法進行制備，包括將該游離堿用無機酸或有機酸進行處理，所述無機酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，所述有機酸例如乙酸、三氟乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁桃酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羥乙酸、水楊酸、吡喃糖苷酸(例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α-羥基酸(例如檸檬酸或酒石酸)、氨基酸(例如天冬氨酸或谷氨酸)、芳香酸(例如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(例如對甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸等)。藥學上可接受的鹽的實例包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽，丁炔-1,4-二酸鹽、己炔-1,6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、酞酸鹽、苯基乙酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、扁桃酸鹽和磺酸鹽，例如二甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽和萘-2-磺酸鹽。

含有酸性官能團的所公開化合物的鹽可通過與合適的堿反應進行制備。這種藥學上可接受的鹽可用提供藥學上可接受的陽離子的堿制備，其包括堿金屬鹽(特別是鈉鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(特別是鈣鹽和鎂鹽)、鋁鹽和銨鹽，以及由生理學可接受的有機堿制成的鹽，所述有機堿例如三甲胺、三乙胺、嗎啉、吡啶、哌啶、甲基吡啶、二環(huán)己胺、N,N’-二芐基乙二胺、2-羥基乙胺、雙-(2-羥基乙基)胺、三-(2-羥基乙基)胺、普魯卡因、二芐基哌啶、去氫樅胺、N,N’-雙去氫樅胺、葡萄糖胺、N-甲基葡萄糖胺、可力丁、膽堿、奎寧、喹啉和堿性氨基酸(例如賴氨酸和精氨酸)。

不是藥學上可接受的其他鹽可用于制備本發(fā)明化合物并且這些應被認為形成本發(fā)明的其他方面。這些鹽，例如三氟乙酸鹽，盡管其本身不是藥學上可接受的，但可用于制備在獲得本發(fā)明化合物和它們的藥學上可接受的鹽中用作中間體的鹽。

如果將含有堿性胺或其他堿性官能團的本發(fā)明化合物作為鹽分離，則該化合物相應的游離堿形式可通過本領(lǐng)域已知的任意合適的方法進行制備，包括用無機或有機堿處理該鹽，適當?shù)臒o機或有機堿具有比該化合物游離堿形式更高的pK_a。同樣地，如果含有酸性官能團的本發(fā)明化合物作為鹽分離，那么該化合物的相應的游離酸形式可通過本領(lǐng)域已知的任意合適的方法進行制備，包括將該鹽用無機或有機酸處理，適當?shù)臒o機或有機酸具有比該化合物游離酸形式更低的pK_a。

本申請所用術(shù)語“本發(fā)明化合物”是指式I化合物及其藥學上可接受的鹽。術(shù)語“本發(fā)明化合物”也出現(xiàn)在本申請中并且是指式I化合物和它的藥學上可接受的鹽。

本發(fā)明還包括各種氘化形式的式(I)化合物。與碳原子連接的各個可用的氫原子可獨立地被氘原子替換。本領(lǐng)域技術(shù)人員將知曉如何合成氘化形式的式(I)化合物。在制備氘代形式的式(I)化合物時可使用市售的氘代起始物質(zhì)，或它們可使用常規(guī)技術(shù)采用氘代試劑(例如氘代氫化鋰鋁)合成。

本發(fā)明化合物可以固體或液體形式存在。在固態(tài)時，本發(fā)明化合物可以晶體或非晶體形式或它們的混合物存在。對于呈晶體形式的本發(fā)明化合物，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，可形成藥學上可接受的溶劑合物，其中在結(jié)晶時溶劑分子被摻入晶格中。溶劑合物可包含非水溶劑例如乙醇、異丙醇、DMSO、乙酸、乙醇胺和乙酸乙酯，或者它們可包含水作為溶劑(該溶劑被摻入到晶格中)。其中水為溶劑(該溶劑被并入晶格中)的溶劑合物通常稱為“水合物”。水合物包括化學計量的水合物以及含有可變量水的組合物(compositions)。本發(fā)明包括所有該類溶劑合物。

本領(lǐng)域技術(shù)人員還將理解，可以晶體形式(包括其各種溶劑合物)存在的本發(fā)明的某些化合物也可顯示多晶型(即出現(xiàn)不同晶體結(jié)構(gòu)的能力)。這些不同晶型，通常稱為“多晶型物”。本發(fā)明包括所有這樣的多晶型物。多晶型物有相同的化學組成，但是不同的堆積(packing)、幾何排列和其它可描述的晶體固態(tài)的性質(zhì)。因此，多晶型物可具有不同的物理性質(zhì)，例如形狀、密度、硬度、可變形性、穩(wěn)定性和溶解性質(zhì)。多晶型物通常具有不同的熔點、IR光譜和X-射線粉末衍射圖，其可用于鑒定。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，可制備不同多晶型物，例如，通過改變或調(diào)整在制備所述化合物中所用的條件或試劑。例如，溫度、壓力或溶劑的變化可產(chǎn)生多晶型物。此外，一種多晶型物在某些條件下可自發(fā)轉(zhuǎn)化成另一種多晶型物。

式I化合物及其藥學上可接受的鹽可單獨使用或與其他治療劑組合使用。因此本發(fā)明的組合療法包括給藥至少一種式I化合物或其藥學上可接受的鹽并使用至少一種其他治療活性劑。式I化合物或其藥學上可接受的鹽以及所述其他治療活性劑可在單一藥物組合物中一起給藥或分開給藥，并且當分開給藥時，可同時進行或以任意順序連續(xù)進行。

在另一方面，提供了組合產(chǎn)品，其包含式I化合物或其藥學上可接受的鹽，以及一種或多種其他治療活性劑和任選的藥學上可接受的載體或賦形劑。

合適的其他治療劑包括，但不限于，(1)TNF-α抑制劑；(2)非選擇性COX-1/COX-2抑制劑；(3)COX-2抑制劑；(4)用于治療炎性和自身免疫性疾病的其他藥劑，包括糖皮質(zhì)激素、甲氨蝶呤、來氟米特、柳氮磺胺吡啶、硫唑嘌呤、環(huán)孢菌素、他克莫司、青霉胺、布西拉明、阿克他利、咪唑立賓、氯苯扎利、環(huán)索奈德、羥氯喹、d-青霉胺、金硫代蘋果酸鹽、金諾芬或胃腸外或口服金、環(huán)磷酰胺、Lymphostat-B、BAFF/APRIL抑制劑，例如belimumab和CTLA-4-Ig或其模擬物；(5)白三烯生物合成抑制劑，5-脂氧合酶(5-LO)抑制劑或5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)拮抗劑；(6)LTD4受體拮抗劑；(7)PDE4抑制劑；(8)抗組胺H1受體拮抗劑；(9)a1-和a2-腎上腺素受體激動劑；(10)抗膽堿能藥物；(11)β-腎上腺素受體激動劑；(12)胰島素樣生長因子I型(IGF-1)模擬物；(13)糖皮質(zhì)激素；(14)激酶抑制劑，例如Janus激酶(JAK1和/或JAK2和/或JAK3和/或TYK2)、p38MAPK和IKK2的抑制劑；(15)B細胞靶生物劑(B-cell targeting biologies)，例如利妥昔單抗；(16)選擇性共刺激調(diào)節(jié)劑，例如阿巴他塞；(17)白介素抑制劑，例如IL-1抑制劑阿那白滯素、IL-6抑制劑托珠單抗(tocilizumab)或sirukumab、IL-12/IL-23抑制劑ustekinumab、IL-23抑制劑guselkumab和抗-IL17抗體；(18)抗-GM-CSF抗體；(19)檢查點阻斷(checkpoint blockade)和其他免疫療法，例如抗-PD-1/抗-PD-L1抗體，包括pembrolizumab和nivolumab和抗-CTLA4抗體，包括易普利姆瑪(ipilimumab)；(20)BET抑制劑，例如GSK525762；和(21)其他腫瘤藥物，例如氟尿嘧啶、貝伐單抗、鹽酸依立替康、卡培他濱、西妥昔單抗、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、奧沙利鉑、亞葉酸鈣、帕尼單抗(panitumumab)、瑞戈非尼(regorafenib)、阿柏西普(ziv-aflibercept)、曲妥珠單抗、甲磺酸伊馬替尼、蘋果酸舒尼替尼、甲苯磺酸索拉非尼、紫杉醇、依維莫司、鹽酸厄洛替尼、鹽酸吉西他濱、絲裂霉素C、達拉非尼(dabrafenib)、曲美替尼(trametinib)、拉帕替尼(lapatinib)、奧法木單抗(ofatumumab)、托泊替康(topotecan)、鹽酸多柔比星和依魯替尼(ibrutinib)。

化合物的制備

式I的化合物可使用常規(guī)有機合成制備。合適的合成途徑描述在下文的以下一般反應方案中。

本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，若本申請描述的取代基與本申請所述的合成方法不相容，則可用對反應條件穩(wěn)定的合適的保護基對所述取代基進行保護。可在反應順序中的合適點脫除保護基，從而提供期望的中間體或目標化合物。合適的保護基和使用所述合適的保護基對不同的取代基進行保護和脫保護的方法對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是熟知的；其實例可參見T.Greene and P.Wuts,Protecting Groups in Chemical Synthesis(第3版),John Wiley&Sons,NY(1999)。在一些情形中，可具體選擇在使用的反應條件下具有反應性的取代基。在這些情況中，所述反應條件將所選的取代基轉(zhuǎn)化為另一種取代基，所述另一種取代基要么是在中間體化合物中有用的，要么是靶標化合物中期望的取代基。

方案1

[示例性條件：a)BH₃·THF，THF，0℃-RT；b)PCC，CH₂Cl₂；c)NaBH(OAc)₃，HOAc，DCM，3；d)Pd，H₂，乙醇，RT；e)R₁CO₂H，DIPEA，HATU，DMF；f)TFA，DCM；g)胺，三光氣，DCM，DIPEA或醇，TEA，THF，氯甲酸酯]。

方案1代表制備式I化合物的一般反應方案，其中R₁-R₇如上文所定義。所述起始材料或試劑是市售可得的或是使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法由市售可得的起始材料制備的。

苯甲酸1可由BH₃·THF還原，以提供苯甲醇2。醇2可被PCC氧化成相應的醛然后用3還原胺化，以提供硝基化合物4。在H₂的存在下，用Pd還原硝基化合物4得到胺，將其與各種酸反應得到酰胺5。5的Boc保護通過用TFA處理脫除并將所得胺與各種胺或醇反應，以提供最終的式I化合物。

方案2

[示例性條件：a)TFA，DCM，RT；b)胺，三光氣，THF，0℃或醇，TEA，THF，氯甲酸酯，RT；c)SnCl₂·2H₂O，乙醇，RT；d)R₁CO₂H，HATU，DIPEA，DMF，50℃]。

方案2代表制備式I化合物的另一反應方案，其中R₁-R₇如上文所定義。所述起始材料或試劑是市售可得的或是使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法由市售可得的起始材料制備的。

通過TFA脫除硝基化合物1上的Boc保護，以提供硝基胺2，然后可將其與各種胺或醇反應，得到相應的脲或羧化物3。通過氯化錫(II)脫水合物將所述硝基還原成胺，得到關(guān)鍵中間體4，然后將其與各種酸濃縮，得到最終式I化合物。

實施例

縮寫

DCE 1,2-二氯乙烷

DCM 二氯甲烷

DIPEA N,N-二異丙基乙胺

DMAP N,N-二甲基吡啶-4-胺

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亞砜

EA 乙酸乙酯

EDC N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽

ESI 電噴霧離子化

HATU O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲六氟磷酸鹽

HOBt 羥基苯并三唑

HPLC 高效液相色譜

LCMS 液相色譜質(zhì)譜

MS 質(zhì)譜

NBS N-溴琥珀酰亞胺

NMP N-甲基-2-吡咯烷酮

PE 石油醚

PCC 氯鉻酸吡啶

PG 保護基

RT 室溫

sat. 飽和

TEA 三乙胺

TFA 三氟乙酸

THF 四氫呋喃

色譜

除非另外提及，所有色譜均使用硅膠柱進行。

LCMS條件：

1)酸性條件：

移動相：含0.05％TFA的水/乙腈

柱：Agilent SB-C18 4.6x 30mm 1.8m

檢測：MS和光電二極管陣列檢測器(PDA)

2)堿性條件：

移動相：10mM NH₄HCO₃水溶液/乙腈

柱：Waters XBridge C18 4.6x 50mm 3.5m

檢測：MS和光電二極管陣列檢測器(PDA)

HPLC條件：

1)儀器：

PHG016

Gilson 281

Waters

2)柱：

Xbridge Prep C18 10μm OBD，19×250mm

Boston，pHlex ODS，21.2×250mm，10μm，100A

Shimadzu Shim-Pack，PRC-ODS，20×250mm，15μm

3)移動相：

酸性條件:含0.05％TFA的水/乙腈

堿性條件：含0.01％NH₄HCO₃的水/乙腈

在以下步驟中，各起始材料后通常提及中間體。這僅是為了幫助本領(lǐng)域化學人員。所述起始材料可能不一定是從所提及的批次制備的。

描述1

5,6-二氯煙酸甲酯(D1)

將5,6-二氯煙酸(5g)和亞硫酰氯(3.10g)在甲醇(20mL)中的混合物在25℃攪拌過夜。加入冷水(100mL)并將所得混合物用飽和NaHCO₃溶液中和。將該水層用DCM(2×100mL)萃取并將合并的有機層用Na₂SO₄干燥。過濾后，將該濾液真空濃縮，得到標題化合物(5g)，其為白色固體。MS(ESI)：C₇H₅Cl₂NO₂理論值205；實測值206[M+H]⁺。

描述2

5,6-二甲基煙酸甲酯(D2)

將K₂CO₃(1.342g)、三環(huán)己基膦(0.272g)、Pd₂(dba)₃(0.444g)、甲基硼酸(0.291g)和5,6-二氯煙酸甲酯(D1，1g)在1,4-二噁烷(20mL)中的混合物加熱至110℃過夜。加入冷水(30mL)并將該水層用DCM(2×100mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將所得殘余物用柱色譜純化(用EA:PE＝0％-50％洗脫)，得到標題化合物(1g)，其為黃色油。MS(ESI)：C₉H₁₁NO₂理論值165；實測值166[M+H]⁺。

描述3

5,6-二甲基煙酸(D3)

將氫氧化鈉(121mg)和5,6-二甲基煙酸甲酯(D2，500mg)在甲醇(10mL)和水(10mL)中的混合物攪拌2小時。加入冷水(50mL)并將所得混合物的pH值用HCl溶液(7M)調(diào)節(jié)至5。將該水層用DCM(2×100mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(400mg)，其為白色固體。MS(ESI)：C₈H₉NO₂理論值151；實測值152[M+H]⁺。

描述4

5-氰基-2-羥基-6-甲基煙酸乙酯(D4)

將在圓底燒瓶中的2-(乙氧基亞甲基)丙二酸二乙酯(21.6g)和(E)-3-氨基丁-2-烯腈(8.20g)的混合物在150℃攪拌2小時，然后靜置過夜。將該混合物過濾并將沉淀物用冰冷甲醇洗滌，得到標題化合物(5g)，其為黃色固體。MS(ESI)：C₁₀H₁₀N₂O₃理論值206；實測值207[M+H]⁺。

描述5

2-氯-5-氰基-6-甲基煙酸乙酯(D5)

將在圓底燒瓶中的5-氰基-2-羥基-6-甲基煙酸乙酯(D4，3000mg)和三氯氧磷(22300mg)的混合物在90℃攪拌5小時，然后靜置過夜。將該溶液真空濃縮。將該殘余物倒至冰上。將所得混合物過濾，得到標題化合物(3g)，其為黃色固體。MS(ESI)：C₁₀H₉ClN₂O₂理論值224；實測值225[M+H]⁺。

描述6

5-氰基-6-甲基煙酸乙酯(D6)

向2-氯-5-氰基-6-甲基煙酸乙酯(D5，1.5g)、甲醇(50mL)和鈀(10％在炭上，0.071g)的混合物中加入甲酸銨(6.32g)。將該混合物在室溫攪拌3小時，然后過濾。將該溶液真空濃縮。將該殘余物用柱色譜純化(用EA:PE＝20％洗脫)，得到標題化合物(1g)，其為白色固體。MS(ESI)：C₁₀H₁₀N₂O₂理論值190；實測值191[M+H]⁺。

描述7

5-氰基-6-甲基煙酸(D7)

向5-氰基-6-甲基煙酸乙酯(D6，1g)、甲醇(15mL)和水(30mL)的混合物中加入氫氧化鈉(2.103g)。將該混合物在室溫攪拌30min。將該溶液的pH用鹽酸調(diào)節(jié)至4。將該混合物用EA(2×100mL)洗滌。將合并的有機層真空濃縮，得到標題化合物(800mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：9.20(d，J＝2.0Hz，1H)，8.62(d，J＝2.0Hz，1H)，2.83(s，3H)。MS(ESI)：C₈H₆N₂O₂理論值162；實測值163[M+H]⁺。

描述8

2-(4-羥基環(huán)己基)乙酸甲酯(D8)

將Rh/C(1g)和2-(4-羥基苯基)乙酸甲酯(2.2g)在甲醇(50mL)中的混合物在50℃氫氣氛下(5巴)攪拌6小時。將該反應混合物過濾并將該濾液真空濃縮，得到標題化合物(500mg)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：3.73(s，3H)，2.51(s，2H)，2.21-2.16(m，2H)，1.72-1.32(m，7H)，1.19-0.91(m，2H)。

描述9

2-(4-羥基環(huán)己基)乙酸(D9)

將氫氧化鉀(326mg)和2-(4-羥基環(huán)己基)乙酸甲酯(D8，500mg)在甲醇(20mL)和水(20mL)中的混合物在60℃攪拌6小時。冷卻至室溫后，將該反應混合物濃縮并用HCl溶液(2M)酸化以調(diào)節(jié)pH值至1，然后用EA(50mL)萃取。將該有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(150mg)，其為白色固體。MS(ESI)：C₈H₁₄O₃理論值158；實測值159[M+H]⁺。

描述10

(3,3-二氟環(huán)丁基)甲醇(D10)

在氮氣下，向在0℃冷卻的3,3-二氟環(huán)丁烷甲酸(970mg)在THF(25mL)中的混合物中滴加硼烷二甲基硫醚絡合物(1.354mL)。將該混合物在0℃攪拌4小時。將該混合物用濃HCl溶液淬滅。將該水層用DCM(2×30mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥并過濾。將該殘余物真空濃縮，得到標題化合物(650mg)，其為無色油。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：3.62(d，J＝5.2Hz，2H)，2.75(brs，1H)，2.62-2.54(m，2H)，2.35-2.25(m，3H)。

描述11

4-甲基苯磺酸(3,3-二氟環(huán)丁基)甲酯(D11)

向(3,3-二氟環(huán)丁基)甲醇(D10，650mg)和TEA(1077mg)在DCM(20mL)中的溶液中加入4-甲基苯-1-磺酰氯(1218mg)在DCM(5mL)中的溶液。將該混合物攪拌過夜，然后真空濃縮。將該殘余物用柱色譜純化(用EA:PE＝0％-30％洗脫)，得到標題化合物(760mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：7.80(d，J＝8.4Hz，2H)，7.37(d，J＝8.0Hz，2H)，4.06(d，J＝6.4Hz，2H)，2.67-2.61(m，2H)，2.49-2.47(m，4H)，2.32-2.27(m，2H)。MS(ESI)：C₁₂H₁₄F₂O₃S理論值276；實測值299[M+Na]⁺。

描述12

2-(3,3-二氟環(huán)丁基)乙腈(D12)

將4-甲基苯磺酸(3,3-二氟環(huán)丁基)甲酯(D11，720mg)和氰化鉀(170mg)在DMF(6mL)中的混合物在50℃攪拌16小時。冷卻至室溫后，加入冷水(30mL)并將該水層用DCM(2×30mL)萃取。將合并的有機層用鹽水洗滌并用Na₂SO₄干燥。過濾后，將該濾液真空濃縮，得到標題化合物(310mg)，其為無色油。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：2.89-2.78(m，2H)，2.60-2.52(m，3H)，2.46-2.34(m，2H)。

描述13

2-(3,3-二氟環(huán)丁基)乙酸(D13)

將2-(3,3-二氟環(huán)丁基)乙腈(D12，300mg)和NaOH(1830mg)在水(5mL)和甲醇(5mL)中的混合物在100℃攪拌36小時。冷卻至室溫后，加入HCl水溶液(1M)以調(diào)節(jié)pH至約2。將所得水層用DCM(2×30mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(120mg)，其為黃色油。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：12.21(brs，1H)，2.72-2.62(m，2H)，2.55-2.26(m，5H)。

描述14

6-乙基煙酸甲酯(D14)

在0℃，向6-氯煙酸甲酯(5.5g)和乙酰丙酮鐵(0.5g)在THF(100mL)和NMP(10mL)中的混合物中滴加乙基溴化鎂(1M的THF溶液，40mL)。加入后，將該混合物在室溫攪拌30分鐘，然后倒至冰/水(300mL)中。將該混合物用EA(2×100ml)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，將其用柱色譜純化(用EA:PE＝5％洗脫)，得到標題化合物(2.7g)，其為澄清油。MS(ESI)：C₉H₁₁NO₂理論值162；實測值163[M+H]⁺。

描述15

6-乙基煙酸(D15)

向6-乙基煙酸甲酯(D14，2.7g)在THF(20mL)中的溶液中加入NaOH(1.5g)的水(20mL)溶液。將該混合物在室溫攪拌1小時，然后減壓濃縮。將所得水相用HCl溶液(1M)酸化以調(diào)節(jié)pH至3。將該混合物真空濃縮并將該粗產(chǎn)物在室溫在MeOH(30mL)中攪拌10分鐘。將該混懸液過濾并將該濾液真空濃縮，得到標題化合物(2.5g)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：9.16(d，J＝1.2Hz，1H)，8.88(dd，J＝8.8Hz，2.0Hz，1H)，8.01(d，J＝8.4Hz，1H)，3.15(q，J＝7.6Hz，2H)，1.45(t，J＝7.6Hz，3H)。MS(ESI)：C₉H₁₁NO₂理論值151；實測值152[M+H]⁺。

描述16

2,6-二氯-5-氟煙酸甲酯(D16)

在室溫，向2,6-二氯-5-氟煙酸(5g)和1滴DMF在DCM(20mL)中的混合物中滴加草酰氯(5mL)。將該混合物在室溫攪拌1小時，然后濃縮。將所得酰氯再次溶于DCM(10mL)中，然后滴加至DCM(20mL)和MeOH(20mL)的混合物中。將所得混合物在室溫攪拌另外1小時，然后濃縮，得到標題化合物(6g)，其為油。MS(ESI)：C₇H₄Cl₂FNO₂理論值223；實測值224[M+H]⁺。

描述17

2-氯-5-氟-6-甲基煙酸甲酯(D17)

將2,6-二氯-5-氟煙酸甲酯(D16，6g)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三硼雜己環(huán)(trioxatriborinane)(3.36g)、K₂CO₃(9.99g)和Pd(Ph₃P)₄(1.548g)在1,4-二噁烷(50mL)中的混合物加熱至110℃，持續(xù)20小時。將該混合物過濾并將該濾液濃縮。將該殘余物用柱色譜純化(用EA:PE＝1:10洗脫)，得到標題化合物(3.5g)，其為油。MS(ESI)：C₈H₇ClFNO₂理論值203；實測值204[M+H]⁺。

描述18

5-氟-6-甲基煙酸甲酯(D18)

在氫氣氛下(1atm)，將2-氯-5-氟-6-甲基煙酸甲酯(D17，4.2g)、Pd/C(0.5g)和乙酸鈉(6.77g)在EA(50mL)中的混合物在室溫攪拌過夜。將該混合物過濾并將該濾液濃縮。將該殘余物用柱色譜純化(EA:PE＝1:10)，得到標題化合物(3.5g)，其為白色固體。MS(ESI)：C₈H₈FNO₂理論值169；實測值170[M+H]⁺。

描述19

5-氟-6-甲基煙酸(D19)

向5-氟-6-甲基煙酸甲酯(D18，2.3g)在THF(10mL)和甲醇(10mL)中的溶液中加入NaOH(0.707g)在水(5mL)中的溶液。將該混合物在室溫攪拌1小時，然后真空濃縮。向該殘余物中加入水(5mL)。將該混合物的pH調(diào)節(jié)至3。收集固體并真空干燥，得到標題化合物(800mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：8.83(s，1H)，8.00(dd，J＝1.2Hz，9.6Hz，1H)，2.57(s，3H)。MS(ESI)：C₇H₆FNO₂理論值155；實測值156[M+H]⁺。

描述20

5-甲氧基-6-甲基煙酸(D20)

將5-氟-6-甲基煙酸甲酯(400mg)和甲醇鈉(383mg)在DMF(2mL)中的混合物在120℃的微波中照射1小時。冷卻至室溫后，將該混合物用HCl水溶液(1M)酸化以調(diào)節(jié)pH至約3。將該水層用EA(2×30mL)萃取。將合并的有機層用無水Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(180mg)，其為黃色固體。MS(ESI)：C₈H₉NO₃理論值167；實測值168[M+H]⁺。

描述21

3-甲基環(huán)丁烷甲酸(D21)

將3-亞甲基環(huán)丁烷甲酸(1g)和Pd/C(0.19g)在MeOH(20mL)中的混合物在室溫氫氣球下攪拌過夜。將該混合物過濾并將該濾液真空濃縮，得到標題化合物(760mg)。MS(ESI)：C₆H₁₀O₂理論值114；未獲得質(zhì)量數(shù)實測值。

描述22

(3-甲基環(huán)丁基)氨基甲酸叔丁酯(D22)

在80℃，將3-甲基環(huán)丁烷甲酸(D21，700mg)、TEA(1862mg)和二苯基膦?；B氮化物(diphenylphosphinyl azide)(2237mg)在叔丁醇(10mL)中的溶液攪拌過夜。冷卻至室溫后，將該混合物過濾并將該濾液用水稀釋。將所得混合物用EA進一步萃取。將該有機層用鹽水洗滌，用Na₂SO₄干燥并真空濃縮，得到標題化合物(320mg)。MS(ESI)：C₁₀H₁₉NO₂理論值185；未獲得質(zhì)量數(shù)實測值。

描述23

3-甲基環(huán)丁胺，鹽酸鹽(D23)

將(3-甲基環(huán)丁基)氨基甲酸叔丁酯(D22，310mg)在MeOH(5mL)中的溶液加至HCl溶液(4M的二噁烷溶液，0.837mL)中。將該混合物在室溫攪拌4小時，然后減壓濃縮，得到標題化合物(110mg)，其為油。MS(ESI)：C₅H₁₁N理論值85；未獲得質(zhì)量數(shù)實測值。

描述24

(環(huán)丙基甲基)氨基甲酸叔丁酯(D24)

將Boc₂O(1.632mL)、DMAP(86mg)、TEA(711mg)和環(huán)丙基甲胺(500mg)在DCM(20mL)中的混合物在室溫攪拌過夜。加入冷水(100mL)并將該水層用DCM(2×100mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(550mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：3.07-3.00(m，2H)，1.60(brs，1H)，1.49(s，9H)，0.99-0.92(m，1H)，0.52-0.48(m，2H)，0.21-0.17(m，2H)。

描述25

(環(huán)丙基甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(D25)

在0℃，向(環(huán)丙基甲基)氨基甲酸叔丁酯(D24，80mg)在THF(10mL)中的溶液中加入氫化鈉(56.1mg)。30min后，加入碘甲烷(332mg)。將該混合物在這一溫度攪拌1小時。將所得混合物溫熱至室溫并攪拌過夜。緩慢加入冷水(30mL)以淬滅該反應。將該水層用DCM(2×50mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(80mg)，其為黃色油。

描述26

1-環(huán)丙基-N-甲基甲胺，鹽酸鹽(D26)

將(環(huán)丙基甲基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(D25，80mg)和濃HCl(0.5mL)在甲醇(10mL)中的混合物攪拌3小時。將該溶劑真空蒸發(fā)，得到標題化合物(51mg)，其為黃色固體。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：5.51(s，1H)，2.92-2.90(m，2H)，2.72(s，3H)，1.18-1.07(m，1H)，0.76-0.70(m，2H)，0.45-0.4(m，2H)。

描述27

(環(huán)丁基甲基)氨基甲酸芐酯(D27)

向環(huán)丁基甲胺(150mg)和TEA(0.246mL)在DCM(20mL)中的溶液中加入氯甲酸芐酯(301mg)。將該混合物在室溫攪拌2小時。將該混合物真空濃縮并將該殘余物用柱色譜純化(用EA:PE＝1:15洗脫)，得到標題化合物(300mg)，其為無色油。MS(ESI)：C₁₃H₁₇NO₂理論值219；實測值220[M+H]⁺。

描述28

(環(huán)丁基甲基)(甲基)氨基甲酸芐酯(D28)

向(環(huán)丁基甲基)氨基甲酸芐酯(D27，300mg)在THF(20mL)中的溶液中加入NaH(60％，328mg)并將該混合物在室溫攪拌30分鐘。然后加入碘甲烷(0.257mL)至上述混合物中并將該反應在室溫攪拌2小時。將該混合物用水(0.1mL)淬滅并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，將其用柱色譜純化(用EA:PE＝1:5洗脫)，得到標題化合物(220mg)，其為無色油。MS(ESI)：C₁₄H₁₉NO₂理論值233；實測值234[M+H]⁺。

描述29

1-環(huán)丁基-N-甲基甲胺(D29)

在室溫，將(環(huán)丁基甲基)(甲基)氨基甲酸芐酯(D28，220mg)和Pd/C(20mg)在MeOH(20mL)中的混合物通入H₂氣體持續(xù)2小時。將該混合物通過硅藻土墊過濾并將該濾液真空濃縮，得到標題化合物(90mg)，其為無色油。

描述30

5-氟-2-甲基-3-硝基苯甲酸(D30)

將5-氟-2-甲基苯甲酸(20g)分批加至冰冷的濃硫酸(98％，80mL)中。將該混合物在0℃攪拌直至所有固體溶解。分批加入硝酸(65％，6mL)和H₂SO₄(98％，12mL)的混合物。將該混合物逐漸溫熱至室溫并在室溫攪拌6小時。將所得混合物倒至冰(500mL)上。收集固體并用水(100mL)洗滌。將該固體再次溶于EA(200mL)中并用鹽水洗滌。將該有機層用無水Na₂SO₄干燥并真空濃縮，得到標題化合物(11g)，其為褐色固體。MS(ESI)：C₈H₆FNO₄理論值199；實測值198[M-H]^-。

描述31

(5-氟-2-甲基-3-硝基苯基)甲醇(D31)

將5-氟-2-甲基-3-硝基苯甲酸(D30，11g)和BH₃.THF(1M，72mL)的混合物加熱至80℃，持續(xù)2小時。將MeOH(20mL)緩慢加至混合物中以淬滅該反應。將所得混合物真空濃縮。將該殘余物溶于DCM(50mL)并用飽和NaHCO₃溶液(2×50mL)和鹽水(2×50mL)洗滌。將該有機相用Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，得到標題化合物(9g)，其為黃色固體。MS(ESI)：C₈H₈FNO₃理論值185；未獲得質(zhì)量數(shù)實測值。

描述32

5-氟-2-甲基-3-硝基苯甲醛(D32)

向(5-氟-2-甲基-3-硝基苯基)甲醇(D31，9g)在DCM(100mL)中的混合物中分批加入PCC(14g)。將該混合物在室溫攪拌過夜。將溶劑真空除去，得到粗產(chǎn)物，將其用柱色譜純化(用EA:PE＝1:20洗脫)，得到標題化合物(5g)，其為淡黃色固體。MS(ESI)：C₈H₆FNO₃理論值185；未獲得質(zhì)量數(shù)實測值。

描述33

5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸(D33)

在0℃，將2-甲基-3-硝基苯甲酸(5g)溶于濃H₂SO₄(20mL)中。向該溶液中逐漸加入NBS(6.2g)。將所得混合物在0℃攪拌2小時，然后溫熱至40℃。在40℃攪拌3小時后，將該混合物倒至冰/水中。將白色固體沉淀物過濾并干燥，得到標題化合物(7g)，其為灰白色固體。MS(ESI)：C₈H₆BrNO₄理論值259；未獲得質(zhì)量數(shù)實測值。

描述34

5-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸(D34)

在0℃，向5-氯-2-甲基苯甲酸(50g)在濃H₂SO₄(300mL)中的溶液中分批加入硝酸(65％，1.92g)和濃硫酸(50mL)的混合物。將該混合物攪拌6小時，然后倒至冰(1kg)上。將所得混合物用水(100mL)稀釋。過濾后，收集固體和再次溶于EA(300mL)。將該溶液用鹽水洗滌，用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將該殘余物用EA和PE(2:1，50mL)洗滌兩次，得到標題化合物(39g)，其為黃色固體。MS(ESI)：C₈H₆ClNO₄理論值215；實測值216[M+H]⁺。

描述35

(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基苯甲?；?-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D35)

在0℃，向5-氯-2-甲基-3-硝基苯甲酸(D34，32.3g)、(S)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(25g)和DIPEA(43.6mL)在DMF(100mL)中的溶液中加入HATU(57.0g)。將該混合物在室溫攪拌過夜，然后倒至水中。將所得混合物過濾。將該固體溶于EA并用鹽水洗滌三次。將有機溶液用Na₂SO₄干燥并真空濃縮，得到標題化合物(47g)，其為亮橙色固體。MS(ESI)：C₁₈H₂₄ClN₃O₅理論值397；實測值342[M-tBu+H+H]⁺。

描述36

(S)-4-(5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲?；?-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D36)

D36使用與D35所述類似的步驟制備。MS(ESI)：C₁₈H₂₄BrN₃O₅理論值441；實測值464[M+Na]⁺。

描述37

(S)-4-(5-溴-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D37)

在0℃，將(S)-4-(5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲?；?-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D36，3.8g)溶于THF(20mL)。在冰浴下，向該溶液中逐漸加入NaBH₄(1.625g)。然后小心地滴加BF₃.OEt₂(5.44mL)。將該混合物在0℃攪拌2小時并在室溫攪拌過夜。加入甲醇以淬滅該反應。除去該溶劑后，將該殘余物用EA(2×20mL)和水(2×20mL)萃取。將合并的有機相用硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到標題化合物(4.28g)，其為淡黃色油。MS(ESI)：C₁₈H₂₆BrN₃O₄理論值427；實測值428[M+H]⁺。

描述38

(S)-4-(5-氟-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D38)

向5-氟-2-甲基-3-硝基苯甲醛(D32，10g)和(S)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(12.03g)在DCM(120mL)中的溶液中加入數(shù)滴乙酸(3.28g)。將該混合物在室溫攪拌1小時。在冰浴中加入三乙酰氧基硼氫化鈉(23.15g)。將該混合物在室溫攪拌過夜并用飽和NaHCO₃溶液淬滅。將該有機層用無水Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(22.17g)。MS(ESI)：C₁₈H₂₆FN₃O₄理論值367；實測值368[M+H]⁺。

描述39

(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D39)

在0℃，將BH₃.THF(1.0M的THF溶液，151mL)滴加至(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基苯甲?；?-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D35，30g)在THF(200mL)中的溶液中，歷時10min。將該反應混合物加熱至75℃并攪拌1小時，然后真空濃縮，得到標題化合物(28g)，其為黃色油。MS(ESI)：C₁₈H₂₆ClN₃O₄理論值383；實測值384[M+H]⁺。

描述40

(S)-4-(5-氰基-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D40)

將在密封管中的(S)-4-(5-溴-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D37，1.28g)、二氰基鋅(0.505g)和四(三苯基膦)鈀(0)(0.276g)的混合物在150℃微波中攪拌5小時。將該反應混合物用EA(20mL)稀釋，倒至水(50mL)中，然后過濾。將該濾液用EA(20mL)萃取。將該有機相洗滌，干燥并濃縮。將該殘余物用柱色譜純化(用EA:PE＝10％-30％洗脫)，得到標題化合物(370mg)。MS(ESI)：C₁₉H₂₆N₄O₄理論值374；實測值397[M+Na]⁺。

描述41

(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D41)

向在50℃氮氣氛下攪拌的(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D39，30g)和鎳(4.59g)在甲醇(200mL)中的溶液中加入肼(80％，12.26mL)。將該反應混合物在50℃攪拌1小時。將催化劑過濾并將該濾液濃縮。將該殘余物真空干燥，得到標題化合物(27g)，其為亮黃色油狀物。MS(ESI)：C₁₈H₂₈ClN₃O₂理論值353；實測值354[M+H]⁺。

描述42

(S)-4-(3-氨基-5-氰基-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D42)

向(S)-4-(5-氰基-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D40，1010mg)在乙醇(10mL)中的溶液中加入氯化錫(II)二水合物(2587mg)。將該混合物在室溫攪拌過夜。將該混合物的pH值用碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至約8。將白色沉淀物用硅藻土過濾。將該濾液濃縮，然后用EA(2×20mL)萃取。將合并的有機相用水(2×10mL)洗滌。將所得有機相真空濃縮，得到標題化合物(630mg)，其為黃色油。MS(ESI)：C₁₉H₂₈N₄O₂理論值344；實測值345[M+H]⁺。

描述43

(S)-1-(5-氟-2-甲基-3-硝基芐基)-3-甲基哌嗪，二鹽酸鹽(D43)

向(S)-4-(5-氟-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D38，4g)在DCM(15mL)中的溶液中加入氯化氫/MeOH(27.2mL)。將該混合物脫氣并在室溫氮氣氛下攪拌12小時。將該混合物真空濃縮，得到標題化合物(3.1g)。MS(ESI)：C₁₃H₁₈FN₃O₂理論值267；實測值268[M+H]⁺。

描述44

(S)-1-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-3-甲基哌嗪(D44)

向(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D39，1.5138g)在DCM(15mL)中的溶液中滴加TFA(3.04mL)。將所得混合物在室溫攪拌過夜。將該溶劑真空除去。將該殘余物用DCM(10mL)稀釋并用飽和Na₂CO₃溶液中和至pH＝9。然后加入NaOH溶液(2M)以調(diào)節(jié)pH值至11。將該水相分離并用DCM(2×15mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(1.17g)，其為淡黃色油。MS(ESI)：C₁₃H₁₈ClN₃O₂理論值283；實測值284[M+H]⁺。

描述45

(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)戊酯(D45)

向(S)-1-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-3-甲基哌嗪(D44，489mg)和TEA(0.426mL)在THF(5mL)中的溶液中加入氯甲酸環(huán)戊酯(340mg)。將該混合物在室溫攪拌過夜。將該混合物溶于EA(20mL)中，然后用水(3×10mL)洗滌。將有機層用無水Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(530mg)，其為黃色油。MS(ESI)：C₁₉H₂₆ClN₃O₄理論值395；實測值396[M+H]⁺。

描述46

(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D46)

將(S)-1-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-3-甲基哌嗪(D44，800mg)，TEA(1.965mL)和三光氣(669mg)在THF(20mL)中的混合物在0℃攪拌30分鐘。然后加入環(huán)丙基甲胺(201mg)，并將該混合物在室溫攪拌20小時。將混合物真空濃縮并將該粗產(chǎn)物用柱色譜(用EA:PE＝1:10至1:2洗脫)純化，得到標題化合物(780mg)，其為無色油。MS(ESI)：C₁₈H₂₅ClN₄O₃理論值380；實測值381[M+H]⁺。

描述47-51

描述47-51使用與D46所述類似的步驟制備，具體反應溶劑和堿列于表中。

D47：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)丙基甲基酯

D48：(S)-(4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(吡咯烷-1-基)甲酮

D49：(S)-(4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(哌啶-1-基)甲酮

D50：(S)-(4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(3-甲基氮雜環(huán)丁烷-1-基)甲酮

D51：(S)-(4-(5-氟-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(吡咯烷-1-基)甲酮

描述52

(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)戊酯(D52)

向化合物(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)戊酯(D45，530mg)在乙醇(10mL)中的溶液中加入氯化錫(II)二水合物(1284mg)。將該混合物在室溫攪拌過夜。將該混合物的pH值用碳酸氫鈉水溶液調(diào)節(jié)至約8。將白色沉淀物用硅藻土過濾并將該濾液真空濃縮。將所得殘余物用EA(2×20mL)萃取。將合并的有機層用水(2×10mL)洗滌并用無水Na₂SO₄干燥。過濾后，將該濾液真空濃縮，得到標題化合物(418mg)，其為黃色油。MS(ESI)：C₁₉H₂₈ClN₃O₂理論值365；實測值366[M+H]⁺。

描述53

(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)丙基甲酯(D53)

D53使用與D52所述類似的步驟制備。MS(ESI)：C₁₈H₂₆ClN₃O₂理論值351；實測值352[M+H]⁺。

描述54

(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D54)

向(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-硝基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D46，780mg)在甲醇(50mL)中的溶液中加入飽和氯化銨(1095mg)溶液和鐵(915mg)。然后將該混合物在室溫攪拌1小時。將該混合物通過硅藻土墊過濾并用MeOH洗滌。將該濾液濃縮并分配于EA和水之間。將該有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到標題化合物(670mg)，其為無色油。MS(ESI)：C₁₈H₂₇ClN₄O理論值350；實測值351[M+H]⁺。

描述55-58

描述55-58使用與描述54所述類似的步驟制備。

D55：(S)-(4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(吡咯烷-1-基)甲酮

D56：(S)-(4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(哌啶-1-基)甲酮

D57：(S)-(4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(3-甲基氮雜環(huán)丁烷-1-基)甲酮

D58：(S)-(4-(3-氨基-5-氟-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(吡咯烷-1-基)甲酮

描述59

3-(2-((5-氯-3-(((S)-4-((環(huán)丙基甲基)氨基甲?；?-3-甲基哌嗪-1-基)甲基)-2-甲基苯基)氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(D59)

將EDC(82mg)、HOBT(43.6mg)、2-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)乙酸(65.3mg)和(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D54，100mg)在DCM(10mL)中的混合物在25℃攪拌2天。加入冷水(50mL)并將該水層用DCM(2×100mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將所得殘余物用柱色譜純化(用EA:PE＝0％-100％洗脫)，得到標題化合物(150mg)。MS(ESI)：C₂₉H₄₄ClN₅O₄理論值561；實測值562[M+H]⁺。

描述60

2-(2-((5-氯-3-(((S)-4-((環(huán)丙基甲基)氨基甲?；?-3-甲基哌嗪-1-基)甲基)-2-甲基苯基)氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(D60)

D60使用與D59所述類似的步驟制備，DCM/DIPEA作為溶劑/堿。MS(ESI)：C₂₉H₄₄ClN₅O₄理論值561；實測值562[M+H]⁺。

描述61

(2S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(2-(吡咯烷-3-基)乙酰氨基)芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺，二鹽酸鹽(D61)

將3-(2-((5-氯-3-(((S)-4-((環(huán)丙基甲基)氨基甲?；?-3-甲基哌嗪-1-基)甲基)-2-甲基苯基)氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(D59，120mg)和HCl溶液(4M的二噁烷溶液，1mL)的混合物攪拌2小時。將該溶劑蒸發(fā)，得到標題化合物(100mg)，其為黃色固體。MS(ESI)：C₂₄H₃₆ClN₅O₂理論值461；實測值462[M+H]⁺。

描述62

(2S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(2-(吡咯烷-2-基)乙酰氨基)芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺，二鹽酸鹽(D62)

向2-(2-((5-氯-3-(((S)-4-((環(huán)丙基甲基)氨基甲酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)甲基)-2-甲基苯基)氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(D60，50mg)在甲醇(10mL)中的溶液中加入濃HCl(180mg)。將該混合物在60℃攪拌3小時。冷卻至室溫后，將該混合物真空濃縮，得到標題化合物(30mg)，其為白色固體。MS(ESI)：C₂₄H₃₆ClN₅O₂理論值461；實測值462[M+H]⁺。

描述63

(S)-4-(5-氯-3-(5-氟-6-甲基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D63)

將(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D41，913mg)、5-氟-6-甲基煙酸(D19，400mg)、HATU(980mg)和DIPEA(0.450mL)在DCM(100mL)中的溶液在室溫攪拌18小時。將該混合物真空濃縮，得到標題化合物(1.2g)，其為紅色油。MS(ESI)：C₂₅H₃₂ClFN₄O₃理論值490；實測值491[M+H]⁺。

描述64

(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D64)

向6-甲基煙酸，鹽酸鹽(450mg)在DCM(10mL)中的混合物中緩慢加入草酰氯(1mL)。將該混合物在室溫攪拌0.5小時。將該混合物真空濃縮并將該殘余物用DCM(10mL)稀釋并將該溶液緩慢加至(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D41，1.2g)和DIPEA(1.07mL)在DCM(10mL)中的溶液中。將該混合物在室溫攪拌1小時。加入冷水(30mL)并將該混合物用DCM(2×100mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將所得殘余物用柱色譜純化(用EA:PE＝1:1洗脫)，得到標題化合物(1g)，其為紫色油狀物。MS(ESI)：C₂₅H₃₃ClN₄O₃理論值472；實測值473[M+H]⁺。

描述65-66

描述65-66使用與描述64所述類似的步驟制備，具體反應溶劑和堿列于表中。

D65：(S)-4-(5-氯-3-(5-甲氧基-6-甲基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯

D66：(S)-4-(5-氰基-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯

描述67

(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-5-氟-6-甲基煙酰胺，2三氟乙酸鹽(D67)

向(S)-4-(5-氯-3-(5-氟-6-甲基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D63，1.2g)在DCM(20mL)中的溶液中加入TFA(1.883mL)。將該混合物在室溫攪拌2小時。將該混合物真空濃縮，得到標題化合物(900mg)，其為黃色固體。MS(ESI)：C₂₁H₂₇ClN4O₂理論值390；實測值391[M+H]⁺。

描述68

(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-5-甲氧基-6-甲基煙酰胺，二鹽酸鹽(D68)

向(S)-4-(5-氯-3-(5-甲氧基-6-甲基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D65，80mg)在MeOH(20mL)中的溶液中加入HCl溶液(4M的二噁烷溶液，0.112mL)。在60℃攪拌4小時后，將該混合物真空濃縮，得到標題化合物(100mg)，其為白色固體。MS(ESI)：C₂₁H₂₇ClN4O₂理論值402；實測值403[M+H]⁺。

描述69

(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺，二鹽酸鹽(D69)

將(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D64，1.0g)在DCM(6mL)中的混合物中加入HCl溶液(4M的二噁烷溶液，1.057mL)。將該混合物在室溫攪拌2小時，然后真空濃縮，得到標題化合物(1.07g)，其為亮黃色固體。MS(ESI)：C₂₀H₂₅ClN₄O理論值372；實測值373[M+H]⁺。

描述70

(S)-N-(5-氰基-2-甲基-3-((3-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺，二鹽酸鹽(D70)

將(S)-4-(5-氰基-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(D66，300mg)加至HCl(5M的異丙醇溶液，1.294mL)的乙醇(20mL)溶液中。將該反應混合物在80℃攪拌過夜。將溶劑真空除去并將該殘余物在EA中研磨，得到標題化合物(280mg)，其為白色固體。MS(ESI)：C₂₁H₂₅N₅O理論值363；實測值364[M+H]⁺。

實施例1

(S)-4-(5-氯-3-(5,6-二甲基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(E1)

向5,6-二甲基煙酸(D3，51.7mg)、HATU(162mg)和DIPEA(73.7mg)在DMF(1.5mL)中的混合物中加入(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D54，100mg)。將該混合物在50℃攪拌15小時。將該混合物用水淬滅并用EA(2×50mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥并濃縮。將該殘余物用制備型HPLC純化，得到標題化合物(30mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：8.84(d，J＝1.2Hz，1H)，8.14(d，J＝1.2Hz，1H)，7.36(d，J＝2.0Hz，1H)，7.32(d，J＝2.0Hz，1H)，4.19(brs，1H)，3.74(d，J＝12.8Hz，1H)，3.52(s，2H)，3.10-3.02(m，3H)，2.83(d，J＝10.8Hz，1H)，2.71(d，J＝11.2Hz，1H)，2.61(s，3H)，2.44(s，3H)，2.32(s，3H)，2.26-2.22(m，1H)，2.10-2.05(m，1H)，1.25(d，J＝6.8Hz，3H)，1.03-0.99(m，1H)，0.49-0.44(m，2H)，0.22-0.18(m，2H)。MS(ESI)：C₂₆H₃₄ClN₅O₂理論值483；實測值484[M+H]⁺。

實施例2-19

實施例2-19使用實施例1所述的類似步驟制備，具體反應溶劑和堿列于表中。

E2：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(3-(甲基磺酰基)丙?；?芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)戊基酯

E3：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(3-(甲基磺酰基)丙?；?芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)丙基甲基酯

E4：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺

E5：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-甲基嘧啶-5-甲酰胺

E6：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4,4,4-三氟丁酰胺

E7：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-氰基異煙酰胺

E8：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-氰基煙酰胺

E9：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-5-氰基-6-甲基煙酰胺

E10和E11：N-(5-氯-2-甲基-3-(((S)-3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-((1r,4S)-4-羥基環(huán)己基)乙酰胺和N-(5-氯-2-甲基-3-(((S)-3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-((1s,4R)-4-羥基環(huán)己基)乙酰胺

E12：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-5,5,5-三氟戊酰胺

E13：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-乙基嘧啶-5-甲酰胺

E14：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-氰基異煙酰胺

E15：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-氰基煙酰胺

E16：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4,4,4-三氟丁酰胺

E17：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-甲基嘧啶-5-甲酰胺

E18：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(3-甲基氮雜環(huán)丁烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-氰基異煙酰胺

E19：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(3-甲基氮雜環(huán)丁烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-氰基煙酰胺

實施例20

(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-(3,3-二氟環(huán)丁基)乙酰胺，三氟乙酸鹽(E20)

將(S)-(4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(哌啶-1-基)甲酮(D56，97mg)、2-(3,3-二氟環(huán)丁基)乙酸(D13，40mg)、EDC(77mg)和DIPEA(0.093mL)在DMF(5mL)中的混合物攪拌16小時。加入冷水(30mL)并將該水層用DCM(2×30mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將該殘余物用柱色譜(用EA:PE＝50％-100％洗脫)和制備型HPLC純化，得到標題化合物(10mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：7.45(brs，2H)，4.39-4.38(m，2H)，3.38-3.22(m，11H)，2.77-2.75(m，2H)，2.70-2.67(m，2H)，2.62-2.60(m，1H)，2.43-2.32(m，2H)，2.28(s，3H)，1.67-1.57(m，6H)，1.28-1.24(m，3H)。¹⁹F NMR(376MHz，MeOD-d₄)：-77.13，-84.44，-96.75。MS(ESI)：C₂₅H₃₅ClF₂N₄O₂理論值496；實測值497[M+H]⁺。

實施例21

(S)-4-(5-氯-3-(6-乙基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(E21)

將6-乙基煙酸(D15，43.1mg)、(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D54，100mg)、EDC(82mg)和HOBT(65.5mg)在DMF(5mL)中的混合物在25℃攪拌2天。加入冷水(30mL)并將該水層用DCM(2×100mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將所得殘余物用制備型HPLC純化，得到標題化合物(20mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：9.02(d，J＝2.4Hz，1H)，8.30(dd，J＝8.0Hz，2.0Hz，1H)，7.48(d，J＝8.0Hz，1H)，7.35(d，J＝2.0Hz，1H)，7.30(d，J＝2.0Hz，1H)，4.17(brs，1H)，3.72(d，J＝12.8Hz，1H)，3.50(s，2H)，3.12-2.97(m，3H)，2.94-2.89(m，2H)，2.81(d，J＝10.8Hz，1H)，2.69(d，J＝11.2Hz，1H)，2.31(s，3H)，2.25-2.21(m，1H)，2.09-2.02(m，1H)，1.34(t，J＝7.6Hz，3H)，1.23(d，J＝6.4Hz，3H)，1.04-0.95(m，1H)，0.47-0.42(m，2H)，0.21-0.17(m，2H)。MS(ESI)：C₂₆H₃₄ClN₅O₂理論值483；實測值484[M+H]⁺。

實施例22

(S)-4-(5-氯-3-(5-氯煙酰氨基)-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(E22)

將5-氯煙酸(22.45mg)和亞硫酰氯(1mL)的混合物在60℃攪拌5小時。冷卻至室溫后，將該混合物減壓濃縮至干。將該殘余物再溶于DCM(10mL)中，將其在0℃緩慢加至(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D54，50mg)和DIPEA(5mL)在DCM(10mL)中的混合物。將該混合物在室溫攪拌2小時，然后用水洗滌。將該有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，得到該粗產(chǎn)物，將其用制備型HPLC純化，得到標題化合物(30mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：9.07(s，1H)，8.74(brs，2H)，8.33(s，1H)，7.59(s，1H)，7.18(s，1H)，4.52-4.49(m，1H)，3.93(brs，1H)，3.52(d，J＝12.4Hz，1H)，3.44(d，J＝13.2Hz，1H)，3.34(d，J＝12.8Hz，1H)，3.08-3.05(m，2H)，2.96-2.89(m，1H)，2.58-2.55(m，2H)，2.28(s，3H)，2.21-2.18(m，1H)，1.94-1.87(m，1H)，1.17(d，J＝6.8Hz，3H)，0.93-0.90(m，1H)，0.51-0.46(m，2H)，0.17(d，J＝4.8Hz，2H)。MS(ESI)：C₂₄H₂₉Cl₂N₅O₂理論值489；實測值490[M+H]⁺。

實施例23

(S)-4-(5-氯-3-(5-氟-6-甲基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(E23)

向5-氟-6-甲基煙酸(D19，44.2mg)在DCM(10mL)中的混合物中加入草酰氯(109mg)和2滴DMF。將該反應在0℃攪拌5小時。然后將該混合物減壓濃縮至干。將該殘余物再溶于DCM(10mL)中，將其在0℃緩慢加至(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D54，100mg)和DIPEA(5mL)在DCM(10mL)中的混合物中。將該反應混合物溫熱至室溫并攪拌2小時。將該混合物用水(15mL)洗滌。將該有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，將其用制備型HPLC純化，得到標題化合物(24mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：8.82(s，1H)，7.97(s，1H)，7.92(dd，J＝8.8Hz，1.2Hz，1H)，7.79(s，1H)，7.18(d，J＝2.0Hz，1H)，4.47(t，J＝5.2Hz，1H)，4.03(brs，1H)，3.64(d，J＝12.0Hz，1H)，3.46-3.38(m，2H)，3.11-3.02(m，3H)，2.70(d，J＝11.2Hz，1H)，2.63(d，J＝3.2Hz，3H)，2.60-2.56(m，1H)，2.32(s，3H)，2.26-2.22(m，1H)，2.05-2.00(m，1H)，1.22(d，J＝6.4Hz，3H)，0.98-0.95(m，1H)，0.50-0.47(m，2H)，0.19-0.17(m，2H)。MS(ESI)：C₂₅H₃₁ClFN₅O₂理論值487；實測值488[M+H]⁺。

實施例24

(S)-4-(5-氯-3-(3-氰基苯甲酰氨基)-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺，三氟乙酸鹽(E24)

向(S)-4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(D54，80mg)在DCM(10mL)中的溶液中加入3-氰基苯甲酰氯(37.8mg)和DIPEA(0.119mL)。攪拌4小時后，將該混合物濃縮，得到黃色油狀物，將其用制備型HPLC純化，得到標題化合物(80mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：10.32(brs，1H)，9.38(brs，1H)，8.41(s，1H)，8.27(d，J＝7.6Hz，1H)，8.11(d，J＝7.6Hz，1H)，7.78(t，J＝8.0Hz，1H)，7.65-7.60(m，2H)，6.78(brs，1H)，4.47(brs，2H)，4.02-3.96(m，1H)，3.31(brs，2H)，3.10(brs，2H)，2.95-2.87(m，2H)，2.21(s，3H)，1.20(brs，3H)，0.95-0.88(m，1H)，0.39-0.33(m，2H)，0.23-0.16(m，2H)。¹⁹F NMR(376MHz，DMSO-d₆)：-74.3。MS(ESI)：C₂₆H₃₀ClN₅O₂理論值479；實測值480[M+H]⁺

實施例25

(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-3-氰基苯甲酰胺(E25)

向(S)-(4-(3-氨基-5-氯-2-甲基芐基)-2-甲基哌嗪-1-基)(吡咯烷-1-基)甲酮(D55，160mg)和DMAP(167mg)在DCM(30mL)中的溶液中加入3-氰基苯甲酰氯(151mg)。將該混合物在40℃攪拌過夜。冷卻至室溫后，將該混合物濃縮并將所得殘余物用制備型HPLC純化，得到標題化合物(20mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：8.52(s，1H)，8.28(s，1H)，8.21(d，J＝7.6Hz，1H)，7.89(d，J＝8.0Hz，1H)，7.80-7.78(m，1H)，7.68(t，J＝8.0Hz，1H)，7.29-7.28(m，1H)，4.23(d，J＝14.0Hz，1H)，4.12(d，J＝13.6Hz，1H)，3.67-3.64(m，1H)，3.52-3.47(m，1H)，3.36(brs，5H)，3.25-3.22(m，1H)，3.05-2.98(m，2H)，2.31(s，3H)，1.88-1.87(m，4H)，1.42(d，J＝6.8Hz，3H)。MS(ESI)：C₂₆H₃₀ClN₅O₂理論值479；實測值480[M+H]⁺。

實施例26

(S)-N-(5-氟-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺(E26)

使用與實施例25所述類似的步驟制備實施例26。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：9.01(s，1H)，8.29(dd，J＝8.4Hz，2.4Hz，1H)，7.49(d，J＝8.0Hz，1H)，7.13-7.07(m，2H)，3.99-3.97(m，1H)，3.50(s，2H)，3.45(d，J＝13.2Hz，1H)，3.37(brs，4H)，3.26-3.19(m，1H)，2.76(d，J＝10.4Hz，1H)，2.67-2.64(m，4H)，2.32-2.29(m，4H)，2.19-2.12(m，1H)，1.86-1.85(m，4H)，1.30(d，J＝6.8Hz，3H)。MS(ESI)：C₂₅H₃₂FN₅O₂理論值453；實測值454[M+H]⁺。

實施例27

(2S)-4-(3-(2-(1-乙?；量┩?3-基)乙酰氨基)-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺，三氟乙酸鹽(E27)

在0℃，向TEA(0.030mL)和(2S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(2-(吡咯烷-3-基)乙酰氨基)芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺，二鹽酸鹽(D61，100mg)在DCM(10mL)中的溶液中加入乙酰氯(16.99mg)。將該混合物在這一溫度攪拌30min。加入冷水(30mL)并將所得混合物用飽和NaHCO₃溶液中和。將該水層用DCM(2×100mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將該殘余物用制備型HPLC純化，得到標題化合物(20mg)。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：7.55-7.53(m，2H)，4.52-4.42(m，3H)，4.09(d，J＝14.4Hz，1H)，3.83-3.35(m，5.5H)，3.29-3.24(m，2H)，3.16-2.98(m，3.5H)，2.80-2.52(m，3H)，2.30-2.13(m，4H)，2.06(d，3H)，1.86-1.65(m，1H)，1.30(d，J＝6.8Hz，3H)，1.05-0.95(m，1H)，0.48-0.44(m，2H)，0.21-0.18(m，2H)。¹⁹F NMR(376MHz，MeOD-d₄)：-77.28。MS(ESI)：C₂₆H₃₈ClN₅O₃理論值503；實測值504[M+H]⁺。

實施例28

(2S)-4-(3-(2-(1-乙?；量┩?2-基)乙酰氨基)-5-氯-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(E28)

實施例28使用與實施例27所述類似的步驟進行制備。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：7.57(d，J＝2.4Hz，1H)，7.52(s，1H)，4.49-4.40(m，4H)，4.10-4.07(m，1H)，3.65-3.38(m，4.5H)，3.28-3.21(m，1.5H)，3.09-2.96(m，4H)，2.52-2.46(m，1H)，2.31(d，J＝2.8Hz，3H)，2.13-1.92(m，7H)，1.31(d，J＝7.2Hz，3H)，1.06-0.96(m，1H)，0.50-0.45(m，2H)，0.23-0.19(m，2H)。MS(ESI)：C₂₆H₃₈ClN₅O₃理論值503；實測值504[M+H]⁺。

實施例29

(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-環(huán)戊基-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺(E29)

向(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺，二鹽酸鹽(D69，100mg)、三光氣(39.8mg)在DCM(15mL)中的溶液中加入DIPEA(0.281mL)。將該混合物攪拌1小時。然后將環(huán)戊胺(22.83mg)加至上述混合物中。將該混合物再攪拌2小時。加入冷水(30mL)并將該水層用DCM(2×30mL)萃取。將合并的有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將該殘余物用柱色譜(用EA:PE＝50％-100％洗脫)和制備型HPLC純化，得到標題化合物(15mg)。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：9.00(d，J＝1.2Hz，1H)，8.29(dd，J＝8.0Hz，2.0Hz，1H)，7.48(d，J＝8.0Hz，1H)，7.36(d，J＝2.4Hz，1H)，7.31(d，J＝2.0Hz，1H)，4.18(brs，1H)，4.06-4.00(m，1H)，3.71(d，J＝11.6Hz，1H)，3.50(s，2H)，3.11-3.04(m，1H)，2.80(d，J＝11.2Hz，1H)，2.69(d，J＝11.2Hz，1H)，2.64(s，3H)，2.30(s，3H)，2.24-2.20(m，1H)，2.08-2.01(m，1H)，1.96-1.88(m，2H)，1.75-1.66(m，2H)，1.62-1.52(m，2H)，1.48-1.39(m，2H)，1.21(d，J＝6.8Hz，3H)。MS(ESI)：C₂₆H₃₄ClN₅O₂理論值483；實測值484[M+H]⁺。

實施例30

(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺(E30)

將(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺，二鹽酸鹽(D69，150mg)、TEA(0.280mL)和三光氣(95mg)在DCM(20mL)中的混合物在0℃攪拌30分鐘。加入哌啶(34.3mg)后，將該混合物在室溫攪拌2小時。將該混合物真空濃縮并將該粗產(chǎn)物用制備型HPLC純化，得到標題化合物(52mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：9.02(d，J＝1.6Hz，1H)，8.29(dd，J＝8.0Hz，2.4Hz，1H)，7.49(d，J＝8.0Hz，1H)，7.37(d，J＝2.4Hz，1H)，7.32(d，J＝2.4Hz，1H)，3.89-3.88(m，1H)，3.51(s，2H)，3.34-3.21(m，6H)，2.74(d，J＝10.4Hz，1H)，2.65-2.61(m，4H)，2.31-2.32(m，4H)，2.17-2.15(m，1H)，1.64-1.56(m，6H)，1.28(d，J＝6.8Hz，3H)。MS(ESI)：C₂₆H₃₄ClN₅O₂理論值483；實測值484[M+H]⁺。

實施例31-43

實施例31-43使用實施例30所述的類似步驟制備，具體反應溶劑和堿列于表中。

E31：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(3-甲基氮雜環(huán)丁烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺

E32：(S)-N-(3-((4-(氮雜環(huán)丁烷-1-羰基)-3-甲基哌嗪-1-基)甲基)-5-氯-2-甲基苯基)-6-甲基煙酰胺

E33：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-2-甲基-N-(3-甲基環(huán)丁基)哌嗪-1-甲酰胺

E34：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺

E35：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-(環(huán)丁基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺

E36：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-N,2-二甲基哌嗪-1-甲酰胺

E37：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-(環(huán)丁基甲基)-N,2-二甲基哌嗪-1-甲酰胺

E38：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-異丙基-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺

E39：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-異丁基-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺

E40：(S)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-N-環(huán)丁基-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺

E41：(S)-N-(叔丁基)-4-(5-氯-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺

E42：(S)-N-(5-氯-2-甲基-3-((3-甲基-4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-5-氟-6-甲基煙酰胺

E43：(S)-4-(5-氯-3-(5-甲氧基-6-甲基煙酰氨基)-2-甲基芐基)-N-(環(huán)丙基甲基)-2-甲基哌嗪-1-甲酰胺

實施例44

(S)-4-(5-氰基-2-甲基-3-(6-甲基煙酰氨基)芐基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸環(huán)戊酯(E44)

向(S)-N-(5-氰基-2-甲基-3-((3-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-6-甲基煙酰胺，二鹽酸鹽(D70，40mg)和TEA(0.014mL)在THF(10mL)中的溶液中加入氯甲酸環(huán)戊酯(29.7mg)。將該混合物在室溫攪拌過夜。將該混合物在EA中稀釋并用水洗滌三次。將有機層用Na₂SO₄干燥，過濾并真空濃縮。將所得殘余物用MADP純化，得到標題化合物(4mg)，其為白色固體。¹H NMR(400MHz，MeOD-d₄)：9.11(brs，1H)，8.49(d，J＝7.83Hz，1H)，7.87(brs，2H)，7.67(d，J＝7.82Hz，1H)，5.12(brs，2H)，4.69-3.86(m，3.5H)，2.91-2.32(m，7.5H)，2.11-1.51(m，9H)，1.32(d，J＝6.60Hz，5H)。MS(ESI)：C₂₇H₃₃N₅O₃，理論值475；實測值476[M+H]⁺。

生物學數(shù)據(jù)

如上所述，所述式I化合物是RORγ調(diào)節(jié)劑且可用于治療由RORγ介導的疾病。式I化合物的生物活性可使用用于確定作為RORγ調(diào)節(jié)劑的候選化合物的活性的任意合適測試以及組織和體內(nèi)模型進行確定。

雙重熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)測試

該測試是基于這樣的知識，即核受體以配體依賴性方式與輔因子(轉(zhuǎn)錄因子)相互作用。RORγ是典型的核受體，即其在配體結(jié)合域(LBD)中具有與輔激活因子相互作用的AF2結(jié)構(gòu)域。相互作用的位點被繪圖為輔激活因子SRC1(2)序列的LXXLL基序。含有LXXLL基序的短肽序列模擬全長輔激活因子的行為。

該測試測量輔激活因子肽與純化的細菌表達的RORγ配體結(jié)合域(RORγ-LBD)的配體介導的相互作用，來間接評估配體結(jié)合。在不存在配體的情況下，RORγ具有與輔激活因子SRC1(2)的相互作用的基礎(chǔ)水平，從而有可能發(fā)現(xiàn)抑制或增強RORγ/SRC1(2)相互作用的配體。

材料

產(chǎn)生RORγ-LBD細菌表達質(zhì)粒

人RORγ配體結(jié)合域(RORγ-LBD)在大腸桿菌菌株BL21(DE3)中表達為氨基末端多組氨酸標記的融合蛋白。將編碼該重組蛋白的DNA亞克隆至修飾的pET21a表達載體(Novagen)中。將修飾的多組氨酸標記(MKKHHHHHHLVPRGS)在框(frame)中融合至人RORγ序列的殘基263-518。

蛋白質(zhì)純化

將約50g大腸桿菌細胞團粒再懸浮于300mL裂解緩沖液(30mM咪唑pH 7.0和150mM NaCl)中。通過超聲處理裂解細胞，然后通過在4℃以20,000g離心30分鐘來除去細胞碎片。澄清的上清液過濾通過0.45uM乙酸纖維素膜濾器。將澄清的裂解液裝載至柱(XK-26)上，所述柱用ProBond鎳螯合樹脂(Invitrogen)填充，用30mM咪唑pH 7.0和150mM NaCl預平衡。用平衡緩沖液洗滌至基線吸收后，將柱用30-500mM咪唑pH 7.0的梯度展開。將含有RORγ-LBD蛋白的柱級份匯集并濃縮至體積5ml。將濃縮的蛋白質(zhì)裝載至Superdex 200柱上，所述柱用20mM Tris-Cl pH 7.2和200mM NaCl預平衡。將含有期望的RORγ-LBD蛋白的級份匯集在一起。

蛋白質(zhì)生物素化

如下對純化的RORγ-LBD進行緩沖液更換：相對PBS[100mM磷酸鈉，pH 8和150mM NaCl]徹底透析[至少20體積的(>8000x)的3次更換]。RORγ-LBD在PBS中的濃度為約30uM。將5倍克分子濃度過量的NHS-LC-Biotin(Pierce)加入最小體積的PBS中。將該溶液在周圍室溫孵育60分鐘，并不時輕輕混合。修飾的RORγ-LBD相對2次緩沖液更換-含有5mM DTT、2mM EDTA和2％蔗糖的TBS pH 8.0–進行透析，每次至少20倍體積。將修飾的蛋白質(zhì)分配成等份，在干冰上冷凍，并在-80℃貯存。對生物素化的RORγ-LBD進行質(zhì)譜分析以揭示經(jīng)生物素化試劑修飾的程度。一般而言，約95％的所述蛋白質(zhì)具有至少一個生物素化位點，以及生物素化的總體程度遵循范圍為1-5個的多個位點的正態(tài)分布。使用類似方法產(chǎn)生對應于輔激活因子甾體激素受體共活化物SRC1(2)的氨基酸676至700(CPSSHSSLTERHKILHRLLQEGSPS)的生物素化的肽。

測試

制備銪標記的SRC1(2)肽：生物素化的SRC1(2)溶液如下制備：從100uM儲備溶液中加入適量的生物素化的SRC1(2)至含有10mM新鮮添加的DTT(來自固體)的緩沖液，得到40nM的最終濃度。然后將適量的銪標記的鏈親和素加到于管中的生物素化的SRC1(2)溶液中，得到10nM的最終濃度。將管輕輕倒置并在室溫孵育15分鐘。加入來自10mM儲備溶液的過量20倍的生物素，然后將管輕輕倒置并在室溫孵育10分鐘。

制備APC標記的RORγ-LBD：生物素化的RORγ-LBD溶液如下制備：從儲備溶液中加入適量的生物素化的RORγ-LBD至含有10mM新鮮添加的DTT(來自固體)的緩沖液，得到40nM的最終濃度。然后將適量的APC標記的鏈親和素加到于管中的生物素化的RORγ-LBD溶液中，得到20nM的最終濃度。將管輕輕倒置并在室溫孵育15分鐘。加入來自10mM儲備溶液的過量20倍的生物素，然后將管輕輕倒置并在室溫孵育10分鐘。

將等體積的上述銪標記的SRC1(2)肽和APC標記的RORγ-LBD輕輕混合在一起，得到20nM RORγ-LBD、10nM APC-鏈親和素、20nM SRC1(2)和5nM銪-鏈親和素。將反應混合物孵育5分鐘。使用Thermo Combi Multidrop384stacker裝置，將25ul反應混合物/孔加至384孔測試板，所述板每孔含有于100％DMSO中的1ul測試化合物。將板孵育1小時，然后在ViewLux上以EU/APC的Lance模式讀取。

Jurkat細胞熒光素酶測試

已知RORγ結(jié)合至IL17啟動子中的CNS(保守的非編碼序列)增強子元件。在該測試中，RORγ活性使用熒光素酶報道分子構(gòu)建物間接評價，所述熒光素酶報道分子構(gòu)建物含有具有RORγ特異性CNS增強子元件的人IL17啟動子?；衔飳ORγ活性的抑制將導致用所述報道分子構(gòu)建物轉(zhuǎn)染的Jurkat細胞的熒光素酶活性的降低。

材料

Jurkat細胞系

對于熒光素酶報道分子質(zhì)粒，從人基因組DNA對含有RORγ特異性CNS增強子元件的3Kb人IL17啟動子進行PCR擴增，然后克隆到測序為XhoI-HindIII(1.1Kb)和KpnI-XhoI(1.9Kb)片段的pGL4-Luc2/hygro報道分子質(zhì)粒中。對于1.1Kb片段，使用PCR從293T細胞的基因組DNA擴增人IL17近側(cè)啟動子區(qū)，使用的引物如下：正向引物，5'-CTCGAGTAGAGCAGGACAGGGAGGAA-3'(XhoI位點加了下劃線)和反向引物，5'-AAGCTTGGATGGATGAGTTTGTGCCT-3'(HindIII位點加了下劃線)。切割所述1.1kb DNA帶，純化，并插入到pMD19-T Simple載體(Takara)中。DNA序列測定確認后，所述1.1kb DNA用XhoI和HindIII消化并插入到pGL4.31[luc2P/GAL4UAS/Hygro](Promega)的XhoI/HindIII位點，產(chǎn)生所述pIL17-1kb-luc報道分子構(gòu)建物。對于所述1.9Kb片段，使用PCR從基因組DNA擴增人IL17啟動子區(qū)，使用的引物如下：正向引物，5'-GGTACCTGCCCTGCTCTATCCTGAGT-3'(KpnI位點加了下劃線)和反向引物，5'-CTCGAGTGGTGAGTGCTGAGAGATGG-3'(XhoI位點加了下劃線)。切割所得1.9kb DNA帶，凝膠純化，并克隆到pMD19-T Simple載體(Takara)中。DNA序列測定分析揭示，存在三個點突變，但是沒有一個影響RORγ結(jié)合。通過用KpnI和XhoI雙重消化釋放1.9kb DNA片段并插入到pIL17-1kb-luc中，產(chǎn)生熒光素酶報道分子質(zhì)?！皃IL17-3kb-CNS-luc.”。為了表達RORγt，將與所公開的序列NM_001001523一致的人RORγt的全長cDNA在KpnI-NotI克隆位點克隆到pcDNA3.1中，產(chǎn)生RORγt過表達質(zhì)?！癈DNA3.1DhRORγ49-8”。

將熒光素酶報道分子質(zhì)粒和RORγt過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到Jurkat細胞系中，然后鑒定穩(wěn)定的克隆。將穩(wěn)定的克隆在于RPMI(1640)中的10％透析的FBS中培養(yǎng)，所述RPMI(1640)含有800ug/ml遺傳霉素和400ug/ml潮霉素。

測試

將化合物以三個濃度(10mM、400uM和16uM)溶于DMSO中，然后分別以40nl、12.5nl、5nl分配到384孔測試板中。用純的DMSO調(diào)節(jié)體積，得到最終均一的體積40nl。對上述Jurkat細胞進行計數(shù)并離心。棄去生長培養(yǎng)基，然后將細胞用測試培養(yǎng)基(不含酚紅的RPMI)以1E-6/ml再懸浮。將細胞加到測試板中的每種化合物中。細胞為未處理的或用CD3微珠子(Miltenyi Biotec)以1ul珠子/500,000個細胞處理。將細胞培養(yǎng)過夜并進行熒光素酶測試(Promega)。經(jīng)ViewLux(使用熒光素酶Greiner 384設(shè)置)收集數(shù)據(jù)。

Th17細胞分化測試

ELISA

使用CD4+T細胞分離II試劑盒根據(jù)制造商(Miltenyi Biotec)指示純化小鼠CD4+細胞。96孔板用抗mCD3抗體預涂覆。未涂覆的孔作為對照。將CD4+細胞再懸浮于RPMI 1640完全培養(yǎng)基中，然后加到所述96孔板中。然后將細胞因子混合物(Cytokine cocktail)和化合物加到孔中。用于所述測試的抗體和細胞因子(所有都來自R&D系統(tǒng))選自以下：抗mCD3；抗mCD28；抗mIFNγ；抗mIL4；mIL-6；mIL-23；mIL-1β；hTGF-β1。將培養(yǎng)基在37℃孵育3天，然后收集上清液進行ELISA。根據(jù)制造商(R&D系統(tǒng))指示進行IL-17ELISAs。結(jié)果使用Prism軟件分析，用非線性回歸確定pIC50。

細胞內(nèi)染色

將上述的Th17分化培養(yǎng)基維持5天，然后根據(jù)制造商(BD Biosciences)指示經(jīng)IL-17和IFN-γ細胞內(nèi)染色分析細胞。

測試數(shù)據(jù)

如果進行多次測定，那么下述數(shù)據(jù)表示多次測試結(jié)果的平均pIC₅₀值。應理解，根據(jù)進行該測試人員所用的具體條件和步驟，下示數(shù)據(jù)可具有合理的變化。

所有示例性化合物均在上述雙重FRET測試中進行測定，除了實施例11、13、17、20、28和44。發(fā)現(xiàn)所有測試化合物均具有5-8的pIC50。

所有示例性化合物均在上述Jurkat細胞熒光素酶測試中進行測定，除了實施例2-16、18-20、22、25、26-28、30-33、35、36、38、42和43。發(fā)現(xiàn)所有測試化合物均具有6-9的pIC50。

所有示例性化合物均在上述Th17細胞分化測試中進行測定，除了實施例3、6、8-13、16-19、26-28、32、33和38-40。發(fā)現(xiàn)所有測試化合物均具有6-9的pIC50。

EAE研究

實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)是多發(fā)性硬化的動物模型。在EAE研究中測量了測試化合物改善EAE的能力。將C57BL/6(B6)品系的野生型小鼠維持在無病原體的條件下。EAE如下誘導：靜脈注射100ng百日咳毒素(List Biological Laboratories)，然后在第0天用由在PBS中的MOG_35-55肽(300μg/小鼠)和等體積的完全弗氏佐劑(Difco Laboratories)組成的乳液進行皮下免疫，所述完全弗氏佐劑含有5mg/ml熱滅活的結(jié)核分枝桿菌H37Ra，接著如前所述在第2天進行另一靜脈注射100ng的百日咳毒素(Wang等人(2006)J.Clin.Invest.116:2434-2441)。為了治療EAE，每種化合物或媒介物PBS從第0天開始以選自3、10、30和100mg/kg的不同劑量口服給藥，一天兩次。使用EAE評分系統(tǒng)對小鼠的每日疾病嚴重度進行評分(Wang等人(2006)J.Clin.Invest.116:2434-2441)：0，沒有明顯的疾病跡象；1，柔弱的尾部(limp tail)或后肢無力但兩者不同時存在；2，柔弱的尾部和下肢輕癱(無力，一個或兩個后肢不完全麻痹)；3，截癱(兩個后肢完全麻痹)；4，截癱伴前肢無力或麻痹；5，瀕死狀態(tài)或死亡。臨床評分數(shù)據(jù)可表示為平均值±S.E.M。

體外經(jīng)皮研究

體外經(jīng)皮研究旨在預測針對銀屑病的局部制劑的化合物獲得的經(jīng)皮滲透水平。該測試與化合物的內(nèi)在效能一起用于預測化合物與靶標接合的成功的可能性。經(jīng)皮滲透與內(nèi)在效能的比例越高，局部皮膚濃度與內(nèi)在效能的比例就越高，因此在局部制劑中化合物與靶標接合的可能性就越大。

化合物在經(jīng)pH＝6的改性的水性乳膏中制備。

水性乳膏組成

該研究可以用來自三種皮膚供體的經(jīng)植皮的(dermatomed)人腹部皮膚進行，使用2cm2Franz擴散池(diffusion cell)。接收流體由在0.1％w/v疊氮化鈉/磷酸鹽緩沖生理鹽水中的牛血清白蛋白(4％w/v)組成，然后可在37℃加熱，為的是在皮膚表面達到32℃。可將乳膏制劑施用在供體側(cè)，以10mg劑量，即，5mg/cm²?？稍谝韵聲r間點取樣：t＝0、3、6、9和24h。然后可如下測試接受者樣品：使用基于用乙腈使蛋白質(zhì)沉淀的方法，接著進行LC/MS/MS分析?？墒褂脷v時24小時每cm²滲透至接受者隔室的個體的API(以多種組成)確定經(jīng)皮流量(表示為ng/cm²/小時)。

咪喹莫特-誘導的皮膚炎癥

咪喹莫特是一種免疫調(diào)節(jié)劑，其有效地活化特異性Toll樣受體(例如，TLR7)并誘導需要免疫系統(tǒng)IL23R/RORγ/IL17軸的皮膚的刺激/炎癥(van der Fits等人，(2009)J Immunol；182:5836-5845；Gray等人，(2013)Nature Immunol；Jun；14(6):584-92)。所述咪喹莫特-誘導的皮膚炎癥模型可用于評估RORγ抑制劑降低小鼠中Th17-驅(qū)動的炎癥的能力。對于耳厚度用計數(shù)工程師的測徑器(Mitutoyo PK-0505)測量的僅耳皮膚炎癥模型而言，8-12周齡的雌性野生型C57BL/6NTac小鼠可獲自Taconic(Hudson，NY)，并被給予每日局部劑量的10mg市售咪喹莫特乳膏(5％)(Aldara；Medicis)，所述乳膏在大約11:00h分布于雙耳，連續(xù)至多4天?；蛘?，在大約11:00h將72mg的Aldara分布于小鼠的雙耳和剃毛/脫毛的背部皮膚上連續(xù)3天，以檢測RORγ-依賴性基因表達(使用Qiazol從雙耳分離RNA，然后用RNeasy方案(Qiagen，Germantown，MD)凈化；Taqman探針/引物針對B2M(Mm00437762_m1)、IL-17A(Mm00439619_m1)、IL-17F(Mm00521423_m1)或IL-22(Mm00444241_m1)(Thermo Fisher Scientific，Inc.，Waltham，MA)設(shè)置，并離體刺激(抗-CD3(2ug/ml，克隆eBio500A2，eBioscience，San Diego，CA)、抗-CD28(1ug/ml，克隆37.51，BD Bioscience，San Jose，CA)、重組小鼠IL-1β(20ng/ml，R&D Systems，Minneapolis，MN)和重組小鼠IL-23(20ng/ml，R&D Systems，Minneapolis，MN)全血中(Meso Scale Discovery，Rockville，MD)IL-17A蛋白的表達。對于治療這些模型中的皮膚炎癥，將各化合物或媒介物(甲基纖維素的水溶液，1％w/v，Sigma Aldrich，St.Louis，MO)在大約08:00h和16:00h，通過口服強飼法以選自1、3、10和30mg/kg的不同劑量每日給藥。

人外周血CD4+T細胞培養(yǎng)和細胞因子分析

人生物樣品是購自AllCells，LLC和/或Stemcell Technologies，Inc的冷凍保存的人CD4+T細胞。所述CD4+T細胞通過以下被分化成Th17亞型：在Th17偏移混合物(skewing cocktail)(包含IL-1β(10ng/mL)、IL-6(30ng/mL)、TGFβ(0.5ng/mL)、IL-21(10ng/mL)、IL-23(10ng/mL)、抗-IFNγ(10μg/mL)和抗-IL-4(10μg/mL))的存在下，在用抗-CD3抗體(2μg/mL)涂布的組織培養(yǎng)板中的Iscove改良的Dulbecco培養(yǎng)基(IMDM)中培養(yǎng)5天，所述培養(yǎng)基含有10％HI-FBS、55μM 2-巰基乙醇和可溶性抗-CD28(3μg/mL)。為了檢測化合物對Th17極化的影響，將在補充有所有Th17極化混合成分(上文)的IMDM中的新鮮解凍的CD4+細胞以低細胞密度(20,000細胞/孔)直接接種到已含有連續(xù)稀釋的化合物的抗-CD3涂布的圓底96孔板上。將細胞在37℃不受干擾地培養(yǎng)5天。培養(yǎng)后，分別立即通過MSD電化學發(fā)光細胞因子測定(Mesoscale Discovery)和ELISA(Quantikine assay，R&D Systems)分析上清液中的分泌的IL-17A和IL-22蛋白?；衔锾幚硪砸皇饺葸M行。

使用方法

式(I)化合物是RORγ調(diào)節(jié)劑且可用于治療由RORγ介導的疾病，特別是自身免疫性或炎性疾病。本發(fā)明炎性或自身免疫性疾病的實例包括多發(fā)性硬化、類風濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、強直性脊柱炎、克羅恩病、炎性腸病、斯耶格倫綜合征、視神經(jīng)炎、慢性阻塞性肺病、哮喘、Ⅰ型糖尿病、視神經(jīng)脊髓炎、重癥肌無力、葡萄膜炎、格林-巴利綜合癥、銀屑病性關(guān)節(jié)炎、格雷夫斯病和變態(tài)反應。因此，在另一方面，本發(fā)明涉及治療由RORγ介導的自身免疫性和炎性疾病的方法。

在另一方面，本發(fā)明還提供了式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其用于治療。

在另一方面，本發(fā)明還提供了式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其用于治療由RORγ介導的炎性和自身免疫性疾病。

在另一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽，其用于治療多發(fā)性硬化。

在另一方面，本發(fā)明提供了式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽，其用于治療強直性脊柱炎。

在另一方面，本發(fā)明涉及治療由RORγ介導的炎性或自身免疫性疾病的方法，其包括向有此需要的人給藥治療有效量的式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽。

還在其他方面，本發(fā)明涉及治療多發(fā)性硬化的方法，其包括向有此需要的人給藥治療有效量的式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽。

還在其他方面，本發(fā)明涉及治療強直性脊柱炎的方法，其包括向有此需要的人給藥治療有效量的式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽。

在另一方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療由RORγ介導的炎性或自身免疫性疾病的藥物中的用途。

還在其他方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療多發(fā)性硬化的藥物中的用途。

還在其他方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療強直性脊柱炎的藥物中的用途。

本申請使用的"治療"涉及病癥時是指：(1)改善或預防所述病癥的一種或多種生物學表現(xiàn)，(2)干擾(a)導致所述病癥或?qū)λ霾“Y負責的生物學級聯(lián)中的一個或多個點或(b)所述病癥的一種或多種生物學表現(xiàn)，(3)減輕與所述病癥相關(guān)的一種或多種癥狀或影響，或(4)減慢所述病癥的進展或所述病癥的一種或多種生物學表現(xiàn)。

如上所述，病癥的"治療"包括所述病癥的預防。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，"預防"不是一個絕對的術(shù)語。在醫(yī)學上，"預防"被理解為是指對藥物的預防性給藥以基本上減小病癥或其生物學表現(xiàn)的可能性或嚴重度，或延遲所述病癥或其生物學表現(xiàn)的發(fā)作。

本發(fā)明化合物可以以任一合適的給藥途徑給藥，包括全身給藥和局部給藥。全身給藥包括口服給藥、腸胃外給藥、透皮給藥、直腸給藥和吸入給藥。腸胃外給藥表示除腸內(nèi)、透皮或吸入以外的給藥途徑，通常為注射或輸注。腸胃外給藥包括靜脈、肌內(nèi)和皮下注射或輸注。吸入表示給藥至患者肺部，無論是通過嘴或是鼻通道吸入。局部給藥包括施用至皮膚以及眼內(nèi)、耳、陰道內(nèi)和鼻內(nèi)給藥。

在給定時間內(nèi)，本發(fā)明化合物可給藥一次或根據(jù)給藥方案以不同的時間間隔給藥多個劑量。例如，劑量可以每天給藥一、二、三或四次。劑量可以給藥直到實現(xiàn)所需治療效果，或無限期給藥以維持所需治療效果。本發(fā)明化合物的合適給藥方案取決于化合物的藥代動力學性質(zhì)，例如吸收、分布和半衰期，其可由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。此外，本發(fā)明化合物的合適的給藥方案(包括該給藥方案的持續(xù)時間)取決于待治療的病癥、待治療的病癥的嚴重程度、待治療的個體的年齡和身體狀況、待治療的個體的醫(yī)學史、并行治療的性質(zhì)、所需治療效果和本領(lǐng)域技術(shù)人員知識和專業(yè)內(nèi)的類似因素。所述技術(shù)人員還將理解，合適的給藥方案可根據(jù)個體對于給藥方案的反應或由于個體需要隨時間變化來進行調(diào)整。

典型的日劑量可取決于具體的所選的給藥途徑而變化。用于口服給藥的典型的日劑量為0.1mg至1000mg。用于局部給藥的典型的日劑量為約0.001％至約10％w/w(重量百分數(shù))，且優(yōu)選約0.01％至約1％w/w。

此外，本發(fā)明化合物可作為前藥給藥。本申請使用的本發(fā)明化合物的“前藥”是化合物的功能性衍生物，其一旦給藥至個體，最終在體內(nèi)釋放本發(fā)明化合物。給藥作為前藥的本發(fā)明化合物可使得本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠進行以下的一種或多種：(a)調(diào)節(jié)化合物在體內(nèi)的作用開始；(b)調(diào)節(jié)化合物在體內(nèi)的作用持續(xù)時間；(c)調(diào)節(jié)化合物在體內(nèi)的運輸或分布；(d)調(diào)節(jié)化合物在體內(nèi)的溶解度；以及(e)克服化合物遭受的副作用或其他困難。用于制備前藥的典型的功能性衍生物包括在體內(nèi)經(jīng)化學或酶法斷裂的化合物的修飾。這種修飾，包括制備磷酸酯、酰胺、酯、硫酯、碳酸酯和氨基甲酸酯，是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。

組合物

在給藥至個體前，通常(但不一定)將本發(fā)明化合物配制成藥物組合物。因此，在另一方面，本發(fā)明涉及藥物組合物，其包含本發(fā)明化合物和一種或多種藥學上可接受的賦形劑。

本發(fā)明的藥物組合物可被制備和包裝成散裝形式，其中可以提取安全且有效量的本發(fā)明化合物，然后給予個體，例如用粉末或漿狀物的形式?；蛘撸景l(fā)明的藥物組合物可被制備和包裝成單位劑型，其中每個物理離散單位含有安全且有效量的本發(fā)明化合物。當制備單位劑型時，本發(fā)明的藥物組合物通常含有0.1mg到1000mg。

本發(fā)明的藥物組合物通常含有一種本發(fā)明化合物。然而，在某些實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物含有超過一種本發(fā)明化合物。例如，在某些實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物含有兩種本發(fā)明化合物。此外，本發(fā)明的藥物組合物可任選還包含一種或多種另外的藥學上可接受的化合物。

本申請使用的“藥學上可接受的賦形劑”表示在給藥形式中涉及的或與藥物組合物相容的藥學上可接受的物質(zhì)、組合物或媒介物。當混合時，各賦形劑必須與藥物組合物的其它成分相容，使得對個體給藥時將基本上降低本發(fā)明化合物的功效的相互作用以及將導致藥物組合物成為藥學上不可接受的相互作用得以避免。此外，各賦形劑的純度當然必須足夠高，使其為藥學上可接受的。

本發(fā)明化合物和藥學上可接受的一種或多種賦形劑通常被配制成通過所需給藥途徑適于給藥至個體的劑型。例如，劑型包括那些(1)適于口服給藥的劑型，例如片劑、膠囊劑、小膠囊劑、丸劑、錠劑、粉末、漿狀物、酏劑、懸浮液、溶液、乳劑、囊袋劑和扁囊劑；(2)適于腸胃外給藥的劑型，例如無菌溶液、懸浮液和用于重構(gòu)(reconstitution)的粉末；(3)適于透皮給藥的劑型，例如透皮貼劑；(4)適于直腸給藥的劑型，例如栓劑；(5)適于吸入的劑型，例如干粉、氣霧劑、懸浮液和溶液；和(6)適于局部給藥的劑型，例如乳膏、軟膏、洗劑、溶液、糊劑、噴霧劑、泡沫劑和凝膠劑。

合適的藥學上可接受的賦形劑將根據(jù)所選具體的劑型而變化。此外，可根據(jù)在組合物中所起的具體功能來選擇合適的藥學上可接受的賦形劑。例如，可根據(jù)促進制備均一劑型的能力來選擇某些藥學上可接受的賦形劑?？筛鶕?jù)促進制備穩(wěn)定的劑型的能力來選擇某些藥學上可接受的賦形劑?？筛鶕?jù)在給藥至個體后促進本發(fā)明化合物從身體的一個器官或部分攜帶或運輸至身體的另一器官或部分的能力來選擇某些藥學上可接受的賦形劑。某些藥學上可接受的賦形劑可根據(jù)其提高患者順應性的能力進行選擇。

合適的藥學上可接受的賦形劑包括下列賦形劑類型：稀釋劑、填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、制粒劑、包衣劑、潤濕劑、溶劑、共溶劑、助懸劑、乳化劑、增甜劑、調(diào)味劑、掩味劑、著色劑、防結(jié)塊劑、保濕劑、螯合劑、增塑劑、增粘劑、抗氧化劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑和緩沖劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，某些藥學上可接受的賦形劑可以以多于一種功能和以替代性功能來使用，取決于所述賦形劑在制劑中存在多少和在制劑中存在何種其它成分。

具有本領(lǐng)域的知識和技術(shù)的技術(shù)人員能夠選擇出以適當量用于本發(fā)明的合適的藥學上可接受的賦形劑。此外，有許多本領(lǐng)域技術(shù)人員可用的資源，這些資源描述了藥學上可接受的賦形劑且其可用于選擇合適的藥學上可接受的賦形劑。實例包括Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company)，The Handbook of Pharmaceutical Additives(Gower Publishing Limited)，和The Handbook of Pharmaceutical Excipients(the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)。

本發(fā)明的藥物組合物使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)和方法制備。通常用于本領(lǐng)域的一些方法描述在Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company)中。

一方面，本發(fā)明涉及固體口服劑型，例如片劑或膠囊劑，其包含安全且有效量的本發(fā)明化合物以及稀釋劑或填充劑。合適的稀釋劑和填充劑包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、淀粉(例如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉和預膠化淀粉)、纖維素及其衍生物(例如微晶纖維素)、硫酸鈣和磷酸氫鈣。口服固體劑型還可包含粘合劑。合適的粘合劑包括淀粉(例如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉和預膠化淀粉)、明膠、阿拉伯膠、海藻酸鈉、海藻酸、西黃蓍膠、瓜爾膠、聚維酮和纖維素及其衍生物(例如微晶纖維素)?？诜腆w劑型還可包含崩解劑。合適的崩解劑包括交聚維酮、淀粉羥乙酸鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素、海藻酸和羧甲基纖維素鈉?？诜腆w劑型還可包含潤滑劑。合適的潤滑劑包括硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣和滑石。