專利名稱：CdTe@SiO₂量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬納米材料、分子印跡技術(shù)和生物分析檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種CdTeOSiO2量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法。
背景技術(shù)：
中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system, CNS)控制人類的意識(shí)、心理、思維活動(dòng)及具體行為，是人類所有活動(dòng)的指揮中心，因此，與CNS相關(guān)的疾病對(duì)病人的工作和生活產(chǎn)生極大的影響。近年來，CNS疾病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，發(fā)病機(jī)制一般都與神經(jīng)元分泌 神經(jīng)遞質(zhì)的功能紊亂有密切關(guān)系如5-羥色胺和去甲腎上腺素含量減少，可導(dǎo)致抑郁癥；谷氨酸、天門冬氨酸、甘氨酸及g_氨基丁酸含量變化可誘發(fā)癲癇、舞蹈病等多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病，因此，神經(jīng)遞質(zhì)釋放研究是神經(jīng)科學(xué)中極其重要的前沿領(lǐng)域。由于神經(jīng)遞質(zhì)一般含量非常低，且取樣量受限制，導(dǎo)致定量測(cè)定的難度較大，因而如何能夠準(zhǔn)確測(cè)定神經(jīng)遞質(zhì)的含量是神經(jīng)遞質(zhì)釋放研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)之一。目前國(guó)內(nèi)外測(cè)定神經(jīng)遞質(zhì)時(shí)，通常采用色譜分離，電化學(xué)、熒光或質(zhì)譜檢測(cè)。這些方法雖然比較成熟，但存在許多缺點(diǎn)。如色譜分離耗時(shí)長(zhǎng)、電化學(xué)檢測(cè)重現(xiàn)性較差、熒光檢測(cè)需預(yù)先衍生化、質(zhì)譜檢測(cè)需要昂貴的儀器等，且以上儀器操作也比較復(fù)雜。更重要的是，以上方法均沒有可視性，不能通過人眼直接觀察神經(jīng)元釋放神經(jīng)遞質(zhì)的動(dòng)態(tài)實(shí)時(shí)變化，而這卻是神經(jīng)細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)疾病研究中迫切需要的。因此，探索一種新的神經(jīng)遞質(zhì)測(cè)定方法將是一項(xiàng)極具實(shí)際意義的研究。近年來，量子點(diǎn)、分子印跡聚合物等新型材料制備技術(shù)的飛速發(fā)展，為研究新的、便捷經(jīng)濟(jì)的、可視化的神經(jīng)遞質(zhì)測(cè)定方法帶來契機(jī)。量子點(diǎn)(quantumdots, QDs)是一種由 II —VI族(如 CdS、CdSe)或III— V族(如InP, InAs)元素組成的、直徑約為I 100 nm、能夠接受激發(fā)光產(chǎn)生熒光的半導(dǎo)體納米顆粒。與傳統(tǒng)的有機(jī)熒光染料相比，QDs具有激發(fā)譜帶寬、發(fā)射譜帶窄、峰型對(duì)稱、熒光量子產(chǎn)率高、光穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。近幾年來，QDs在新型熒光探針方面的研究取得了重大進(jìn)展，顯示了巨大的應(yīng)用價(jià)值和開發(fā)潛力(Q. J. Sun, Y. A. Wang, et al. Nat. Photonics, 2007
(I): 717-722)。QDs定量的原理與傳統(tǒng)的熒光探針類似將被測(cè)物引入QDs表面，由于引入的分析對(duì)象與QDs發(fā)生物理、化學(xué)作用，引起能量或電子轉(zhuǎn)移，使QDs熒光強(qiáng)度發(fā)生變化，根據(jù)熒光強(qiáng)度的變化量可實(shí)現(xiàn)對(duì)分析對(duì)象的含量測(cè)定。因此，為獲得準(zhǔn)確的分析結(jié)果，要盡量避免QDs表面的非選擇性結(jié)合。為了提高QDs分析的選擇性，有人巧妙地在QDs表面合成分子印跡聚合物，從而實(shí)現(xiàn)了高選擇性分析。分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymer, MIP)是利用仿生的分子印跡技術(shù)制備的一種具有分子識(shí)別能力的新型高分子材料。其制備過程是首先模板分子(目標(biāo)分子)與功能單體通過共價(jià)鍵或非共價(jià)鍵結(jié)合形成復(fù)合物，然后加入交聯(lián)劑進(jìn)行共聚形成聚合物，之后洗去模板分子，這樣，在聚合物中就留下與模板分子大小、形狀、功能團(tuán)互補(bǔ)的孔穴。MIP對(duì)模板分子具有專一的識(shí)別作用，因此，分子印跡聚合物也稱為人工抗體。Lin等最先嘗試了在CdSe/ZnS表面進(jìn)行了分子印跡(C.1. Lin, A. K. Joseph,et al. Biosensors and Bioelectronics, 2004, 20: 127-131 )。Zhang等在 CdTe 量子點(diǎn)表面印跡細(xì)胞毒素C，試驗(yàn)結(jié)果表明，CdTe量子點(diǎn)表面印跡后，當(dāng)和細(xì)胞毒素C結(jié)合時(shí)發(fā)生了熒光猝滅，且其猝滅程度與細(xì)胞毒素C的濃度有關(guān)，合成的QDs-MIP可用于生物樣品中細(xì)胞毒素C 的測(cè)定(W. Zhang, X. ff. He, et al. Biosensors and Bioelectronics, 2011,26: 2553-2558)。目前，國(guó)內(nèi)外在QDs表面進(jìn)行分子印跡的工作尚處在起步階段，還未見有應(yīng)用QDs結(jié)合分子印跡技術(shù)測(cè)定神經(jīng)遞質(zhì)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)上面所述的問題，提供一種CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物(CdTe@SiO#MIPS)的制備方法，探索一種快速、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、可視化的測(cè)定單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的新分析方法，從而改進(jìn)現(xiàn)有方法的費(fèi)時(shí)、操作復(fù)雜、費(fèi)用高等缺陷。為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
稱取碲粉、NaBH4于反應(yīng)容器中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水，磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一反應(yīng)容器中加入蒸餾水，然后依次加入Cd2+母液、巰基丙酸，調(diào)節(jié)pH 9.0-10.0，加熱至9(Tl00 °C時(shí)，將NaHTe溶液導(dǎo)入(反應(yīng)液總體積控制在75 300 mL)，攪拌混合均勻，緩慢注入正硅酸四乙酯，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下于9(T100 °C回流反應(yīng)4 8 h，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)，得到CdTeOSiO2量子點(diǎn)，粒徑1(T20nm ；
Cd2+母液的濃度為0. 25 mo I L-1，反應(yīng)體系中Cd2 +的濃度為5X 10_3 mo I L-1 ；
Cd2+、NaHTe、巰基丙酸、正硅酸四乙酯的摩爾比是1: 0.3 0.8: 4.8: 10;
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將步驟(I)所得CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到25 60 mL致孔劑中，超聲分散均勻，通氮?dú)?0 min除氧；致孔劑為無水乙醇與水廣4:1體積比的混合物；
加入模板分子，攪拌，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷和交聯(lián)劑正硅酸四乙酯，使用氨水催化，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)16 24 h ;將反應(yīng)液離心，棄去上清；所得固體先用致孔劑洗滌3次，然后用二次水洗滌至無模板分子殘留，得到CdTe@Si02@MIPs。所述CdTeOSiO2量子點(diǎn)的粒徑范圍為10 20 nm。所述模板分子的濃度為0. 02、. 08 mol L'模板分子、功能單體、交聯(lián)劑的摩爾比為1: 2 6: 4 10 ；
所述模板分子為單胺類神經(jīng)遞質(zhì)L-去甲腎上腺素、L-腎上腺素、5-羥色胺、多巴胺中的任一種。CdTe@SiO#MIPS的制備過程可概括如下經(jīng)反應(yīng)，將模板分子中的羥基和氨基與功能單體氨丙基三乙氧基硅烷結(jié)合，合成出功能化的反應(yīng)前體-模板分子和功能單體的復(fù)合物。然后，在可控的反應(yīng)條件下，在CdTeOSiO2量子點(diǎn)表面，與交聯(lián)劑正硅酸四乙酯共聚凝膠化，獲得結(jié)合神經(jīng)遞質(zhì)分子的分子印跡聚合物。最后，洗脫除去神經(jīng)遞質(zhì)分子，從而在QDs表面產(chǎn)生帶有殘基的結(jié)合位點(diǎn)和形狀匹配的結(jié)合“空穴”，制備出對(duì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子具有高選擇性和高度親和力的功能化CdTe@SiO#MIPs。有益效果 本發(fā)明采用粒徑l(T20nm的CdTeOSiO2量子點(diǎn)作為分子印跡的載體，故大量的識(shí)別位點(diǎn)處于量子點(diǎn)的表面，從而大大提高了分子印跡的效率，使得模板分子的去除和再結(jié)合迅速，模板分子洗滌8次左右即可除去，模板分子的再結(jié)合只需超聲10 min，為高效、快速測(cè)定樣品提供基石出;
合成的分子印跡材料CdTe@SiO#MIPs具有極高的比表面積，因此吸附容量大，熒光猝滅常數(shù)可達(dá)1.5X104 M—1?？梢栽谒羞x擇性的識(shí)別模板分子，環(huán)保、安全、方便。


圖1A是實(shí)施例11制備得到的CdTeIiSiO2量子點(diǎn)的透射電子顯微鏡 圖1B是實(shí)施例11制備得到的CdTe@SiO#MIPs的透射電子顯微鏡 圖2是實(shí)施例1制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)與以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPs對(duì)模板分子的吸附的熒光圖對(duì)比CdTeliSiO2量子點(diǎn)，具有很強(qiáng)的熒光(曲線a);未洗脫模板分子的CdTeOSiO^MIPs，熒光強(qiáng)度幾乎為零(曲線b)，推測(cè)是由于大量模板分子的存在，猝滅了 CdTe@Si02@MIPs的熒光，為了證明這一點(diǎn)，將CdTe@Si02@MIPs模板分子洗凈，熒光強(qiáng)度明顯恢復(fù)(曲線C)，但較CdTeOSiO2 (曲線a)的熒光強(qiáng)度低，且發(fā)射波長(zhǎng)由534 nm紅移至552 nm，紅移了 18 nm，此現(xiàn)象是由于CdTeOSiO2表面覆蓋了一層MIPs，使量子點(diǎn)尺寸變大，是CdTeOSiO^MIPs的量子尺寸效應(yīng)的表現(xiàn)；再次在洗凈模板分子的CdTeOSiO#MIPs中加入模板分子，熒光又降低(曲線d)，這進(jìn)一步說明了 CdTe@SiO#MIPS的成功印跡；為了表明曲線d是由CdTe@SiO#MIPs吸附模板分子而非CdTeliSiO2的吸附所致，在CdTeiSiO2量子點(diǎn)中加入模板分子，熒光強(qiáng)度比CdTeOSiO2強(qiáng)(曲線e)，而在洗凈的CdTeOSiO#MIPs中加入相同濃度的模板分子，其熒光猝滅。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果充分說明了 CdTeOSiO2IgMIPs成功的印跡。圖3是L-去甲腎上腺素、L-腎上腺素、5-羥色胺、異丙腎上腺素對(duì)實(shí)施例11制備得到的CdTe@SiO#MIPs熒光猝滅的Stern-Volmer圖。由圖3可以看到，模板分子L-去甲腎上腺素的濃度與熒光猝滅程度己/F在一定范圍內(nèi)呈線性，線性回歸方程為y=l. 0571+0. 0145x,相關(guān)系數(shù) r =0. 9979，猝滅常數(shù)
^sv =1-45X IO4 M—1，而在相同的條件下，隨著L-腎上腺素、5-羥色胺和異丙腎上腺素濃度的改變，CdTe@SiO#MIPs的熒光強(qiáng)度幾乎不變，熒光猝滅程度FQ/F很小。由此可見，以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS對(duì)模板分子L-去甲腎上腺素具有選擇性吸附作用。
具體實(shí)施例方式碲粉、NaBH4、Cd(Ac)2 2. 5 H20、正硅酸四乙酯(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；巰基丙酸、L-去甲腎上腺素、5-羥色胺鹽酸鹽、多巴胺鹽酸鹽、氨丙基三乙氧基硅烷(98%，阿拉丁試劑有限公司)；L-腎上腺素(99%，上海億欣生物科技有限公司)；鹽酸異丙腎上腺素(98%，上海田源生物技術(shù)有限公司)。實(shí)施例1
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0.25 mol -L^1 Cd2+母液6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；
然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeliSiO2量子點(diǎn)加入到25 mL致孔劑(無水乙醇水=1: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0. 0846 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷58. 5 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯55. 8 yL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)16 h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS。空白聚合物(匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例2
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.1531 g碲粉、0. 5443 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊拢⑷胄轮蠓蟹爬涞恼麴s水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeliSiO2量子點(diǎn)加入到25 mL致孔劑(無水乙醇水=1: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。
精密稱定0. 0846 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷58. 5 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯55. 8 yL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)16 h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS?？瞻拙酆衔?匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例3
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入?煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)8 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeliSiO2量子點(diǎn)加入到25 mL致孔劑(無水乙醇水=1: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0. 0846 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷58. 5 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯55. 8 yL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)16 h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS?？瞻拙酆衔?匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例4
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeliSiO2量子點(diǎn)加入到25 mL致孔劑(無水乙醇水=1: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0. 0846 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷58. 5 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯55. 8 yL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20 h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS?？瞻拙酆衔?匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例5
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備· 精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)狻⒎磻?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeliSiO2量子點(diǎn)加入到25 mL致孔劑(無水乙醇水=1: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0.0846 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷58. 5 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯55. 8 yL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)24 h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS?？瞻拙酆衔?匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例6
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備將制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到25 mL致孔劑(無水乙醇水=4: 1,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0. 0846 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷58. 5 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯55. 8 yL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20 h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS?？瞻拙酆衔?匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例7
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)狻⒎磻?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到60 mL致孔劑(無水乙醇水=4: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0. 2030 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷140 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯134 iiL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS?？瞻拙酆衔?匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例8
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(I)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊拢⑷胄轮蠓蟹爬涞恼麴s水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)狻⒎磻?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；(2) CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到60 mL致孔劑(無水乙醇水=4: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0. 6090 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷420 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯402 iiL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS。空白聚合物(匪IP)除不加 L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例9
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到60 mL致孔劑(無水乙醇水=4: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0. 8120 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷560 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯536 iiL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS。空白聚合物(匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例10
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下 (I)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊拢⑷胄轮蠓蟹爬涞恼麴s水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到60 mL致孔劑(無水乙醇水=4: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0. 6090 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷1. 26 mL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯402 yL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS?？瞻拙酆衔?匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。
實(shí)施例11
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到60 mL致孔劑(無水乙醇水=4: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0.6090 g模板分子L-去甲腎上腺素加入上述含有CdTeIgSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷420 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯I mL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS。空白聚合物(匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例12
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(I)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。
最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到60 mL致孔劑(無水乙醇水=4: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0.7656 g模板分子5_羥色胺鹽酸鹽加入上述含有CdTeIiSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷420 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯I mL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS。空白聚合物(匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。實(shí)施例13
CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下
(1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備
精密稱定0.0574 g碲粉、0. 2041 g NaBH4于50 mL三頸瓶中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水20 mL,磁力攪拌，并持續(xù)通氮?dú)?、反?yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用；
在另一個(gè)500 mL三頸瓶中加入270 mL蒸餾水，隨后依次加入0. 25 mol L—1 Cd2+母液 6 mL、巰基丙酸 627 yL，用 I mol/L NaOH 調(diào)節(jié) pH 9. 0-10. 0，油浴加熱至 90_100°C ；然后將NaHTe溶液導(dǎo)入到500 mL的三頸瓶中，磁力攪拌10 min后，慢慢注入3. 35 mL正硅酸四乙酯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于90-100°C回流反應(yīng)4 h。最后，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)后，得到CdTeiSiO2量子點(diǎn)；
(2)CdTe@Si02@MIPs 的制備
將制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到60 mL致孔劑(無水乙醇水=4: l,V: K)中，超聲分散均勻，通氮除氧20 min。精密稱定0.6596 g模板分子L-腎上腺素鹽酸鹽加入上述含有CdTeIiSiO2量子點(diǎn)的致孔劑中，攪拌反應(yīng)10 min，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體氨丙基三乙氧基硅烷420 UL、交聯(lián)劑正硅酸四乙酯I mL、25%氨水100 U L，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)20h。將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體依次用致孔劑洗滌3次、二次水洗滌至無模板分子殘留，得到以L-去甲腎上腺素為模板分子的CdTe@SiO#MIPS?？瞻拙酆衔?匪IP)除不加L-去甲腎上腺素外其它相同。表I
權(quán)利要求
1.CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，步驟如下 (1)CdTeiSiO2量子點(diǎn)的制備 稱取碲粉、NaBH4于反應(yīng)容器中，在氮?dú)夥諊?，注入新煮沸放冷的蒸餾水，攪拌，反應(yīng)，得到淡粉色NaHTe溶液，備用； 在另一反應(yīng)容器中加入蒸餾水，然后依次加入Cd2+母液、巰基丙酸，調(diào)節(jié)pH 9.0-10.0，加熱至9(Tl00°C時(shí)，將NaHTe溶液導(dǎo)入，反應(yīng)液總體積控制在75 300 mL,攪拌混合均勻，緩慢注入正硅酸四乙酯，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下于9(noo°c回流反應(yīng)Γ8 h，將所得反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)，得到CdTeOSiO2量子點(diǎn)，粒徑1(T20 nm ； (2)CdTe@Si02@MIPs 的制備 將步驟(I)制備得到的CdTeOSiO2量子點(diǎn)加入到25 60 mL致孔劑中，超聲分散均勻，通氮除氧； 加入模板分子，攪拌，待模板分子全部溶解后依次加入功能單體和交聯(lián)劑，使用氨水催化，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)16 24 h ;將反應(yīng)液離心，棄去上清；所得固體先用致孔劑洗滌，然后用二次水洗滌至無模板分子殘留，得到CdTe@SiO#MIPs。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述Cd2+母液的濃度為O. 25 mol -Γ1，反應(yīng)體系中Cd2+濃度為5X10_3 mol · L—1 ;Cd2+、NaHTe、巰基丙酸、正硅酸四乙酯的摩爾比是1: 0.3 0.8: 4.8:10。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，其特征在于，步驟(2)致孔劑為無水乙醇與水廣4:1體積比的混合物；所述模板分子的濃度為O. 02 O. 08 mol .L-1 ;模板分子、功能單體、交聯(lián)劑的摩爾比為1: 2 6: 4 10 ；所述模板分子為單胺類神經(jīng)遞質(zhì)L-去甲腎上腺素、L-腎上腺素、5-羥色胺、多巴胺中的任一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的CdTe/Si02量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，其特征在于，步驟(2)功能單體為氨丙基三乙氧基硅烷，交聯(lián)劑為正硅酸四乙酯。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種CdTe@SiO2量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡聚合物的制備方法，是在水相中合成CdTe@SiO2量子點(diǎn)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至水揮發(fā)完畢，用無水乙醇洗去未反應(yīng)的物質(zhì)；將所得CdTe@SiO2量子點(diǎn)加入到致孔劑中，超聲分散均勻后，依次加入模板分子、功能單體、交聯(lián)劑，在N2保護(hù)下，攪拌反應(yīng)20h；將反應(yīng)液離心，棄去上清，所得固體洗滌除去模板分子后，得到CdTe@SiO2量子點(diǎn)表面單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分子印跡材料。本發(fā)明所合成的材料同時(shí)具有量子點(diǎn)熒光探針的靈敏度高、檢測(cè)簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)和分子印記聚合物的高選擇性、高親和力的特點(diǎn)，可以直接應(yīng)用于生物體液中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的測(cè)定。
文檔編號(hào)C08G77/26GK103012800SQ201210382810
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月10日
發(fā)明者胡琴, 魏芳弟, 吳燕子, 李 瑞, 劉利萍, 周萍, 蔡政, 楊靜 申請(qǐng)人:南京醫(yī)科大學(xué)